树突细胞介导的独特型瘤苗的体外抗骨髓瘤作用

目的研究树突细胞（DC）介导的独特型瘤苗诱导骨髓瘤抗原特异性细胞毒性T淋巴细胞（CTL）的抗肿瘤免疫反应。方法从多发性骨髓瘤（MM）患者外周血中分离获取DC前体细胞，使用GM-CSF、IL-4与TNF-α诱导分化促成熟。加入MM患者的M蛋白F（ab′），片段（Id），诱导MM肿瘤特异性CTL。光学显微镜下观察其培养过程中形态特征变化，电镜观察其超微结构，间接免疫荧光观察其表型特征，采用MTT法检测致敏DC促自体T淋巴细胞增殖的能力以及患者CTL对自体骨髓瘤细胞的特异性细胞毒杀伤作用。结果 GM-CSF、IL-4和TNF-α配伍可有效地从MM患者外周血单陔细胞中诱导出大量成熟的功能性DC。MM患者自体血清Id冲击致敏的成熟DC能够显著地提高T细胞的增殖能力，并且使幼稚T细胞活化成为肿瘤独特型CTL，各个剂量的CTLs均能够产牛针对自体MM细胞的抑制性杀伤反应。结论 在MM患者外周血中可获得典型的DC，使用负载了Id的DC疫苗能够诱导出有效的抗肿瘤免疫应答反应，以DC为基础的疫苗可能在MM免疫治疗中发挥重要的作用。     

骨髓增殖性疾病患者JAK2基因V617F突变频率、磷酸化JAK/STAT蛋白表达水平及临床意义

目的 探讨145例骨髓增殖件疾病患者JAK2基因V617F突变率;并分析JAK2基因V617F突变阳性患者的临床特点及意义.方法 应用PCR产物直接测序和等位基因特异性PCR技术检测145例骨髓增殖性疾病患者JAK2基因V617F突变.并应用Western blot方法测定JAK2基因V617F突变阳性患者JAK2蛋白、磷酸化JAK2蛋白及磷酸化STAT5蛋白表达;对JAK2基因V617F突变阳性与突变阴性的骨髓增殖性疾病患者临床资料进行比较,评价JAK2基因V617F突变阳性的临床意义.结果 ①本组病例真性红细胞增多症(PV)、特发性骨髓纤维化(ET)、原发性血小板增多症(IMF)患者JAK2基因V617F突变率分别为92%(64例中59例)、58%(43例中25例)和50%(38例中19例),等位基因特异性PCR检测较PCR产物直接测序有更高的JAK2基因V617F检出率[PV84%(64例中53例)、MIF 44%(43例中19例)、ET 39%(38例中15例)].②JAK2基因V617F突变阳性患者外周血单个核细胞磷酸化JAK2及磷酸化STAT5蛋白表达较突变阴性者明显增高(P<0.05).③JAK2基因V617F突变阳性骨髓增殖性疾病患者发病平均年龄偏大;平均白细胞计数高于突变阴性患者;血小板计数小于突变阴性患者;脾脏较突变阴性患者小;JAK2基因V617F突变阳性PV、ET和IMF患者血栓性事什发生率分别为17%、32%和16%;而突变阴性PV、ET和IMF患者血栓性事件发生率分别为0、16%和5%.结论 骨髓增殖性疾病患者有较高的JAK2基因V617F突变发生率,且JAK2基因V617F突变阳性患者易发生血栓事件.     

构建兔抗人凝血因子XIIIA亚单位多克隆抗体及特异性鉴定

背景：关于凝血因子XIII（FXIII）抑制物作用于FXIII的具体结合表位,目前尚无报道。目的：用免疫动物方法制备针对FXIIIA亚单位多克隆抗体,并对其特异性和活性进行鉴定。方法：用人工合成的FXIIIA亚单位多肽免疫新西兰兔,制备多克隆抗体;应用Dotblot鉴定抗体特异性,并用抗体中和/尿素溶解实验检测多克隆抗体活性;Westernblot方法检测2例获得性FXIII缺乏症患者的血浆FXIII水平,再应用Dotblot分析这2例患者血浆FXIII抑制物作用的抗原表位。结果与结论：Dotblot证实兔血清中已产生抗FXIII抗体,此抗体不仅可特异性与人FXIII及转氨酶活性位点多肽结合,且在体外可抑制人FXIII的活性;用此抗体可检测出获得性FXIII缺乏症患者的血浆FXIII缺乏,分析出转氨酶活性位点是病例2血浆FXIII抑制物的作用位点。证实动物免疫法可成功制备兔抗人FXIIIA亚单位转氨酶活性位点的多克隆抗体,此抗体可用于人FXIII的检测和抗原表位分析。     

构建兔抗人凝血因子XIII A亚单位多克隆抗体及特异性鉴定

背景：关于凝血因子XIII(FXIII)抑制物作用于FXIII的具体结合表位,目前尚无报道。 目的：用免疫动物方法制备针对FXIII A亚单位多克隆抗体,并对其特异性和活性进行鉴定。 方法：用人工合成的FXIII A亚单位多肽免疫新西兰兔,制备多克隆抗体;应用Dot blot鉴定抗体特异性,并用抗体中和/尿素溶解实验检测多克隆抗体活性;Western blot方法检测2例获得性FXIII缺乏症患者的血浆FXIII水平,再应用Dot blot分析这2例患者血浆FXIII抑制物作用的抗原表位。 结果与结论：Dot blot证实兔血清中已产生抗FXIII抗体,此抗体不仅可特异性与人FXIII及转氨酶活性位点多肽结合,且在体外可抑制人FXIII的活性;用此抗体可检测出获得性FXIII缺乏症患者的血浆FXIII缺乏,分析出转氨酶活性位点是病例2血浆FXIII抑制物的作用位点。证实动物免疫法可成功制备兔抗人FXIII A亚单位转氨酶活性位点的多克隆抗体,此抗体可用于人FXIII的检测和抗原表位分析。     

疑难病例析评 第102例 反复皮下肌肉血肿—皮肤瘀斑—关节疼痛—腹腔出血—凝血因子Ⅷ缺乏

病历摘要患者女,31岁,因反复皮下肌肉血肿、全身广泛皮肤瘀斑1年余于2005年11月29日入院。2004年8月患者手臂用力不当后出现左肩部大片瘀斑、肿胀、剧痛,就诊于重庆西南医院,给予激素治疗后,病情有所好转出院。2004年11月患者崴脚后出现右髋关节处刺痛,随后出现大片瘀斑,右     

第121例反复肢体皮下血肿-未明原因的高γ球蛋白血症-骨痛-凝血因子ⅩⅢ部分缺乏

病例摘要 患者，女，57岁，因反复发作肢体皮下血肿14年于2004年5月11日入中南大学湘雅二医院。患者于1990年7月无明显诱因出现左下肢皮下血肿，血肿逐渐增大，约拳头大小，肿胀，局部波动感明显，伴疼痛，数天后自行消退。此后多次无诱因于全身多个部位出现过大小不一的皮下淤斑或血肿，在外院经对症处理后消退。2004年5月患者因被小狗脚爪轻度抓伤后出现右肘关节处皮下血肿，并渐行性增大成水囊样，局部疼痛剧烈，活动受限而急诊入院。既往有“二尖瓣脱垂”病史20年，15年前体检时发现血清球蛋白增高，未重视。1987年接受双侧扁桃体摘除术，当时止血良好，无过度出血倾向。30年前顺产1女，无过度出血。月经规律，经量正常。否认异烟肼等药物摄入史，否认青霉素类药物的长期注射史。父母非近亲婚配。家族中无出血病史者。     

84例骨髓增生异常综合征细胞遗传学特点及预后评估分析

目的:分析中国人种骨髓增生异常综合征(MDS)患者的骨髓细胞染色体异常特点,探讨细胞遗传学检测在我国MDS诊断及预后评估中的应用价值。方法:采用染色体核型分析结合荧光原位杂交(FISH)技术,检测84例MDS确诊病例的骨髓细胞染色体异常,将患者的骨髓细胞遗传学结合临床特点进行综合分析。结果:84例MDS患者中,存在骨髓细胞染色体异常者38例,占45.2%,其中+8、-7/7q-和20q-最常见,无单纯5q-者。具有预后良好染色体者55例,具有预后中等染色体者14例,具有预后不良染色体者15例。16例三系病态造血患者中染色体异常者10例(62.5%),其余68例患者中染色体异常者28例(41.2%),三系病态造血患者中染色体异常者比例似乎较高,但差异无统计学意义(P>0.05)。经随访6～24个月,84例患者中已死亡29例。预后良好染色体组患者的生存时间高于预后不良染色体组(P<0.01)。结论:中国人种MDS患者中,+8、-7/7q-和20q-为常见的染色体异常,单纯5q-罕见。细胞遗传学分析不仅应作为中国人种MDS诊断的重要依据,同时也是不可替代的预后评估指标。     

构建兔抗人凝血因子XIIIA亚单位多克隆抗体及特异性鉴定

背景:关于凝血因子XIII(FXIII)抑制物作用于FXIII的具体结合表位,目前尚无报道。目的:用免疫动物方法制备针对FXIIIA亚单位多克隆抗体,并对其特异性和活性进行鉴定。方法:用人工合成的FXIIIA亚单位多肽免疫新西兰兔,制备多克隆抗体;应用Dotblot鉴定抗体特异性,并用抗体中和/尿素溶解实验检测多克隆抗体活性;Westernblot方法检测2例获得性FXIII缺乏症患者的血浆FXIII水平,再应用Dotblot分析这2例患者血浆FXIII抑制物作用的抗原表位。结果与结论:Dotblot证实兔血清中已产生抗FXIII抗体,此抗体不仅可特异性与人FXIII及转氨酶活性位点多肽结合,且在体外可抑制人FXIII的活性;用此抗体可检测出获得性FXIII缺乏症患者的血浆FXIII缺乏,分析出转氨酶活性位点是病例2血浆FXIII抑制物的作用位点。证实动物免疫法可成功制备兔抗人FXIIIA亚单位转氨酶活性位点的多克隆抗体,此抗体可用于人FXIII的检测和抗原表位分析。     

构建兔抗人凝血因子XIII A亚单位多克隆抗体及特异性鉴定

背景：关于凝血因子XIII(FXIII)抑制物作用于FXIII的具体结合表位,目前尚无报道。 目的：用免疫动物方法制备针对FXIII A亚单位多克隆抗体,并对其特异性和活性进行鉴定。 方法：用人工合成的FXIII A亚单位多肽免疫新西兰兔,制备多克隆抗体;应用Dot blot鉴定抗体特异性,并用抗体中和/尿素溶解实验检测多克隆抗体活性;Western blot方法检测2例获得性FXIII缺乏症患者的血浆FXIII水平,再应用Dot blot分析这2例患者血浆FXIII抑制物作用的抗原表位。 结果与结论：Dot blot证实兔血清中已产生抗FXIII抗体,此抗体不仅可特异性与人FXIII及转氨酶活性位点多肽结合,且在体外可抑制人FXIII的活性;用此抗体可检测出获得性FXIII缺乏症患者的血浆FXIII缺乏,分析出转氨酶活性位点是病例2血浆FXIII抑制物的作用位点。证实动物免疫法可成功制备兔抗人FXIII A亚单位转氨酶活性位点的多克隆抗体,此抗体可用于人FXIII的检测和抗原表位分析。     

以岗位胜任力为导向的诊断学教学改革实践

以胜任力为导向的教学是第三代国际医学教育改革的核心内容之一。诊断学是医学基础到医学实践的桥梁课程,诊断学教学质量的高低与医学生岗位胜任力密切相关。文章将岗位胜任力引入诊断学教学中,将胜任力转变为诊断学的教学培养目标。通过调整诊断学教学目标和教学内容,加强师资队伍建设,综合应用分小组练习、分组讨论、多媒体讲授、录像教学、模拟教学、情景教学、CBL教学、PBL教学、SP与临床见习等多种教学方法,采用多方位考核等措施,诊断学教学效果得以提高,从而为实现提升医学生岗位胜任力的目标服务。