角膜新生血管光动力学疗法的实验研究

目的研究角膜新生血管的治疗方法,观察不同浓度的光敏剂血卟啉单甲醚(hematoporphyrinmonomethylether,HMME)所介导的光动力作用对兔角膜新生血管的影响,为探讨光动力学疗法治疗角膜新生血管的可行性和有效性提供初步的实验依据。方法采用角膜缝线的方法,诱导18只荷兰大耳白兔36只眼角膜新生血管形成。缝线后的第7天,将18只兔随机分成9组,将不同浓度的HMME分别注射于兔眼球结膜下,30min后用波长为632.8min的He-Ne激光照射不同的时间(即能量密度不同),观察每眼角膜新生血管损伤情况及角膜组织病理学改变。结果在HMME浓度为7.5mg/ml时,激光功率密度为30mW/cm2,能量密度为108,(?)m2,照射时间60min,兔角膜新生血管密度减低率(67.97±2.20)%,不但高于激光照射时间分别为15、30和45min,能量密度分别为27.54和81J/cm2时的新生血管密度减低率,其统计学差异有显著意义(P=0.001,P=0.002,P=0.031),而且高于HMME浓度为2.5mg/ml和5mg/ml2时的角膜新生血管的减低率,其统计学差异有显著意义(P<0.01,P<0.01);而HMME浓度为10m/ml时,睑球结膜损伤较大,不宜用于治疗眼部。PDT后组织病理学检查,电镜下见新生血管内皮细胞变性;HE染色角膜标本光镜下见新牛血管退缩。结论采用结膜下注射HMME,并用波长为632.8nm的He-Ne激光照射,     

血卟啉单甲醚-光动力学疗法治疗实验性脉络膜新生血管

目的 观察光敏剂血卟啉单甲醚-630 nm半导体激光器光动力学疗法对实验性脉络膜新生血管的疗效及影响疗效的因素.方法 BN大鼠共21只,随机分为空白对照组?和PDT治疗组(T1～T6).氪激光光凝诱导BN大鼠建立脉络膜新生血管动物模型后14～21d,T1～13组大鼠股静脉注射血卟啉单甲醚15 mr/ks后20 min,分别以400、600、1 000 mW/cm2功率密度,波长630 nm半导体激光照射90s,即能最密度36、54、90 J/cm2;T4～T6组大鼠在给予血卟啉单甲醚30mg/kg后,以波长630 nm半导体激光分别照射60、90、150 s,即能量密度分别为36、54、90 J/cm2.眼底光斑直径皆为800～1 000μm.治疗后24 h、7 d行荧光素眼底血管造影检查和组织病理学检查,治疗后7 d行脉络膜平片的免疫组化检查.结果 荧光素眼底血管造影显示各治疗参数的CNV闭合率不同,随能量密度的增加和光敏剂剂量的增加而提高.T1、T2、T3组PDT后第24小时CNV闭合率分别为39.1%、65.2%、87.5%,PDT后第7天闭合率分别为O%、5.6%、45.5%.T4、T5、T6组PDT后第24小时CNV闭合率分别为56.5%、78.3%、90.9%,PDT后第7天闭合率分别为25.0%、68.8%、93.3%.PDT后第24小时除T1组外,其余各组均可见不同程度的CNV和脉络膜毛细血管闭合及血栓形成;T2组视网膜毛细m管和脉络膜大血管未闭合;T4、T5组部分视网膜毛细血管有附壁红细胞聚集未堵塞管腔;T3、T6组视网膜毛细血管、CNV、脉络膜毛细血管及大部分脉络膜大血管闭合.PDT后第7天各组闭塞的视网膜血管和脉络膜大血管未见完全开放.脉络膜平片的免疫组化分析显示对形成血管腔和未形成血管腔的内皮细胞均有特异性表达,用方差分析统计方法结果显示C组与T1～T6组问差异有统计意义(P<0.01).结论 血卟啉单甲醚—光动力学疗法治疗实验性脉络膜新生血管疗效确切.     

不同参数HMME-PDT对兔耳增生性瘢痕的生物效应

目的观察不同参数的血卟啉单甲醚-光动力学疗法（HMME-PDT）对兔耳增生性瘢痕的生物学效应，为临床应用HMME-PDT防治增生性瘢痕提供实验依据。方法建立兔耳增生性瘢痕模型后，将150个增生性瘢痕块随机分为HMME-PDT治疗组和对照组。PDT治疗组给予HMME10mg／kg，分别在给药后即刻、30min、1和3h行半导体激光照射，波长630nm，能量密度分别为5、10和20J／cm^2。观察瘢痕生长情况，术后28d取材行常规HE染色，计算各组瘢痕增生指数，分析HMME-PDT对瘢痕的影响。结果静脉注射HMME10mg／kg后，以功率密度为20mW／cm^2，能量密度为5J／cm^2的半导体激光在给药后即刻和30min照光时能对瘢痕增生块产生抑制效应，其中以时间间隔为30min时的作用更加显著，而能量密度为20J／cm^2的激光照射瘢痕增生指数仍然较高，甚至超过空白对照组。结论HMME-PDT对兔耳增生性瘢痕的生物学效应与光敏剂的剂量和激光照光时间、给药后至照光的时间间隔和能量密度密切相关。     

血卟啉单甲醚-光动力学疗法对兔移植静脉再狭窄的抑制作用

目的探讨局部灌注血卟啉单甲醚(HMME)结合血管外激光照射的方法对移植静脉吻合口处内膜增生的抑制作用。方法采用兔颈外静脉颈总动脉移植模型，将实验动物随机分为光动力学治疗组、单纯激光照射组、单纯光敏剂灌注组、空白对照组，每组4只兔。光动力学治疗组局部应用血卟啉单甲醚HMME(15／μg／ml)溶液充盈在移植静脉段，再以532nm波长半导体激光器在吻合口(每只兔2处吻合口)附近进行血管外照射5min，功率密度100mW／cm^2，能量密度30J／cm^2；单纯激光照射组以生理盐水充盈移植静脉段，再用激光照射；单纯光敏剂灌注组仅用HMME(15μg／ml)溶液充盈移植静脉段5min；空白对照组应用生理盐水充盈移植静脉段5min.术后第4周于各实验组移植静脉的动静脉连接都及其两侧0.5cm处的动脉端、静脉端取材，常规石蜡包埋切片HE染色，组织病理观察，采用IMAGE-Pro Plus生物医学图像分析系统，观察不同处理组内膜增生程度的差异。     

三种光敏剂介导的光动力疗法治疗上消化道肿瘤的疗效比较研究

目的分析比较三种光敏剂介导的光动力疗法治疗上消化道癌的近期疗效和不良反应。方法上消化道癌患者181例,分别应用血卟啉衍生物（67例）、血卟啉单甲醚（58例）及卟吩姆钠（56例）作为光敏剂,给药剂量分别为5、6和2mg／kg,于照光前6—24h静脉滴注。分别应用金蒸气激光和半导体激光作为治疗光源,功率密度200～400mW／cm^2,能量密度100～300J／cm^2。治疗1-5次后评价疗效：完全疗效（cR）、明显疗效（PR）、稍有疗效（MR）、无效（NR）。结果血卟啉衍生物组67例患者,cR5例（7．5％）,PR40例（59．7％）,MR16例（23．9％）,NR6例（9．0％）。血卟啉单甲醚组58例患者,CR5例（8．6％）,PR33例（56．9％）,MR14例（24．1％）,NR6例（10．3％）。卟吩姆钠组56例患者,CR6例（10．7％）,PR33例（58．9％）,MR12例（21．4％）,NR5例（8．9％）。三组病例均未出现严重不良反应。结论血卟啉衍生物、血卟啉单甲醚和卟吩姆钠三种光敏光动力疗效治疗临床各期上消化道癌疗效相近,不良反应轻,耐受性好,是较好的姑息治疗手段。     

光动力学疗法辅助显微技术治疗脑胶质瘤

目的 观察血卟啉单甲醚光动力学疗法辅助手术治疗脑胶质瘤的近期疗效和随访效果。方法 1999～2001年，应用光动力学疗法辅助手术治疗脑胶质瘤34例。术中暴露肿瘤前，静脉推注血卟啉单甲醚5mg／kg。显微镜下切除肿瘤后，以能量密度200J／cm^2 He-Ne激光照射肿瘤残腔。术后避光3d，观察近期临床表现，出院后定期随访2.4年。结果 大部分患者术后临床症状缓解或消失；出院时Karnofsky记分升高者28例，无变化者6例，改善率82.4％(28／34)；全部病例无皮肤光敏反应；术后1年生存率为76.5％(26／34)；术后2年生存率为52.9％。结论 激光光动力学疗法是一种有效的脑胶质瘤辅助治疗方法，近期临床效果满意，有利于提高生存率和生存质量，延长患者生命。     

光动力学疗法治疗鲜红斑痣的护理体会

目的：介绍光动力学治疗鲜红斑痣的治疗方法及护理体会。方法：鲜红斑痣136例，光敏剂为血卟啉单甲醚，光源为HLCu-10型铜蒸气激光器。取HMME1μg做皮试，静脉推注HMME3．5～5mg／kg，5min内激光照射，功率密度80～100mW／cm^2，照射时间1个光斑20～40min，光斑直径8～10cm。     

光动力学疗法治疗中鲜红斑痣治疗区的反应

目的 探讨光动力学疗法（ＰＤＴ）治疗过程中鲜红斑痣治疗区的反应特点及共与病变分型、粢九及儿间的关系,为确定最佳照射时间提供客观指标。方法 对１２８例鲜红斑痣患者的红斑区共分１４７个治疗灶（病灶分型粉红型２３个,紫红型８６个,增厚型３８个）行ＰＤＴ治疗。边静脉推注血卟啉单甲醚（４．５～６．０ｍｇ／ｋｇ）边对炳灶给予铜蒸气激光（波长为５１０．６和５７８．２ｎｍ）照射,光斑直径５～９ｃｍ,功率密度８０～     

低强度He—Ne激光照射对K562细胞的抑制作用

目的：观察不同量密度的低强度He-Ne激光对K562细胞的生物学作用。方法：以能量密度为1．89、4．74和9．47J/cm^2的He-Ne激光照射K562细胞,检测细胞活性：以能量密度为0．41、1．02和2．03J／cm^2的He-Ne激光照射K562细胞,测定超氧化物歧化酶（SOD）活性。结果：中、高能量密度He-Ne激光照射显著抑制K562细胞生长,升高细胞内SOD活性,而低能量密度激光照射对细胞无明显影响。结论：较高能量密度的He-Ne激光对K562细胞的生长有抑制作用,其机制可能与胞内SOD活性增高有关。     

510.6nm激光对兔血管平滑肌细胞、内皮细胞选择性损伤作用的研究

目的 观察激光照射后兔血管平滑肌细胞、内皮细胞形态结构变化特点，观察激光对血管壁的损伤是否有选择性，为防止再狭窄提供实验依据。方法 用能量密度为50、100、150和200J／cm^2的铜蒸气激光照射兔腹主动脉，分别用光镜、电镜、图像分析方法，观察激光照射后第24小时，血管平滑肌细胞、内皮细胞形态、结构变化。结果 100J／cm^2能量密度的激光照射后，血管平滑肌细胞出现细胞核固缩，细胞质凝集贴边，细胞核面积均值缩小等损伤性改变。经同等剂量激光照射，而内皮细胞无明显变化。结论 经100J／cm^2的铜蒸气激光照射可损伤在体血管平滑肌细胞，而对内皮细胞无明显作用。激光对血管壁的损伤具有一定的选择性。     

竹红菌乙素-光动力学疗法治疗脉络膜新生血管方案的初步探讨

目的 观察不同参数的竹红菌乙素．光动力学疗法(HB-PDT)对青紫蓝兔脉络膜毛细血管层的生物学效应以及对视网膜的非选择性损伤，为临床应用HB-PDT疗法治疗脉络膜新生血管(CNV)提供依据。方法 青紫蓝兔18只，随机分为6组，每组3只。其中药物对照组耳缘静脉注射HBl．5mg／kg，不照激光。激光对照组耳缘静脉注入生理盐水2．0mg／kg，PDTI-Ⅳ组耳缘静脉注射HB各10mg／kg，分别以能量密度为240、14．4、30．0、48．0和56．OJ／cm^2，波长为532nm的倍频YAG激光照射兔眼底。观察兔眼底变化、荧光素渗漏情况及视网膜、RPE、视细胞、脉络膜的组织病理学变化。结果 在PDT后第1天，单纯照光组和单纯药物对照组眼底和组织学无改变；HB剂量为10mg／kg，功率密度120-700mW／cm^2、能量密度14．4—56．0J／cm^2的532nm激光照射，可以导致脉络膜毛细血管层的闭塞，视网膜外层损伤，内层无明显改变。HB剂量10mg／kg，功率密度300—600mW／cm^2，照光时间80—100s，能量密度30—50J／cm^2是适宜的治疗参数。结论 HB对视网膜和脉络膜的生物学效应与光敏剂的剂量和激光照光时间、功率密度、能量密度密切相关。生物学效应与能量密度呈量效依赖性关系。     

光动力疗法封闭兔耳缘静脉的实验研究

目的：探讨光动力疗法封闭小静脉所需光敏剂和激光照射的剂量，为临床应用光动力疗法封闭小静脉提供依据。方法：以兔耳缘静脉为研究对象。实验动物注射血啉甲醚或竹红菌乙互后用铜蒸气激光照射耳缘静脉。选择不同的功率密度、照射时间、光敏剂及其剂量，比较各组兔耳缘静脉血栓形成比率。结果：在血啉甲醚剂量为10mg/kg时，150mW/cm^2激光照射40min(能量密度为360J／cm^2)的血兔耳缘静脉血栓形成比率高于180J/cm^2和240J/cm^2(P=0.040,P=0.167)。180J／cm^2激光照射剂量时，30mg/kg血啉甲醚组血栓形成比率高于10mg/kg和20mg/kg(P=0.014,P=0.214).功率密度同为150mW/cm^2，血啉甲醚剂量为30mg/kg激光照射20min与10mg/kg激光照射40min的血栓形成比率相当（P＝0．556）。功率密度为150mW/cm^2激光照射时，竹红菌乙素剂量为1mg/kg激光照射5min，与血啉甲醚剂量为10mg/kg激光照射40min的血栓形成比率相当（P＝0．714）。结论：在一定范围内局部激光照射能量越高、光敏剂的剂量越大，越容易形成血栓。光动力疗法封闭小静脉形成血栓比较合适的条件是血啉甲醚剂量10mg/kg，功率密度150mW/cm^2，照射时间40min。光动力疗法对小静脉的封闭作用使之有可能成为治疗食管、胃静脉曲张的新方法。     

激光对兔损伤性血管内膜增殖的抑制作用

目的　观察５１０－６ ｎｍ 波长激光对兔损伤性血管内膜增殖的抑制作用。方法　实验用雄性日本大耳白兔１２ 只,用球囊导管剥脱腹主动脉内皮,并将其分成激光照射段和对照段,随后用柱状光导纤维以１００Ｊ／ｃｍ２ 的光剂量对照射段进行照射,于术后１４ 天取材,光镜观察血管形态变化,计算机图像分析确定新生血管内膜的面积。结果　激光照射段和对照段腹主动脉均有明显的新生血管内膜形成,呈同心性增厚,厚度不均一。内膜中细胞形态和排列不规则。激光照射段血管新生内膜的平均面积为５－２ ｍｍ２ ±０－６ ｍｍ２ ;对照段为１８－３ ｍｍ２ ±１－１ ｍｍ２ ,两者差异有非常显著意义（Ｐ＜０－０１）。结论　５１０－６ ｎｍ 波长激光照射能显著抑制损伤性血管内膜的增殖,有望用于再狭窄的防治。     

儿童面部鲜红斑痣光动力疗法治疗疗效分析

目的:分析应用铜蒸气激光为光源的光动力学疗法治疗儿童鲜红斑痣的有效性及各种因素对疗效的影响。方法:鲜红斑痣患者142例。静脉推注血卟啉单甲醚5min内行铜蒸气激光照射。激光功率密度80～100mW/cm2,光斑直径8～9cm,照射时间20～40min,能量密度120～240J/cm2。治疗随访1～3个月分析疗效与患者鲜红斑痣分型、病变部位的关系。     

《中国激光医学杂志》2004年（第13卷）文题索引

基础研究PCNA和FⅧR∶Ag在氪激光诱导大鼠脉络膜新生血管中的表达及意义　 (论著 )　史雪辉　何守志　 13 (1) :1血卟啉单甲醚 光动力学疗法对兔移植静脉再狭窄的抑制作用　 (论著 )　程智广　余翼飞　顾瑛等　 13 (1) :6应用激光扫描共聚焦显微成像术研究光敏剂亚细胞定位　 (论著 )　戴维德　王雷　刘凡光等　 13 (1) :12线粒体在血卟啉单甲醚 PDT诱导HeLa细胞凋亡中的作用　 (论著 )　丁新民　刘凡光　顾英等　 13 (1) :18单脉冲半导体激光照射对犬声带形态学的影响　 (论著 )　袁慧钧　王振霖　王丽妍等　 13 (1) :3 8人体皮肤及…     

He—Ne激光对离体大鼠淋巴细胞超微结构变化的影响

为研究激光照射剂量与细胞效应的关系，用Ｈｅ－Ｎｅ激光照射离体大鼠淋巴细胞，电子显微镜观察淋巴细胞结构的变化。结果：用能量密度为２．３４Ｊ／ｃｍ２～２．４４Ｊ／ｃｍ２的Ｈｅ－Ｎｅ激光照射淋巴细胞，线粒体稍有肿胀，微绒毛明显伸长和变粗；４．６３Ｊ／ｃｍ２～４．８９Ｊ／ｃｍ２照射后，染色质浓缩，胞浆变淡变薄，空泡状结构增多，微绒毛稀少而粗短；７．０３Ｊ／ｃｍ２～７．３３Ｊ／ｃｍ２照射后，有的细胞膜消失，少部分细胞的核受损，微绒毛消失。结果表明：激光照射治疗能量密度要适中，过低则无效应，过高可能出现抑制效应，甚至对机体产生伤     

^192Ir高线量率血管腔内照射对抑制兔血管平滑肌细胞增殖及新生内膜过度增生的研究

目的 研究^192I搞线量率血管腔内照射对用切割球囊导管行经皮血管腔内成形术（PTA）后的日本白兔髂动脉平滑肌细胞增殖抑制的经时反应和效果。方法 20只日本白兔经左侧颈总动脉放置切割球囊导管行髂动脉PTA术，随机于一侧髂动脉施行12Gy剂量的血管腔内照射，非照射侧作为对照侧。实验动物于术后1、2、3、4、8及12周处死。根据新生内膜的形成情况，血管成形术后接受血管腔内照射的血管段按时间分为3组：即1周组5只、2－4周组9只、8－12周组6只。随后对标本进行了组织病理、形态学测量和免疫组织化学分析。结果 1周时，与照射侧比较，对照侧血管段创口修复处可明显的新生内膜增生，新生内膜中抗增殖细胞核抗原（PCNA）阳性细胞率呈一峰值；2－4周期间，与对照侧比较，照射侧血管段新生内膜增生明显减弱（P＜0．01），新生内膜中PCNA阳性细胞率较对照侧低，差异有显著性意义（P＜0．01）；8－12周，照射侧血管段增生的新生内膜较对照侧仍处较低水平，新生内膜中PCNA阳性细胞率约低于1％。经抗平滑肌细胞α胶原免疫组织化学染色，证实新生内膜中主要为平滑肌细胞。结论 由照射所致的新生内膜增生过程的抑制作用从开始时即已启动。12Gy的^192Ir高线量率照射能有效地抑制用切割球囊导管损伤引起的日本白兔髂动脉新生内膜的过渡增生。     

金蒸汽激光低功率照射对基因转染血管平滑肌细胞的影响

本文将体外培养的血管平滑肌细胞经波长为６２７．８ｎｍ的金蒸汽激光，以功率密度为１、１０、１００ｍＷ／ｃｍ＾２，能量密度为０．６、６、６０Ｊ／ｃｍ＾２照射后，转染Ｌｉｐｏｆｅｃｔｉｎ包课的含Ｌｓｃ Ｚ基因的质粒ＤＮＡ，经７２小时培养，测基因产物β－半乳糖苷酶的活性。结果显示，１和１０ｍＷ／ｃｍ＾２照射组酶活性分别高于对照组３和７倍，而１００ｍＷ／ｃｍ＾２照射组未见明显提高。提示适量的低功率激光照射可     

HMME介导的光动力疗法诱导人肝癌细胞SMMC-7721凋亡的实验研究

目的:探讨光动力疗法对肝癌细胞SMMC-7721凋亡的影响。方法:以血卟啉单甲醚(HMME)为光敏剂,波长635nm激光为激发光源的光动力疗法作用于肝癌SMMC-7721细胞。细胞分别与浓度5、10、20、30μg/ml的光敏剂孵育4h后,用不同能量密度的激光照射。MTT法检测HMME的暗毒性以及光动力疗法作用24h后的细胞活性。Hoechst细胞     

应用Er：YAG激光消融兔角膜

新西兰白兔６只，分成１、２两组，每组３只（６眼）。在静脉麻醉下刮去角膜中部上皮，用Ｅｒ：ＹＡＧ激光１００～１４０ｍＪ、０．３２ｃｍ（能量密度为１２５０～１７５０ｍＪ／ｃｍ２）、１５０μｓ、１Ｈｚ，分别照射１组每眼６０次，２组１２０次。术后进行裂隙灯检查，并于术后３周、１月和４月摘下眼球，分别作光镜及扫描电镜检查。激光照射后即见到角膜表面出现黄白色凝固层。一般４～８天上皮修复完毕。术后３周至１月角膜基质混浊最明显，此时出现上皮过度增生，基质胶原纤维增殖，排列紊乱。术后４月角膜基本恢复透明。以上表现均以２组更为明显。本文并对Ｅｒ：ＹＡＧ激光进行角膜手术的可行性及优点进行了讨论。