抗前列腺特异抗原单链抗体/人羧肽酶A融合基因的构建及表达

目的 构建抗前列腺特异抗原（PSA）单链抗体（scFv)/人羧肽酶A(hCPA)融合基因,为前列腺癌的抗全导向酶-前体药物疗法奠定基础。方法 在已克隆抗PSAscFv和hCPA基因的基础上,用加端PCR分别在scFv基因的3′端和hCPA基因的5′端加上部分连接肽（linker)基因序列,回收后混合。应用重叠延伸拼接法,将抗PASscFv基因和hCPA基因通过linker序列串联为scFv/hCPA融合基因;并将构建的融合基因克隆到融合表达载体pGEX-4T-1中进行表达。结果 序列测定结果表明,构建的抗PSAscFv/hCPA融合基因中scFv和hCPA序列均正确,scFv和hCPA间有18bp的linker序列,推导的氨基酸序列为GSGGSG,与设计的序列相符,融合基因经IPTG诱导表达重组蛋白并以SDS-PAGE分析,在Mr为94000左右出现一条新生蛋白带,表达量约占菌体总蛋白的34%。结论 成功构建并原核表达了抗PSAscFv/hCPA融合基因。     

前列腺癌相关雄激素受体突变体的促细胞增殖效应

目的评价前列腺癌相关雄激素受体突变体(mtAR)对细胞生长的促进作用。方法利用三种腺病毒表达载体:野生型雄激素受体(Ad-wtAR);一个被广泛研究的前列腺癌(CaP)相关的mtAR(Ad-mtAR,T877A);以及作为对照的腺病毒载体,我们评价并比较了野生型AR及mtAR的促细胞生长效应。结果相对于被野生型或者对照的腺病毒转染的LNCaP、PC3细胞,转染mtAR的LNCaP、PC3细胞无论有无合成的雄激素(R1881)存在的情况下均显示出更强的细胞增殖作用。并且,用腺病毒载体转染T877A的LNCaP和PC3细胞显示了对R1881更强的反应性。结论这些发现提出了崭新的关于mtAR在CaP细胞中作用的细胞生物学方面的见解,并且表明mtAR(T877A)可能为前列腺癌病程的进展提供了选择性的细胞生长的便利。     

输尿管支架在恶性肿瘤引起的输尿管梗阻治疗中的应用新进展

正恶性肿瘤引起的输尿管梗阻(malignant ureteral obstruction,MUO)通常由盆腔恶性肿瘤局部侵犯或压迫输尿管导致,大多数病例来自妇科、消化道及腹膜后肿瘤,且肿瘤的放化疗导致输尿管周围纤维化会加重梗阻的程度,此类患者如不进行治疗,将很快出现上尿路功能损害,甚至器官功能衰竭。上尿路减压和维持输尿管通畅为首选的治疗方案,治疗的目标是解除输尿管梗阻,避免泌尿系统的并发症,为患者提供继续治疗原发肿瘤的机会。随着技术进步及新材料的开发,各种输尿管支架包括聚合物输尿管支架、金属输尿管支架被应用于临床治疗MUO,为泌尿外科医师提供了更多的选择,同时有助于提高患者生活质量。     

显微镜下Mathieu术式治疗尿道下裂的技术探讨

目的:探讨显微镜下Mathieu术式治疗阴茎型尿道下裂的临床疗效.方法:回顾性分析2016年1月-2019年6月期间收治53例阴茎型尿道下裂患儿资料,根据是否在显微镜下手术分为研究组33例和对照组20例.研究组采用ZEISS 88显微镜下Mathieu术尿道成形术,对照组采用传统Mathieu术尿道成形术,比较两组手术...     

肾三维重建在结节性硬化症相关肾血管平滑肌脂肪瘤治疗中的应用综述

结节性硬化症相关肾血管平滑肌脂肪瘤(tuberous sclerosis complex-renal angiomyolipoma,TSC-RAML)是一种罕见的良性肿瘤,由不同比例的脂肪、血管和平滑肌构成,目前的临床治疗手段包括mTOR抑制剂、选择性动脉栓塞和外科手术等。影像学检查为TSC-RAML的诊疗及随访监测提供重要依据,但电子计算机断层扫描及磁共振成像结果受临床经验的限制,存在主观差异性,且二维图像的不直观、不立体、不能融合为整体等缺陷容易造成诊疗偏差。近些年三维重建技术的出现为充分认识病情、合理术前规划及精确手术操作提供了客观依据,另外三维立体图像清晰、直观的特点让其在临床中得到了广泛的应用。本文就三维重建在TSC-RAML治疗中的应用进行综述。     

索拉非尼治疗转移性肾癌疗效与不良反应的关系

目的:探索索拉非尼在治疗转移性肾细胞癌（mRCC）患者中的不良反应与疗效之间的关系。方法:回顾性研究西京医院接受索拉非尼治疗的mRCC患者63例,利用卡方检验分析肿瘤控制率与不良反应的发生频率和严重程度的相关性,利用Kaplan-Meier方法分析16种不良反应,筛选出与患者PFS,OS相关的不良反应,将P＜0.05变量纳入多变量Cox比例风险回归模型进行进一步的多因素分析,确定独立预后因素。结果:63例接受索拉非尼治疗的患者中,完全缓解2例（3.2％）,部分缓解16例（25.4％）,疾病稳定37例（58.7％）,疾病进展8例（12.7％）。中位PFS为12.0个月,中位OS为24.0个月。卡方检验结果示肿瘤控制率与不良反应的发生频率和严重程度相关（均P＜0.05）。多变量分析显示,更好的PFS的独立预后因素包括腹泻（OR 0.255,95％CI 0.130~0.500,P=0.000）和皮疹（OR 0.235,95％CI 0.114~0.482,P=0.000）。OS的独立预后因素包括腹泻（OR 0.454,95％CI 0.246~0.839,P=0.012）,皮疹（OR 0.405,95％CI 0.211~0.776,P=0.006）和高血压（OR 0.373,95％CI 0.177~0.784,P=0.009）。结论:索拉非尼治疗mRCC患者的疗效与不良反应的发生频率和严重程度呈正相关。皮疹和腹泻是影响PFS的独立保护因素,皮疹,腹泻和高血压是影响OS的独立保护因素。这一结论仍需大量前瞻性研究证实。     

Tum5蛋白多克隆抗体的制备及纯化

目的制备Tum5蛋白多克隆抗体并纯化。方法利用pQE30-Tum5重组质粒在大肠杆菌中通过IPTG诱导表达;亲和层析法纯化重组蛋白;以纯化的重组蛋白为抗原免疫新西兰大耳白兔制备抗Tum5多克隆抗体,ELISA方法检测抗体滴度,亲和层析法纯化兔抗Tum5多克隆抗体。结果利用pQE30-Tum5重组质粒,经原核表达和亲和层析获得Tum5蛋白;利用Tum5蛋白制备多克隆抗体,纯度大于95%。结论利用原核表达的Tum5蛋白成功地制备了兔抗Tum5多克隆抗体。     

机器人辅助腹腔镜手术治疗巨大肾上腺肿瘤的经验总结

目的:总结机器人辅助腹腔镜手术治疗巨大肾上腺肿瘤(6cm)的临床经验并观察疗效。方法:回顾性分析2015年2月～2018年2月我院22例行经腹腔途径机器人辅助腹腔镜巨大肾上腺肿瘤根治性切除术患者的临床资料。结果:22例经腹腔途径机器人辅助腹腔镜巨大肾上腺肿瘤(直径6.4～10.9cm,平均8.2cm)根治性切除手术均取得成功,无中转开放手术。手术时间85～220min,平均155min;术中出血10～500ml,平均158ml,术中无输血。术后住院时间4～7d,平均5.5d。术后病理诊断:嗜铬细胞瘤9例,肾上腺髓脂肪瘤4例,肾上腺皮质腺瘤4例,神经节细胞瘤2例,肾透明细胞癌肾上腺转移1例,原始神经外胚层肿瘤1例,肾上腺皮质癌1例。术后随访3～39个月,2例失访,1例肾透明细胞癌左肾切除术后肾上腺转移的患者于术后10个月因肿瘤复发转移死亡,其余患者在随访期间未发现复发。结论:机器人辅助腹腔镜巨大肾上腺肿瘤切除术切实可行、安全有效。     

应用焦磷酸微测序技术行HLA-DRB基因型分析

目的应用焦磷酸微测序技术进行HLA-DRB基因型分析.方法PCR扩增外显子2基因片段,经链亲和素包被磁珠纯化、制备单链DNA测序模板,应用焦磷酸微测序技术进行实时测序和HLA-DRB基因分型.结果焦磷酸微测序技术-次可判读40～80个碱基,采用3-4个微测序可以判读全部扩增区域的多态性位点,测序结果与HLA数据库基因序列比较,可准确进行HLA-DRB基因型分析.结论焦磷酸微测序技术应用于HLA-DRB基因型分析具有高分辨率、高通量和快速等优点,该方法可应用于器官及骨髓移植的供体/受体筛查.