重组跨膜型人CD55分子在小鼠NIH3T3细胞上的表达及其补体溶破保护功能的研究

目的 :在小鼠NIH3T3细胞转染表达人天然GPI锚固型CD5 5和重组跨膜型CD5 5 TM分子 ,观察比较它们对人补体溶破异源细胞的抑制功能。方法 :将带有CD5 5cDNA、CD5 5 TMcDNA的重组逆病毒表达质粒CD5 5 pLXSN、CD5 5TM pLXSN经脂质体法转染PA317细胞 ,用病毒上清感染小鼠成纤维母细胞NIH3T3。经G418加压筛选 ,利用FACS检测获得表达CD5 5和CD5 5 TM分子的阳性细胞克隆 ,通过MTT比色法比较两种分子对人血清补体溶破细胞的抑制功能有无差别。结果 :细胞转染筛选获得多个表达跨膜型人CD5 5分子的NIH3T3细胞克隆 ,补体杀伤试验证实其具有抑制人补体溶破的功能 ,且两种分子的补体抑制功能无明显差异。结论 :成功地建立了稳定表达天然CD5 5、跨膜型CD5 5分子的小鼠NIH3T3细胞 ,证实其表达的GPI型CD5 5分子和CD5 5TM分子均具有抑制人补体溶破细胞的功能 ,为进一步探讨应用跨膜型的CD5 5分子对PNH进行基因治疗奠定了基础。     

采用去β细胞技术建立胰岛α细胞大鼠模型

目的 建立一种去除胰岛β细胞的α细胞大鼠模型.方法 12周龄SD大鼠分为3组(n=8):正常对照组(NC)、模型1组(M1)和模型2组(M2),M1和M2组大鼠分别腹腔注射1次链脲佐菌素(STZ)100和150 mg/kg,5 d后处死大鼠,胰腺组织匀浆检测胰岛素(Ins)和胰高糖素(Glc)的含量;胰腺组织HE染色,Ins、Glc经免疫组织化学染色并图像定量分析.结果 去β细胞大鼠(M1和M2组)胰岛丽积约为正常大鼠的1/7,β细胞面积占胰岛面积比例由正常状态的74.3%分别下降到5.4%和5.2%,胰腺匀浆液Ins的含量不到正常的3%,而Glc的含量略有上升.NC组Glc阳性细胞位于胰岛周边,数量较少,M1和M2组Glc阳性的α细胞由周边向中央聚集,α细胞面积占胰岛面积比例由16.4%分别上升到76.5%和74.4%.结论 STZ一次大剂量腹腔注射可获得完全去除胰岛β细胞的大鼠模型,且不影响α细胞的形态和功能,建立胰岛α细胞大鼠模型.     

感觉神经定量检测仪对糖尿病患者检测的临床意义初步观察

目的探讨血脂异常与糖尿病周围神经病变(DPN)的相关性。方法将201例患者按照是否合并血脂异常分为单纯T2DM组68例、T2DM合并血脂异常组66例、单纯血脂异常组32例和健康对照(NC)组35名,采用感觉神经定量检测仪测定各组正中、腓肠神经于2000、250、5Hz的电流感觉阈值(CPT),检测相关生化指标。结果 T2DM合并血脂异常组较单纯T2DM组CPT升高(P0.05),5Hz时CPT升高最显著(P0.01)。单纯T2DM组和单纯血脂异常组双侧正中、腓肠神经比较差异无统计学意义。单纯血脂异常组双侧正中、腓肠神经CPT较NC组升高(P0.05或P0.01)。结论血脂异常与高糖毒性是DPN的两个等位危险因素,高糖合并血脂异常可加快DPN发生发展。     

中晚期宫颈癌同步放化疗的临床观察

目的探讨中晚期宫颈癌同步放化疗的耐受性和毒副反应.方法2004年2005年我院开展了中晚期宫颈癌同步放化疗治疗患者54例,组织学类型为鳞癌81.48%(44/54),腺癌18.51%(10/54),Ⅱb期34例,Ⅲ期18例,Ⅳ期2例.全部病例采用体外照射和腔内近距离照射的联合放疗方案,同步应用DF化疗方案.体外照射采用6MV-X线,前后野对穿照射,常规分割每周5次,每次2Gy,外照射全盆腔剂量24Gy～30Gy/2W～3W,盆腔野挡铅4×10cm～17cm,加腔内近距离治疗.腔内近距离治疗每次A点剂量5Gy～6Gy,腔内照射当日不作体外照射,共5次～7次,腔内照射A点总量25Gy～42Gy.体外和腔内照射A点总量为70Gy～82Gy,B点总剂量50Gy～70Gy,总疗程6周～8周.与放化疗开始之日常规应用升白胺3片,3次/天,至疗程结束.结果达CR者49/54(90.74%),PR者5/54(9.25%).放疗结束宫颈刮片阴性52/54(96.29%).本组病例治疗后均满2年,2年总生存率77.78%.本组宫颈癌患者同步放化疗副反应主要为肠道反应、泌尿系统反应、血液学毒性.急性放射性直肠反应全组发生率为46.30%(25/54),其中18例(72%)为轻度,7例(24%)为中度,全组病例无直肠阴道瘘发生.血液学毒性主要表现为白细胞下降,RTO G1级9例(16.67%),RTO G2级5例(9.25%),无3级以上毒性反应.结论中晚期宫颈癌同步放化疗具有较好的临床耐受性,两年生存率达77.78%.通过改进外照射方式(如IMRT),降低单次腔内治疗剂量(小于6Gy),将会减轻肠道副反应.     

中晚期宫颈癌同步放化疗的临床观察

目的：探讨中晚期宫颈癌同步放化疗的耐受性和毒副反应。方法：2004年2005年我院开展了中晚期宫颈癌同步放化疗治疗患者54例，组织学类型为鳞癌81．48％（44／54），腺癌18．51％（10／54），Ⅱb期34例，Ⅲ期18例，Ⅳ期2例。全部病例采用体外照射和腔内近距离照射的联合放疗方案，同步应用DF化疗方案。体外照射采用6MV-X线，前后野对穿照射，常规分割每周5次，每次2Gy，外照射全盆腔剂量24Gy-30Gy／2W-3W，盆腔野挡铅4×10cm-17cm，加腔内近距离治疗。腔内近距离治疗每次A点剂量5Cy-6Gy，腔内照射当日不作体外照射，共5次-7次，腔内照射A点总量25Gy-42Gy。体外和腔内照射A点总量为70Gy-82Cy，B点总剂量50Gy-70Gy，总疗程6周-8周。与放化疗开始之日常规应用升白胺3片，3次／天，至疗程结束。结果：达CR者49／54（90．74％），PR者5／54（9．25％）。放疗结束宫颈刮片阴性52／54（96．29％）。本组病例治疗后均满2年，2年总生存率77．78％。本组宫颈癌患者同步放化疗副反应主要为肠道反应、泌尿系统反应、血液学毒性。急性放射性直肠反应全组发生率为46．30％（25／54），其中18例（72％）为轻度，7例（2，4％）为中度，全组病例无直肠阴道瘘发生。血液学毒性主要表现为白细胞下降，RTOG1级9例（16．57％），RTOG2级5例（9．25％），无3级以上毒性反应。结论：中晚期宫颈癌同步放化疗具有较好的临床耐受性，两年生存率达77．78％。通过改进外照射方式（如IMRT），降低单次腔内治疗剂量（小于6Gy），将会减轻肠道副反应。     

不同性别、年龄及不同骨骼部位骨质疏松检出率的比较

背景早期诊治骨质疏松( osteoporosis, OP)目前仍以骨密度( bone mineral density, BMD)的测定为标准.但在测定中随不同性别、不同年龄、骨骼不同部位的 OP检出率不同,有必要分析这种差别. 目的比较不同性别随增龄在骨骼不同部位骨质疏松检出率的不同. 设计以患者为研究对象的横断面调查. 单位一所军队炮兵总医院的内分泌科. 对象本研究在解放军第二炮兵总医院内分泌科完成.选择 2000- 09/2002- 01在本院门诊就诊的患者共 147例,其中男 54例,女 93例,年龄 50～ 78岁.按年龄分为 3组,即 50～ 59岁组、 60～ 69岁组和 70～ 79岁组,各组人数分别为 46例(男 13例,女 33例), 66例(男 26例,女 40例)和 35例(男 15例,女 20例).纳入标准①年龄≥ 50岁,女性均为绝经后;②符合 WHO推荐的 OP诊断标准 [1].排除标准患肝、肾、心脏、胃肠道等脏器慢性疾病及糖尿病、甲亢等内分泌疾病引起的继发性骨质疏松者. 方法每个受试者详细填写病史调查表,准确测量身高和体质量,并计算体质量指数( kg/m2).应用本院新型 Norland Excell plus 双能 X线骨密度吸收仪( DEXA)测定每一受试者的 L2- 4及股骨近端(股骨颈、 Ward' s三角、大转子) BMD值( g/cm2).将所测值与同性别年轻成年人正常数据比较,得出 T评分(即 SD). 主要观察指标①不同性别、年龄、部位 OP检出结果比较;②年龄及体质量指数与 BMD的相关性. 结果女性更年期以腰椎 OP为主(χ 2=10.14,P< 0.01),随年龄增加腰椎和股骨颈均出现 OP的检出率增加 (χ 2=7.41,P< 0.05);男性 60岁以后以单纯股骨颈 OP增加明显(χ 2=9.11,P< 0.05);女性较男性更易患单纯腰椎 OP及腰椎和股骨颈均出现 OP(χ 2=8.04,P< 0.05;χ 2=14.26,P< 0.01);女性年龄与股骨颈、 Ward, s三角及大转子区 BMD有明显负相关( r=- 0.364,- 0.389,P< 0.01;r=- 0.504,P< 0.001);体质量指数与 L2～ 4、股骨颈和大转子 BMD有明显正相关( r=0.306,0.329,0.338,P< 0.05). 结论 OP的检出率随骨骼测量部位和年龄的变化而变化.正确认识和评价这些客观现象,对 OP的诊治具有重要意义.     

不同年龄健康者不同部位骨密度分析

目的：分析不同年龄健康志愿者腰椎及髋部不同部位骨密度结果，提高早期诊断骨质疏松的依据。方法：对300名健康志愿者，年龄30～79岁，男110名，女190名。应用双能X线骨密度吸收仪测定腰椎及髋部不同部位(股骨颈、Ward’s三角、大转子)骨密度，并按不同年龄组进行结果分析。结果：①女性腰椎2～4(L2-4)BMD50岁后下降明显(t=3．96～5．62,P&;lt;0．001)；股骨颈和Ward’s三角BMD随年龄增加而下降(各组间差异t=2．01～6．91，P&;lt;0．05～0．001，t=2．88～7．34．P&;lt;0．001)：大转子。BMD在50岁组和60岁组与其他各年龄组之间有明显的下降(t=4．19～5．24，P&;lt;0.01～0．001)。②110名男性L2-4BMD各组间比较无明显差异；股骨3个部位的BMD50岁后随年龄增加而下降(各组间差异t=2．13～0．87，P&;lt;0．05～0．001)。③女性。BMD4项值与年龄及绝经年限明显负相关(r=0．312，P&;lt;0.01;r=0．532．P&;lt;0.01；r=0．418，P&;lt;0.01；r=0．642，P&;lt;0．001)；男性与年龄及BMI的相关性不明显。结论：女性在更年期后以L2-4BMD下降为主；男性以髋部BMD变化为主。骨密度的测定提供了早期诊断骨质疏松的依据。     

内源性大麻素系统心血管作用的研究进展

内源性大麻素系统在心血管系统中的作用涉及到血压、心率、心肌收缩力的调节等许多方面,在生理条件下主要通过刺激大麻素1受体(CB1受体)发挥降低血压和心脏抑制效果;在多种病理条件中也起了重要作用,包括通过CB1受体活化参与出血、内毒素和心源性休克、肝硬化伴随的低血压,降低高血压大鼠的血压;通过大麻素2受体(CB2受体)活化防止动脉粥样硬化进展,还能对缺血再灌注后的心肌起保护作用,但CB1受体和CB2受体谁在其中起主要作用尚不明确。对其机制的深入研究对研制新的药物,治疗心血管疾病有着深远意义。     

氧化应激与β细胞脂性凋亡关系及机制研究

目的:观察长期高脂饮食对大鼠胰岛β细胞凋亡影响,探讨氧化应激相关因子及基因表达与β细胞脂性凋亡关系及可能机制.方法:41只SD雄性大鼠随机分为高脂饲料喂养的肥胖组(n=21)和普通饲料喂养的正常对照组(n=20),喂养28周后,检测血浆及胰腺组织中的丙二醛(MDA)、还原型谷胱甘肽(GSH)浓度;静脉葡萄糖耐量试验评价早相胰岛素分泌反应(AIR);TUNEL法观察胰岛β细胞凋亡情况并计数每个胰岛中β细胞凋亡率;采用荧光定量PCR(Real-time PCR)比较两组大鼠胰岛细胞解偶联蛋白-2(UCP-2)mRNA表达的情况.结果:28周时高脂饲养组血浆及胰腺组织中MDA高于正常饲养组(P<0 05),而高脂饲养组血浆及胰腺组织中GSH低于正常饲养组(P<0 01).与基础值比较,高脂饲养组糖负荷后胰岛素增高的幅度低于正常饲养组(3 0倍vs 5 7倍,P<0 05).高脂饲养组1 min后血糖浓度下降缓慢,3、5、10 min血糖水平均高于正常饲养组(P<0 05).高脂饲养组胰岛β细胞凋亡率比正常饲养组增加40 0%(P<0 01).高脂饲养组胰岛细胞UCP-2基因mRNA表达与正常饲养组相比升高22 4%(P<0 01).结论:高脂喂养28周后SD大鼠胰岛β细胞凋亡率明显增加,血浆及胰岛细胞中MDA升高、GSH降低, 而且胰岛细胞UCP-2基因mRNA表达升高,提示氧化应激可能参与了高脂引起的β细胞脂性凋亡.     

脂肪分存的顺序及其与胰岛素抵抗的关系

目的探讨高脂饲养SD大鼠脂肪分存的顺序及其与胰岛素抵抗的关系。方法将8周龄雄性SD大鼠随机分为2组：正常饲养组（NC，n=40）、高脂饲养组（HF，n=40）。在不同周龄测定血清、肝脏、肌肉组织中甘油三酯（TG）含量；进行正常血糖高胰岛素钳夹试验评估胰岛素的敏感性；并用定量PCR方法分析肝脏和肌肉中脂代谢调控基因mRNA表达的变化。结果（1）与NC组比较，高脂饲养4周、8周时血TG无明显变化，12周时明显增高[0．52（0．15-1．00）mmol／L vs 0．31（0．09-0．53）mmol／L，P〈0．01]，持续至20周。（2）HF组肝脏TG含量从高脂饲养4周始便明显增高[（34．38±11．12）mg／g vs（1．65±0．37）mg／g，P〈0．01]，一直持续至20周；肌肉TG在高脂饲养4、8、12周均无明显变化，高脂饲养20周时明显增高[（32．24±7．24）mg／g vs （2．77±0．76）mg／g，P〈0．01]。（3）正常血糖高胰岛素钳夹试验表明，HF组高脂饲养4周始葡萄糖输注率（GIR）呈下降趋势，高脂饲养8周时明显下降[（21．81±7．20）mg·kg^-1·min^-1 vs （8．44±1．77）mg·kg^-1·min^-1，P〈0．01]，一直持续至20周。（4）脂代谢调控基因的检测表明，高脂饲养4周时肝脏中合成基因乙酰辅酶A羧化酶（ACC1）的表达无明显增高而氧化基因肉毒碱酰基转移酶（CPT-1）的表达下降20．3％（P〈0．05），肌肉组织ACC2、CPT-1的表达均无明显变化（P〉0．05）；高脂饲养8周时肝脏中ACC1的表达增高20．6％、CPT-1的表达下降27．1％（P〈0．05），肌肉组织ACC2的表达增高18．6％、CPT-1的表达下降19．2％（P〈0．05）；高脂饲养20周时肝脏ACC1表达增高48．3％（P〈0．05）、CPT-1表达无明显变化（P〉0．05），肌肉ACC2表达增高101．1％、CPT-1的表达下降71％（P〈0．05）。结论高脂饲养SD大鼠脂肪分存过程中，肝脏早于肌肉，肝脏TG含量增加可能是胰岛素抵抗的早期标志之一。脂代谢调控基因的表达可能在其中起了重要作用。