骨髓细胞的培养

本实验从新西兰白兔分离出骨髓细胞，制成单细胞悬液后，进行细胞培养，培养４天，可见少量梭形及三角形细胞，７天，细胞克隆形成，１６天时，细胞汇合成层，按１：３的比例传代，７天传代一次，观察细胞的形态，排列及增殖情况，从细胞生长曲线可以看出，接种第一天细胞基本无增长，第２～６天，细胞增长明显７天后细胞生长又趋缓慢。本实验结果表明兔骨髓细胞体培养的可行性。     

胎儿颈部软组织厚度的超声测量

目的　建立胎儿颈部软组织厚度 (nuchalskinfoldthickness ,NT)的正常参考值 ,以便为产前超声诊断胎儿染色体异常提供参照。方法　经腹超声测量 3 2 0 3例中晚孕期胎儿颈部软组织厚度 ,并进行统计分析。结果　初步得出各孕周胎儿NT的参考值范围。NT随着孕周增加而增长 ,其回归方程 :NT =-1.44 8+0 .40 1×孕周 (r =0 .790 ,P <0 .0 0 0 1)。结论　NT的变化遵循胎儿发育的规律 ,有其本身的固定图像特征。本文提出的各孕周的NT超声测值 ,对胎儿染色体异常的筛查有重要参考价值。其敏感性为 66.67% ,特异性为 95 .0 6% ,准确性为 95 %。     

高频超声在玻璃体病变诊断中的应用

目的:探讨高频超声在玻璃体病变诊断中的临床应用价值。方法:选取2012年1月至2016年3月在沈阳市第四人民医院确诊的70例玻璃体病变患者作为研究对象并进行回顾性研究,利用常规超声检查观察玻璃体病变的位置、内部回声、形态、边界、运动及后运动情况,利用彩色多普勒超声和频谱多普勒超声检查观察、判断玻璃体病变内部和边缘的血供情况,将高频超声检查的结果和手术结果进行对比分析。结果:高频超声表现,视网膜脱离:玻璃体内条状或类似“V”形的条带状回声,其上可见与视网膜中央动、静脉相延续的彩色血流信号;球内异物:玻璃体内强回声;视网膜下出血:眼球后极部扁平性隆起病变,病变表面可探及彩色血流信号,病变内部无彩色血流信号;晶状体脱位:玻璃体内部不同位置的类似椭圆形异常回声,周边部呈强回声,内部呈无回声区,高频超声检查结果与手术结果相符合的例数为视网膜脱离25例,球内异物15例,视网膜下出血19例,晶状体脱位7例,正确率为94.3%(66/70)。结论:高频超声对玻璃体病变的诊断正确率较高,可为眼科临床诊断和治疗提供可靠的影像学依据。     

百里醌类似物ATQTHB对肺癌细胞株A549增殖与凋亡的影响

目的 研究人工合成百里醌类似物ATQTHB对肺癌细胞A549的增殖抑制和诱导凋亡作用。方法 将细胞分为5组：空白对照组、A549细胞组、A549细胞+ATQTHB干预(400μg/mL)组、人正常肺上皮细胞(BEAS-2B)组、BEAS-2B细胞+ATQTHB干预组。采用CCK-8法分析细胞增殖抑制情况,采用流式细胞术检测细胞凋亡水平,采用Western blot检测凋亡相关蛋白Bcl-2和Bax表达水平。结果 与A549细胞组相比,400μg/mL ATQTHB干预对A549细胞增殖具有显著抑制作用(P<0.05);ATQTHB干预后,人正常肺上皮细胞BEAS-2B增殖与未干预细胞间差异无统计学意义(P>0.05);与A549细胞组相比,A549细胞+ATQTHB干预组的细胞凋亡率显著增加(P<0.05),抑制凋亡蛋白Bcl-2表达减少(P<0.05),促凋亡蛋白Bax表达增加(P<0.05);与BEAS-2B细胞组相比,BEAS-2B细胞+ATQTHB干预组的细胞凋亡率无显著改变(P>0.05),Bcl-2和Bax的蛋白表达水平差异无统计学意义(...     

黄体支持方案及时间对宫腔内人工授精妊娠成功率的影响

目的探讨排卵障碍的不孕妇女行宫腔内人工授精时用促性腺激素释放激素激动剂(GnRHa)诱导卵泡成熟排卵后,采取不同的黄体支持方案与时间对妊娠成功率的影响。方法对2011至2014年因排卵障碍给予来曲唑/FSH促排卵行宫腔内人工授精的不孕女性126例,卵泡长至直径18~20 mm后用GnRHa诱发卵泡成熟排卵,24~36 h后行夫精宫腔内人工授精(IUI),根据排卵后采用的不同的排卵方案及时间分为2组,A组:排卵后第3天给予地屈孕酮10 mg,口服,3次/d,持续至孕10周;B组:排卵后即给予地屈孕酮10 mg,口服,2次/d至孕10周;观察指标:GnRHa注射日子宫内膜厚度及雌激素水平、宫腔内人工授精术中注入宫腔内的前向运动精子数、卵巢过度刺激综合征(OHSS)发生率、多胎率、临床妊娠率。结果 2组间GnRHa注射日子宫内膜厚度及雌激素水平和IUI术中注入的前向精子数无明显差异(P>0.05),但A组卵巢过度刺激综合征和多胎的发生率明显降低(P<0.05),而其临床妊娠成功率明显提高(P<0.05)。结论排卵障碍的不孕女性行IUI时,GnRHa诱发卵泡成熟,排卵前行夫精宫腔内人工授精,于排卵后第3天开始用地屈孕酮10 mg,3次/d,至孕10周,此种黄体支持方案明显提高妊娠成功率,安全有效。     

威尼克何德霉致儿童掌黑癣一例

报告1例4岁女性患儿,右手掌小鱼际褐色斑片2个月。皮损真菌镜检见棕色分隔、分枝菌丝。皮损真菌培养见黑色酵母样菌落生长。基因测序为威尼克何德霉。诊断:掌黑癣。给予1%联苯苄唑乳膏每日1次外用,0.1%他扎罗汀乳膏每晚1次外用,2周后皮损完全消退,随访1个月未见复发。     

壳多糖基质网架复层组织工程皮肤的动物移植实验

背景：治疗由烧伤或疾病等引起的大面积全层皮肤缺失最为常见的和有效的方法就是皮肤移植修复，但目前面临的最大障碍是皮肤供体不足。以自体皮肤细胞作为种子细胞构建的组织工程皮肤是解决这一矛盾的最理想途径。目的：探讨组织工程皮肤动物移植实验的效果。设计：随机对照实验。单位：一所大学再生医学科学研究所及皮肤科。材料：实验于1998—09／2001—07在吉林大学细胞工程研究室完成。选用新生Wistar大鼠20只；8周龄雄性裸鼠24只。方法：应用以壳多糖为基质网架构建的组织工程化复层人工皮肤，对裸鼠大面积(直径20mm)全层皮肤缺损模型进行移植修复。24只8周龄裸鼠分为组织工程皮肤移植(artificial skin，AS)组、壳多糖膜覆盖物(chitosan，CH)组及对照组(control gmup，CG)，术后进行大体观察，并在3，7，14和21d应用组织学、红外热像扫描分析等手段对修复组织进行动态监测。主要观察指标：①实验动物大体观察情况。②修复区血供情况的红外热像观察。③组织学观察。结果：AS组在移植第3天，移植的组织工程皮肤与自体皮肤能够很好地融合，有少量毛细血管长人移植物，皮肤移植物颜色与自体皮肤颜色接近；随着时间的延长，移植物中毛细血管的数量逐渐增多，表皮层清晰可见基底层、棘细胞层、颗粒层和角质层，角化现象加强，有角化物脱落；真皮层细胞数量增多，网架逐渐降解，分泌的细胞外基质成份增多；第14天，创面基本愈合；修复区皮肤颜色与正常皮肤颜色非常接近，瘢痕很小，无需进行二次植皮。至移植的第14天，CH组结痂未完全脱落，创面未愈合，颜色较AS组深。对照组的结痂脱落，创面大而深。颜色深红。结论：以壳多糖为基质网架构建的组织工程皮肤具有良好的组织相容性，可应用于皮肤缺损的移植修复。     

角质形成细胞的培养及其表皮生长因子受体表达

目的:在成功分离人皮肤角质形成细胞的基础上,观察表皮生长因子受体在人皮肤角质形成细胞中的表达情况。方法:实验于2006-3/10在北京大学深圳医院中心实验室进行。采用dispase Ⅱ-trypsin两步消化法获取表皮基底层细胞,用小鼠皮肤成纤维母细胞滋养层和黄素腺嘌呤二核苷酸培养液进行培养。小鼠皮肤成纤维母细胞的预处理:向对数生长期的小鼠皮肤成纤维母细胞培养液中加入丝裂霉素C至终浓度为4mg/L,37℃下培养4h,弃去培养液,用D-Hank’s液洗3次,加入浓度为0.25g/L的胰蛋白酶消化,分离出细胞,离心(200g,5min),用黄素腺嘌呤二核苷酸培养液悬浮细胞,计数,以5.0×104/cm2的密度种于培养皿内,37℃、体积分数0.05的CO2培养箱下培养。角质形成细胞的培养:将分离的角质形成细胞悬浮在黄素腺嘌呤二核苷酸培养液中,以2.0×104/cm2的密度接种在前1天经丝裂霉素C处理的小鼠皮肤成纤维母细胞滋养层上,37℃、体积分数0.05的CO2培养箱下培养。24h换液,以后每3d换1次液。采用免疫细胞化学的方法检测表皮生长因子受体的表达,采用复合逆转录聚合酶链反应检测角质形成细胞中表皮生长因子受体mRNA的表达。结果:采用dispaseⅡ消化法分离了真皮和表皮,获得较多的角质形成细胞,可以避免真皮成纤维细胞的污染。人皮肤角质形成细胞在黄素腺嘌呤二核苷酸培养液中培养5d可见明显的集落,约10d可长满单层。免疫细胞化学显示表皮生长因子受体在细胞表面有明显的表达,复合逆转录聚合酶链反应显示表皮生长因子受体mRNA有明显的表达。结论:用小鼠皮肤成纤维母细胞滋养层和黄素腺嘌呤二核苷酸培养液可以较好地培养原代人皮肤角质形成细胞,表皮生长因子受体在细胞表面有明显的表达,这些结果为与表皮生长因子受体相关的皮肤病(如银屑病)的研究奠定了基础。