鼻咽癌细胞株CNE-1和CNE-2细胞蛋白质的拉曼光谱初步分析

目的以放射敏感性不同的鼻咽癌细胞株CNE-1和CNE-2为研究对象,分析经不同剂量X射线照射后鼻咽癌细胞株CNE-1和CNE-2蛋白质的拉曼光谱。比较不同剂量X射线对两种鼻咽癌细胞株蛋白质的影响。方法应用细胞集落实验分析CNE-1和CNE-2细胞的放射敏感性;激光共聚焦显微拉曼光谱仪检测分析射线照射后CNE-1和CNE-2细胞蛋白质的变化。结果 CNE-1细胞的放射抗性(存活分数SF2)是CNE-2细胞的1.43倍。拉曼光谱技术分析结果表明,两种细胞株蛋白质的拉曼光谱谱峰基本一致,在归属为L-苯丙氨酸的952cm-1位置,经照射CNE-1和CNE-2细胞株谱峰强度不同;两种细胞株的L-苯丙氨酸在照射后72h的拉曼谱峰强度显著增强,提示此时L-苯丙氨酸的含量有所增加。结论CNE-1和CNE-2细胞放射敏感性存在着差异;探寻放射敏感性的特征拉曼标志,将可作为研究肿瘤放射敏感性预测的手段之一。     

Wnt10b、β-catenin与鼻咽癌放射敏感性的关系

目的 探讨Wnt/β-catenin信号通路与鼻咽癌细胞放射敏感性的关系.方法 收集对数生长期以及经直线加速器6MV X射线0、2、4、6 Gy照后48 h的鼻咽癌CNE2细胞和放射抗拒的CNE-2 (R743)细胞,RT-PCR方法检测Wnt10b基因、β-catenin基因mRNA的表达,Western blot检测Wnt10b、β-catenin蛋白的表达.结果 放射抗拒株CNE-2(R743)细胞的Wnt10b和β-catenin基因mRNA及蛋白的表达均高于放射敏感的CNE 2细胞(P＜0.05).经照射后CNE 2细胞和CNE-2 (R743)细胞的Wnt10b和β-catenin的mRNA及蛋白表达量随着照射剂量的增加而增加;在相同照射剂量下放射抗拒株CNE-2 (R743)细胞Wnt10b和β-catenin的表达量均高于CNE 2细胞(P＜0.05).结论 Wnt/β-catenin信号通路可能与鼻咽癌细胞放射敏感性有关.     

shRNA沉默Annxin A2基因对放射抗拒鼻咽癌细胞迁移和侵袭的影响

目的 探讨shRNA沉默Annxin A2基因对放射抗拒鼻咽癌细胞迁移和侵袭的影响。方法 采用FuGENE HD将Annexin A2 shRNA转染放射抗拒的鼻咽癌CNE2（R743）细胞,qRT-PCR验证转染细胞中Annxin A2基因的表达,细胞划痕实验和Transwell实验观察下调Annxin A2基因表达及联合照射对鼻咽癌细胞迁移和侵袭的影响,Western blot检测细胞中基质金属蛋白酶2（MMP2）蛋白的表达。结果 转染组细胞Annexin A2 基因的mRNA相对表达量为（0.25±0.17）,较对照组的（1±0.00）和转染对照组的（0.96±0.06）明显下降,差异有统计学意义（P<0.05）。细胞划痕实验显示,下调Annxin A2基因表达可抑制照射诱导的CNE2（R743）细胞的迁移能力（P<0.05）。Transwell实验结果显示,下调Annxin A2基因表达可抑制照射诱导的CNE2（R743）细胞的迁移和侵袭能力（P<0.05）。Western blot结果表明,下调Annxin A2基因表达能抑制照射诱导的MMP2蛋白的表达上调（P<0.05）。结论 下调Annxin A2基因表达能抑制照射诱导放射抗拒的鼻咽癌CNE2（R743）细胞的迁移和侵袭能力,可能与MMP2蛋白表达下调相关。     

麦冬提取液对人肺癌细胞株SPC-A1细胞放射效应的影响

目的观察麦冬提取液对人肺癌细胞株SPC-A1细胞放射效应的影响。方法实验分6组,空白对照组、单纯照射组、单纯药物组、照射前给药组、照射中给药组和照射后给药组。应用集落形成实验测定各组细胞的存活率,计算麦冬提取液的放射增敏比;流式细胞法分析比较各组细胞周期的变化。结果在2Gy照射剂量下,麦冬提取液与照射联合应用组的存活率低于单纯照射组,并以照射后加药组相对更为明显(P0.05);在放射前、中、后联用麦冬提取液的各组中,放射增敏比分别为1.11、1.46、1.29。流式细胞法分析显示,麦冬提取液与照射联合应用组G2/M期比例上升,与空白对照组、单纯照射组、单纯药物组比较均具有统计学意义(P0.05)。结论麦冬提取液对经照射的人肺癌细胞株SPC-A1细胞具有一定的增效作用,其机制可能与改变细胞周期有关。     

变性高效液相色谱法筛选XRCC4基因突变

目的应用变性高效液相色谱技术（DHPLC）-异源双链分析对鼻咽癌患者XRCC4基因突变进行筛查与鉴定,研究鼻咽癌患者XRCC4的基因突变情况,探讨DHPLC在筛查相关基因突变、预测放疗敏感性方面的应用。方法采用聚合酶链反应（PCR）和DHPLC筛查88例鼻咽癌患者XRCC4基因的突变。结果对DHPLC图形异常的PCR扩增片断进行DNA测序鉴定突变位点及性质,检测出28例XRCC4基因8号外显子第377位C变成T,导致126号密码子的ser→phe,导致氨基酸残基的替代变化（丝氨酸→苯丙氨酸）。结论用PCR—DHPLC筛查结合测序分析检测XRCC4突变是一种高效、经济、简便、可靠的方法。     

鼻咽癌患者放疗前后血清游离DNA测定的意义

正常人体血清中存在微量的游离ＤＮＡ ,在慢性自身免疫性缺陷病和癌症病人血清中循环的ＤＮＡ含量增加 ,但是对每种肿瘤与ＤＮＡ之间的确切关系 ,还缺乏具体的大范围的研究。已有报道ＤＮＡ含量与有效的治疗呈负相关［１ ,２］。本文探讨鼻咽癌患者在放射治疗前后血清游离ＤＮＡ含量的变化以及疗效评估、预后预测之间的关系。材料与方法经病理证实的鼻咽癌患者共３０６例 ,其中男性２２５例 ,女性８１例 ,年龄１５岁～８０岁 ,中位年龄４７岁。分期 :按ＴＮＭ分期 ,Ⅰ期１例 ,Ⅱ期６５例 ,Ⅲ期１２８例 ,Ⅳ期１１２例。健康体检者７７例作对…     

氧化砷诱导人小细胞肺癌细胞凋亡的研究

目的 研究砷剂（As2O3)对人小细胞肺癌细胞凋亡诱导作用以及干扰素（IFNα－2b)对As2O3作用的影响。方法 采用DNA电泳、TUNEL原位末端标记和免疫细胞化学染色检测不同浓度As2O3作用不同时间对人小细胞肺癌细胞凋亡诱导作用及相关主相关基因蛋白的表达。结果 在一定的浓度范围内,As2O3可诱导人小细胞肺癌细胞凋亡,并且随浓度的升高和作用时间的延长,凋亡细胞数增加,相关基因蛋白Bcl-2、PCNA表达降低。联合使用IFNα-2b可增强凋亡诱导作用。结论 As2O3可诱导人小细胞肺癌细胞凋亡,且与药物浓度和作用时间有关。IFNα-2b可增强此作用。     

完全腹膜外腹股沟疝修补术中扩张腹膜前间隙方法的改进

正腹腔镜完全腹膜外腹股沟疝修补术(total extraperitoneal hemiorrhaphy,TEP)不进入腹腔,并发症少,是欧洲《成人腹股沟疝诊疗指南》推荐的首选术式~[1]。通常分离中线及两侧约1 cm范围的腹直肌前鞘,在中线两侧分别横行切开0.6 cm,由对侧腹直肌前鞘切口放入气腹针建立气腹,但因完全在腹膜外操作,操作空间狭小,手术难度大。我们在Mc Kernan等~[2]报道的TEP手术方法基础上进行部