稳定过表达生长分化因子５基因大鼠脂肪干细胞系的建立

目的:探讨慢病毒介导的稳定过表达生长分化因子5(GDF-5)基因大鼠脂肪干细胞(ASCs)的构建条件和方法。方法:取大鼠腹股沟脂肪垫组织,采用Ⅰ型胶原酶消化贴壁法分离培养大鼠ASCs。倒置相差显微镜观察细胞形态,CCK-8法测定细胞生长曲线,流式细胞仪鉴定细胞表型。制备带GDF-5/GFP融合基因的慢病毒载体系统,探索不同感染复数(MOI=1、5、10、20、40、60、80、100)的转染效率,选择最佳MOI,采用流式细胞仪检测转染效率。对转染细胞行流式细胞筛选,测定筛选后转染细胞的阳性率。筛选出的细胞行细胞爬片,DAPI染色,形态学上进一步验证细胞阳性率;并采用CCK-8法检测转染后细胞活力。结果:成功培养大鼠ASCs,流式细胞免疫表型鉴定:间充质干细胞表面抗原(CD90、CD29、CD44、CD105)表达阳性,造血细胞表面抗原(CD45、CD34)和骨髓干细胞表面抗原(CD106)表达阴性。成功构建GDF-5过表达慢病毒载体系统,慢病毒转染大鼠ASCs最佳MOI为40,转染率为65%。采用GFP荧光流式细胞筛选技术筛选后阳性率可提高至96%。CCK-8法显示,转染后细胞活力、生长曲线与未转染细胞无明显差异。结论:胶原酶消化法可成功培养大鼠ASCs,流式细胞筛选技术可显著提高转染细胞阳性率,且对细胞系活力无显著影响。     

老年退行性肩袖撕裂的研究进展

肩袖撕裂是一种多发病，发病率与年龄有一定的相关性。不少学者通过核磁共振（MRI）、超声等影像学及尸体解剖发现，肩袖撕裂的发生率在老年人群中较高，且随年龄增长而增大。由于老年退行性肩袖撕裂临床症状不典型甚至无症状，加上部分临床医师对其认识不足，极易漏诊或误诊为肩关节的其他疾病，而影响其早期康复，甚至遗留严重后遗症。笔者查阅近年国内外相关文献对老年退形性肩袖撕裂进行总结，以便临床对该病有较全面的了解。     

手术治疗颈椎后纵韧带骨化症同时合并胸椎腰椎黄韧带骨化症1例报告

患者女性,60岁。因"双下肢紧绷感、足底至大腿进行性麻木伴行走无力2年加重2个月"于2008年3月28日首次收入我院。患者2年前无明显诱因出现双下肢紧绷     

正位透视下椎弓根穿刺椎体后凸成形术治疗胸腰段骨质疏松性骨折的疗效分析

目的:评价行经皮椎体后凸成形术治疗胸腰椎骨质疏松性压缩性骨折术过程中,在正位透视下进行椎弓根穿刺的疗效及安全性。方法:选择2018年8月至2020年8月诊治的55例胸腰椎骨质疏松性压缩骨折患者,分别采用常规正侧位透视下椎弓根穿刺(传统组,n=29),以及术前根据三维CT结果规划穿刺方案,术中在正位透视下完成椎弓根穿刺(正位组,n=26)。比较两组患者年龄、术前病椎高度、注入骨水泥量、骨水泥渗漏率、手术时间、透视次数、手术前后视觉模拟评分(VAS)评分及疗效。结果:两组患者年龄、术前病椎高度差异无统计学意义。正位组患者平均骨水泥注入量[(5.08±0.70)mL vs(5.77±0.79) mL]、手术时间[(32.69±5.03)min vs(44.93±6.16) min]、中位透视次数(25次vs 32次)均少于传统组患者(P0.01)。两组患者骨水泥渗漏率、术前后VAS评分差异均无统计学意义。结论:采用C臂机单一正位透视下双侧椎弓根穿刺经皮椎体后凸成形术治疗胸腰椎骨质疏松性压缩性骨折与常规透视下手术缓解疼痛的疗效和安全性相当,但所用时间更短、透视更少。     

带头灯的手术显微镜辅助与开放式髓核摘除术治疗腰椎间盘突出症的疗效比较

 开放式髓核摘除术治疗腰椎间盘突出症, 由于过多切除腰椎后部结构, 常导致术后腰椎不稳并使腰痛加重。随着微创外科技术的发展, 各种内镜技术应运而生, 但其学习曲线长, 对术者手术技巧要求高。我科近年来开展了带头灯的手术显微镜辅助显微外科髓核摘除术治疗腰椎间盘突出症。本研究通过对带头灯的手术显微镜辅助显微外科髓核摘除术与开放式髓核摘除术治疗腰椎间盘突出症的疗效比较, 探讨带头灯的手术显微镜辅助下髓核摘除术治疗腰椎间盘突出症的优势。     

脂肪来源间充质干细胞向雪旺细胞分化的研究

我们利用SD大鼠脂肪组织提取脂肪来源间充质干细胞(ADSCs),并利用一系列化学诱导剂诱导其分化为雪旺细胞,结果报道如下. 一、材料与方法 1.脂肪来源间充质干细胞的获得与培养:采用Zuk等[1]的方法并进行改良以获取和培养脂肪来源间充质干细胞.4～8周的SD大鼠麻醉后取双侧腹股沟脂肪垫剪成1 mm×1mm×1 mm大小,用0.1%Ⅰ型胶原酶37 ℃消化1h后用等体积磷酸盐缓冲液(PBS)稀释终止消化.消化液用200目的筛网进行过滤,1500 r/min离心7 min,用含10%胎牛血清(FBS)的DMEM重悬并接种于25 ml培养瓶中.24 h换液以去除未贴壁的细胞.每3 d换1次液.     

腰椎间盘髓核组织工程研究进展

腰椎间盘退行性病变(symptomatic lumbar interver-tebral disc degeneration)是造成腰腿痛的一个重要原因。研究显示,退变最初发生于椎间盘,以髓核退变为主[1、2]。临床上根据病变轻重进行保守治疗和外科干预[3~5],目的是缓解疼痛,稳定脊柱生物力学平衡。近十年来,髓核组织工程研究取得了较大进展,理论上可以修复原有退变组织,为     

不同手术方法治疗多节段腰椎间盘退变疾病的中长期疗效评价

目的 探讨不同手术方法治疗多节段腰椎间盘退变疾病的临床效果.方法对自2004年6月～2008年1月收治的302例多节段腰椎间盘退变性疾病,均一期行腰椎后路手术,分别给予单纯开窗髓核摘除、后路椎间融合术(PLIF)、经椎间孔腰椎间融合术(TLIF)、棘突间动态固定系统(Coflex)、腰椎后路动态钉棒固定系统(Semi-...     

曲马多与氟哌利多混合硬膜外腔注射后的镇痛效果

曲马多(Tramal)是一种非麻醉性中枢镇痛药，已广泛应用于临床术后镇痛。我们将曲马多与氟利多混合注入硬膜外腔术后镇痛．发现镇痛效果好，且无副作用发生．报告如下。     

老年骨质疏松性椎体骨折的治疗

一、概述 骨质疏松症是以骨矿密度减低和骨微结构破坏，致使骨骼强度降低和骨折危险性增加为特征的一种全身性骨骼疾病。该病非常隐匿，有些患者直到由于一些轻微外伤导致了骨质疏松性骨折时才得知自己患上此病。骨质疏松性椎体骨折包括压缩性骨折和爆裂性骨折，压缩性骨折最为多见。