移植胶质细胞源性神经营养因子基因修饰骨髓基质干细胞对脑出血大鼠的神经保护作用

背景：研究显示,细胞移植对脑出血脑损伤有保护作用,有学者在脑梗死后移植骨髓基质干细胞能促进大鼠神经功能恢复。 目的：观察移植胶质细胞源性神经营养因子基因修饰的骨髓基质干细胞是否比单纯骨髓基质干细胞移植对脑出血有更好的保护作用。 方法：采用自体血制作大鼠脑出血模型,36只SD成年大鼠随机抽签法分为3组,每组按不同时间点分为２个亚组,每个时间点6只。胶质细胞源性神经营养因子/骨髓基质干细胞组、骨髓基质干细胞组分别在脑出血壳核注射胶质细胞源性神经营养因子基因修饰的骨髓基质干细胞、骨髓基质干细胞20 μL/只;对照组注射生理盐水20 μL。分别在1,2周处死大鼠,免疫组织化学染色观察突触素和神经生长相关蛋白在脑出血周边区的表达。 结果与结论：各时间点胶质细胞源性神经营养因子/骨髓基质干细胞组的突触素和神经生长相关蛋白43免疫阳性产物比骨髓基质干细胞组和对照组显著增加(P < 0.05)。提示胶质细胞源性神经营养因子基因修饰的骨髓基质干细胞比单一骨髓基质干细胞对大鼠脑出血有更好的保护作用。     

胶质细胞源性神经营养因子基因修饰神经干细胞移植短暂性脑缺血再灌注损伤大鼠半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3的表达

背景：以往对脑缺血再灌注后半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(cysteinyl aspartate specific protease 3,Caspase-3)的表达均缺乏长时间的动态观察。 目的：探讨胶质细胞源性神经营养因子基因修饰的神经干细胞移植对暂时性脑缺血大鼠脑组织Caspase-3表达的影响。 设计：随机对照动物实验。 材料：清洁级成年SD大鼠60只,随机分为4组：正常对照组5只、缺血再灌注组5只、单纯细胞移植组25只、基因修饰细胞移植组25只。另取清洁级新生SD大鼠数只,用于分离培养神经干细胞。 方法：除正常对照组外,其余3组大鼠按改良性线栓法制备暂时性脑缺血模型。再灌注3 d,单纯细胞移植组从右侧侧脑室每只注入20 μL神经干细胞悬液,含(4.0~5.0)×105个神经干细胞;基因修饰细胞移植组每只注入等量胶质细胞源性神经营养因子基因修饰的神经干细胞悬液;缺血再灌注组每只注入20 μL生理盐水。正常对照组、缺血再灌注组在缺血再灌注1周麻醉处死动物,单纯细胞移植组、基因修饰细胞移植组分别在缺血再灌注1,2,3,5,7周麻醉处死动物,5只/时间点。 主要观察指标：采用免疫组织化学SP法观察Caspase-3在海马和额顶皮质表达及分布特点。 结果：免疫组织化学染色显示,Caspase-3免疫阳性产物位于细胞核、细胞质和部分突起。在海马：单纯细胞移植组、基因修饰细胞移植组Caspase-3阳性细胞数均随再灌注时间的延长而逐渐减少;除缺血再灌注第1周外,其余各时间点基因修饰细胞移植组Caspase-3阳性细胞数均明显少于单纯细胞移植组(P < 0.05)。在额顶皮质：单纯细胞移植组、基因修饰细胞移植组Caspase-3阳性细胞数亦均随再灌注时间的延长而逐渐减少;除缺血再灌注第1,2周外,其余各时间点基因修饰细胞移植组Caspase-3阳性细胞数均明显少于单纯细胞移植组(P < 0.05)。 结论：胶质细胞源性神经营养因子基因修饰的神经干细胞移植通过降低Caspase-3的表达,减少神经元凋亡,从而抑制缺血性脑损伤的进行性恶化,其移植效果优于单纯神经干细胞移植。     

移植物化学修饰减轻小鼠半相合骨髓移植后的急性移植物抗宿主病

背景: 甲氧基聚乙二醇是一种无免疫原性的兼性聚合分子，可以共价结合方式修饰各种蛋白质，减少其免疫原性。因此，在进行半相合造血干细胞移植时，若能用甲氧基聚乙二醇对移植物的T细胞进行化学修饰，阻断其激活的途径，就可能减轻移植物抗宿主病反应，提高移植成功率。 目的：构建小鼠半相合骨髓移植模型，观察甲氧基聚乙二醇修饰移植物对小鼠H2半相合骨髓移植后移植物抗宿主病的影响。 设计、时间及地点：随机化配对设计实验，于2003-03/11在解放军总医院医学动物实验中心和小儿内科实验室完成。 材料：纳入20只8~10周龄雄性近交系BALB/cH-2d小鼠作为供鼠，60只8~10周龄杂交获得的雌性CB6 F1 代H-2d/b小鼠作为受鼠。甲氧基聚乙二醇为美国Sigma公司产品。 方法：常规制备供鼠骨髓及脾细胞混合悬液。受鼠行总剂量8.0 Gy 60Co γ射线全身均匀照射，照射后随机分为3组，每组20只。照射对照组每只受鼠经尾静脉输入RPMI-1640培养基0.5 mL，单纯移植组照射后12 h内经尾静脉输入未处理的半相合供鼠骨髓及脾细胞混合悬液0.5 mL，修饰移植组照射后12 h内经尾静脉输入甲氧基聚乙二醇修饰的半相合供鼠骨髓及脾细胞混合悬液0.5 mL。 主要观察指标：移植后观察动物存活率、急性移植物抗宿主病理表现及存活小鼠的染色体核型。 结果：照射对照组小鼠均在2周内死亡；修饰移植组小鼠30 d存活率显著高于单纯移植组（75%，40%，χ2=5.01，P=0.025）。取死亡小鼠的爪垫皮肤、肝及小肠肠管作病理组织学检查，修饰移植组急性移植物抗宿主病病理表现减轻，Thomas 病理分级轻于单纯移植组。移植后75 d应用染色体C带显色法检测存活受鼠的嵌合体，证实为完全供者型植入。 结论：甲氧基聚乙二醇修饰移植物可明显减轻急性移植物抗宿主病，提高半相合骨髓移植存活率。     

骨髓基质细胞源神经干细胞对大鼠局灶性脑缺血神经细胞凋亡及相关蛋白表达的动态影响

目的探讨骨髓基质细胞源神经干细胞对大鼠局灶性脑缺血神经细胞凋亡及相关蛋白表达的影响。方法建立大鼠大脑中动脉缺血再灌注模型。32只健康Sprague-Dawley(SD)大鼠分为假手术组、缺血对照组、缺血骨髓基质细胞移植组和缺血骨髓基质细胞源神经干细胞移植组。分别在移植后7d和14d行脑灌注固定取材,应用免疫组化染色及原位细胞凋亡检测脑组织Bcl-2、Bax蛋白表达及凋亡细胞数。结果缺血移植组各时点的凋亡细胞数均少于缺血对照组(P<0.01),缺血移植14d组凋亡细胞数明显少于缺血移植7d组(P<0.01),骨髓基质细胞源神经干细胞移植组凋亡细胞明显少于骨髓基质细胞移植组(P<0.05)。缺血移植组Bcl-2表达显著高于缺血对照组(P<0.01)。缺血移植组Bax蛋白表达明显低于缺血对照组(P<0.01)。结论骨髓基质细胞源神经干细胞可能通过上调Bcl-2蛋白表达,下调Bax蛋白表达,对脑缺血再灌注损伤起保护作用。     

脑源性神经营养因子基因修饰骨髓间质干细胞移植对痴呆大鼠记忆功能的影响

背景：一些研究已显示，重组脑源性神经营养因子基因修饰的骨髓间质干细胞具有向神经样细胞分化的潜能，且能提高脑缺血模型鼠的神经缺失功能。 目的：拟进一步观察脑源性神经营养因子基因修饰的骨髓间质干细胞移植对阿尔茨海默病鼠学习记忆能力的改善。 设计、时间及地点：随机对照动物观察，于2006-01/2007-06在中山大学一附院神经病学实验室完成。 材料：清洁级8周龄雄性SD大鼠48只，随机分为正常对照组、损伤模型组、基因修饰细胞组、未修饰细胞组，12只/组。另取出生3 d的清洁级SD大鼠10只，用于骨髓间质干细胞的分离培养。 方法：取传至第6代的骨髓间质干细胞，双酶切后亚克隆至pcDNA3质粒，行增强型绿色荧光蛋白基因转染，采用电穿孔法得到重组腺病毒Ad-BDNF，转染293细胞进行病毒包装。除正常对照组外，其余3组大鼠均建立阿尔茨海默病模型。造模后12 d，基因修饰细胞组取重组腺病毒脑源性神经营养因子基因修饰的不含血清骨髓间质干细胞悬液，于伤侧侧脑室坐标前囟后1.6 mm、外侧1.5 mm、腹侧4.0 mm注入8 μL；未修饰细胞组移植等量的单纯骨髓间质干细胞悬液。 主要观察指标：Western blotting法鉴定重组病毒在骨髓间质干细胞中表达，流式细胞仪检测基因感染效率。细胞移植后2周采用Morris水迷宫检测大鼠学习记忆能力。 结果：Ad-BDNF感染的骨髓间质干细胞存在Mr14 000的脑源性神经营养因子蛋白条带，2 d后约34%骨髓间质干细胞被感染。基因修饰细胞组、未修饰细胞组大鼠平均逃避潜伏期均明显低于损伤模型组（P < 0.01），且前者基本达到正常水平。与损伤模型组寻找平台的运动策略比较，基因修饰细胞组与未修饰细胞组趋向式、直线式显著增多（P < 0.01），边缘式、随机式明显减少（P < 0.01），且前者基本达到正常水平。 结论：移植的骨髓间质干细胞经脑源性神经营养因子基因修饰后，可明显改善阿尔茨海默病模型鼠的记忆能力。     

肝细胞生长因子基因转染骨髓间充质干细胞异体移植修复烧伤创面

背景：经携带人肝细胞生长因子的重组腺病毒（adenoviral vector mediated human hepatocyte growth factor，Ad-HGF）修饰的骨髓间充质干细胞创面移植后，可分化为“修复细胞”，并能够在创面持续释放肝细胞生长因子。 目的：观察Ad-HGF基因转染的骨髓间充质干细胞异体移植对大鼠烧伤创面愈合的影响。 设计、时间及地点：随机对照动物观察，于2006-02/2007-03在解放军兰州军区兰州总医院临床实验科和烧伤整形科实验室完成。 材料：Wistar大鼠40只，由解放军兰州军区兰州总医院动物实验科提供。Ad-HGF与携带绿色荧光蛋白的重组腺病毒（adenoviral vector mediated human hepatocyte growth factor，Ad-GFP）颗粒均由哈小琴博士惠赠。 方法：取雄鼠10只，Percoll密度梯度离心法体外分离培养骨髓间充质干细胞，并行Ad-HGF转染。取雌鼠30只，随机分为未转染细胞组、Ad-HGF转染细胞组、Ad-GFP转染细胞组、Ad-HGF对照组、假伤组，6只/组。前4组大鼠复制背部深Ⅱ度烧伤模型，并分别于创面真皮层下方多点注射对应的细胞悬液或病毒悬液1 mL；假伤组大鼠背部剃毛后浸入37 ℃温水12 s模拟烧伤，同法注射等量生理盐水。 主要观察指标：对采集的创面标本行组织学观察和羟脯氨酸含量测定，采用免疫组化分析创面肝细胞生长因子的表达。 结果：苏木精-伊红染色结果显示，Ad-HGF转染细胞组移植后7 d创面表皮化优于其他组，至21 d再生表皮明显厚于其他组，并可见真皮钉脚下伸。胶原特殊染色结果显示，Ad-HGF转染细胞组移植后7，21 d创面中的胶原排列较其他组整齐。移植后7 d，Ad-HGF转染细胞组羟脯氨酸含量显著低于其他组（F=3.216，P < 0.01）。移植后21 d，Ad-HGF转染细胞组愈合创面中肝细胞生长因子的阳性表达位于真皮层，表达强度明显强于其他组。 结论：Ad-HGF基因修饰的大鼠骨髓间充质干细胞异体移植后，对烧伤创面愈合存在一定的促进作用。     

神经干细胞与神经生长因子对豚鼠损伤内耳保护效果的比较

背景：研究证明神经干细胞在体外能自然分泌一定量的神经生长因子，因此若将神经干细胞移植入内耳，可作为神经生长因子源源不断的供体。 目的：比较神经干细胞内耳移植和神经生长因子肌肉注射两种方式对豚鼠损伤内耳的保护效果。 设计：随机对照动物实验。 材料：新生24 h豚鼠5只，用于脑海马神经干细胞的制备。 方法：①动物实验：健康豚鼠40只，随机分为6组：正常对照组4只，不施加任何处理因素；单纯耳蜗打孔组8只，仅施以耳蜗底转骨壁打孔术；单纯神经干细胞移植组8只，经耳蜗底转骨壁打孔后，向内耳注入Brdu标记的神经干细胞；致聋模型组4只，按4 mg/kg体质量连续3 d腹腔注射顺铂建立耳聋模型；致聋后神经干细胞移植组8只，先造成耳聋模型，而后经耳蜗底转骨壁打孔向内耳注入Brdu标记的神经干细胞；致聋后神经生长因子移植组8只，先造成耳聋模型，然后肌肉注射神经生长因子。移植后14，28 d测定纯音听阈值，各处死4只用于耳蜗基底膜四唑氮蓝铺片、苏木精-伊红染色、Brdu免疫组化染色、神经生长因子免疫组化染色。②RT-PCR检测实验：健康豚鼠30只，随机分为4组：正常对照组8只、致聋模型组8只、致聋后神经干细胞移植组5只、致聋后神经生长因子移植组9只，干预措施同上。移植后28 d RT-PCR检测各组动物耳蜗组织神经生长因子mRNA的表达。 结果：与正常对照组比较，移植后14，28 d致聋模型组、致聋后神经干细胞移植组、致聋后神经生长因子移植组的纯音听阈值均显著升高（P < 0.05），但后2组升高幅度明显低于致聋模型组（P < 0.05），且毛细胞排列整齐，无缺失、核溶解、碎裂等现象，螺旋神经节细胞的结构及形态基本接近正常对照组。移植后7 d，耳蜗底转的移植位点、鼓阶蜗轴侧周围及基底膜下方均可见大量BrdU阳性细胞，血管纹、鼓唇和蜗神经纤维神经生长因子免疫组化染色均呈阳性表达，28 d时致聋后神经干细胞移植组染色程度强于致聋后神经生长因子移植组。RT-PCR检测耳蜗神经生长因子mRNA的表达与免疫组化染色结果基本一致。 结论：内耳移植神经干细胞和肌肉注射神经生长因子对豚鼠损伤内耳的毛细胞、螺旋神经节以及听力保护作用基本相似，但免疫组化及RT-PCR结果表明前者耳蜗内分布的神经生长因子较后者更为密集。     

人主动脉-性腺-中肾区基质细胞诱导胚胎干细胞分化为造血干细胞及体内造血重建*☆

背景：研究证实多种造血生长因子、基质细胞饲养层及其条件培养液可促进胚胎干细胞向造血干细胞分化。 目的：以人主动脉-性腺-中肾(aorta-gonad-mesonephros,AGM)区基质细胞为饲养层体外诱导小鼠胚胎干细胞分化为造血干细胞,并比较不同移植途径对造血干细胞体内造血重建能力的影响。 方法：将小鼠E14 胚胎干细胞诱导为拟胚体,采用Transwell非接触共培养体系在人AGM区基质细胞饲养层上诱导6 d,接种NOD-SCID小鼠检测体内致瘤性。再将诱导后的拟胚体细胞移植经致死量60Co γ射线辐照的BALB/C雌鼠,受鼠随机分为静脉移植组、骨髓腔移植组、照射对照组及正常对照组。 结果与结论：拟胚体细胞经人AGM区基质细胞诱导后Sca-1+c-Kit+细胞占(13.12±1.30)%。NOD-SCID小鼠皮下接种经人AGM区基质细胞诱导的拟胚体细胞可出现畸胎瘤,经骨髓腔接种未见肿瘤形成。静脉移植组动物全部死亡,骨髓腔移植组生存率为55.6%,移植后21 d外周血象基本恢复,存活受鼠检测到供体来源Sry基因。提示小鼠胚胎干细胞经人AGM区基质细胞诱导分化的造血干细胞通过骨髓腔移植安全并具有一定的造血重建能力。     

人脐血间质干细胞静脉输注对60Coγ射线照射小鼠脾脏细胞生物学效应的影响★

背景：研究发现，脐血间质干细胞对辐射损伤有一定的防护作用。 目的：实验拟观察脐血间质干细胞静脉输注对照射小鼠脾脏细胞生物学效应的影响，验证其防辐射损伤作用。 设计、时间及地点：随机对照动物实验，于2007-04/10在广东医学院实验动物中心完成。 材料：将体质量(20.0±1.5) g的雌性昆明种小鼠随机分为正常对照组、单纯照射对照组、60Coγ射线照射前静脉注射脐血间质干细胞组，每组30只。新鲜脐带血来源于本院妇产科健康产妇。 方法：以无菌塑料采血袋按密闭式方法采集足月新生儿脐带血80～140 mL，无菌条件下将脐带血液采集到含有ACD-B保养液的无菌采血袋内，并按照卫生部检测血液的标准检测每一份脐带血液，采集、分离间质干细胞。60Coγ射线照射小鼠，通过尾静脉将分离获得的人脐血间质干细胞输注入小鼠体内，细胞数≥ 1×108/份，照射后当天再次输注人脐血间质干细胞。 主要观察指标：应用流式细胞仪检测脾脏细胞的凋亡指数和免疫参数。 结果：与单纯照射组相比，60Coγ射线照射前静脉注射脐血间质干细胞组的G0/G1期细胞比例下降，而S、G2M期细胞比例均有不同程度的升高。经照射后，小鼠脾细胞的凋亡率明显增加，脐血间质干细胞对细胞的凋亡有一定保护作用，同时能够提高细胞的增殖率。单纯照射组的NK细胞、CD4+和CD8+标记率明显低于正常对照组，而脐血间质干细胞能显著地提高它们的活性。 结论：脐血间质干细胞静脉输注对辐射造成的脾细胞损伤有一定保护作用，可促进脾脏细胞的分裂增殖，加速脾脏细胞的修复，其作用机制可能与提高NK细胞活性和CD4+、CD8+数量有关。     

肝细胞生长因子基因修饰的骨髓间充质干细胞移植治疗兔股骨头坏死

背景：课题利用实验室自主研制、已获国家SFDA批准临床试验的重组肝细胞生长因子腺病毒感染骨髓间充质干细胞,结合肝细胞生长因子的促血管新生和抗细胞凋亡以及间充质干细胞的成骨功能,通过细胞治疗的手段进行骨损伤修复。 目的：探讨肝细胞生长因子基因修饰的骨髓间充质干细胞移植对兔股骨头坏死骨缺损的治疗效果。 设计、时间及地点：细胞-材料学体内实验,于2007-09/12在北京放射与辐射医学研究所和解放军66400部队骨病专科医院完成。 材料：清洁级26~28周龄新西兰大白兔18只,由北京开源兔业养殖场提供。骨基质明胶为上海骁博科技发展有限公司产品。 方法：采用贴壁法分离培养兔自体骨髓间充质干细胞,体外鉴定成骨和成脂肪能力。18只兔均建立双侧股骨头坏死骨缺损模型,随机分为3组,6只/组,单纯材料组缺损区仅填塞骨基质明胶,细胞-材料组填塞复合骨髓间充质干细胞的骨基质明胶,基因修饰细胞-材料组填塞复合Ad-HGF感染的骨髓间充质干细胞的骨基质明胶,各组细胞用量为 107个/缺损,骨基质明胶用量为27 mm3/缺损,修复3个月后取材进行组织学检查。骨髓间充质干细胞和Ad-HGF感染的骨髓间充质干细胞经荧光染料二醋酸琥珀酰酯羟基荧光素标记后,氯化钴处理72 h,流式细胞学分析细胞增殖情况。 主要观察指标：骨髓间充质干细胞的诱导分化,骨髓间充质干细胞对兔股骨头坏死的修复效果,Ad-HGF感染的骨髓间充质干细胞抗低氧损伤能力。 结果：培养的细胞在适当诱导条件下可分化为成骨和成脂肪细胞。修复后3个月组织学分析显示,单纯材料组仅见疏松的纤维肉芽组织填充;细胞-材料组可见致密的纤维肉芽组织填充,其间有较多的新生血管,但未见新生骨组织;基因修饰细胞-材料组多为软骨样组织填充,周围可见新骨带形成。各组Lane-Sandhu骨组织学评分比较差异有非常显著性意义(P < 0.01),其中基因修饰细胞-材料组评分最高,即Ad-HGF感染的骨髓间充质干细胞具备最佳的骨修复能力。培养体系中加入氯化钴后,已增殖的Ad-HGF感染的骨髓间充质干细胞比例显著高于未感染骨髓间充质干细胞(P < 0.001)。 结论：在骨缺损模型中Ad-HGF感染的骨髓间充质干细胞具有更强的抗低氧损伤能力,其在体内成骨能力优于未感染的骨髓间充质干细胞,提示肝细胞生长因子基因修饰的骨髓间充质干细胞移植是应用于缺血性骨坏死的有效治疗途径。     

Place cells and silent cells in the hippocampus of freely-behaving rats

In the present study, nearly two-thirds of all hippocampal pyramidal units isolated under barbiturate anesthesia, which maximizes these cell's activity, were behaviorally silent. These "silent cells" showed no spontaneous firing activity in the awake, freely-behaving rat. Both reanesthetization and antidromic stimulation, however, activated these silent cells. More than 92% of the remaining spontaneously active hippocampal pyramidal cells recorded from freely-behaving rats were place cells; i.e., they exhibited spatially specific changes in firing activity in at least one environment. The firing rates of these place cells varied depending on the animal's location in this environment. Interestingly many of these place cells displayed low or no spontaneous activity and no spatial specificity in other, dissimilar environments; i.e., their lack of firing in some spatial environments mirrored the behavioral silence of the more numerous silent cells reported here. In complex information processing, such as the processing of spatial information by the hippocampus demonstrated here, neural silence may be as important a signal as neural activity.     

Uncoupling of horizontal cells alters the receptive fields of retinal bipolar cells

Effects of uncoupling of horizontal cells by 1-octanol, a non-specific gap junction uncoupling agent, on the receptive field organization of cone-dominant bipolar cells were investigated in isolated, superfused carp retina, using intracellular recording techniques. At 1 mM, 1-octanol increased responses of cone driven horizontal cells to light spots, but decreased those to light annuli, indicating a reduction of the receptive field size of these cells by uncoupling. Furthermore, 1-octanol eliminated the surround response of OFF type bipolar cells and increased their center response. Similar effects of 1-octanol on the center and surround responses were observed in ON type bipolar cells. These results suggest that uncoupling of horizontal cells can significantly alter the receptive field organization of retinal bipolar cells.     

Astroglial cells: glucocorticoid target cells in the brain

Glutamine synthetase (GS), an enzyme localized in astroglial cells in the brain, is directly implicated in brain detoxification. An ontogenic study of GS activity was performed in homogenates from four distinct brain areas in comparison with the respective astrocytes obtained in primary cultures. GS was induced by hydrocortisone in the astrocytes of all brain areas studied; only cerebellum and cerebral hemisphere astroglial cells had a higher specific activity when compared with the corresponding homogenates. N6O2-Dibutyryl adenosine 3',5'-cyclic monophosphate (dBc AMP), insulin, soluble brain factors, and noradrenaline (NA) were also able to modulate GS activity. Brain factors as well as dBc AMP interfered with hydrocortisone induction of GS. Regulation by hydrocortisone paralleled the variation in its concentration in brain during development. We conclude that astroglial cells are target cells for glucocorticoids, which may modulate ammonia detoxification in these cells.     

Immune cells of the human peripheral taste system: Dominant dendritic cells and CD4 T cells

Taste loss or alterations can seriously impact health and quality of life due to the resulting negative influence on eating habits and nutrition. Infection and inflammation are thought to be some of the most common causes of taste perception disorders. Supporting this view, neuro–immune interactions in the peripheral gustatory system have been identified, underlying the importance of this tissue in mucosal immunity, but we have little understanding of how these interactions influence taste perception directly or indirectly. This limited understanding is evident by the lack of even a basic knowledge of the resident immune cell populations in or near taste tissues. The present study characterized the distribution and population of the major immune cells and their subsets in healthy human anterior, lingual, fungiform papillae (FP) using immunohistochemistry. Dendritic cells (DCs) were the predominant innate immune cells in this tissue, including four subtypes: CD11c⁺ DCs, DC-SIGN+ immature DCs, CD83⁺ mature DCs, and CD1a⁺ DCs (Langerhans cells). While most DCs were localized beneath the lamina propria and only moderately in the epithelium, CD1a⁺ Langerhans cells were exclusively present within the epithelium and not in sub-strata. A small number of macrophages were observed. T lymphocytes were present throughout the FP with CD4⁺ T cells more prevalent than CD8⁺ T cells. Very few CD19⁺ B lymphocytes were detected. The results show that DCs, macrophages, and T lymphocytes are the constitutive guardians of human FP taste tissue, with DCs and CD4 T cells being dominant, while B lymphocytes are rare under normal, healthy conditions. These observations provide a basic anatomical foundation for the immune response in the healthy human tongue as a basis for subsequent disease-related studies, but none of the present data indicate that the immune cell populations identified are, in fact, altered in individuals with abnormal taste perception.     

神经干细胞移植对视网膜节细胞再生的影响

目的探讨神经干细胞（NSCs）在视神经损伤后对视网膜节细胞轴突再生的作用及其在视神经内迁移和分化。方法实验动物分对照组（PBS组），实验组（NSCs组）；成年SD大鼠在眼球后1min处切断视神经。移植NSCs或PBS至视神经断端；4周后以霍乱毒素B亚基顺行标记观察轴突再生情况，并观察NSCs在视神经内的迁移及免疫组织化学法检测移植后的细胞表达神经丝蛋白（NF）、2，3-环核苷酸磷酸二酯酶（CNP）、胶质纤维酸性蛋白（GFAP）的情况。结果4周后视网膜节细胞再生轴突穿过视神经断端到达远端，移植的NSCs分化为星形胶质细胞并在视神经内迁移0．5～1min。免疫组织化学法检测NSCs部分呈GFAP阳性，未见NF、CNP表达。结论NSCs移植可促进视网膜节细胞轴突再生，能在视神经内迁移并在视神经周围分化为星形胶质细胞。     

嗅鞘细胞对脂肪干细胞诱导分化的影响

目的 比较2种不同方法共培养脂肪干细胞后神经元特异性核蛋白(neuron specific nuclear protein,NeuN)的表达.方法 以transwell小室为共培养载体,实验组中将脂肪干细胞接种于上室,嗅鞘细胞接种于下室,对照组下室无嗅鞘细胞,只加入嗅鞘细胞条件培养液,共培养12 d后观察脂肪干细胞NeuN的表达.结果 共培养12 d后2组都有部分脂肪干细胞表达NeuN,实验组NeuN阳性率为303/345(87.8%),而对照组为120/320(37.5%),差异有统计学意义(χ~2=181.6,P＜0.05).结论 脂肪干细胞在与嗅鞘细胞共培养时更容易向神经元样细胞分化.     

Horizontal cells contribute to the receptive field surround of ganglion cells in the rabbit retina

The influence of horizontal cells on ganglion cells in the rabbit retina was examined by injecting current intracellularly into horizontal cells while simultaneously monitoring the extracellular spike activity of nearby single-unit ganglion cells. Hyperpolarizing current injected into horizontal cells decreased the firing rate of on-center brisk ganglion cells and increased the firing rate of off-center brisk ganglion cells. Depolarizing current produced opposite effects on on-center and off-center brisk ganglion cells. These findings are consistent with the view that horizontal cells in the rabbit contribute to the antagonistic surround excitation of brisk ganglion cells.