大黄虫丸对H2O2诱导大鼠肝星状细胞氧化应激的影响

目的研究大黄■虫丸对H_2O_2诱导大鼠肝星状细胞氧化应激的影响,并探讨其分子机制。方法制备大鼠大黄■虫丸血清和正常血清;将肝星状细胞(HSCs)分为正常血清低浓度H_2O_2(50 nmol/L)组、大黄■虫丸血清低浓度H_2O_2组、正常血清高浓度H_2O_2(100μmol/L)组和大黄■虫丸血清高浓度H_2O_2组,应用化学荧光和流式细胞术检测细胞内活性氧(ROS)水平。蛋白质免疫印迹实验中,将HSCs分为正常血清组、大黄■虫丸血清组、正常血清低浓度H_2O_2(50 nmol/L)组和大黄■虫丸血清低浓度H_2O_2组,以检测ROS生成相关分子RAC1、p67~(phox)、p22~(phox)和p-ERK的表达。结果正常血清高浓度H_2O_2组和大黄■虫丸血清高浓度H_2O_2组细胞内均有较强ROS荧光,但两组之间差异无统计学意义(P0.05);大黄■虫丸血清低浓度H_2O_2组细胞的ROS荧光强度明显弱于正常血清低浓度H_2O_2组(P0.01);与正常血清组比较,正常血清低浓度H_2O_2组RAC1、p67~(phox)、p22~(phox)和p-ERK蛋白表达水平均显著升高(P0.01);与正常血清低浓度H_2O_2组比较,大黄■虫丸血清低浓度H_2O_2组RAC1、p67~(phox)、p22~(phox)和p-ERK蛋白表达下调(P0.01)。结论大黄■虫丸可能通过调控RAC1、p67~(phox)、p22~(phox)和p-ERK等分子,参与拮抗H_2O_2诱导的氧化应激,阻止ROS的生成,并最终抑制HSCs活化、增殖,防治肝纤维化。     

新型雌激素受体β信号通路调节因子的分离及鉴定

目的：利用酵母双杂交技术筛选与ERβ相互作用的蛋白，为进一步研究ERβ的功能奠定基础。方法：从乳腺cDNA文库中钓取ERβ-AF1 cDNA，构建诱饵蛋白载体pAS2-1-ERβ—AF1，利用酵母双杂交筛选技术，在乳腺cDNA文库中筛选与ERβ-AF1相互作用的蛋白。将含有pACT2-候选基因的酵母菌与含有pAS2—1-ERp—AF1的酵母菌进行交配实验，利用LacZ报告基因检测ERβ—AF1与候选蛋白之间是否存在相互作用。然后将ERp—AF1和候选蛋白分别构建到pGEx-KG和pET-28a上，并纯化GST-ERβ-AF1和His-侯选蛋白融合蛋白，利用GST沉淀实验进一步验证ERβ-AF1和候选蛋白的体外相互作用。结果：所获取的候选蛋白为CTGF，是CCN多肽家族成员。交配实验表明，CTGF与ERβ-AF1特异相互作用，而不与空载体或BRCT1对照相互作用。GST沉淀实验进一步验证，CTGF与ERβ、ERα均存在相互作用，但与CTGF同源性较高的NOV蛋白却不与ERβ、ERa结合。结论：CTGF和ERβ存在特异的相互作用。     

骨梗灵含服液治疗骨梗的临床应用

<正> 骨梗灵是根据广东民间秘方而制成的治疗咽喉和食道骨梗的含服液,经临床使用7例表明对咽喉和食道骨梗有明显的松解作用,现报告如下。1.处方:由芒萁叶4g 乌毛蕨贯众叶4g     

“导乐Doula分娩”内涵提升和管理技巧的探讨

导乐陪伴分娩有效地促进母婴安全工程，提高围产质量，密切医患关系，提高护理服务理念，注意以人为本，转变产时服务模式，强调分娩过程中的温馨感和陪伴者支持的重要性，让分娩回归自然。     

解磷定在胃内解毒的临床应用

有机磷农药在胃内吸收快,常规阻止毒物吸收的方法是洗胃。由于洗胃需要一定的设备和时间,同时在临床工作中遇到病人情况很差、机器故障、停电、胃管阻塞等情况,会给抢救增加困难。据此,我们用解磷定灌胃及口服进行胃内解毒。现将动物实验及临床观察结果报告如下。1 动物实验1.1 实验材料1.1.1 小鼠(取材于浙江省中医学研究所)20只,     

监护病房耐药菌临床分析

目的：研究加强监护病房(ICU)的耐药菌情况。方法：收集ICU 182例病人临床分离的耐药菌进行药物敏感试验。结果：共分离到748菌株，包括G杆菌386株(51．6％)，G球菌274株(36．6％)，真菌88株(11．6％)，致病菌分离95．5％来自痰培养。MBSA为最常见耐药菌，占总耐药菌的32．5％，未发现耐万古霉素的MRSA；铜绿假单胞杆菌居第2位，占总耐药菌的14．7％，亚安培南大多耐药，体外药敏试验最敏感为妥布霉素，其次为头孢哌酮／舒巴坦；鲍曼氏不动杆菌第3位，最有效为亚安培南；白色念珠菌第4位，尚未发现耐氟康唑菌株；大肠埃希菌、肺炎克雷伯杆菌仅居第6、9位，对亚安培南均敏感。结论：ICU中的耐药菌情况相似于2001年全国13家大医院的感染率，应采取必要的措施以控制和预防耐药菌的发生。     

早产儿合并肺透明膜病的护理

总结了早产儿合并肺透明膜病的护理措施。主要措施是在严密消毒隔离下采取保暖、抗感染、替代疗法和加强呼吸道、皮肤、口腔、脐部等护理,能有效防止并发症的发生,提高早产儿并肺透明膜病的治愈率。     

rhGM-CSF基因真核表达载体的构建及其在COS-7细胞和小鼠体内的表达

将ｈＧＭＣＳＦ基因克隆至真核表达质粒ｐＣＤＳ中，构建成重组质粒ｐＣＧ１。用电穿孔法将质粒ｐＣＧ１导入ＣＯＳ７细胞和直接注射小鼠骨骼肌内，ＥＬＩＳＡ检测显示质粒ｐＣＧ１转染ＣＯＳ７细胞后４８、７２、９６ｈ和肌注质粒ｐＣＧ１后ｄ１０、ｄ１５、ｄ２０、ｄ２５小鼠体内均有ｈＧＭＣＳＦ的表达。生物学活性检测显示含肌注ｐＣＧ１的小鼠血液有维持ＴＦ１细胞生长的作用，表明重组质粒ｐＣＧ１表达分泌的ｈＧＭＣＳＦ具有生物学活性     

一种含多个CCP结构域的新型基因的克隆及生物学特性初探

目的克隆并分析新型基因CCP22，研究其结构及初探生物学特性。方法常规分子克隆、生物信息学分析、Western blot、RT—PCR。结果利用酵母双杂交技术从人乳腺文库中分离到一种含有22个补体调控蛋白（complement control protein，CCP）序列元件的新基因，命名为CCP22。生物信息学分析发现，该基因定位于人染色体9q31．2-32，共15个外显子，基因编码序列全长4494bp，编码1497个氨基酸。将CCP22基因全长编码序列克隆于真核载体中，该表达载体转染人胚肾细胞293T后获得的表达产物经Western blot证实CCP22属于分泌蛋白。将CCP22与绿色荧光蛋白（EGFP）标签融合后证实CCP22主要分布在细胞核外。Northern blot证实，内源性CCP22 mRNA转录本全长约6kb。RT-PCR检测表明，CCP22在正常乳腺细胞株中高表达，而在多种乳腺肿瘤细胞株中不表达或低表达。结论CCP22在乳腺肿瘤发生发展中可能发挥重要作用。