喉癌中凋亡抑制基因Livin的表达

目的探讨凋亡抑制基因Livin在喉癌组织中的表达及其与喉癌临床病理的相关性。方法采用免疫组织化学染色方法检测了50例喉癌组织,45例癌旁组织,10例喉乳头状瘤及16例声带息肉中Livin蛋白的表达情况。RT-PCR方法检测41喉癌组织,41例癌旁组织和11声带息肉组织中Livin mRNA的表达情况。结果 RT-PCR检测结果显示Livin mRNA在喉癌组织中相对表达量明显高于癌旁组织及声带息肉组织（P〈0.01）。免疫组织化学检测结果显示Livin蛋白在喉癌组织中的阳性表达率明显高于癌旁组织、喉乳头状瘤及声带息肉（P〈0.05）。Livin蛋白表达与肿瘤的病理分级有关（P〈0.05）,而与患者年龄、肿瘤部位、临床分期、淋巴结转移无关（P〉0.05）。结论 Livin在喉癌组织中异常高表达,提示在喉癌的发生、发展中可能起重要作用。     

端粒酶催化亚单位在喉鳞癌组织中的表达及意义

目的研究喉鳞癌组织中端粒酶催化亚单位（hTERT）的表达及其与肿瘤临床病理参数的关系.方法应用免疫组化法检测39例喉鳞癌组织,10例声带息肉组织中hTERT的表达,并分析喉鳞癌组织中hTERT蛋白的表达与肿瘤各项临床病理参数的关系.结果39例喉鳞癌组织中hTERT蛋白阳性表达率分别为84.6%（33/39）.10例声带息肉组织中hTERT蛋白均未见阳性表达.hTERT蛋白在喉鳞癌组织与声带息肉组织中的表达差异有统计学意义.喉鳞癌组织中hTERT蛋白表达与癌组织的的组织学分级、临床分期、淋巴结转移间均未见相关性.结论hTERT的激活在喉鳞癌的发生中起重要作用.     

环氧化酶-2在喉鳞状细胞癌中的表达及其与微血管密度的关系

目的：检测喉鳞状细胞癌（LSCC）中环氧化酶-2（COX-2）、兔抗人Ⅷ因子（FⅧ）的表达，探讨LSCC中COX-2的表达情况与微血管密度（MVD）的关系。方法：利用免疫组织化学SABC法检测42例LSCC及其癌旁正常组织中COX-2、FⅧ的表达，分析其与LSCC的临床病理、淋巴结转移、MVD等的关系。结果：LSCC组织中COX-2阳性率为71．4％，癌旁正常组织中COX-2的阳性率为19．1％，肿瘤组织中COX-2的表达明显高于癌旁正常组织，差异有统计学意义（P〈0．05）；COX-2在LSCC中的表达与患者的性别、年龄、病变原发部位、分化程度和T分期无关（均P〉0．05）：与病理分期、颈淋巴结转移和MVD密切相关。结论：COX-2在LSCC中的高表达对肿瘤的发生、发展及淋巴结转移起促进作用，COX-2可能是促进肿瘤血管形成的主要因子。     

喉鳞状细胞癌中人类错配修复蛋白2与多药耐药蛋白表达及相关性

目的研究人类错配修复蛋白2（human muts homolog 2,hMSH2）在喉鳞状细胞癌（简称喉鳞癌）中的表达及与多药耐药基因蛋白P-糖蛋白（P-glycoprotein,P-gp）表达的相关性,两者表达与临床病理特征的关系。方法采用免疫组化En-ViSion法检测喉鳞癌及声带息肉组织中hMSH2和P-gp的表达情况,同时检测hMSH2阳性表达和阴性表达组中P-gp的表达情况。结果 hMSH2蛋白在喉鳞癌组织中阳性表达率为59%,明显低于声带息肉90%（χ2=12.741,P〈0.05）,P-gp在喉鳞癌中阳性表达率为76%,显著高于声带息肉阳性表达率45%（χ2=13.260,P〈0.05）。hMSH2阳性的喉鳞癌中P-gp阳性率为69%,hMSH2阴性的喉鳞癌中P-gp阳性率为87%,差异有统计学意义（χ2=4.479,P〈0.05）。hMSH2表达与喉鳞癌分化程度、临床分期、淋巴结转移相关。P-gp表达与肿瘤分化程度、临床分期、淋巴结转移及T分级相关。结论 hMSH2与P-gp在喉鳞癌发生及恶性演进中起一定作用,hMSH2可能通过影响P-gp表达导致喉鳞癌多药耐药的产生。     

p27基因在喉鳞癌组织中的表达及其临床意义

目的探讨喉鳞癌p27基因表达水平及其临床意义.方法用原位杂交方法检测49例喉鳞癌、19例声带息肉、12例癌旁增生组织及8例非典型增生组织中p27的表达.结果喉鳞癌组织p27阳性表达率12.24%(6/49),声带息肉63.16%(12/19),癌旁增生组织33.33%(4/12),非典型增生组织25.00%(2/8),喉鳞癌组织p27mRNA表达显著低于其他各组(P＜0.05),与临床分期有显著相关性(P＜0.05).结论喉鳞癌组织中存在p27基因的低表达,与喉癌临床分期显著相关.     

喉鳞状细胞癌中hMLH1和hMSH2的表达及与细胞凋亡的相关性

目的检测人类错配修复基因hMLH1（human mutl homolog 1）和hMSH2（human muts homolog 2）蛋白在喉鳞状细胞癌（简称喉癌）组织中的表达及与细胞凋亡的相关性,从而探讨其与喉癌发生发展的关系。方法应用免疫组织化学方法检测40例喉癌组织、19例癌旁组织和12例非癌喉黏膜组织（声带息肉、乳头状瘤患者喉黏膜）中hMLH1和hMSH2的表达情况。应用流式细胞术的方法定量检测40例喉癌组织、40例癌旁组织和15例非癌喉黏膜组织中hMLH1和hMSH2的含量并检测其凋亡率。结果 hMLH1和hMSH2蛋白在喉癌组织中的定量及定性表达均明显低于癌旁组织及非癌喉黏膜组织,两者在喉癌组织中的表达与淋巴结转移、临床分期、病理分级有相关性,喉癌组织细胞凋亡率与hMLH1和hMSH2蛋白表达均呈直线正相关。结论 hMLH1和hMSH2蛋白可能与喉癌的发生、发展及转移有关,可能通过促进细胞凋亡而与抑制肿瘤发生发展有关。     

CyclinG2在喉鳞癌组织中的表达及其与微血管密度的相关性研究

目的检测喉鳞状细胞癌（laryngeal squmaous cell carcinoma,LSCC）组织中CyclinG2蛋白表达和微血管密度（microvessel density,MVD）,并探讨其与LSCC预后的关系。方法应用免疫组织化学技术对81例喉鳞癌组织的CyclinG2蛋白表达和MVD进行检测,并取20例喉正常黏膜组织（normal laryngeal tissues,NLT）及20例声带息肉组织（vocal cord polyp,VCP）作为对照。采用SPSS12.0统计软件系统分析CyclinG2蛋白的表达和MVD与LSCC、NLT、VCP的相关性,以及LSCC组织中MVD的表达与临床病理特征的关系。结果81例LSCC组织中平均MVD为36.15土11.23,CyclinG2蛋白表达阳性组平均MVD为32.18土11.31,阴性者平均MVD为50.34土17.34,其差异具有统计学意义（P〈0.05）。LSCC总的5年生存率约77.8%,且CyclinG2蛋白表达阳性组5年生存率（89.1%）明显高于阴性组（53.8%）,其差异具有统计学意义（P〈0.01）。结论CyclinG2蛋白在LSCC中的表达与MVD关系密切。CyclinG2可能抑制喉鳞癌中微血管形成,进而抑制癌细胞的侵袭与转移。     

一氧化氮合酶(NOS)在喉鳞癌中的表达及意义

目的：检测喉鳞状细胞癌组织中一氧化氮合酶（nitricoxidesynthase,NOS）的表达,并分析其表达与喉鳞癌病理特性的关系。方法：应用免疫组织化学技术对42例喉鳞癌,15例喉乳头状瘤,5例声带息肉组织中的iNOS,eNOS表达情况进行对比。结果：喉鳞癌中iNOS的阳性表达率为83．3％（35／42）,喉乳头状瘤阳性表达率为40．0％（6／15）,二者比较有显著性差异（x2＝9．47,P＜0．05）;eNOS在喉鳞癌组阳性表达为52．4％（22／42）,喉乳头状瘤组为6．7％（1／15）,二者比较有显著性差异（x2＝9．59,P＜0．05）;iNOS和eNOS的表达与喉鳞癌的临床分期无显著相关性（P＞0．05）。iNOS在低分化癌表达率为86．7％（13／15）,在高分化癌为75．0％（12／16）,但iNOS强阳性表达在高分化型鳞癌中为12.6％（2／16）,在低分化鳞癌中为53．3％（8／15）,其差异显著;eNOS在低分化和高分化癌中的表达率分别为73．3％（11／15）和31．3％（5／16）,其差异均有显著性（P＜0．05）。结论：NOS在喉鳞癌有较高的表达,可能为肿瘤细胞间的异常介质信号,与喉癌的发生和分化有关,肿瘤组织内有新生血管形成,其血流由一氧化氮（nitricoxide,ON）调节,明确其作用机理,将可能为喉癌的生物治疗提供理论依据。     

微管相关蛋白1轻链3在喉癌中的表达及其意义

目的:探讨微管相关蛋白1轻链3(LC3)在喉癌中的表达及其意义.方法:采用免疫组织化学染色方法检测LC3蛋白在50例喉癌组织、45例癌旁组织、10例喉乳头状瘤及16例声带息肉中的表达情况.采用RT-PCR法检测LC3 mRNA和蛋白在41例喉癌组织、41例癌旁组织及11例声带息肉组织中的表达,并结合临床病理因素进行分析.结果:免疫组织化学结果显示LC3蛋白在喉癌组织、癌旁组织、喉乳头状瘤、声带息肉中的阳性率分别为60.0%、93.3%、90.0%、93.8%.LC3在喉癌组织中的阳性表达率明显低于癌旁及声带息肉组织(χ2=18.135,P＜0.01).RT-PCR检测结果显示LC3 mRNA在喉癌组织中相对表达量为0.57±0.08,与癌旁组织(0.99±0.11)及声带息肉组织(1.07±0.05)中的相对表达量比较差异亦有统计学意义(F=255.872,P＜0.01).LC3在喉癌中的蛋白表达与肿瘤部位、病理学分级有关(P＜0.05),与患者的年龄、T分期、临床分期及淋巴结转移无关(P＞0.05).结论:LC3在喉癌中的表达下调,自噬活性的改变可能与喉癌发生、发展有关.     

喉鳞癌血管内皮生长因子的表达及其临床意义

目的　研究喉鳞癌组织中血管内皮生长因子 (vascularendothelialgrowthfactor,VEGF)的表达及其临床意义。方法　用免疫组化ABC法对 33例喉鳞状细胞癌和 15例声带息肉标本进行血管内皮生长因子测定和肿瘤微血管密度 (microvesseldensity ,MVD )记数。结果　喉癌组织中VEGF的表达程度与MVD呈正相关(P <0 .0 1) ;喉癌组织中 ,VEGF阳性表达率高于声带息肉组织中的VEGF阳性表达率 (P <0 .0 1) ;VEGF表达与病人年龄、病变部位和喉鳞癌细胞分化程度无关 (P >0 .0 5 ) ;VEGF表达与喉鳞癌T分期和颈淋巴结转移呈正相关 (P <0 .0 1) ,而与病人预后呈负相关 (P <0 .0 1)。结论　VEGF在喉鳞癌中有高表达 ,VEGF的表达与新生血管密切相关 ,VEGF的表达程度与喉鳞癌T分期和颈淋巴结转移有关 ,可作为判断喉鳞癌病人预后的参考指标。     

凋亡抑制基因Livin在喉癌组织中的表达及其与p53、Bcl-2表达的相关性研究

目的　探讨凋亡抑制基因Livin在喉鳞状细胞癌（laryngeal squamous cell carcinoma,LSCC）组织中的表达及其与p53和Bcl-2表达的关系,探讨Livin在LSCC 中的作用机制。方法　收集LSCC标本42例,声带息肉组织20例,采用免疫组织化学SP法检测LSCC组织和声带息肉组织中Livin、p53和Bcl-2蛋白的表达。结果　LSCC中Livin表达阳性率为71.4%（30/42）,显著高于声带息肉组织（χ 2=27.679,P <0.01）。临床分期Ⅲ+Ⅳ期Livin阳性表达率显著高于Ⅰ+Ⅱ期（χ 2=7.087,P <0.01）;有淋巴结转移者的Livin阳性表达率高于无淋巴结转移者（χ 2=5.458,P <0.05）。Livin蛋白的表达与p53蛋白表达呈正相关（r =0.665,P <0.05）,与Bcl-2蛋白表达呈正相关（r =0.657,P <0.05）。结论　Livin在LSCC组织中异常表达,有望成为LSCC诊断和基因治疗的新靶点。凋亡相关基因p53与Bcl-2基因的异常表达在喉癌癌变中起协调作用。     

在喉鳞状细胞癌中的表达

目的:研究癌基因STK15在喉鳞状细胞癌中的表达，探讨STK15与喉鳞状细胞癌的相关性。方法：应用SP免疫组织化学法检测40例喉鳞状细胞癌及30例声带息肉中STK15的蛋白表达。结果：STK15在喉鳞状细胞癌和声带息肉中的阳性率分别为67.5%（27/40）、33.3%（10/30），二者之间差异有统计学意义（P＜0.05）。STK15蛋白表达与喉鳞状细胞癌的TNM分期及淋巴结转移有关（P＜0.05），与喉鳞状细胞癌病理学分级、原发部位及患者的性别、年龄无关（P＞0.05）,且STK15蛋白阳性表达强度与喉鳞癌患者的TNM分期有关（P＜0.05）。结论：STK15在喉鳞状细胞癌的发生、发展中起重要作用，可能成为喉鳞状细胞癌基因治疗的新靶点。     

EphA2与VEGF蛋白在喉鳞癌组织中的表达及相关性研究

目的探讨沉默促红细胞生成素产生肝细胞受体(erythropoietin-producing hepatocellular re-ceptor,EphA2)与促血管生成因子(VEGF)蛋白在喉鳞状细胞癌(喉鳞癌)组织中的表达及相关性。方法采用免疫组织化学技术检测EphA2、VEGF蛋白在69例喉鳞癌组织及15例癌旁黏膜组织中的表达,分析二者表达水平与临床病理特征的关系。结果 EphA2和VEGF蛋白在喉鳞癌组织中的阳性率均高于癌旁黏膜组织(P均<0.05),EphA2蛋白表达尚与肿瘤原发部位相关(P<0.05),且EphA2和VEGF蛋白表达均与喉鳞癌患者的临床分期(P均<0.05)及转移(P均<0.05)密切相关,而二者表达与患者年龄、性别、组织学分级均无明显相关(P均>0.05)。喉鳞癌组织中EphA2及VEGF蛋白表达存在正相关性(P<0.05)。生存分析结果显示EphA2及VEGF蛋白表达水平与患者5年总生存率密切相关(P<0.05)。多因素Cox比例风险回归模型进一步显示,淋巴结有无转移及EphA2蛋白表达水平为喉鳞癌患者预后的独立影响因素。结论 EphA2与VEGF蛋白在喉鳞癌组织中表达均上调,提示二者可能存在相互作用,共同在喉鳞癌的发生、发展中起作用。     

BUB1在喉鳞状细胞癌中的表达及临床意义

目的：探讨喉鳞状细胞癌（LSCC）组织中BUB1蛋白的表达及临床意义。方法：采用免疫组织化学EliVision二步法检测55例LSCC组织和30例癌旁正常黏膜组织中BUB1蛋白的表达,并分析其与LSCC临床病理特征的关系。结果：BUB1蛋白在LSCC组织中的阳性表达率为50．9％（28／55）,低于癌旁正常黏膜组织83．3%（25／30）,两者比较差异有统计学意义（P〈0．01）;BUBl蛋白的表达与LSCC分化程度及淋巴结转移有相关性（均P〈0．05）,而与患者性别、年龄、吸烟、肿瘤原发部位、T分期及临床分期无相关性（均P〉0．05）。结论：BUBl蛋白的低表达与LSCC的发生、发展有关,BUB1可能作为预测LSCC转移及预后的生物学指标之一。     

缺氧诱导因子1α和环氧化酶2在喉鳞癌组织中的表达及意义

目的 探讨喉鳞癌组织中缺氧诱导因子1α(hypoxia-inducible factor-1 alpha,HIF-1α)和环氧化酶2(cyclooxygenage-2,COX-2)的表达情况及其与患者临床病理资料的关系和对预后的影响.方法 免疫组化Envision二步法检测60例喉鳞癌标本中HIF-1α和COX-2蛋白的表达,15例不典型增生、10例声带白斑、10例声带息肉标本作对照.结合喉鳞癌患者临床和病理资料进行分析.结果 60例喉鳞癌组织中HIF-1α呈高表达为35.0%(21/60),COX-2高表达为38.3%(23/60).两者阳性表达率与不典型增生、声带白斑及声带息肉组相比差异均具有统计学意义(Fisher确切概率法,P值均<0.01).喉鳞癌组织中HIF-1α和COX-2的表达结果 呈正相关(r=0.526,P<0.01).喉癌HIF-1α高、低表达组在临床分期(X2=4.331,P<0.05)及淋巴转移方面(Fisher确切概率法,P<0.05)组间差异具统计学意义;COX-2高、低表达组在T分期及临床分期方面组间差异具统计学意义(X2值分别为6.792和8.539,P值均<0.01).单因素分析HIF-1α高、低表达组间生存率及无瘤生存率差异均具统计学意义(X2值分别为6.003和5.010,P值均<0.05),COX-2高、低表达组生存率差异及无瘤生存率差异均具统计学意义(X2值分别为9.489和6.102,P值均<0.05).多因素分析提示复发及COX-2表达是影响喉癌患者预后的重要危险因素(相对危险度分别为7.104和5.714,P值均<0.01).结论 HIF-1α和COX-2在喉鳞癌发生、发展中起重要作用,两者可能有协同关系.COX-2表达及肿瘤复发情况可能作为评估喉鳞癌预后的重要危险因素.     

喉癌组织中IGFBP-rP1基因的甲基化及表达

目的：探讨喉癌中胰岛素样生长因子结合蛋白一相关蛋白1（IGFBP—rP1）基因启动子区甲基化与蛋白表达之间的关系。方法：采用甲基化特异性PCR方法和免疫组织化学的方法分别检测45例喉癌组织及18例癌旁组织中IGFBP-rP1基因的甲基化状态和蛋白表达情况。结果：喉癌组织IGFBP—rP1启动子区甲基化率为33．3％（15／45）,相应癌旁组织甲基化率为5．6％（1／18）,喉癌组织中IGFBP—rP1基因甲基化率明显高于癌旁组织（P〈0．05）。喉癌组织中IGFBP—rP1蛋白表达显著低于癌旁正常组织（P％0．05）,且与其启动子区甲基化状态呈负相关。结论：IGFBP—rP1基因启动子区甲基化导致基因沉默可能是喉癌发生的机制之一。     

喉鳞状细胞癌组织中骨桥蛋白和p53的表达及其临床意义

目的 研究人喉鳞状细胞癌（LSCC）及其癌旁相对正常组织中骨桥蛋白 (OPN)和p53表达水平,并探讨两者的相互关系及其临床病理学意义。方法 采用免疫组织化学SP法,对44例LSCC及癌旁组织手术切除标本常规制作石蜡包埋切片,检测OPN和p53的表达,结合喉癌患者的临床病理学特征进行分析。结果 ①44例喉癌组织中OPN和p53表达阳性率分别为75.0%（33例）和65.9%（29例）,癌旁相对正常组织中分别为13.6%（6例）和2.3%（1例）;②OPN的表达与颈部淋巴结转移、临床分期、病理组织学分级有关,与性别、年龄、原发部位无相关性;③OPN和p53的表达呈显著正相关（r＝0. 360,P＝0.016）。结论 OPN在喉癌组织中的表达高于癌旁相对正常组织,可能参与了喉癌的发生、发展和转移,有可能成为判断预后的重要生物学标记物。     

人端粒保护蛋白POT1和TRF2在喉癌中的表达

目的探讨人端粒保护蛋白1（human protection of telomeres1,POT1）和端粒重复序列结合因子2（telomeric repeat binding factor-2,TRF2）在喉鳞状细胞癌（简称喉癌）及声带息肉中的表达及意义。方法采用间接免疫荧光法检测20例喉癌、19例声带息肉中POT1和TRF2的表达水平。结果POT1和TRF2在喉癌中的阳性表达率为65．00％和70．00％,在声带息肉中未见POT1和TRF2的表达。POT1在低分化喉癌中的表达高于POT1在高及中分化喉癌中的表达（P〈0．05）,POT1的表达水平在喉癌的不同发生部位、T分级、临床分期及淋巴结转移率中的差异无统计学意义（P〈0．05）。TRF2的表达程度与肿瘤的发生部位、组织病理、T分级、淋巴结转移率和临床分期均无关（P〈0．05）。相关分析显示喉癌中POT1的表达与TRF2的表达无相关性（P〈0．05）。结论POT1和TRF2在喉癌中高表达,两者在喉癌的发生中可能起重要作用。POT1在喉癌中的表达与肿瘤的分化程度有关。