中华眼镜蛇毒F组分对沙鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用

目的：研究中华眼镜它毒F组分脑缺血再灌注损伤的保护作用,方法：结扎沙鼠双侧颈总动脉1h,造成前脑缺血模型,用比色法测定脑匀浆过氧化脂质的最终产物丙二醛（MDA）的含量及超氧化物歧化酶（SOD）的活性,结果：F组分0．9,0．3,0．1mg/kg可显著抑制脑内脂质过氧化,降低MDA的含量,并提高超化物歧化酶的活,性且呈一定的量效关系,同缺血再灌组比较P＜0．05,同阳性对照药尼莫通比较,P＞0．05,结论：中华眼镜蛇毒F组分对脑缺血再灌注损伤有保护作用,可能与抑制自由基的生成和促进自由基的清除有关。     

蝎毒抗肿瘤有效成分SVⅡ-A4的提纯及抑瘤活性观察

目的：分离纯化东亚钳蝎原毒,提取活性多肽成分SVⅡ—A4,并观察其抑瘤活性。方法：（1）分离纯化,采用分子筛凝胶柱层析和离子交换柱层析分离纯化蝎毒;（2）纯度分析,用SDS—PAGE电泳和HPLC色谱法对SVⅡ—A4进行纯度分析;（3）活性观察,用MTF法（酶反应比色法）观察比较不同浓度（1、10、100mg／L）的蝎毒及其成分与SVⅡ-A4对4种肿瘤细胞（A549、HL-60、K562／S及K562／ADR）的抑制作用。结果：经过两步的分离纯化获得5个蝎毒多肽成分,其中的蝎毒抗肿瘤有效成分SVⅡ-A4对4种肿瘤细胞的抑制作用与阳性对照组相当。结论：经过优化提纯方法,两步即可从东亚钳蝎原毒中获得色谱纯度达96．73％的抑瘤活性单体成分SVⅡ-A4,初步观察,SVⅡ-A4对4种肿瘤细胞均显示出明显的抑制作用及一定的剂量-效应关系,而且它对布耐药细胞株（K562／ADR）的抑制作用较阳性对照组强有进一步开发利用的价值。     

口腔修复治疗前患者口腔健康状况的调查分析

目的评估口腔修复治疗患者行口腔修复治疗前口腔健康状况,为口腔修复综合治疗方案提供科学依据。方法选取口腔修复治疗的250例初诊患者,通过问卷及口腔检查的方式获得其牙齿龋损、充填、牙齿缺失及修复等口腔健康数据。结果年轻人组患龋率高发区主要在磨牙区人均患龋1颗／人,患龋率67％,老年人组患龋高发区在前牙,人均患龋1．09颗／人,患龋率47％,中年人组有比较高的人均补牙数3．4颗／人。全牙列的患龋概率与身体健康状况有关,身体健康状况自评为良或以下者牙齿患龋风险是健康状况评价好以上者的3．68倍,OR的95％CI（1．83—7．40）,P〈0．05,牙弓缺失牙风险与牙齿部位有有关：磨牙区〉前磨牙区〉前牙区。年龄因素与牙列龋病、补牙、牙齿缺失、修复有相关性,年龄越大,有较高的缺失牙数。结论口腔修复治疗患者口内存在多发口腔疾病,合理的口腔修复综合治疗方案应该依据患者口腔健康状况具体分析制定。     

复方枣仁水提物对小鼠学习记忆的影响研究

目的观察复方枣仁水提物对小鼠学习记忆能力的影响。方法采用跳台法观察复方枣仁水提物对记忆获得障碍小鼠、记忆巩固障碍小鼠和正常小鼠学习记忆能力的影响。结果复方枣仁水提物可明显减少记忆获得障碍小鼠在跳台中错误次数(P<0.01)和明显延长潜伏期(P<0.05),可明显减少记忆巩固障碍小鼠错误次数(P<0.05)和明显延长潜伏期(P<0.05)。结论复方枣仁可显著改善小鼠学习记忆能力。     

5例煤工尘肺并发肺曲霉菌感染的观察及护理

总结5例煤工尘肺并发肺曲霉菌感染患者的护理。护理重点是对患者加强心理护理及健康教育,消除负性情绪,积极配合治疗护理;加强呼吸道症状护理及饮食营养护理;加强药物不良反应的观察及护理等。本组4例肺曲霉菌感染患者痊愈,1例肺曲霉菌感染得到较好控制。     

妊高征应用硫酸镁对产后出血的影响以及护理探讨

目的观察妊高征应用硫酸镁对产后出血的影响及探讨如何预防出血的护理方法。方法回顾性分析深圳市龙岗区人民医院自2006年1月至2009年12月收治的74例妊高征患者的临床资料及护理方法,并与74例同期正常分娩者的临床资料做对比,观察两组产后出血的情况。结果观察组产后出血量<200mL者17例,200～500mL者45例,>500mL者12例,平均出血量为(452.6±16.8)mL;对照组产后出血量<200mL者58例,200～500mL者13例,>500mL者3例,平均出血量为(253.4±28.2)mL。两组比较差异显著(P<0.01),具有统计学意义。结论妊高征患者使用硫酸镁治疗可导致产后出血增多,临床采取相应的护理措施能减少产后出血。     

东亚钳蝎钙通道样毒素的克隆与其在大肠杆菌中的表达

目的:克隆东亚钳蝎钙通道样毒素(BmCa)基因,并构建原核表达质粒,在大肠杆菌中重组表达该毒素蛋白.方法:以东亚钳蝎尾毒腺的总RNA为模板,通过RT-PCR技术,扩增并克隆BmCa的cDNA基因,并将该基因重组到PET-GST表达载体中,转化入大肠杆菌BL21并诱导表达,采用Ni-SuperChelating Resin柱亲和层析纯化,用小白鼠毒性实验检测融合蛋白的活性.结果:成功克隆BmCa基因并构建原核表达质粒,IPTG诱导后表达分子质量约为33KD的融合蛋白,含量为大肠杆菌总蛋白的25%,经亲和层析得较高纯度的融合蛋白,小白鼠毒性实验表明融合蛋白具有活性.结论:在大肠杆菌中成功表达了有活性的东亚钳蝎钙通道样毒素蛋白,为其功能研究奠定基础.     

卵黄抗体用于蛇毒抗原检测的初步研究

目的在常规ELISA检测中,以卵黄抗体取代哺乳动物来源的IgG类抗体,以探讨卵黄抗体应用于蛇毒检测的可行性。方法以甲醛减毒的眼镜王蛇毒抗原免疫莱航母鸡,制备抗眼镜王蛇毒抗体;采用过碘酸钠法对特异卵黄抗体进行酶标;将卵黄抗体及相应酶标抗体应用于常规ELISA中,对国内常见蛇毒样品抗原(包括眼镜王蛇毒、眼镜蛇毒、金环蛇毒、银环蛇毒、五步蛇毒及广东园斑蝰蛇毒)进行检测,并进行灵敏度、精确度、特异性及交叉反应等分析。结果检测的灵敏度可达32μg.L-1,并且眼镜王蛇毒抗原浓度在32~750μg.L-1的范围内,线性关系较好(r=0.963);初步应用表明卵黄抗体对眼镜王蛇毒具有较高的特异性,与蝰蛇科的五步蛇毒、园斑蝰蛇毒无交叉反应,与眼镜蛇科的金环及银环蛇毒仅在高剂量(剂量大于500μg.L-1)时存在轻度交叉反应,不干扰实验检测,但与眼镜蛇毒之间交叉反应明显,干扰实验检测;应用本方法对低(100μg.L-1)、中(300μg.L-1)、高(1 000μg.L-1)不同浓度的眼镜王蛇毒样品检测,结果平均板内变异系数均在1%~3%之内,板间变异系数在8%以内。结论特异的卵黄抗体应用于微量蛇毒检测研究是可行的,具有灵敏度高、特异性较强等优点。该研究将为蛇伤诊断试剂盒的研制提供相应的理论依据。     

中华眼镜蛇毒F组分抗血小板聚集的作用机制

目的 探讨中华眼镜蛇毒F组分抑制血小板聚集的作用机制.方法 用比浊法测定中华眼镜蛇毒F组分对二磷酸腺苷、花生四烯酸和血小板活化因子诱导血小板聚集作用的影响,流式细胞术观察中华眼镜蛇毒F组分对荧光标记的单克隆抗体CD41(FITC-CD41)和CD61(FITC-CD61)与血小板膜糖蛋白Ⅱb/Ⅲa(GPⅡb/Ⅲa)结合的影响.结果 中华眼镜蛇毒F组分明显抑制二磷酸腺苷、花生四烯酸和血小板活化因子诱导的血小板聚集,其作用呈现一定程度的剂量依赖关系.中华眼镜蛇毒F组分可以明显降低单克隆抗体CD41(抗GPⅡb)与血小板的结合率,而对单克隆抗体CD61(抗GPⅢa)与血小板的结合率没有影响.结论 中华眼镜蛇毒F组分可以抑制多种激动剂诱导的血小板聚集,其机制和中华眼镜蛇毒F组分与血小板膜糖蛋白Ⅱb/Ⅲa复合物的结合有关.