可与肝癌细胞系HepG2特异性结合的单链抗体的表达及其特性

目的:在原核细胞中表达经噬菌体抗体库筛选可与HepG2细胞特异性结合的单链抗体(scFv),并对其特性进行鉴定。方法:采用正常肝细胞系L02和肝癌细胞系HepG2,从人源噬菌体抗体库中筛选可与HepG2细胞特异结合的scFv。对scFv DNA测序后,以其阳性噬菌体感染大肠杆菌HB2151,在IPTG诱导下表达scFv并以金属离子螯和层析(IMAC)进行纯化,用100g/L SDS-PAGE、Western blot及ELISA分析纯化的scFv。将纯化的scFv与HepG2细胞共孵育后,观察其对细胞生长的影响。结果:经筛选获得的2个相对特异性的scFv,分别命名为SLH04及SLH10。经IPTG诱导获得可溶性scFv的表达。Western blot分析证明,表达产物的相对分子质量(Mr)均为36000左右,与理论预期值相符。ELISA检测表明,纯化的scFv能与HepG2细胞特异性结合,并抑制HepG2细胞的生长。结论:从人源噬菌体抗体库中,筛选出能与HepG2细胞特异性结合的scFv,并在大肠杆菌中表达,有望用于肝癌生物治疗的实验研究。     

新型mucA基因突变的铜绿假单胞菌生物被膜的形成和藻酸盐相关基因表达的研究

目的 确定黏液型铜绿假单胞菌PA17的mum基因突变位点，研究藻酸盐合成相关基因在其生物被膜形成过程中的表达，并观察PAl7生物被膜形成过程和形态。方法 PCR方法扩增铜绿假单胞菌PA17的mueA基因全长并测序；改良平板培养法建立PA17的生物被膜模型，半定量RT-PCR测定生物被膜形成24h、3d．6d时藻酸盐合成相关基因,algD、algU和algR的表达，并进行统计学分析；扫描电镜观察不同时间点的生物被膜形态。结果 PA17的mucA基因第166～333位核苷酸片段缺失，第342位A→G；其藻酸盐相关基因algD和algU均在生物被膜形成过程的第6天表达水平最高，algR在24h表达最高，单因素方差分析显示，上述基因在生物被膜形成过程不同时间点表达的差异有统计学意义；PA17于第6天形成成熟生物被膜，形态为薄膜状。结论 PA17是一株含新型mucA突变基因的黏液型铜绿假单胞菌，其藻酸盐相关基因在生物被膜形成的不同时间点的表达差异具有统计学意义，其生物被膜形态为薄膜状。     

卡托普利治疗糖尿病肾病25例

目的 :观察卡托普利治疗糖尿病肾病 (DN)的临床疗效。方法 :45例DN患者 ,分为治疗组 2 5例 ,对照组2 0例。对照组采用常规治疗 ,治疗组在常规治疗基础上加用卡托普利 2 5～ 10 0mg·d 1 ,po。在治疗前后各收集 2 4h尿液各项指标测定。结果 :治疗组与对照组治疗后平均动脉压下降 12 .8,5 .3mmHg ,2 4h尿蛋白平均下降 3 0 4,66mg ,空腹血糖平均下降 3 .7,3 .3mmol·L 1 ,差异无显著性 ,两组治疗前后的尿素氮和血肌酐值差异也无显著性。结论 :卡托普利治疗糖尿病肾病有一定疗效。     

干扰素结合布地奈德治疗小儿哮喘的临床价值研究

目的探讨干扰素结合布地奈德治疗小儿哮喘的临床价值。方法选择2013年5月至2014年6月该院治疗的哮喘患儿80例为研究对象,随机分为观察组与对照组,各40例。两组患儿均给予临床综合治疗,观察组患儿在综合治疗的基础上,给予干扰素结合布地奈德治疗,对比分析两组患儿的临床疗效。结果观察组患儿显效25例(62.5%),有效14例(35.0%),无效1例(2.5%),总有效率为97.5%;对照组患儿显效14例(35.0%),有效10例(25.0%),无效16例(40.0%),总有效率为60.0%,两组总有效率比较,差异有统计学意义(P<0.05)。气血分析结果方面,观察组患儿氧气分压(Pa O2)为(67.1±9.0)mm Hg(1 mm Hg=0.133 k Pa),二氧化碳分压(Pa CO2)为(64.4±8.7)mm Hg;对照组患儿的Pa O2为(79.2±9.2)mm Hg,Pa CO2为(54.5±7.4)mm Hg,差异有统计学意义(P<0.05)。在肺功能方面,对照组患儿的呼气流速峰值(PEF)为(64.3±4.2)L/min,第1秒用力呼吸容积(FEV1)为(69.2±6.6)L;观察组患儿的PEF为(74.4±4.5)L/min,FEV1为(76.2±7.2)L,两组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论对哮喘患儿给予干扰素结合布地奈德治疗,可有效缓解患儿的哮喘症状、消除哮喘带来的负面影响、对患儿造成的不良反应少、临床疗效显著,日后可深入研究该种治疗方法,健全治疗体系,彻底治愈哮喘患儿。     

急性肝功能衰竭大鼠内毒素血症对肝脏和肾脏糖异生功能的影响

目的探讨大鼠急性肝功能衰竭时内毒素血症对肝脏及肾脏糖异生功能及血糖水平的影响。方法24只雄性健康成年SD大鼠,随机分成4组,每组6只,Ⅰ组：腹腔注射等渗盐水,Ⅱ组：腹腔注射400 mg/kg D-氨基半乳糖（D-GaLN）;Ⅲ组：腹腔注射400 mg/kg D- GaLN＋50μg/kg LPS,Ⅳ组：腹腔注射400 mg/kg D-GaLN＋500μg/kg LPS。LPS注射后6 h,取血清检测内毒素、肾功能,取大鼠肝组织及肾组织,采用荧光定量PCR方法检测磷酸烯醇丙酮酸磷酸羧激酶（PEPCK）基因表达。结果Ⅰ组、Ⅱ组大鼠未见明显的内毒素血症,Ⅲ组、Ⅳ组大鼠体内内毒素水平明显升高,Ⅳ组高于Ⅲ组（8.05±0.43对比3.50±2.25,P〈0.05）。Ⅰ组、Ⅱ组、Ⅲ组大鼠于LPS注射前后未出现低血糖,Ⅳ组大鼠于LPS注射后6h出现明显的低血糖。各组大鼠肾功能均在正常水平,仅有Ⅳ组大鼠出现血清尿素氮水平轻度增高。大鼠肝脏PEPCK的表达在Ⅰ组、Ⅱ组、Ⅲ组、Ⅳ组逐渐减少,差异有统计学意义（2.54±1.32、1.87±0.15、0.91±0.13、0.44±0.42,P〈0.05）;大鼠肾脏PEPCK的表达,同Ⅰ组比较,Ⅱ组无明显变化（0.75±0.03对比0.77±0.04,P〉0.05）,Ⅲ组明显增强（0.75±0.03对比1.63±0.86,P〈0.05）,Ⅳ组大鼠肾脏PEPCK表达显著减弱（0.75±0.03对比0.13±0.07,P〈0.05）。结论急性肝功能衰竭大鼠中严重的内毒素血症通过抑制PEPCK的转录损伤肝脏和肾脏糖异生的功能,导致低血糖的发生。     

肺原发性恶性黑色素瘤18F-FDG PET/CT显像一例

患者男,46岁。咳嗽伴痰中带血10天就诊。体检:全身皮肤、黏膜无皮疹及出血点,左下肺呼吸音稍低,两肺未闻及干湿性啰音。实验室检查提示十二项肿瘤指标均正常。胸部CT平扫及增强扫描:左肺下叶后基底段见一团块状高密度影,纵隔窗无减影,略呈浅分叶状,大小约3 cm×4cm,密度均匀,增强扫描后病灶均匀强化。诊断:炎性病变,     

经改良Stoppa入路治疗骨盆髋臼骨折的临床体会

目的探讨采用改良Stoppa入路治疗骨盆、髋臼骨折的手术方法和初步体会。方法采用改良Stoppa入路治疗16例骨盆、髋臼骨折。术前均摄骨盆正、斜位X线片和三维CT检查,体外模拟骨折复位与固定。术中采用仰卧位或漂浮体位,通过改良Stoppa入路或联合髂窝入路与K-L入路,直视下复位骨折,透视证实复位满意后采用重建钢板内固定。结果切口长度6.5-12 cm,手术时间40-160 min,术中失血50-1 000 ml。术后X线片显示骨盆、髋臼骨折复位满意。16例获随访6～12个月。疗效根据Matta功能标准评定:优9例,良6例。无坐骨神经损伤、深静脉血栓和骨折再移位发生。结论改良Stoppa入路联合髂窝或K-L入路治疗骨盆、髋臼骨折暴露充分、操作简单、效果可靠,尤其适用于双侧耻骨骨折和四边形面内移的髋臼骨折。     

人工心脏瓣膜置换术后关节置换的围手术期抗凝治疗策略

背景:目前,对于人工心脏瓣膜置换术后关节置换患者围手术期的抗凝治疗尚无统一认识。目的:探讨人工心脏瓣膜置换术后关节置换患者围手术期使用低分子肝素(LMWH)替代华法林抗凝治疗的安全性和有效性。方法:回顾性分析2007年4月至2011年6月行人工心脏瓣膜置换术后关节置换患者19例。术前3天采用LMWH替代治疗。术后出现出血倾向时停用LMWH并输入血浆,补充凝血因子,同时给予夹闭引流,患肢加压包扎等对症治疗。术后鼓励下肢肌肉等长收缩训练,拔出引流后离床活动,并辅以下肢静脉泵和下肢弹力袜治疗。术后7 d开始加用术前用量的华法林,术后10 d左右停用LMWH。记录术中出血量和术后引流量,计算平均国际标准化比值(INR),评价术后出血和血栓情况。结果:19例患者的术中出血量为230～520 ml,平均(347±81)ml;术后引流量为480～820 ml,平均(607±103)ml。19例患者术后INR平均值为2.16±0.43。术后无一例出现重度出血,11例出现轻度出血,给予相应治疗后好转。无一例出现血栓征象。结论:人工心脏瓣膜置换术后关节置换患者围手术期使用LMWH替代华法林抗凝治疗可有效预防血栓形成。出现出血症状后及时停药、输入血浆、补充凝血因子以及对症治疗,同时给予术侧肢体加压包扎、夹闭引流可及时有效控制出血。术后鼓励早期功能锻炼、应用下肢静脉泵和抗血栓袜可协助预防血栓行成,有助于患者快速康复。     

18F-FDG PET/CT 代谢参数在鼻型结外NK/T淋巴瘤诊断中价值

目的探讨鼻型结外NK/T淋巴瘤18 F-FDG PET/CT显像代谢参数的相关因素。方法选取47例病理学证实的鼻型结外NK/T淋巴瘤患者,治疗前行^18F-FDG PET/CT检查,根据Ann-Arbor分期系统为参考,早期(Ⅰ~Ⅱ期)32例,进展期(Ⅲ~Ⅳ)期15例,测量两组患者鼻腔病灶最大平均标准值(SUVmax)、平均标准摄取值(SUVmean、)峰值标准摄取值(SUVpeak)、肿瘤代谢体积(MTV)、病灶糖酵解总量(TLG)代谢参数,采用统计学软件SPSS 20.0分析组间关系。结果早期与进展期病灶SUVmax(χ^2=0.027)、SUVmean(χ^2=0.140)、SUVpeak(χ^2=2.108)、MTV(χ^2=1.099)上无统计学差异。而TLG(χ^2=5.240,P=0.022)是独立影响因素,进一步回归分析,与分期呈正相关性,回归系数1.482。结论鼻型结外NK/T淋巴瘤呈18 F-FDG高摄取,代谢参数TLG对淋巴瘤分期有预测价值。     

注射用盐酸头孢替安与胶塞相容性研究

目的 通过胶塞相容性研究,分析影响注射用盐酸头孢替安溶液澄清度的因素,以便采取针对性措施提高药品质量。方法 通过测定样品的浊度值及胶塞迁移出的指征性成分——抗氧剂2,6-二叔丁基对甲酚（BHT）的量,探讨胶塞成分迁移与药物澄清度的关系;通过胶塞相容性加速试验,讨论影响胶塞成分迁移的因素。结果 浊度值与BHT 迁移量、贮存时间显著正相关（P<0.01）;头孢替安规格越小,胶塞对其澄清度影响越大（P<0.01）。影响胶塞成分迁移的因素为胶塞的质量、储存温度及放置状态。结论 应通过提高胶塞质量或包装设计、降低贮藏温度、保持正置等措施以降低胶塞成分迁移,解决小规格产品澄清度不合格的问题。