慢性乙型肝炎外周血树突状细胞的功能障碍机制的初步探讨

目的:探讨慢性乙型肝炎者树突状细胞(DCs)的功能状态及机制。方法:以直接荧光法进行表型分析、CCK8法测定DCs对同种异体淋巴细胞的刺激作用、AnnexinV/FITC法测定细胞凋亡率进行分析。结果:慢性乙型肝炎患者外周血单核细胞经诱导分化形成的DCs,与正常人相比,表达协同刺激分子CD80、CD86水平均较低;刺激同种异体淋巴细胞增殖能力也低于正常人;DCs凋亡率明显增高。结论:慢性乙型肝炎患者外周血的DCs免疫功能处于抑制状态,而HBV感染导致的DCs凋亡增多可能是引起DCs功能障碍的原因之一。     

医学免疫学多媒体教学调查报告

医学免疫学是一门医学必修课，不仅与临床结合紧密，而且与细胞生物学、分子生物学、分子遗传学以及生物化学等其他学科相互渗透，知识更新较快；此外其内容较为抽象，所介绍的分子、机制等无法给学生直观的感官印象；逻辑性较强，章节与章节之间相辅相成，前后内容联系紧密。同时免疫学一般在本科二年级开课，往往与生化同步，此时学生尚不具备相关知识，因而增加了学习难度。学生普遍反映免疫学难学。     

抑制LSD1酶活性对HBV模型小鼠的作用

目的研究组蛋白赖氨酸去甲基化酶1（LSDl）酶活性下降对乙型肝炎病毒（HBV）模型小鼠的作用。方法尾静脉高压注射重组HBVl．3质粒建立HBV小鼠模型;将雌性BALB／c小鼠随机分为正常组、模型组、LSDl小干扰RNA（siRNA）处理组和反苯环丙胺（TCP）治疗组。取各组小鼠外周血,通过酶联免疫吸附试验、全自动微粒子化学发光法和Real—TimePCR检测小鼠体内乙肝表面抗原（hepatitis B surface antigen,HBsAg）和HBVDNA的表达;免疫组织化学法检测HBsAg在肝脏中的分布;Western blotting检测小鼠脾淋巴细胞LSDl的表达。结果HBV模型小鼠造模成功;LSDlsiRNA处理组和TCP治疗组小鼠HBsAg、HBVDNA和LSDl的表达水平均较模型组明显下降（P〈0．01）,肝组织中HBsAg的分布也明显减少。结论抑制LSDl酶活性对HBV模型小鼠体内HBV的清除有一定的作用。     

SSeCKS对施万细胞TNF-α自分泌的作用

目的探讨Src抑制的蛋白激酶C底物(SSeCKS)对施万细胞TNF-α自分泌的作用。方法予TNF-α处理施万细胞及siRNA干扰SSeCKS表达后,ELISA法检测培养基上清中TNF-α的含量,蛋白免疫印迹检测SSeCKS、磷酸化p38、磷酸化JNK、总p38、总JNK的表达。结果 TNF-α可以诱导施万细胞自分泌及SSeCKS表达的增加;干扰SSeCKS表达可以抑制TNF-α的自分泌及p38与JNK通路的激活。结论在施万细胞中,SSeCKS可能通过影响p38及JNK激活对TNF-α的自分泌发挥正向调控作用。     

一种新型酸奶对小鼠肠道菌群影响的研究

目的 :探讨一种新型发酵剂酸奶对小鼠肠道菌群的影响。方法 :新型酸奶灌胃为实验组 ,市售某品牌酸奶灌胃为对照组 ,连续喂养 2 0天。末次喂养 2 4h后留取粪便进行肠道菌群分析。结果 :实验表明实验组受试后乳杆菌增多 (P<0 .0 1) ,且增幅明显高于对照组 (P<0 .0 5 )、肠杆菌减少 (P<0 .0 1)、肠球菌无明显变化。结论 :受试酸奶对小鼠肠道菌群有一定的调节作用。     

尾静脉高压注射CⅡTA siRNA对小鼠胶原诱导性关节炎的治疗作用

目的 将MHCⅡ类反式作用因子(CⅡTA) siRNA用于胶原诱导的小鼠关节炎模型中,观察是否具有治疗效果.方法 将雄性DBA/1小鼠随机分为胶原诱导性关节炎(CIA)模型组、CⅡTA siRNA组(siCⅡTA组)、control siRNA组(siCT组)、正常组.再次免疫后4周观察小鼠发病情况,检测小鼠足爪的肿胀度,病理切片观察炎症变化,MTT检测脾淋巴细胞对CⅡ胶原的增殖反应,实时荧光定量PCR检测小鼠脾细胞IFN-γ、IL-4 mRNA表达水平,ELISA检测小鼠血清中IFN-γ、IL-4、IL-17的含量.结果 siCⅡTA组关节炎评分、脾淋巴细胞对Ⅱ型胶原的增殖反应低于模型组和siCT组;siCⅡTA组IFN-γ、IL-17水平低于模型组和siCT组,但IL-4水平高于模型组和siCT组.结论 尾静脉高压注射CⅡTAsiRNA对CIA具有治疗作用.     

乙肝患者外周血Th17与Treg细胞的表达与临床意义

目的:探讨乙肝患者外周血Th17与Treg细胞的表达情况及与临床指标的相关性?方法:采集17例慢性乙肝患者(CHB组)?13例急性乙肝患者(AHB组)和14例健康者(对照组)外周血,流式细胞术分析Th17和Treg细胞的频率;酶联免疫吸附测定血清IL-17的水平,实时定量PCR法检测HBV DNA载量,速率法检测ALT水平?结果:AHB组?CHB组外周血Th17细胞频率和IL-17水平高于对照组(P < 0.05);CHB组外周血Treg细胞频率高于对照组(P < 0.01),而AHB组和对照组之间差异无统计学意义(P > 0.05);与对照组相比,AHB组外周血Th17/Treg比值显著增高而CHB组明显降低(P < 0.05);AHB组?CHB组外周血Th17细胞频率和Th17/Treg比值与ALT水平成正相关,Treg细胞频率与HBV DNA载量成正相关?结论:乙肝患者外周血存在Th17?Treg细胞表达异常和Th17/Treg相对失衡,并与ALT水平?HBV DNA载量具有一定的相关性,提示Th17和Treg细胞可能在乙型肝炎的发病机制中起着比较重要的作用?     

慢性乙型肝炎患者CD4+Th细胞中LSD1表达及其作用

目的： 探讨慢性乙型肝炎（乙肝）患者外周血CD4⁺Th细胞内赖氨酸特异性组蛋白去甲基化酶1（histone lysine specific demethylase 1，LSD1）表达水平与Th1/Th2平衡的关系，初步探讨LSD1介导的组蛋白修饰对慢性乙肝患者CD4⁺Th细胞分化的作用。方法： 选择2017年6月至12月在南通大学附属医院感染科住院的慢性乙肝患者65例，分为丙氨酸转氨酶（ALT）高水平组与低水平（≤4×ULN）组，HBV-DNA高载量（≥10⁶拷贝/mL）组与低载量（<10⁶拷贝/mL）组。以同期在该院体检的30例健康人为对照。采用密度梯度离心法分离外周血单个核细胞，免疫磁珠法分选CD4⁺Th细胞；提取CD4⁺Th细胞总蛋白，以Western印迹法检测LSD1表达水平。采用ELISA法检测血清中干扰素γ（IFN-γ）、白细胞介素4（IL-4）含量；用微粒子化学发光法检测血清乙型肝炎表面抗原（HBsAg）含量；用实时定量PCR法检测血清HBV-DNA载量。结果： 慢性乙肝组患者外周血CD4⁺Th细胞中LSD1表达水平高于健康人（0.52±0.21 vs 0.28±0.09，t=-7.49，P<0.001）。慢性乙肝患者中，CD4⁺Th细胞中LSD1表达量在ALT高水平组（n=38）低于低水平组（n=27，0.39±0.18 vs 0.64±0.16；t=-5.79，P<0.001），在HBV-DNA高载量组（n=32）高于HBV-DNA低载量组（n=33，0.69±0.08 vs 0.35±0.16；t=10.80，P<0.001）。与健康人相比，慢性乙肝组血清IFN-γ含量降低、IL-4含量增高、IFN-γ/IL-4比值减小（P<0.05）。慢性乙肝患者外周血CD4⁺Th细胞中LSD1表达量与其血清ALT水平（r=-0.590）、IFN-γ水平（r=-0.379）及IFN-γ/IL-4（-0.285）负相关（P<0.01），与HBV-DNA载量正相关（r=0.880，P<0.001），与血清IL-4水平无相关性（r=0.169，P=0.102）。结论： LSD1高表达可能是慢性乙肝患者体内Th1/Th2失衡、Th1反应水平下降的原因之一，并导致机体清除HBV能力减弱或抑制HBV复制能力减弱。     

壳聚糖、月见草、舒降之降血脂作用及机制研究

目的研究壳聚糖、月见草、舒降之的降血脂作用及机制。方法运用新西兰家兔制备高脂血症模型,各实验组分别同时饲喂壳聚糖、月见草、舒降之10周,然后分别测定给药前、后血脂水平的变化,并提取肝组织和肾皮质组织蛋白,用免疫印迹法观察受体相关蛋白的表达水平变化。结果壳聚糖、月见草与舒降之都可使血脂不同程度下降,高脂饮食加壳聚糖组实验动物肾、肝脏组织中受体相关蛋白表达水平较其他各组明显增高。结论壳聚糖、月见草、舒降之均具有一定的降血脂作用,调节受体相关蛋白RAP的表达可能是机制之一。