人原发性肝内管细胞癌及其癌旁肝组织内乙型肝炎病毒基因的表…

为了从分子水平探讨乙型肝炎病毒与肝内胆管细胞癌的发病关系，应用原位分子杂交技术，在４０例肝内胆管细胞癌及其癌旁肝细胞内检测ＨＢＶ ＤＮＡ，ＨＢＶ的ｐｒｅ－Ｓ基因，Ｓ基因，Ｘ基因和Ｃ基因。结果显示，在４０例中，３３例ＨＢＶ ＤＮＡ呈阳性信号占８２．５％；Ｘ基因阳性为３１例，占７７．５％；ｐｒｅ－Ｓ基因阳性２６例，占６５．０％，Ｓ基因阳性２４例，占６０．０％；Ｃ基因阳性２７例，占６７．５％。在后４种基     

c-fos反义寡核苷酸与MDR1特异Ribozyme联合对人耐药肝癌细胞株耐药性的逆转作用

多药耐药MDRl基因的过度表达是导致肿瘤细胞产生MDR的重要机制.c-fos基因表达的变化很可能对MDRl基因的表达起着调控作用.为逆转肝癌多药耐药细胞对多种化疗药物的耐受性,本文分别设计合成了针对c-fos Exonl(914-938)的25聚反义寡核苷酸(ASODN),其序列为5’CAGCGGGAGGATCACGCCTCGTAGT-3’.同时设计合成了切割MDRl mRNA第196密码子GUC序列的锤头状Ribozyme,其双链序列为:5’-pGATCCATTAATACGCTCACTATAGAATCTTCGACTGATGAG-3’,和5’-pAATTCTCTTTCA GTTTCGTC-CTCACGGACTCATCAGAATG-3’.将Ribozyme基因定向克隆于逆转录病载体pDOR-neo的BamH Ⅰ位点,经病毒包装细胞PA317包装后感染人肝癌多药耐药细胞株BEL-7402/DOX,用c-fox ASODN 作用于此转化细胞株,48小时后流式细胞技术(FCM)检测联合治疗组细胞P-gp的表达为6.2～7.8%;单纯Ribozyme治疗组细胞为38～45%;对照组为93.4～97.5%.     

MTS1和反义MTS1真核表达载体的构建与鉴定

ＭＴＳ１和反义ＭＴＳ１真核表达载体的构建与鉴定顾广玉王文亮△黄高升△詹洲为了研究ＭＴＳ１基因与肿瘤的关系，我们构建了ＭＴＳ１和反义ＭＴＳ１真核表达载体，并检测了ＭＴＳ１产物ｐ１６在人肝癌细胞株中的表达。１材料和方法１．１质粒及载体含ＭＴＳ１的ｐＵＣ...     

人原发性肝内胆管细胞癌中乙肝病毒基因及其抗原的表达及意义

的检测ＨＢＶ基因及其抗原在人原发性肝内胆管细胞癌中的表达，探讨人原发性肝内胆管细胞癌的发病因素及发病机制．方法用免疫组化技术检测ＨＢＶ抗原，用原位分子杂交技术检测ＨＢＶ基因．结果在２０例肝内胆管细胞癌中，ＨＢｘＡｇ，ｐｒｅＳ１，ｐｒｅＳ２，ＨＢｓＡｇ和ＨＢｃＡｇ阳性检出率分别为７５％，４０％，４０％，１０％和０％；在１９例癌旁肝组织中，其阳性检出率分别为８４２％，４７９％，４７９％，３１６％和３１６％．在４０例肝内胆管细胞癌中，ＨＢＶＤＮＡ，Ｘ基因，ｐｒｅＳ基因，Ｓ基因及Ｃ基因阳性检出率分别为７７５％，７０％，４７５％，４０％和４２５％；在３３例癌旁肝组织中，其阳性检出率分别为８７９％，８４８％，６３６％，６９７％和６６７％．结论人原发性肝内胆管细胞癌的发生与ＨＢＶ慢性感染有密切关系，特别是与ＨＢＶＸ基因及其蛋白在肝癌发病中起着更重要的作用     

肺鳞癌FHIT蛋白表达与吸烟的关系

[目的]观察FHIT蛋白在肺鳞癌组织细胞中定位及分布情况 ,比较吸烟组与非吸烟组肺癌组织中的表达差异。[方法]采用兔抗 FHIT多克隆抗体对82例肺鳞癌组织标本行免疫组化ABC法染色 ,结果以半定量方法记录分析。[结果]FHIT蛋白在肺鳞癌组织中表达减弱或缺失率为60% ,吸烟组肺癌组织FHIT蛋白表达减弱或缺失(73%)较非吸烟组(33%)高(P<0.01)。[结论]FHIT蛋白在肺鳞癌组织中表达减弱或缺失是频发事件。吸烟组肺鳞癌FHIT蛋白表达减弱或缺失较非吸烟组高。吸烟组肺鳞癌FHIT蛋白表达减弱或缺失与患者吸烟年支数(每天吸烟量与吸烟年数的乘积)无明显相关关系(P=0.074)     

Ranos免疫组织化学技术检测冰冻组织良恶性病变的诊断价值

目的：探讨Ｒamos免疫组织化学技术在冰冻快速病理诊断中的应用价值。方法：应用Ｒamos免疫组织化学技术对１００例冰冻活检组织进行免疫组化标记。结果：Ｒamos法在冰冻活检组织中有较好的抗原定位及较强的阳性信号,整个检测过程可在１０min内守成。结论：Ｒamos免疫组织化学技术可应用于冰冻活检诊断,并可能成为其重要的辅助手段。     

表皮生长因子受体在肝细胞癌及胆管细胞癌中的表达

目的：比较表皮生长因子受体（ＥＧＦＲ） 在肝细胞癌及胆管细胞癌中表达的差异。方法：采用免疫组化及原位杂交方法检测９２ 例肝细胞癌及５０ 例胆管细胞癌组织中ＥＧＦＲ蛋白及ｍ ＲＮＡ的表达。结果：９２ 例肝细胞癌标本中,４２ 例ＥＧＦＲ 蛋白或ｍＲＮＡ阳性,占４５－７％ 。５０ 例胆管细胞癌中,３６ 例ＥＧＦＲ蛋白或ｍＲＮＡ 阳性,占７２－０ ％ 。结论：与肝细胞癌相比,胆管细胞癌的发生、发展与ＥＧＦＲ 表达增高的关系更加密切。     

骨形态发生蛋白5(BMP5)基因在骨折愈合中的定位研究

目的：应用骨形态发生蛋白5（BMP5）cDNA探针检测骨折愈合过程中外骨痂内BMP5基因表达的定位与分布,探讨BMP5基因表达在闭合性骨折愈合外骨痂形成中的作用。方法：以64只健康SD大鼠,制备闭合性胫骨骨折动物模型。骨折后分别于12小时,1,3,5,7,9,14及28天取材,取材后行恒冷切片,用地高辛素标记的BMP5 cDNA探针进行原位杂交,设立对照。结果：骨折后12小时及1天,骨折周围血肿内细胞及肌肉中新出现的间充质细胞内BMP5检测为阳性信号。结论：本实验表明创伤激活BMP5 cDNA的表达,并呈区域性参与骨折的修复,也说明骨折血肿及周围软组织在骨折愈合过程中具有非常重要的地位。     

非小细胞肺癌Ⅰ期脆性组氨酸三联体基因蛋白表达研究

脆性组氨酸三联体基因 (ｆｒａｇｉｌｅｈｉｓｔｉｄｉｎｅｔｒｉａｄ ,ＦＨＩＴ)位于3ｐ14.2 ,跨越人类染色体最常见脆性位点ＦＲＡ3Ｂ[1] 。近年研究发现 ,人类肺癌、胃肠道癌、乳腺癌及头颈部癌中存在ＦＨＩＴ基因及其转录产物的异常 ,多数学者认为ＦＨＩＴ可能是肿瘤抑制基因[2 ,3 ] 。ＦＨＩＴ是组氨酸三联体 (ｈｉｓｔｉｄｉｎｅｔｒｉａｄ ,ＨＩＴ)基因家族成员之一 ,由 10个外显子组成 ,其中第 5～ 9外显子为编码区 ,其编码的蛋白产物 (Ｆｈｉｔ)可能的功能之一为具有多磷酸二腺苷水解酶活性 ,尤以ＡＰ3 Ａ为最适底物 ,该活性依赖于…