基于UPLC-Q-Orbitrap MS/MS技术研究膝痹宁对KOA模型大鼠的软骨保护效应

  目的  运用超高效液相色谱-四极杆-静电场轨道阱串联质谱(UPLC-Q-Orbitrap MS/MS)技术分析膝痹宁的药物活性成分, 通过干预膝骨关节炎(KOA)模型大鼠代谢因素探讨膝痹宁软骨保护效应的作用机制。  方法  制备膝痹宁水提物, UPLC-Q-Orbitrap MS/MS技术分析膝痹宁的活性成分。将大鼠分为空白组、KOA组、膝痹宁组, 提取大鼠软骨组织, HE染色、番红O-固绿染色观察组织结构形态; qPCR和Western blot法检测过氧化物酶体增殖物激活受体(PPARγ)、PPARγ辅助激活因子1α(PGC1α)及基质金属蛋白酶(MMP)3、MMP13的mRNA和蛋白表达水平; 取各组大鼠血清完成代谢组学分析。  结果  经鉴定, 膝痹宁含活性成分56种; 组织学切片提示膝痹宁具有软骨保护作用, 并能上调KOA大鼠软骨组织PPARγ、PGC1α的mRNA和蛋白表达水平(P < 0.05, P < 0.01), 降低MMP3、MMP13的mRNA和蛋白表达水平(P < 0.05, P < 0.01);此外, 代谢组学研究发现, 膝痹宁对13种KOA差异代谢物存在干预作用, 涉及10条代谢通路。  结论  膝痹宁具有多种药物活性成分, 其KOA软骨保护效应与药物活性成分对KOA的代谢调控有关。      

基于HMGB1探讨“易层”贴敷对KOA大鼠滑膜纤维化的影响

目的 基于HMGB1研究“易层”贴敷对膝骨关节炎（KOA）大鼠滑膜纤维化的影响。方法 30只SPF级SD大鼠,随机均分为空白对照组、模型组及易层组。KOA模型通过碘乙酸钠构建,造模成功后,易层组外敷“易层”贴敷28 d。末次给药后腹主动脉采血并提取各组滑膜组织,HE染色观察滑膜炎症;ELISA检测血清中促炎因子IL-1β、IL-6、TNF-α,抑炎因子IL-4、IL-10、TGF-β含量;Western blot和qPCR检测滑膜HMGB1及α-SMA、TIMP1、CollagenⅠ、CollagenⅢ蛋白和基因表达量。结果 HE染色显示易层组炎性细胞浸润较模型组显著减少,排列较为规则;模型组较空白对照组IL-1β、IL-6、TNF-α含量明显升高（P<0.05）,易层组较模型组IL-1β、TNF-α含量明显降低（P<0.05）,模型组较空白对照组IL-4含量明显升高（P<0.05）,IL-10、TGF-β含量明显降低（P<0.05）,易层组较模型组IL-10含量明显升高（P<0.05）;HMGB1及α-SMA、TIMP1、CollagenⅠ、CollagenⅢ的蛋白和基因水平在模型组较空白对照组表达增加（P<0.05）,易层组较模型组表达下调（P<0.05）。结论 “易层”贴敷能够抑制滑膜纤维化,其作用机制可能与抑制HMGB1、平衡促炎因子和抑炎因子有关。      

缺氧诱导因子在膝关节骨性关节炎发病机制中作用研究

正膝关节骨性关节炎(knee osteoarthritis, KOA)属于痹症范畴,包括"痛痹"、"膝痹"和"骨痹"等,主要病理特征为滑膜炎症、软骨破坏、软骨下骨病变,造成长期慢性疼痛,最终可导致膝关节活动受限甚至残疾不得不行关节置换,给工作和生活造成严重影响~[1]。目前,KOA的发病机制尚未明确,一项针对KOA的非手术指南中指出,其发病可能与生物力学改变,基质金属蛋白酶(MPP)激活活化,炎症因子分泌,软骨、软骨下骨和滑膜病变等相关,提     

2种不同整复手法对Colles'骨折腕部影像学指标的影响

目的 比较不同手法整复治疗Colles'骨折,观察腕部影像学指标改变的影响.方法 分别运用周氏"三折顶"整复手法(试验组47例)和传统整复手法(对照组45例)治疗Colles'骨折,对整复前后的腕部影像学指标(掌倾角、尺倾角、侧方和短缩移位)的改变进行观察.结果 试验组对Colles'骨折后掌倾角、尺倾角、侧方移位、短缩移位的首次矫正复位优于对照组(P<0.05,P<0.01);末次复诊掌倾角、侧方移位指标与对照组治疗效果相当,尺倾角、短缩移位指标优于对照组(P<0.05).2组骨折复位的痊愈率分别为78.72%、62.22%,P<0.05,试验组优于对照组.结论 周氏"三折顶"整复手法在Colles'骨折治疗中具有其优势,为骨折的复位、腕关节稳定和功能的恢复奠定了基础.     

耐热芽孢杆菌XJT9503高温中性蛋白酶的中试发酵工艺

对耐热芽孢杆菌(Thermophilicbacillus)XJT9503保藏、菌种活化、种子培养基和发酵培养基及7,25,250,3000L发酵罐的中试发酵工艺参数进行了研究,确定了耐热芽孢杆菌XJT9503高温中性蛋白酶的中试发酵工艺.在3000L发酵罐上控制罐温为46℃、转速180r/min、通气量4L/(L·min),培养18h后发酵酶活最高达13240U/mL.     

易层贴敷疗法对兔膝骨性关节炎滑膜基质金属蛋白酶的影响

目的研究易层贴敷疗法对骨性关节炎(OA)中滑膜炎症因子及基质金属蛋白酶表达的影响。方法 30只新西兰大白兔,随机分为正常组、模型对照组及治疗组;模型对照组及治疗组通过切断兔左后肢前交叉韧带获得OA模型,术后6周外用易层贴敷;术后8周处死动物,取滑膜行Western Blot及荧光定量PCR检测IL-1β、MMP-1及MMP-13的含量及表达。结果 Western Blot测定模型对照组滑膜中MMP-1及MMP-13含量明显高于治疗组,正常组中含量最低;荧光定量PCR测定模型对照组中MMP-1及MMP-13的表达量最高,正常组最低;正常组滑膜中IL-1β表达明显最低,模型对照组与治疗组之间无统计学差异。结论易层贴敷疗法能有效抑制滑膜中MMP-1及MMP-13的表达,从而降低了软骨基质的降解,缓解OA的进程,仍需进一步研究其具体的作用靶点,完善其作用机制。     

单侧外固定支架加夹板固定合桃红四物汤治疗肱骨干粉碎性骨折10例

自1997年—2004年,本院147例肱骨干骨折病人行保守或手术治疗,其中10例肱骨干粉碎性骨折,骨折经复位和夹板或悬吊石膏固定,治疗不满意,笔者选用单侧外固定支架加夹板固定进行治疗,术后给予加味桃红四物汤内服,其效果满意,现报道如下。1临床资料本组10例肱骨干粉碎性骨折,男7例,女3例;年龄22￣72岁,平均50岁;右8例,左2例;闭合性骨折9例,开放性骨折1例;A O分型B2型2例,B3型4例,C 1型2例,C 2型2例;手术时间,伤后4￣96h,平均26h;住院天数7￣19天,平均14天。2治疗方法臂丛麻醉后平卧,上肢置胸前位。先行肱骨远端螺纹钉置入,取肱骨远端外侧小切…     

基于Netrin-1介导神经萌发探讨温经活血外治法对膝骨关节炎大鼠疼痛的影响

目的 研究Netrin-1介导感觉神经萌发对膝骨关节炎(Knee osteoarthritis, KOA)大鼠疼痛行为的影响及温经活血外治法的干预作用。方法 随机将30只大鼠平均分为空白组、KOA组及外治法组。KOA模型通过前交叉韧带横断术构建,造模成功后,外治法组使用温经活血外治法代表方——“易层”贴敷28 d。给药完成后各大鼠腹主动脉采血并提取各组滑膜组织和背根神经节(Dorasal root ganglion, DRG)组织,苏木精-伊红(Hematoxylin-eosin staining, HE)染色观察滑膜炎症,神经镀银染色滑膜观察神经萌发;ELISA检测血清中促炎因子白介素-6(Interleukin 6,IL-6)和疼痛介质P物质(Substance p, SP)、降钙素基因相关肽(Calcitonin gene-related peptide, CGRP)含量;Western blot和qPCR检测滑膜组织Netrin-1、CGRP和DRG组织神经元表面受体结直肠癌缺失基因(Deleted in colorectal cancer, DCC)、非协调同源-5(Unco...     

第1跖骨远端Chevron截骨联合软组织松解术治疗拇外翻

目的 :探讨第1跖骨远端Chevron截骨联合软组织松解术治疗轻、中度拇外翻的临床疗效。方法:自2015年6月至2017年6月,采用第1跖骨远端Chevron截骨联合软组织松解术治疗拇外翻32例(40足),其中男3例3足,女29例37足;年龄22～80岁,平均57.57岁;病程2～32年,平均14年;轻度9足,中度31足。术前患者合并拇囊炎,伴有第1跖趾关节周围疼痛并存在负重行走时疼痛加重。手术前后拍摄足负重正侧位片,比较拇外翻角(hallux valgus angle,HVA),第1、2跖骨间角(intermetatarsal angle,IMA),并采用美国足踝外科协会拇外翻评分(AOFAS)评价临床疗效。结果:32例患者获得了随访,时间12～24个月,平均15.2个月。术后切口均愈合良好,无感染、跖骨头坏死等并发症发生。术前HVA、IMA分别由(32.08±5.59)°、(11.63±2.24)°减小至术后12个月的(10.31±4.36)°、(5.02±2.34)°,差异有统计学意义(P0.05)。AOFAS评分由术前的56.75±6.42提高至术后12个月的88.80±3.99 (P0.05)。结论:第1跖骨远端Chevron截骨联合软组织松解术治疗轻、中度拇外翻畸形可获得较好的临床效果,为拇外翻治疗提供了更多的选择。     

负压封闭引流技术（VSD）治疗骨科软组织损伤26例

骨折经常合并软组织损伤,特别是在高能量损伤状态下,软组织往往首先遭受冲击,产生严重损伤。没有良好的软组织覆盖,骨折通常难以愈合,因此对软组织损伤的治疗修复,是临床骨科医师经常面临的难题。自1992年德国ULM大学创伤外科Fleischman博士发明负压封闭引流技术（VSD）以来,让各种软组织缺损和感染的治疗变得简单快速有效,该技术使创面处于一个全表面封闭负压引流状态,促进创面、腔隙内的渗液、坏死组织及时排出体外,