盐酸药根碱对HPV16 E6/E7-HaCaT细胞中NF-κB及C2TA蛋白的影响

目的：探究加味二妙颗粒有效成分盐酸药根碱清除人乳头瘤病毒（human papilloma virus,HPV）的分子作用机制。方法：利用生物信息学数据库筛查宫颈鳞状细胞癌组织中差异表达基因并对其进行生存分析。体外验证实验利用慢病毒载体构建稳定过表达HPV16 E6/E7蛋白的人角质形成细胞系HaCaT,用盐酸药根碱0.001、0.05、0.2、1、5μmol/L处理HaCaT-HPV16E6/E7细胞系,采用Cell Counting Kit-8(CCK-8)检测盐酸药根碱对HaCaT-HPV16 E6/E7细胞的影响,采用实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）检测盐酸药根碱对HaCaT-HPV16 E6/E7细胞中相关细胞因子白介素-1β(IL-1β)、白介素-8(IL-8)、白介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的影响,蛋白免疫印迹（Western blot）法检测C2TA蛋白及NF-κB通路相关蛋白的表达,探讨盐酸药根碱在人乳头瘤病毒蛋白E6、E7逃避免疫识别的作用机制。结果：通过数据库筛查得知C2TA与宫颈鳞状细胞癌密切相关,其低表达影响患者的...     

御生堂减肥胶囊的急性毒性及致突变性

背景与目的:测试御生堂减肥胶囊的急性毒性及致突变性.材料与方法:按<食品安全性毒理学评价程序和方法>进行了小鼠的急性毒性试验、小鼠骨髓细胞微核试验、小鼠精子畸形试验、大鼠30 d喂养试验及Ames试验.结果:小鼠LD50＞215 000mg/kg,小鼠骨髓细胞微核试验和小鼠精子畸形试验测试组和对照组相比差异均无显著性,Ames试验中不同剂量组在加S9和不加S9条件下的回变菌落数均未超过空白对照组回变菌落数的2倍;大鼠30 d喂养试验各剂量组动物生长发育良好,血液及生化指标均在正常范围内,各试验组与对照组比较差异无显著性,病理学检查结果肝、肾、胃、肠均正常.结论:御生堂减肥胶囊属无毒物质,致突变试验及30 d喂养试验均为阴性结果.     

洋参二醇皂苷注射液对大鼠心肌缺血再灌注损伤的影响

[目的]研究洋参二醇皂苷注射液(IPQDS)对大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用。[方法]在体大鼠结扎冠状动脉前降支30min后,松扎再灌注120min造成心肌缺血再灌注模型,计算心肌梗死范围(MIS),测定血清磷酸肌酸激酶(CK)、乳酸脱氢酶(LDH)、天门冬氨酸氨基转换酶(AST)、超氧化物岐化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性及脂质过氧化物(LPO)含量,血浆内皮素(ET)、血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)、前列环素(PGI₂)及血栓素A₂(TXA₂)水平。[结果]IPQDS对心肌缺血30min再灌注损伤120min大鼠,可明显缩小MIS,降低血清CK、LDH、AST活性及LPO含量,提高SOD及GSH-Px活性,能使血浆ET、AngⅡ、TXA₂水平明显下降,PGI₂水平及PGI₂/TXA₂比值明显增高。[结论]IPQDS对大鼠心肌缺血再灌注损伤具有明显保护作用,可能与其增强抗氧化酶活性,减少自由基对心肌的氧化损伤,减少内源性血管活性物质ET及AngⅡ释放,纠正PGI₂/TXA₂失衡等机制有关。     

《金匮要略》“面目乍赤、乍黑、乍白”辨析

“面目乍赤、乍黑、乍白”出自《金匮要略·百合狐惑阴阳毒病脉证治》篇,为狐惑病证候表现之一。后世医家对面目证候的病机论述多推崇赵以德之论而作“虫蚀”解。现行《金匮要略》教材将该句释义为面部和眼睛的颜色一会儿变红,一会儿变白,一会儿变黑。通过对“面目”“乍”“蚀”字的剖析及对狐惑病病因的探讨,发现该病与虫蚀无关,而是与脾胃湿热气虚而化火相关,并应将原句释义更正为“面部的颜色有的红,有的白,有的黑”。     

La、hVAP-33、eIF2B γ和HCV IRES特异性小干扰RNA抑制HCV的复制和表达

目的 证实La自身抗原、33kD人类囊相关膜蛋白(hVAP-33)和真核细胞翻译起始因子第3亚单位(eIF2B γ)是HCV在细胞内的协同感染因子,通过抑制Huh7细胞内这些因子的表达可抑制HCV复制和表达. 方法 分别设计合成3条HCV内部核糖体进入位点(IRES)的小干扰RNA(siRNAs),转染Huh7-HCV细胞后筛选出其中沉默效率最高的1条.以HCV假病毒感染Huh7细胞后48 h,分别以上述HCV IRES siRNA和之前试验中已经筛选出的La、hVAP-33和eIF2B γ特异性siRNAs单独或者不同组合转染Huh7-HCV细胞,利用荧光定量PCR方法检测HCV核心基因并计算△△CT值(相对定量法),比较不同siRNAs及组合对目的基因沉默的效率;同时以Western blot观察HCV核心蛋白表达量的差异.结果 La自身抗原与IRES特异性siRNA共转染对HCV表达的抑制效率最高,使HCV核心蛋白基因相对表达量下降了约41％;4种基因特异性siRNAs 对HCV在Huh7细胞中的复制和表达均有不同程度的抑制作用,La、hVAP-33和eIF2Bγ特异性siRNAs分别与IRES siRNA联合均较其单独转染对目的基因的抑制效率高.结论 可以认为La自身抗原、hVAP-33和eIF2Bγ是HCV在宿主细胞内的协同感染因子,通过对Huh7细胞内协同感染因子及HCV IRES基因沉默后可以显著减少HCV的表达.     

认知行为取向团体辅导对大学生生气情绪管理的干预效果研究

目的：研究认知行为互动团体辅导对大学生生气情绪管理的干预效果。方法：筛选出21名大学生为试验组,进行4期8次的认知行为取向的团体心理辅导;同时设立对照组21名,不参加团体训练。通过定量和定性的方法对于干预效果进行评估。结果：通过团体心理辅导后,试验组在情境生气、特质生气、生气表达及非理性信念的后测结果较前测显著降低（P〈0．05）,对照组的前后测分数无显著差异（P〉0．05）;后测和追踪测量的结果：在情境生气、特质生气等4个维度方面,试验组显著低于对照组（P〈0．05）。结论：认知行为取向团体心理辅导对改善大学生生气情绪管理具有积极正向的效果。     

基于基因编辑技术的DMD人诱导多能干细胞模型构建

目的 采用CRISPR/Cas9技术,构建杜氏进行性肌营养不良(DMD)大片段缺失的人诱导多能干细胞(hiPSCs)模型.方法 采用电转质粒的方式,在正常的hiPSCs上用双sgRNA切割方案,切除dystrophin基因的52号外显子.结果 T7E1分析显示,所选sgRNA切割效率最高可达91％,后续基因型鉴定显示成...     

去卵巢小鼠焦虑样行为和血清激素水平及当归补血汤的干预作用

目的 探讨当归补血汤对去卵巢小鼠焦虑样行为和血清激素水平的影响.方法 60只小鼠随机分为两组:假手术组(n=12)和去卵巢组(n=48).去卵巢组小鼠再随机分为4组,即模型组和低、中、高剂量组.去卵巢组和假手术组动物灌胃给予等体积的生理盐水,低、中、高剂量组动物分别灌胃给予2.5 g/kg,10.0 g/kg,40.0...     

黄芪注射液治疗糖尿病肾病效果的Meta分析

目的 系统评价黄芪注射液治疗糖尿病肾病的临床效果。方法 以“糖尿病肾病”“黄芪注射液”为中文关键词,以“astragalus membranaceus injection”“diabetic”“nephropathy”“diabetic nephropathy”“DN”为英文关键词,计算机及手工检索万方、中国知网、维普、中国生物医学、PubM ed、Embase数据库,收集1996年1月~2015年10月关于黄芪注射液治疗糖尿病肾病的随机对照文献,采用Review Manager 5.1软件进行Meta分析。结果 经筛选最终纳入9篇相关文献,共437例患者,其中采用基础治疗262例(对照组),另加黄芪注射液静脉注射治疗295例(观察组)。治疗后,观察组24 h尿蛋白(MD=-0.5,95%CI为-0.85~-0.16)、血肌酐(MD=-25.07,95%CI为-45.7~-4.44)、血尿素氮水平(MD=-2.18,95%CI为-3.67~-0.69)与对照组比较差异有统计学意义(P均<0.05)。结论 黄芪注射液静脉注射可显著改善糖尿病肾病患者的尿蛋白水平。     

“益精方”提高小鼠精子特异性钙通道蛋白1及胞内Ca2+浓度的表达

目的 研究以“益精方”为代表的中药对小鼠精子尾部特异性钙通道蛋白(cation channel 1 of sperm,CatSper1)及其胞内Ca2+浓度的影响.方法 将60只成年雄性昆明小鼠用分层法随机分为大剂量中药治疗组(large dose,LD)、小剂量中药治疗组(small dose,SD)、模型组(model group,MG)和对照组(control group,CG),按60 mg/kg体质量给MG、SD、LD组小鼠腹腔注射环磷酰胺,给CG组小鼠腹腔注射生理盐水,1次/d,连续5d,第6天开始按体质量分别给SD和LD组小鼠灌服“益精方”,剂量分别为人类常规用量(以60 kg为标准)的1倍和5倍,MG组小鼠给予等体积的生理盐水灌胃,1次饵,连续34 d,CG组小鼠常规饲养,然后对小鼠进行精液常规分析,并用RT-PCR法检测小鼠精子CatSper1的表达,流式细胞术检测精子胞内Ca2+浓度.结果 经“益精方”治疗后,LD组精子密度、前向运动精子百分率、精子活动率明显增加,与MG组比较有统计学意义(P＜0.05);MG组小鼠精子密度,前向运动精子百分率,精子活动率显著低于CG组(P＜0.05);MG组小鼠精子CatSper1的表达量虽然下降,但与CG组比较没有明显区别,治疗后LD组显著高于MG组(P＜0.05),而与CG组比较没有明显区别;MG组小鼠精子胞内Ca2+浓度明显减少,与CG组小鼠比较有统计学意义(P＜0.05),而治疗后LD组小鼠胞内Ca2+浓度显著改善,与MG组小鼠比较有统计学意义(P＜0.05).结论 环磷酰胺腹腔注射可降低小鼠前向运动精子百分率、精子总活动率和精子密度,降低CatSper1表达量,大剂量“益精方”通过增加精子尾部CatSper1的表达,提高精子胞内Ca2+浓度,进而增加精子前向运动率和活动率,并可以增加小鼠精子密度,从而达到治疗少弱精子症的目的.