氧化砷诱导食管癌细胞系细胞凋亡的光镜和电镜研究

提要目的：观察氧化砷作用于食管癌细胞株EC8712细胞凋亡的形态改变。方法：EC8712细胞，以3uMAS2O3作用72小时收获细胞，作光镜HE染色，TUNEL标记，透射电镜和流式细胞仪检查。结果：3uMAS2O3作用72小时，TUNEL标记阳性。流式细胞仪检测有凋亡峰出现（亚G1／G0峰）。电镜检查有二种凋亡类型。一呈典型凋亡细胞核改变，病变分三期。另一种固缩细胞。结论：光镜和电镜检查结果证实AS2O3可以诱导食管癌细胞系EC8712细胞凋亡，因此AS2O3可作为食管癌辅助治疗药物。氧化砷诱导食管癌细胞系细胞凋亡的光镜和电镜研究@沈忠英$汕头大…     

人乳头状瘤病毒18E6E7和TPA协同诱发人胚食管上皮恶性转化的研究

提要研究病毒和促癌物在食管癌形成的作用，用人胚食管上度培养和HPV18E6E7AAV感染。培养细胞分二组，SHEEC1组培养基中加入TPA(5ng/mL)4周。对照组SHEE未加TPA。细胞转化的形态，细胞周期,软琼脂培养和裸鼠致瘤性等指标皆证明SHEEC1已恶性转化。E6E7基因在FISH和PCR检测，两组细胞核皆呈阳性。结论：人胚食管上皮可用HPV18E6E7和TPA在体外协同诱导细胞恶性转化。人乳头状瘤病毒18E6E7和TPA协同诱发人胚食管上皮恶性转化的研究@沈忠英$汕头大学医学院肿瘤病理研究室@蔡维佳$汕头大学医学院肿瘤病理研究室@沈健$汕头大…     

人乳头状瘤病毒18型E6E7基因诱导人胚食管上皮永生化

提要人乳头状瘤病毒18型E6E7AAV感染胎儿食管，建立一株新的人食管，上皮细胞株（SHEE），这株细胞成为永生化并继续繁殖超过60代。经过长时间的传代培养，其10代细胞表型保留原始上皮细胞培养物的特征，表现为单层生长和锚使依赖性生长，在软琼脂培养不形成克隆，接种裸鼠未成瘤。SHEE细胞系电镜检查可见张力原纤维，免疫组化检查细胞角质蛋白阳性，证实为鳞状上皮来源。荧光原位杂交和PCR检测显示有HPV18E6E7基因。结论：我们提供这株用HPV18E6E7基因成功地诱导永生化细胞株SHEE，支持HPV18可能和食管癌病因有关，它可用以…     

不同剂量三氧化二砷对食管癌细胞的作用

目的：研究不同浓度As2O3对食管癌细胞系的作用。方法：食管恶性转化上皮细胞（SHEEC1）是我室用人乳头状瘤病毒（HPV）18和TPA诱发的细胞,养在培养瓶和24孔板,用浓度1,3和5μmol/L的As2O3处理2,4,8,16,24h,电镜检查细胞形态,光镜检查核分裂指数（MI）;用放射自显影检查[^3H]-TdR掺入细胞,流式细胞仪查增殖指数（PI）和凋亡指数（AI）。结果：低剂量As2O3（1．0μmol/L)组^3H]-TdR掺入细胞,MI,PI皆增加,提示SHEEC1增殖率提高;高剂量组（3和5μmol/L)高AI和低PI,给药24h后,电镜可见细胞凋亡和坏死。结论：不同剂量氧化砷的作用不同,低剂量可引起食管癌细胞DNA合成增加和促进细胞增殖,高剂量则引起细胞凋亡和坏死。     

氧化砷诱导食管癌细胞系细胞凋亡的形态学研究

目的在氧化砷（As2O3）作用于食管癌细胞株EC8712过程中，用光镜和电镜观察培养细胞凋亡的形态改变方法ECh712于199培养基常规培养，以3μmolAs2O3作用于细胞，72h收获细胞，作光镜（HE染色，TUNEL标记）、透射电镜和流式细胞仪检查.结果3μmolAs2O3作用72h，出现许多凋亡细胞，培养细胞部分变圆，脱落.在光镜下HE染色观察2种凋亡细胞.一种核小；圆形，致密呈固缩核、和核碎,另一种胞质红染，染色质凝集，二者TUNEL标记阳性．流式细胞仪检测有凋亡峰出现（亚G1／G0峰）．电镜检查有二种凋亡类型.一呈典型凋亡细胞核改变；在早期染色质凝集成块状，细胞器保存完好.第二期，随着染色质改变，细胞核变圆，饱满，核膜完整，染色质靠边，大块染色质，构成车轮状或半月状.核膜变性解体，使染色质逸出．最后细胞变性坏死.凋亡小体易见，小块状球状，膜包或裸露.另一种固缩细胞，细胞皱缩，胞质致密，核电子密度高.结论光镜和电镜检查结果证实As2O3可以诱导食管癌细胞系ECh712细胞凋亡，因此As2O3可作为食管癌辅助治疗药物．     

HPV18型E6E7基因诱导胎儿食管永生化上皮的生物学特性

提要目的：研究SHEE生物学特性，包括增殖，分化和凋亡。方法：SHEE细胞系，199培基培养细胞，用光镜，电镜和荧光显微镜，免疫组化（Ki67，角蛋白），TdT标记，流式细胞仪和染色体分析。结果：细胞培养呈单层，锚定依赖和接触抑制生长。增殖指数PI34％，分裂指数MI2．74％（1．2％－4．8％），凋亡指数AI1．30％－6.90m％，核染色体分析46条为主（44－54条）和细胞周期DNA呈2倍体核型分布。电镜可见胞浆有张力原纤维和角蛋白免疫组化证实鳞状上皮有分化特征。结论：从生物学行为看来，SHEE细胞株接近于其来源组织胎儿食管上皮基…     

人食管粘膜原代培养上皮细胞生物学特征观察

细胞生物学研究的进展是和细胞培养分不开的，即使是分子生物学研究领域，也不能脱离细胞。细胞培养是在可控制的条件下研究细胞特性的重要方法[1]。在细胞培养中，尤其是原代培养，细胞可以反映其在体内的基本特征。因此它成为细胞生物学［2］，分子生物学［3］和肿瘤学研究[4]，到的良好对象。为了研究人食管病及癌旁细胞的增殖，分化，调亡特性，研究食管癌患者遗传特性差异，DNA损伤和修复，研究环境因素致癌，及药效试验，我们开展了食管癌患者（或可疑患者）食管粘膜培养，食管癌旁粘膜培养和胎儿食管粘膜培养。本文研究食管手术标…     

人乳头状瘤病毒18型E6E7基因诱导人胚食管上皮永生化

目的为研究病毒和肿瘤的关系,用人乳头状瘤病毒（ＨＰＶ）１８型Ｅ６Ｅ７基因感染胎儿食管上皮,建立一株新的人食管上皮永生化细胞株（ＳＨＥＥ）。方法ＨＰＶ１８Ｅ６Ｅ７腺病毒伴随病毒（ＨＰＶ１８Ｅ６Ｅ７ＡＡＶ））载体的构建;胚胎食管组织培养,ＨＰＶ１８Ｅ６Ｅ７ＡＡＶ感染,继续培养传代。用光镜、电镜检查其形态;聚合酶链反应（ＰＣＲ）、荧光原位杂交（ＦＩＳＨ）检查该病毒片段;用软琼脂培养和裸鼠接种检查致瘤性。结果经过长时间的传代培养,ＳＨＥＥ的表型仍保留原代上皮细胞培养的特征,表现为单层生长和锚锭依赖性生长,在软琼脂培养不形成克隆,接种裸鼠未成瘤。ＳＨＥＥ细胞系电镜检查可见张力原纤维,免疫组织化学检查细胞角质蛋白阳性,证实为鳞状上皮来源。ＦＩＳＨ和ＰＣＲ检测显示有ＨＰＶ１８Ｅ６Ｅ７基因。结论用ＨＰＶ１８Ｅ６Ｅ７基因建立食管上皮永生化细胞株ＳＨＥＥ,支持ＨＰＶ１８可能和食管癌病因有关的观点,可进一步用以研究食管癌的病因和发病机制。     

氧化砷诱导食管癌细胞凋亡细胞骨架的改变

我们过去用氧化砷 (Ａｓ2 Ｏ3 )诱导食管癌细胞凋亡[1] ,发现在凋亡早期 ,细胞核未见明显改变之前有线粒体增生反应 ,并首先描述了Ａｓ2 Ｏ3 诱导食管癌细胞的线粒体的形态改变[2 ] 。细胞凋亡的形态有细胞变小 ,皱缩 ,细胞核变圆 ,染色质凝集、靠边。我们发现在羊膜上皮细胞自发凋亡过程中张力微丝的消失[3 ] ,因此使我们考虑到细胞凋亡时 ,细胞形态的改变与细胞骨架的改变的关系。我们以Ａｓ2 Ｏ3 诱导食管癌细胞凋亡 ,观察细胞形态和细胞张力微丝 ,肌动蛋白Ｆ(Ｆ ａｃｔｉｎ)的变化 ,以阐明细胞骨架的改变在细胞凋亡形态改变的意义。一、…