Darbufelone对胃癌SGC-7901细胞裸鼠移植瘤生长的影响

目的观察5-脂氧合酶/环氧合酶-2双重抑制剂Darbufelone对胃癌SGC7901细胞裸鼠皮下移植瘤生长的影响,并探讨其机制。方法建立裸鼠皮下实体瘤模型,随机分为Darbufelone治疗组及对照组(n=7),Darbufelone治疗组给予Darbufelone,45mg/(kg·d),连续灌服4周,对照组给予等量生理盐水。测定移植瘤体积及质量并计算抑瘤率。采用RT-PCR及免疫组织化学法检测肿瘤组织中COX-2、5-LOX、PCNA、Bcl-2及Caspase-3的表达。结果 Darbufelone对裸鼠移植瘤的生长有明显抑制作用,与对照组相比,Darbufelone治疗组体重及移植瘤体积均明显减低(P<0.05),抑瘤率为58.42%,且未见不良反应。Darbufelone治疗组COX-2、5-LOX、PCNA、Bc1-2的mRNA及蛋白表达均明显下降,Caspase-3 mRNA及蛋白表达则显著增加(P<0.05)。结论 Darbufelone可抑制体内胃癌生长,其机制与抑制肿瘤细胞增殖及诱导凋亡有关。     

全反式维A酸对胃癌干细胞相关基因CD133、Sox2及GSK3B表达的影响

 目的 探讨全反式维A酸(all-trans retinoic acid,ATRA)对胃癌干细胞相关基因CD133、Sox2及GSK3B表达的影响,为胃癌治疗提供新的切入点。方法 建立人胃癌裸鼠移植瘤模型,分为对照组、氟尿嘧啶组、ATRA组、氟尿嘧啶+ATRA组,采用ATRA腹腔注射,观察裸鼠一般状况,取出肿瘤组织,HE染色,检测各组胃癌细胞坏死情况;采用半定量反转录聚合酶链反应(RT-PCR)、实时定量PCR方法,分析检测CD133mRNA、Sox2mRNA及GSK3BmRNA基因表达,并通过免疫组化法检测CD133、Sox2及GSK3B蛋白表达。结果 与对照组相比较,氟尿嘧啶组、ATRA组、氟尿嘧啶+ATRA组肿瘤体积缩小,差异有统计学意义(P<0.05);氟尿嘧啶组、ATRA组、氟尿嘧啶+ATRA组高表达CD133、Sox2干细胞相关因子;ATRA组、氟尿嘧啶+ATRA组高表达GSK3B,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 ATRA作用后胃癌干细胞标志物CD133、Sox2、GSK3B表达增加;CD133、Sox2、GSK3B表达增加可以抑制肿瘤细胞生长;ATRA老药新用对胃癌的治疗预后有一定的作用。     

125Ⅰ粒子植入治疗荷人肝癌裸鼠移植瘤的实验研究

目的探讨125Ⅰ粒子植入对荷人肝癌裸鼠移植瘤生长和细胞增殖及凋亡相关蛋白的影响.方法建立12只荷人肝癌BEL-7402裸鼠模型,治疗组和对照组各6只.治疗组每只裸鼠移植瘤内植入1枚活度为33.3 MBq的125Ⅰ粒子,对照组不进行干预.治疗后每3～4 d测量1次肿瘤直径,并计算治疗组肿瘤的体积抑制率.21 d后处死裸鼠,制作肿瘤组织标本,进行常规病理学检查和免疫组织化学检测增殖细胞核抗原(PCNA)、bcl-2和bax的表达.结果125Ⅰ粒子治疗组肿瘤体积最大抑制率为49.2%,病理检查显示近粒子处肿瘤细胞变性坏死,远离粒子处可见存活肿瘤细胞.免疫组织化学显示治疗组PCNA表达强度和bcl-2/bax比值均低于对照组.结论125Ⅰ粒子植入低剂量持续照射可直接杀死荷瘤鼠肝癌细胞或抑制肿瘤生长.     

C-myc反义寡核苷酸对胃癌荷瘤裸鼠抑瘤作用的研究

目的:探讨C-myc反义寡核苷酸(ASODN)对胃癌荷瘤裸鼠的抑瘤作用。方法:将21只裸鼠建立人胃癌MKN-45细胞移植瘤动物模型。成瘤后动物随机平均分为3组,分别由皮下瘤体内注射脂质体(lipofectin,Lip)、C-mycSODN/Lip、C-mycASODN/Lip,每周1次,共3次。观察肿瘤抑制率、肿瘤体积和动物存活情况。免疫组化ABC法检测各组肿瘤的C-myc蛋白表达情况。结果:ASODN/Lip组肿瘤体积明显减少,肿瘤生长抑制,抑瘤率达41.5%;ASODN/Lip组裸鼠生存期较SODN/Lip组和Lip对照组延长明显(P<0.05);ASODN/Lip组肿瘤的C-myc蛋白表达明显降低。结论:C-myc反义寡核苷酸可以有效抑制人胃癌裸鼠皮下肿瘤的生长,延长动物生存期,为胃癌的治疗提供新的思路。     

氧化砷抑制结肠癌裸鼠皮下移植瘤生长及作用机制的研究

 目的研究氧化砷(As2O3)对人结肠癌SW480细胞裸鼠皮下移植瘤生长的抑制作用及其作用机制.方法建立BALB/C-nu/nu裸鼠SW480结肠癌皮下移植瘤模型,以不同浓度As2O3行腹腔内注射治疗,与5-氟脲嘧啶(5-FU)治疗进行对比,观察移植瘤的瘤重及瘤重抑制率,TUNEL法检测移植瘤SW480细胞凋亡率,免疫组织化学法检测bcl-2,Fas基因表达水平的变化.结果5-FU、低剂量As2O3及高剂量As2O3均能明显抑制裸鼠皮下肿瘤的生长,抑瘤率分别为41.51%、53.21%和58.02%,As2O3对移植瘤的生长抑制作用明显强于5-FU,两者比较有显著性差异(P＜0.01).两种浓度As2O3组SW480细胞凋亡率明显高于5-FU.移植瘤组织中bcl-2蛋白阳性细胞数明显减少,Fas蛋白阳性细胞数明显增加.结论As2O3对结肠癌移植瘤的生长具有明显的抑制作用,可诱导移植瘤SW480细胞凋亡,其作用的分子机制可能是下调bcl-2基因表达,上调Fas基因表达.     

^125I粒子植入治疗荷人肝癌裸鼠移植瘤的实验研究

目的 探讨^125I粒子植入对荷人肝癌裸鼠移植瘤生长和细胞增殖及凋亡相关蛋白的影响。方法 建立12只荷人肝癌BEL-7402裸鼠模型，治疗组和对照组各6只。治疗组每只裸鼠移植瘤内植入1枚活度为33．3MBq的^125I粒子，对照组不进行干预。治疗后每3～4d测量1次肿瘤直径，并计算治疗组肿瘤的体积抑制率。21d后处死裸鼠，制作肿瘤组织标本，进行常规病理学检查和免疫组织化学检测增殖细胞核抗原（PCNA）、bcl-2和bax的表达。结果 ^125I粒子治疗组肿瘤体积最大抑制率为49．2％，病理检查显示近粒子处肿瘤细胞变性坏死，远离粒子处可见存活肿瘤细胞。免疫组织化学显示治疗组PCNA表达强度和bcl-2／bax比值均低于对照组。结论 ^125I粒子植入低剂量持续照射可直接杀死荷瘤鼠肝癌细胞或抑制肿瘤生长。     

32P胶体致人胰腺癌Pc-3移植瘤细胞凋亡及其相关基因表达的研究

目的 观察低剂量^3-P胶体瘤体内注射诱导裸鼠人胰腺癌Pc-3移植瘤细胞凋亡的生物学效应、相关基因的表达及其可能的作用机理。方法建立：BALB／c裸鼠人胰腺癌Pc-3移植瘤动物模型，分别向30只荷瘤鼠瘤块中心注射不同剂量(0．37、0．74、1．48、2．96和5．92MBq)的^32P胶体溶液，对照组注射等体积冷胶体。于注射后24h取出瘤块；通过流式细胞仪、透射电镜及免疫组织化学检测等方法，研究肿瘤组织的细胞凋亡率、细胞坏死率、细胞超微结构改变及Apo2．7、Caspase-3、bcl-2、box相关基因的表达。结果 0．74、1．48和2．96MBq组瘤体内注射后电镜下可见典型的细胞凋亡表现，5．92MBq组细胞则以大量坏死为主。辐射诱导凋亡过程中，bcl-2／bax比值下调，Apoa2.7、Caspase-3蛋白表达均明显增加。结论 ^32P胶体瘤体注射可诱导荷瘤裸鼠人胰腺癌Pc-3肿瘤细胞凋亡；Aao2．7、Caspase-3、bcl-2及bax蛋白参与调控辐射诱导细胞凋亡过程。     

AZT对大鼠种植性肝癌细胞凋亡及bax蛋白和PCNA表达影响的研究

目的:观测端粒酶抑制剂3'-叠氮-3'-脱氧胸腺核苷(AZT)对大鼠种植性肝癌组织细胞凋亡及bax蛋白和增殖细胞核抗原(PCNA)表达的影响,探讨其诱导肿瘤细胞凋亡的可能机制.材料和方法:对Walker-256荷瘤大鼠行直视下瘤内注射AZT6天后观测肿瘤细胞凋亡率并采用免疫组化EnVision法检测肿瘤组织中bax蛋白及PC-NA的表达,并与对照组进行对照.结果:AZT组及对照组肿瘤细胞凋亡率分别为(12.439±0.802)%、(3.903±0.182)%,AZT组明显高于对照组(P＜0.05);对照组bax蛋白及PCNA阳性细胞表达率分别为(16.851±10.064)%和(54.234±24.589)%,AZT组bax蛋白及PCNA阳性细胞表达率为(39.279±17.041)%和(27.278±13.961)%,经AZT处理后bax蛋白表达被明显调高(P＜0.05),PCNA表达明显降低(P＜0.05).结论:AZT能调高大鼠walker-256肿瘤组织bax蛋白的表达,抑制PCNA表达,促进肿瘤细胞凋亡.     

葡萄籽原花青素对卵巢癌裸鼠耐药移植瘤的抑制作用观察

目的探讨葡萄籽提取物原花青素(GSPE)对人卵巢癌顺铂耐药细胞COC1/DDP裸鼠皮下移植瘤的抑制作用及其机制。方法 30只COC1/DDP裸鼠建立皮下移植瘤模型,随机分为GSPE高浓度组、GSPE低浓度组、对照组(每组10只),分别以200mg/kgGSPE、100mg/kgGSPE及生理盐水灌胃[10ml/(kg·d)]。3周后处死裸鼠,测量各组移植瘤体积,流式细胞术(FCM)分析细胞凋亡率,RT-PCR、Western blotting检测肿瘤细胞Livin和caspase-3的mRNA、蛋白表达情况。结果 GSPE高、低浓度组皮下移植瘤体积(分别为351.23±15.52、432.51±18.36mm3)明显小于对照组(594.49±16.33mm3,P0.05)。FCM检测显示GSPE高、低浓度组肿瘤细胞凋亡率分别为66.25%、29.31%,明显高于对照组(1.03%,P0.01)。与对照组相比,GSPE能明显降低Livin的mRNA、蛋白表达水平(P0.01或P0.05),增加caspase-3的mRNA、蛋白表达水平(P0.01或P0.05)。结论 GSPE可能是通过降低Livin的表达、增强caspase-3的表达而显著抑制COC1/DDP细胞移植瘤的生长,促进COC1/DDP细胞的凋亡。     

平调饮对小鼠S180骨肉瘤细胞PCNA、Ki-67、EGF及EGFR表达的实验研究

目的:探讨平调饮对小鼠S180骨肉瘤细胞PCNA(增殖细胞核抗原)、Ki-67(肿瘤增殖抗原)、EGF(表皮生长因子)及EGFR(表皮生长因于受体)表达的影响及抑瘤率。方法:观测平调饮低剂量组、高剂量组及西药对照组对荷瘤小鼠的抑瘤率,运用免疫组化方法观察四种因子在实验小鼠肿瘤组织中的表达率。结果:中药低剂量组、高剂量组、西药对照组对荷瘤小鼠的抑瘤率分别为32.10%、43.97%和45.90%。中药低剂量组、高剂量组、西药对照组均能降低四种因子在实验小鼠肿瘤组织中的表达率。结论:平调饮对荷瘤小鼠肿瘤组织有抑制作用,能降低四种因子的表达率。     

核因子E2相关因子2基因沉默对人前列腺癌PC-3细胞增殖、侵袭和转移的影响

 目的 探讨核因子E2相关因子2(NRF2)基因沉默对人前列腺癌PC-3细胞增殖、侵袭和转移的影响及其机制。方法 采用RT- PCR检测人前列腺上皮细胞株RWPE-1和前列腺癌细胞株PC-3中NRF2 mRNA的表达。采用脂质体转染法将NRF2 siRNA-1、NRF2 siRNA-2和NRF2 siRNA-3干扰序列转染至PC-3细胞后,Western blot和RT-PCR检测转染效果,并筛选出干扰效果最好的NRF2 siRNA序列。将体外培养的PC-3细胞分为Con组(未转染)、NC组(转染阴性对照)和NRF2 siRNA组(转染NRF2 siRNA-3),采用CCK-8法、平板克隆实验和Transwell实验分别检测各组细胞的增殖、克隆形成、侵袭和迁移能力,Western blot检测各组细胞中细胞核增殖相关抗原(Ki67)、细胞周期蛋白D1(CyclinD1)、基质金属蛋白酶9(MMP-9)、N-钙黏附素(N-cadherin)蛋白的表达。结果 与前列腺上皮细胞株RWPE-1相比,前列腺癌细胞株PC-3中NRF2 mRNA的表达水平明显升高(0.84±0.05 vs 0.22±0.03,P<0.05)。NRF2 siRNA-1、NRF2 siRNA-2和NRF2 siRNA-3干扰序列均能够明显下调PC-3细胞中NRF2蛋白(0.56±0.04,0.39±0.03,0.11±0.02 vs 0.76±0.07)和mRNA(0.80±0.05,0.52±0.03,0.26±0.03 vs 1.00±0.05)的表达,且NRF2 siRNA-3的干扰效果明显大于NRF2 siRNA-1和NRF2 siRNA-2。与Con组相比,NRF2 siRNA组细胞的增殖、克隆形成、侵袭和迁移能力[存活率:24 h (82.05±5.24)% vs (99.86±5.05)%,48 h (64.57±4.85)% vs (97.28±6.36)%,72 h (45.62±3.76)% vs (94.57±5.49)%;克隆形成率:(39.35±3.26)% vs (66.52±4.85)%;侵袭细胞数:42.00±5.50 vs 85.00±7.50;迁移细胞数:58.00±3.00 vs 118.50±8.00]均明显减弱,同时Ki67、CyclinD1、MMP-9和N-cadherin蛋白的表达(Ki67:0.25±0.03 vs 0.78±0.05;CyclinD1 0.41±0.03 vs 0.85±0.06;MMP-9:0.10±0.02 vs 0.89±0.07;N-cadherin:0.22±0.02 vs 0.49±0.04)均明显降低(P<0.05);而NC组与Con组间无统计学差异(P>0.05)。结论 NRF2基因沉默可抑制人前列腺癌PC-3细胞增殖、侵袭和转移,其分子机制可能与下调Ki67、CyclinD1、MMP-9和N-cadherin蛋白的表达有关。     

组织细胞在炎性肠病鉴别诊断中的意义

 目的 研究炎性肠病(inflammatory bowel disease,IBD)肠黏膜内组织细胞种类与分布特点,为其鉴别诊断寻找线索。方法 参照2012年中华医学会新制定的诊断标准选取病例,结合临床病史及内镜下表现做出诊断,确定溃疡性结肠炎(ulcerative colitis,UC)组 30例,克罗恩病(Crohn’s disease,CD)组 26例,选取10例正常肠黏膜作为对照组。所有病例均HE染色及加做6项免疫组化染色(CD1a、CD21、CD68、CD163、S-100、Ki-67)。所有切片均扫描进入优纳ISCAN系统进行半定量分析。结果 UC(80.72±17.15)个/10⁴ μm²及CD(78.59±16.37)个/10⁴ μm²的固有层内细胞数与正常对照组(59.57±14.04)个/10⁴ μm²相比均具有显著的统计学意义(P<0.01)。CD1a在正常肠黏膜及UC内几乎没有表达[(0.72±0.79)个/10⁴ μm², CD(22.19±10.19)个/10⁴ μm²]统计分析比较与正常对照组及UC(1.32±2.26)个/10⁴ μm²均有统计学意义(P<0.05)。CD21在组织学上的鉴别诊断意义不大。S-100三组的组间比较均具有统计学意义(P<0.05)。CD68 CD组(16.02±7.33)个/10⁴ μm²的阳性细胞数少于正常对照组(21.92±6.18)个/10⁴ μm²和UC组(19.96±11.31)个/10⁴ μm²,与UC及正常对照组比较均具有统计学意义(P<0.05)。CD163染色时CD与UC组比较无统计学意义。 Ki67三组的组间比较均具有统计学意义(P<0.05)。结论 通过多种组织细胞免疫组化染色结果可以综合判断IBD的免疫状态及对UC和CD进行鉴别诊断。     

契伦科夫光分子成像技术对胃癌裸鼠移植瘤诊断的可能性探讨

 目的 采用契伦科夫光分子成像(Cerenkov luminescence imaging,CLI)技术对胃癌裸鼠移植瘤进行放射性核素光学分子成像,探索契伦科夫光诊断胃癌的可行性。方法 2只胃癌裸鼠移植瘤模型尾静脉分别注射1.67×10⁷ Bq ¹⁸F-FDG和3.34×10⁷ Bq ¹⁸F-FDG,1 h后采集契伦科夫光,选取相同大小的ROI进行信号强度分析。成像结束后解剖出移植瘤组织和肝、肾、心脏、胃肠道、肺脏再次成像。然后进行CLI动态成像:1只胃癌裸鼠移植瘤模型尾静脉注射1.67×10⁷ Bq ¹⁸F-FDG,分别于注药后40、60、80、100、120、140、160、180 min采集移植瘤部位的光学信号并进行对比。结果 移植瘤部位出现契伦科夫光信号的浓聚,契伦科夫光信号强度与尾静脉注射的¹⁸F-FDG的活度成正比,注射3.34×10⁷ Bq ¹⁸F-FDG和1.67×10⁷Bq ¹⁸F-FDG的胃癌移植瘤小鼠移植瘤部位光子数值分别为8.432×10⁵ p/s和3.172×10⁵ p/s。随时间的延长,移植瘤摄取¹⁸F-FDG的契伦科夫光信号逐渐减弱。结论 CLI可以实现胃癌裸鼠移植瘤的放射性核素光学成像,具有实现光学分子成像诊断胃癌的潜力。     

腹腔镜辅助远端胃癌根治术对老年进展期胃癌的短期疗效

 目的 探讨腹腔镜辅助远端胃癌根治术(laparoscopy-assisted distal gastrectomy,LADG)对老年进展期胃癌的短期疗效。方法 分别选取128例行LADG和128例传统开腹术的老年胃癌患者,比较两组患者的术中及术后指标、白细胞计数(WBC)、C反应蛋白(CRP)、血浆胃动素、血管活性肠肽和生长抑素,并统计患者的术后并发症。结果 腹腔镜组的术中出血量、手术切口、肛门首次排气时间等术后指标显著低于开腹组,差异有统计学意义(P＜0.05)。两组患者的WBC和CRP值有随时间变化的趋势(P＜0.05);腹腔镜组患者在术后不同阶段的WBC和CRP值显著低于开腹组,差异有统计学意义(P＜0.05);不同手术方式与时间的交互效应对WBC和CRP值有影响(P＜0.05)。两组患者的血浆胃动素、血管活性肠肽和生长抑素有随时间变化的趋势(P＜0.05),腹腔镜组患者术后不同阶段的血浆胃动素值显著高于开腹组,而血管活性肠肽和生长抑素值显著低于开腹组,差异有统计学意义(P＜0.05),不同手术方式与时间的交互效应对血浆胃动素、血管活性肠肽和生长抑素有影响(P＜0.05)。两组患者并发症发生率比较,差异无统计学意义。结论 LADG在减少术中出血量、减小手术切口、缩短住院时间、降低机体炎性反应、促进胃肠功能恢复等方面具有明显的优势。     

青藤碱联合顺铂对顺铂耐药Hela细胞株增殖凋亡的作用

 目的 探讨青藤碱联合顺铂对顺铂耐药Hela细胞株增殖凋亡的作用。方法 取对数期Hela细胞,建立顺铂耐药模型,分为对照组、青藤碱组、激活剂组、青藤碱联合激活剂组。对照组不处理,青藤碱组加入青藤碱(40 μmol/L终浓度),激活剂组加入Notch信号通路配体Jagged1蛋白(500 ng/ml),青藤碱联合激活剂组加入青藤碱(40 μmol/L终浓度)+Jagged1蛋白(500 ng/ml)。MTT法检测不同浓度顺铂对各组细胞的增殖抑制率;流式细胞术检测细胞凋亡率;Western blot法检测细胞神经源性基因Notch同源蛋白1(Notch1)、信号转导及转录激活子3(STAT3)、发状分裂相关增强子1(Hes1)蛋白表达。结果 与对照组比较,青藤碱组不同顺铂浓度对细胞增殖抑制率升高,IC₅₀降低,激活剂组不同顺铂浓度对细胞增殖抑制率降低,IC₅₀升高(P＜0.05);与青藤碱组比较,青藤碱联合激活组不同顺铂浓度对细胞增殖抑制率降低,IC₅₀升高(P＜0.05);与激活剂组比较,青藤碱联合激活组不同顺铂浓度对细胞增殖抑制率升高,IC₅₀降低(P＜0.05);与对照组比较,青藤碱组凋亡率升高(P＜0.05),激活剂组凋亡率降低(P＜0.05);与青藤碱组比较,青藤碱联合激活组凋亡率降低(P＜0.05);与激活剂组比较,青藤碱联合激活组凋亡率升高(P＜0.05);与对照组比较,青藤碱组Notch1、Stat3、Hes1蛋白表达量降低(P＜0.05),激活剂组Notch1、Stat3、Hes1蛋白表达量升高(P＜0.05);与青藤碱组比较,青藤碱联合激活剂组Notch1、Stat3、Hes1蛋白表达量升高(P＜0.05);与激活剂组比较,ATL联合转染组Notch1、Stat3、Hes1蛋白表达量降低(P＜0.05)。结论 青藤碱可提高化疗药物对宫颈癌细胞的增殖抑制率,并促进其凋亡,从而减弱宫颈癌细胞化疗耐药性,可能通过抑制Notch1/STAT3信号通路来实现。     

miR-320a调控非小细胞肺癌细胞的上皮细胞间质化过程研究

 目的 探讨miR-320a对非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer, NSCLC)细胞上皮细胞间质化过程的调控作用及其可能的作用机制。方法 选取2017-07至2018-12于菏泽市立医院住院并进行手术治疗的NSCLC患者60例,术中取切除的癌组织和癌旁组织,RT-PCR和Western Blot检测癌组织和癌旁组织miR-320a和FoxM1表达;miR-320a mimics、miR-320a NC和miR-320a inhibitor转染A549细胞,24 h后划痕实验和Transwell小室实验检测细胞迁移、侵袭能力,双荧光素酶报告基因系统预测miR-320a与FoxM1的靶向关系,Western Blot检测FoxM1、E-Cadherin和Vimentin蛋白表达。结果 癌旁组织内miR-320a的表达高于癌组织(P<0.001),FoxM1的阳性细胞率低于癌组织(P<0.001);miR-320a NC组细胞迁移和侵袭能力低于miR-320a mimics组(P<0.001),而高于miR-320a inhibitor组(P<0.001);miR-320a可靶向下调FoxM1的表达水平;FoxM1-WT A549细胞中,miR-320a mimics组细胞E-cadherin表达显著高于miR-320a NC组(P<0.001),Vimentin表达显著低于miR-320a NC组(P<0.001);miR-320a inhibitor组细胞E-cadherin表达显著低于miR-320a NC组(P<0.001),Vimentin表达显著高于miR-320a NC组(P<0.001)。结论 miR-320a在NSCLC中可能作为抑癌基因发挥作用,这种作用可能是通过靶向抑制FoxM1的表达,从而抑制NSCLC细胞的上皮细胞间质化过程而实现的。     

COL6A2基因在胃癌中的表达及临床意义

 目的 探讨胃癌组织中Ⅵ型胶原蛋白α2链(collagen type Ⅵ α2 chain ,COL6A2)的表达情况、临床意义及可能的作用机制。方法 采用免疫组化法检测62例胃癌组织及配对的癌旁组织中COL6A2蛋白的表达情况,统计分析COL6A2蛋白与患者临床病理特征之间的相关性。利用Kaplan-Meier法绘制生存曲线图,并用Kaplan-Meier Plotter 在线数据集进行生存验证。下载癌症基因组图谱(the cancer genome atlas,TCGA)数据库中的胃癌表达数据,分析COL6A2与上皮间质转化(epithelial mesenchymal transition,EMT)相关基因表达的相关性。并运用基因探针富集分析(gene set enrichment analysis,GSEA)探究COL6A2在胃癌中的可能作用机制。结果 COL6A2在胃癌组织中的阳性表达率显著高于配对癌旁组织(43.5% vs. 25.8%,P=0.038),与淋巴结转移,远处转移及TNM分期显著相关,差异有统计学意义(P<0.05)。生存分析及Kaplan-Meier Plotter均提示高表达COL6A2的胃癌患者生存时间较短。COL6A2是影响胃癌患者的独立预后因素(HR=2.339,95%CI: 1.150~4.757,P=0.019)。相关性分析发现,COL6A2与EMT相关蛋白的表达密切相关;GSEA结果显示,高表达COL6A2样本主要富集的基因集中包括TGF-beta信号通路及MAPK信号通路等经典肿瘤信号通路。结论 COL6A2在胃癌组织中呈显著高表达,且与预后不良有关,可作为判断胃癌患者预后的潜在生物标志物。     

模拟正畸静压力刺激牙周膜干细胞增殖的TGFβ/STAT信号通路探讨

 目的 探讨模拟正畸静压力刺激牙周膜干细胞增殖的TGFβ/STAT信号通路参与机制,为相关研究提供参考。方法 体外培养牙周膜干细胞至生长状态良好后加压处理(100 kPa)不同时间(1、6、12 h),Western blotting法检测细胞凋亡相关蛋白及TGFβ/STAT信号通路蛋白的表达。结果 体外培养的牙周膜干细胞具有多向分化能力,加压处理1 h和6 h后细胞Bax明显增强(0.34±0.05 vs 0.42±0.08, P<0.05)而Bcl-2水平明显减弱(0.33±0.05 vs 0.29±0.05, P<0.05),TGFβ/STAT信号通路蛋白TGFβ(0.34±0.06 vs 0.39±0.07, P<0.05)及STAT2表达明显增强(0.32±0.06 vs 0.43±0.08, P<0.05),而处理12 h干细胞的上述蛋白表达差异无统计学意义(P>0.05)。结论 模拟正畸静压力刺激可明显抑制体外培养的牙周膜干细胞的增殖过程,其可能与TGFβ/STAT信号通路异常有关。     

有氧运动对自发性高血压大鼠肾脏纤维化的影响

 目的 探讨有氧运动对自发性高血压大鼠(SHR)肾脏纤维化的影响并探讨肾小管上皮－间质转化(EMT)在其间的作用机制。方法 将10只Wistar-Kyoto大鼠作为正常血压对照组(WKY),30只雄性SHR按照随机数字表法分为高血压安静组(SHR-S)和高血压运动组(SHR-E),每组15只。WKY和SHR-S组在鼠笼内安静饲养,SHR-E组进行8周跑台运动。实验后,利用无创血压仪检测尾动脉血压;测定24 h尿蛋白(UP)、血尿素氮(BUN)和血清肌酐(SCr)含量评价肾功能;Masson染色进行肾脏病理组织学观察并获取纤维化指数(FI);免疫印迹测定转化生长因子β₁(TGF-β₁)、磷酸化Smad2/3(p-Smad2/3)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)和E-钙黏蛋白(E-CA)表达量。结果 与WKY组比较,SHR-S组血压[SBP:(177.3±17.2) mmHg vs. (110.6±13.3)mmHg,P<0.05;DBP:(108.1±6.3) mmHg vs. (75.6±4.9) mmHg,P<0.05;MAP:(131.1±7.4) mmHg vs. (87.3±4.7) mmHg,P<0.05]、肾脏FI[(7.87±1.89)% vs. (0.43±0.05)%,P<0.05]、UP[(197.3±41.6) mg/24 h vs. (89.2±9.5) mg/24 h,P<0.05]、BUN[(14.3±2.9) mmol/L vs. (4.9±1.0) mmol/L,P<0.05]和SCr[(98.6±10.1) μmol/L vs. (35.8±4.3) μmol/L,P<0.05]升高,TGF-β₁、p-Smad2、p-Smad3和α-SMA蛋白表达上调(P<0.05),E-CA蛋白表达下调(P<0.05);与SHR-S组比较,SHR-E组血压[SBP:(152.3±14.2) mmHg vs. (177.3±17.2) mmHg,P<0.05;DBP:(93.1±9.7) mmHg vs. (108.1±6.3) mmHg,P<0.05;MAP:(112.8±7.9) mmHg vs. (131.1±7.4) mmHg,P<0.05]、肾脏FI[(3.02±0.91)% vs. (7.87±1.89)%,P<0.05]、UP[(127.9±25.7)mg/24 h vs. (197.3±41.6) mg/24 h,P<0.05]、BUN[(6.8±1.7) mmol/L vs. (14.3±2.9) mmol/L,P<0.05]和SCr[(50.3±6.0) μmol/L vs. (98.6±10.1) μmol/L,P<0.05]下降,TGF-β₁、p-Smad2、p-Smad3和α-SMA蛋白表达下调(P<0.05),E-CA蛋白表达上调(P<0.05)。结论 有氧运动可能通过调控TGF-β₁/Smad信号途径抑制高血压肾病大鼠肾小管EMT,进而改善肾脏纤维化并提高肾功能。     

早期大剂量地塞米松对挤压综合征大鼠模型心肌特异性损伤的疗效

 目的 评估早期大剂量地塞米松对挤压综合征大鼠模型心肌特异性损伤的疗效。方法 将Wistar大鼠随机分为4组。空白(Sham)组、对照(CS)组、生理盐水(NS)组和地塞米松(DEX)组,每组20只。CS组造模后不做任何处理;DEX组和NS组造模后在解压前即刻注射1 mg/kg地塞米松和等体积的生理盐水;Sham组对正常Wistar大鼠无造模及药物干预,行麻醉、取血和手术处理。各组收集不同时间点的血液和组织学样本。结果 心肌损伤观察指标:(1)血清cTnI OD值,解压后3 h各组间差别无统计学意义。6 h时3个处理组血清cTnI均较Sham组显著上升,CS组为(0.246+0.028),NS组为(0.202+0.033),DEX 组为(0.178+0.017),差异有统计学意义(P<0.01);NS组和DEX组均低于CS组,NS组和DEX组之间差异无统计学意义。12 h时3个处理组均高于Sham组,差异有统计学意义(P<0.01);各处理组间无统计学差异。24 h时CS组和NS组高于Sham组,P<0.05;DEX组与Sham组相比差异无统计学意义;(2)心肌细胞凋亡率CS组、NS组和DEX组各时间点均高于Sham组,差异有统计学意义(P<0.01)。3 h时NS组和DEX组低于CS组,差异有统计学意义(P<0.01),NS组和DEX组间差异无统计学意义12~24 h时间段,NS组和CS组差异无统计学意义,DEX显著低于NS和CS组,差异有统计学意义(P<0.01);(3) 心肌细胞HE染色 Sham组大鼠心肌组织正常。CS组中可见充血性改变,随时间加重。NS组和DEX组充血水肿均有不同程度的减轻,DEX组减轻更明显。结论 挤压综合征大鼠存在心肌细胞的特异性损伤,大剂量的地塞米松和与之等体积的生理盐水扩容均能改善这一现象,地塞米松明显优于生理盐水单纯扩容。大剂量糖皮质激素可能通过抑制全身炎性反应从而减轻挤压综合征大鼠的心肌损伤。