同种自然杀伤细胞在移植与免疫治疗中的研究进展

自然杀伤（NK）细胞是具有多种免疫学功能的淋巴样细胞,处于机体防御体系的第一道防线。输注活化同种NK细胞是近年来肿瘤免疫治疗的方法之一,尤其配合骨髓移植治疗显示出了强大的抗瘤效应。现综述同种NK细胞识别、作用机制及治疗方面的研究进展。     

肌电图评价肌萎缩侧索硬化389例嗅鞘细胞脑内移植的效果

背景：肌萎缩侧索硬化尚缺乏有效治疗手段，细胞学治疗是研究的重要方向之一。目前研究表明，嗅鞘细胞、骨髓基质细胞、脐血间质干细胞等具有一定临床疗效。 目的：观察嗅鞘细胞脑内移植治疗肌萎缩侧索硬化的肌电图改变，分析肌电图检查对肌萎缩侧索硬化疗效的评定价值。 设计、时间及地点：病例自身对照观察，于2003-09/2007-12在北京市虹天济神经科学研究院及北京康复中心神经外科完成。 对象：选择389例接受胚胎嗅鞘细胞脑内移植治疗的肌萎缩侧索硬化患者。 方法：局麻下作双额发际内2.0~3.0 cm，旁开中线2.5~2.9 cm，长约0.5 cm小切口2个，两侧共缓慢注射细胞数2×104/μL嗅鞘细胞悬液100 μL。移植前及移植后三四周分别采用丹麦Keypoint-4型肌电/诱发电位仪检查患者肌电图。 主要观察指标：每例患者检查8~12块肌肉，包括四肢近、远端肌肉以及舌肌、胸锁乳突肌。移植前后肌电图主要对比自发电位、运动单位电位以及大力收缩时募集波型的改变。 结果：①389例患者中332例（85.3%）肌电图检查显示不同程度改善，主要有3类：a.自发电位减少：122例出现不同程度此项改变。b.300例出现数量不等的肌肉募集波型由低级向高级转变，电位密度明显增加，如单纯相转变为混合相；混合相转变为干扰相。c.移植前未能测到运动单位电位而术后新出现者51例。②51例（13.2%）肌电图无变化，移植前后肌电图大致相同。③6例（1.5%）比移植前差，主要变化为自发电位增多或肌肉大力收缩时募集波型减弱。 结论：嗅鞘细胞移植近期能改善肌萎缩侧索硬化患者的神经功能，延缓病情的进行性恶化。肌电图检测用于胚胎嗅鞘细胞移植治疗肌萎缩侧索硬化疗效评定具有较好的应用价值，通过移植前后肌电图改变可以较客观反映治疗的有效性。     

来源于人胚室下区神经干/祖细胞的贴壁法培养和鉴定

目的建立有效的人胚胎神经干/祖细胞分离及纯化方法以达到临床需要。方法无菌取胎脑室管膜下区组织,经反复机械吹打制备细胞混悬液,采用贴壁法进行体外培养、传代。传代后用Nestin进行细胞鉴定。结果应用贴壁法进行胎脑室管膜下区神经干/祖细胞的培养能够稳定传代20代以上;共聚焦显微镜下可见Nestin阳性细胞表达呈递增趋势,传至P3(passage3)阳性率为35%,P7为79%,P12为90%,P15为99%。传到前七代时分别做细胞存活率鉴定,可达(82.57±1.38)%。结论成功建立了来源于人胚室下区的神经干/祖细胞的贴壁法培养,为该细胞移植治疗神经系统疾病提供了技术方法支持。     

神经干细胞概念辨析

神经干细胞(neural stem cells,NSCs)被定义为由神经外胚层分化发育而来的具有持续自我更新能力和分化为多种谱系祖细胞(lineage-restricted progenitors,LRPs)潜能的未分化细胞.但到目前为止还没有发现NSCs中特异性的标记蛋白和较好的鉴定方法,很多报道误用或错用了这一概念,使人们对NSCs在移植研究的价值众说纷纭,本文主要就细胞移植研究中应用的NSCs这一概念进行辨析.     

初诊Graves′甲亢患者合并白细胞减少的研究

目的探讨初诊Graves′甲亢患者白细胞减少的相关因素及初诊甲亢对患者白细胞基数的影响。方法回顾性分析该院2010年12月至2011年12月间经治的208例初发甲亢患者的临床资料,观察其年龄、病程、性别、吸烟史、甲状腺激素、甲状腺过氧化物酶及甲状腺球蛋白、外周血白细胞、中性粒细胞、淋巴细胞等方面的关系及初诊甲亢患者白细胞基数。结果该208例初诊Graves′甲亢患者中合并白细胞减少者34例,初诊Graves′甲亢患者白细胞减少患病率为16.35%;两组年龄、性别比较差异有统计学意义(P0.05);初诊Graves′甲亢患者的白细胞基础值为(5.5±1.75)×109/L;34例合并白细胞减少组中粒细胞减少者32例,淋巴细胞均正常;147例不并白细胞减少组中粒细胞减少者54例,淋巴细胞增高者3例。结论高龄及女性患者是初诊Graves′甲亢合并白细胞减少的重要影响因素,而与病程、吸烟史、甲状腺激素、甲状腺过氧化物酶及球蛋白无明显相关性;208例初诊Graves′甲亢患者的白细胞基础值在正常参考值范围内;初诊Graves′甲亢患者合并白细胞减少患病率与文献报道一致。     

自身免疫性肝病患者肝纤维化血清标志物检测的意义

目的 探讨血清透明质酸(HA)、Ⅲ型前胶原(PCⅢ)、Ⅳ型胶原(CⅣ)和层粘连蛋白(LN)对自身免疫性肝病(ALD)患者肝纤维化诊断及鉴别的意义.方法 采用增强化学发光免疫分析法对37例原发性胆汁性肝硬化(PBC)患者、25例自身免疫性肝炎(AIH)患者、33例肝硬化患者、37例病毒性肝炎患者及20例健康体检者血清HA、PCⅢ、CⅣ、LN进行检测,并对部分患者在治疗6个月后再次检测上述指标,同时和部分肝功能指标进行相关性分析.结果 ALD患者4项肝纤维化指标均高于健康对照组(均P<0.05);AIH组4项指标均高于病毒性肝炎组(均P<0.01),ROC曲线下面积分别为0.823、0.849、0.824和0.830; PBC组CⅣ和LN低于肝硬化组(P<0.05);两组ALD患者在经治疗6个月后,上述指标均明显下降(均P<0.05).结论 肝纤维化血清标志物HA、PCⅢ、CⅣ和LN对于ALD患者肝纤维化的诊断及和病毒性肝炎的鉴别具有一定价值,并能间接反映肝脏炎症的情况.     

ELISA法检测丙型肝炎病毒抗体最佳临界值及其可疑区间

摘要:目的　探讨ELISA法检测丙型肝炎病毒（HCV）抗体诊断阳性的最佳临界值（Cut-off值）及其可疑区间,为不同实验室间的结果互认提供依据。方法　选取某院住院或体检的130例经ELISA法初筛为阳性的血清标本和25例接近临界值 （阴性）标本（OD＝0.15～2.0）,采用重组免疫印记（RIBA）法检测确认其阴、阳性。利用SPSS17.0绘制ROC曲线,确定最佳Cut-off值,进一步探讨可疑区间。结果　ELISA法检测HCV抗体诊断阳性的最佳Cut-off值为0.2513,其可疑区间范围为0.2136～0.5513。结论　确定适合本实验室最佳Cut-off值和可疑区间能有效地降低丙型肝炎抗体检测的漏诊率和误诊率。     

靶向转录因子STAT3的Decoy核苷酸对膀胱癌细胞体外增殖的抑制作用

目的： 〖HT5"SS〗研究核转录因子STAT3的诱骗寡核苷酸(decoy ODNs)对人膀胱癌细胞系增殖的抑制作用,并探讨其作用机制。〖HT5W〗方法： 〖HT5”SS〗采用阳离子聚合物Sofast为转染试剂将STAT3 decoy ODNs转染入膀胱癌T24及5637细胞;用MTT法检测细胞增殖情况;流式细胞术检测ODNs的转染效率;荧光显微镜检测ODNs入核情况;RTPCR及Western blot检测转染ODNs前后bclxl、cyclinD1和cmyc表达水平的变化。〖HT5W〗结果：〖HT5"SS〗ODNs可有效地转染至细胞内,部分可进入核内,转染效率呈剂量依赖关系;STAT3 decoy ODNs可抑制膀胱癌细胞的增殖,100 nmol/L组抑制率最明显,达40%～48%;100 nmol/L decoy ODNs明显抑制bclxl、cyclinD1和cmyc mRNA及蛋白的表达水平。〖HT5W〗结论：〖HT5"SS〗STAT3 decoy ODNs可显著抑制膀胱癌细胞的增殖,其作用机制可能是通过下调癌基因cmyc、细胞周期基因cyclinD1及凋亡相关基因bclxl的基因转录及蛋白表达而实现的。     

细粒棘球绦虫抗原B对免疫性血小板减少症小鼠模型免疫调节作用的初步研究北大核心CSCD

目的探讨细粒棘球绦虫(Echinococcus granulosus sensu stricto,E.granulosus s.s.)囊液自然抗原B(natural antigen B,nAgB)对免疫性血小板减少症(Immune thrombocytopenia,ITP)的调节作用。方法50只8~10周龄Balb/C雌性小鼠随机分5组,每组10只进行腹腔注射实验:I组:PBS处理组即空白对照组;II组:大鼠抗小鼠CD41单克隆抗体(anti-CD41 Ab)免疫组即ITP模型组;III组:nAgB对照组;IV组:nAgB连续免疫5 d后给予anti-CD41 Ab免疫组即nAgB+ITP组;V组:在anti-CD41 Ab免疫建立和维持ITP模型基础上,注射nAgB组即ITP+nAgB组。观察各组血小板(PLT)指标的变化。结果小鼠干预前血PLT计数均为(749.86±84.61)×10^(9)/L。II组和V组给予anti-CD41 Ab 2 d后分别与干预前比较差异均有统计学意义(t=31.299,t=20.955,均P<0.001),ITP建模成功。II组建模成功后与IV组PLT计数比较差异有统计学意义(t=7.493,P<0.001)。II组建模成功后第2 d与V组PLT计数比较差异有统计学意义(t=10.829,P<0.001)。II组建模成功后平均血小板体积(MPV)数值和血小板压积(PCT)数值分别与I组MPV数值和PCT数值比较差异有统计学意义(t=9.615,P<0.001;t=28.698,P<0.001)。结论AgB对免疫损伤所致ITP具有预防及治疗作用。