薏苡仁注射液提高人肝癌细胞Bel-7402放射敏感性的机制研究

目的 观察薏苡仁注射液对人肝癌细胞Bel-7402活性和放射敏感性的影响。方法 将Bel-7402细胞分为空白对照组、薏苡仁组、单纯照射组和联合处理组。采用X射线照射,同时联合薏苡仁注射液处理,采用四甲基偶氮唑盐（MTT）比色法检测细胞增殖活性的变化,流式细胞术观察细胞凋亡率的变化,应用RT-PCR和Western blot法检测肝癌细胞中Bax、Bcl-2 mRNA和蛋白的表达变化。采用细胞克隆形成法观察存活细胞数,单击多靶模型拟合剂量存活曲线,计算细胞平均致死剂量（D₀）值。结果 薏苡仁注射液和X射线对肝癌细胞的生长均有明显抑制作用,其中联合处理组的细胞抑制率明显高于薏苡仁组和单纯照射组（8 Gy）,差异有统计学意义（t=17.03、11.26,P<0.05）;与薏苡仁组和单纯照射组相比,联合处理组的细胞凋亡率明显增加（t=24.80、20.19,P<0.05）。薏苡仁组、单纯照射组及联合处理组Bax的mRNA和蛋白水平依次升高（F=437.92、67.91,P<0.05）,而Bcl-2的mRNA和蛋白水平逐渐降低（F=31.18、48.50,P<0.05）。单纯照射和联合处理组D₀值分别是4.27和3.34,放射增敏比为1.27。结论 薏苡仁注射液可能通过凋亡相关因子Bax和Bcl-2抑制肝癌细胞生长,诱导凋亡,具有放射增敏作用。     

阿帕替尼对脑胶质瘤细胞放射敏感性的影响

目的 研究小分子酪氨酸激酶抑制剂甲磺酸阿帕替尼对脑胶质瘤细胞U87MG放射敏感性的影响,并初步探讨其作用机制。方法 将胶质瘤细胞U87MG分为空白对照组、阿帕替尼组、单纯照射组、阿帕替尼联合照射组。CCK-8法检测不同浓度阿帕替尼（5、10、20、40、80 μmol/L）对细胞增殖的影响;创伤愈合实验和侵袭实验检测阿帕替尼对胶质瘤细胞的迁移及侵袭能力的影响;平板克隆实验检测阿帕替尼对脑胶质瘤细胞的放射敏感性的影响;流式细胞术检测细胞凋亡情况;采用Western blot检测Bax、Bcl-2蛋白表达。结果 阿帕替尼对胶质瘤细胞U87MG的增殖具有明显抑制作用,且存在时间-剂量的依赖性。与单纯照射组比较,阿帕替尼联合照射组能明显抑制细胞的增殖、迁移和侵袭,差异有统计学意义（t=9.857、18.704、4.167,P<0.05）。与单纯照射组比较,阿帕替尼联合照射组的D₀、D_q和SF₂均下降,放射增敏比（SER_D0）为1.3。与单纯照射组比较,阿帕替尼联合照射组的细胞凋亡率增加,Bcl-2蛋白表达降低,Bax蛋白表达升高,差异有统计学意义（t=16.187、8.890、5.222,P<0.05）。结论 阿帕替尼能够抑制胶质瘤细胞增殖、迁移和侵袭,并促进细胞凋亡,增加胶质瘤细胞的放射敏感性。     

聚腺苷二磷酸核糖聚合酶抑制剂对乳腺癌细胞放射敏感性的影响及其机制研究

目的 观察聚腺苷二磷酸核糖聚合酶(PARP)抑制剂尼拉帕利及帕米帕利对乳腺癌MCF-7及MDA-MB-436细胞放射敏感性的影响,并对其机制进行探讨。方法 将乳腺癌MCF-7及MDA-MB-436细胞分为空白对照组、尼拉帕利组、帕米帕利组、单纯照射组、尼拉帕利联合照射组、帕米帕利联合照射组。CCK-8法检测药物对细胞增殖的影响,克隆形成实验检测药物对细胞放射敏感性的影响,流式细胞术分析药物联合照射对细胞周期和凋亡的影响,免疫荧光法检测细胞内γ-H2AX焦点数量的变化,qPCR法及Western blot实验检测细胞中FANCG、Bax、Bcl-2 mRNA及蛋白的表达。结果 尼拉帕利及帕米帕利均能抑制乳腺癌MCF-7及MDA-MB-436细胞的增殖,呈时间-剂量依赖性。随着照射剂量的增加,两种细胞的放射生物学参数D₀、D_q、SF₂逐渐减小,而放射增敏比SER_D0、SER_Dq逐渐增大。尼拉帕利联合照射组及帕米帕利联合照射组与空白对照组相比,G₂/M期比例增加(t_MCF-7=41.66、44.08,P<0.05;t₄₃₆=24.69、18.91,P<0.05); G₀/G₁期比例减少(t_MCF-7=8.67、29.61,P<0.05;t₄₃₆=26.39、29.12,P<0.05);细胞凋亡率显著增加(t_MCF-7=11.17、11.71,P<0.05;t₄₃₆=42.68、15.89,P<0.05)。与空白对照组相比,MCF-7细胞的单纯照射组、尼拉帕利联合照射组在射线照射后2 h,细胞核内γ-H2AX焦点数量显著增加(t=8.89、21.72,P<0.05);照射后24 h单纯照射组细胞核内γ-H2AX焦点数量基本恢复照射前水平,而尼拉帕利联合照射组细胞核内γ-H2AX焦点数量仍大量存在(t=8.82,P<0.05)。 尼拉帕利联合照射组与空白对照组比较,MCF-7细胞的FANCG、Bcl-2 mRNA表达明显减少(t_FANCG=14.07,P<0.05;t_Bcl-2=29.21,P<0.05);Bax mRNA表达明显增多(t=8.90,P<0.05);与空白对照组相比,尼拉帕利联合照射组MCF-7细胞的FANCG、Bcl-2蛋白水平显著下降(t_FANCG=7.09,P<0.05;t_Bcl-2=10.24,P<0.05);Bax蛋白水平显著升高(t=2.90,P<0.05)。结论 PARP抑制剂尼拉帕利及帕米帕利能增加乳腺癌MCF-7及MDA-MB-436细胞的放射敏感性,其机制可能与下调FA-BRCA通路中FANCG的表达,调节凋亡相关基因,抑制DNA损伤修复有关。     

低温等离子体联合辐射对三种癌细胞系放射增敏效应的研究

目的 探讨低温等离子体对人肝癌细胞系HepG2、非小细胞肺癌细胞系A549及人宫颈癌细胞系HeLa的放射增敏作用及其机制。方法 应用克隆形成实验观察低温等离子体对3种细胞的放射增敏作用;流式细胞仪分析3种细胞周期分布、凋亡率及活性氧含量;Western blot法检测单纯照射(R组)、单纯等离子体作用(P组)及其联合辐射(P+R组)对3种细胞中Bcl-2、Caspase-3蛋白表达的影响。结果 低温等离子体对HepG2、A549及HeLa细胞均有放射增敏作用,放射增敏比(SER_D0)分别为1.28、1.32、1.29。HepG2、A549及HeLa细胞P+R组G₂/M期比例、凋亡率及活性氧含量与R组比较均明显增高(t_G2/M期=9.52、8.24、9.53,P<0.05;t_凋亡率=10.67、38.56、6.74,P<0.05;t_{活性氧含量}=9.41、15.42、13.53,P<0.05)。HepG2和A549细胞P+R组G₂/M期比例、凋亡率及活性氧含量与P组比较均明显升高(t_G2/M期=8.75、20.37,P<0.05;t_凋亡率=8.43、9.99,P<0.05;t_{活性氧含量}=4.82、5.27,P<0.05)。3种癌细胞中P+R组Bcl-2蛋白表达较R组降低,而Caspase-3蛋白表达升高。结论 低温等离子体可提高HepG2、A549及HeLa细胞系的放射敏感性,其对HepG2及A549细胞系的放射增敏机制可能与抑制亚致死损伤修复,使细胞周期阻滞在G₂/M期,以及提高细胞内ROS水平诱导细胞凋亡有关。     

FOXO4-DRI多肽增加非小细胞肺癌细胞放射敏感性研究

目的 探讨FOXO4-DRI多肽对非小细胞肺癌（NSCLC）细胞放射敏感性的影响。方法 为检测FOXO4-DRI对NSCLC细胞的影响,将H460和A549细胞按照射与给药方式分为对照组、FOXO4-DRI组、单纯照射组、照射+FOXO4-DRI组。采用剂量率为0.99 Gy/min γ射线单次照射,在照射前10 min对H460细胞给予FOXO4-DRI 6 μmol/L,A549细胞给予FOXO4-DRI 30 μmol/L。采用CCK-8法检测照射后24、48和72 h细胞存活率;用结晶紫染色法检测细胞克隆形成数目;用伤口愈合实验检测细胞迁移程度;用流式细胞术检测细胞凋亡和细胞周期的改变。结果 与对照组相比,FOXO4-DRI组H460细胞和A549细胞存活率降低（t=1.06~50.75,P<0.05）、迁移率降低（t=33.37~139.10,P<0.05）,克隆形成数目减少（t=5.20~93.48,P<0.05）。FOXO4-DRI诱导了细胞凋亡（t=2.95~42.00,P<0.05）,导致G₀/G₁细胞周期阻滞以及G₂/M期细胞比例下降（t=3.50~31.59,P<0.05）。与照射组相比,FOXO4-DRI可进一步降低辐照后的细胞存活率（t=2.94~23.40,P<0.05）,减少辐照后克隆形成数目（t=8.43~34.00,P<0.05）和细胞迁移率（t=5.25、7.56,P<0.05）,增加细胞凋亡（t=9.20~11.52,P<0.05）。照射+FOXO4-DRI组细胞,G₂/M期细胞比例进一步下降,S期细胞增加（t=3.85~17.62,P<0.05）。结论 FOXO4-DRI多肽通过促进细胞凋亡,降低细胞增殖能力和迁移率,可以提高NSCLC细胞放射敏感性。     

塞来昔布对正常脑胶质细胞和脑胶质瘤细胞放射增敏效应的比较及其机制

目的 探讨塞来昔布对正常少突胶质细胞（oln93）及脑胶质瘤细胞（u373）的放射增敏作用及其作用机制。方法 将两种细胞按空白处理、单独接受塞来昔布或X射线、塞来昔布联合X射线4种不同处理方式分为对照组、给药组、照射组和联合组,MTT法、克隆形成法对比两种细胞的增殖和放射敏感性,流式法测细胞的周期分布,Western blot法分析相关蛋白表达。结果 与未加药物相比,塞来昔布能抑制oln93细胞和u373细胞生长（t=2.215~30.996,P<0.05;t=0.383~11.732,P<0.05）,但相同药物浓度下抑制两种细胞差异无统计学意义。放射增敏比SER分别为1.13和1.21,并诱导G₀/G₁期阻滞（t=-6.1~5.141,P<0.05）。联合组与照射组比较,oln93细胞发生S期阻滞（t=-18.174,P<0.05）,CyclinA蛋白表达增加（t=-8.087,P<0.05）;u373细胞发生G₂/M期阻滞,Cyclin B1、DNA-PKcs、MRE11蛋白表达下降（t=-8.838~10.45,P<0.05）。结论 塞来昔布对u373的放射增敏作用比oln93细胞明显,其机制与调节细胞周期分布及DNA损伤修复有关。     

Stattic对乏氧食管癌细胞放射增敏作用机制的研究

目的 观察Stattic对乏氧人食管癌ECA109细胞的体外放射增敏作用,并探讨其可能机制。方法 应用四甲基偶氮唑盐比色法（MTT）检测Stattic对食管癌ECA109细胞的毒性,细胞克隆形成法确定1.0 μmol Stattic对ECA细胞放疗敏感性的影响,流式细胞法检测细胞的凋亡率,γ-H2AX免疫荧光染色法检测不同时间点下ECA109细胞中双键断裂情况,Western blot检测Stattic照射前后STAT3、pSTAT3、HIF-1α、VEGF蛋白的表达。结果 Stattic对ECA109细胞具有毒性,24 h IC₅₀为5.499 μmol/L,克隆形成实验通过单击多靶模型拟合细胞的存活曲线,计算出1.0 μmol/L Stattic的放射增敏比SER_Do分别为1.20（常氧）和1.28（乏氧）,γ-H2AX荧光染色提示Stattic能增加双键断裂情况,尤其是在照射之后0.5 h最为明显。照射联合给药组的乏氧细胞凋亡率较单独乏氧照射组的细胞凋亡增加（t=7.33,P < 0.05）,Western blot显示乏氧食管癌细胞株pSTAT3、乏氧诱导因子1α（HIF-1α）、血管内皮生长因子（VEGF）蛋白的表达升高,Stattic作用24 h表达显著下调。结论 Stattic对乏氧人食管癌细胞株ECA109细胞的毒性呈剂量依赖性,放射增敏作用明显,随药物剂量的增加而增强,其机制可能与抑制pSTAT3、HIF-1α和VEGF蛋白表达有关。     

阿帕替尼对食管癌Kyse-150细胞放射敏感性影响的实验研究

目的 观察阿帕替尼对食管癌Kyse-150细胞放射敏感性的影响,并初步探讨其作用机制。方法 将食管癌Kyse-150细胞分为空白对照组、阿帕替尼组、单纯照射组、阿帕替尼联合照射组。CCK-8法检测不同浓度阿帕替尼（0、5、10、20、30、40 μmol/L）对细胞增殖的影响;克隆形成法检测不同浓度阿帕替尼（0、10、20、40 μmol/L）对细胞放射敏感性的影响;流式细胞术分析阿帕替尼（20 μmol/L）联合射线（4 Gy）对细胞周期和细胞凋亡的影响。结果 阿帕替尼能抑制Kyse-150细胞的增殖,且呈剂量-时间依赖性（r=0.89~0.96,P<0.05）;随着阿帕替尼浓度的增加,Kyse-150细胞的放射生物学参数D₀、D_q、SF₂值逐渐减小,而放射增敏比SER_D0值逐渐增加。阿帕替尼联合照射组分别与空白对照组、单纯照射组及阿帕替尼组比较,细胞凋亡率均显著增加,差异具有统计学意义（t=12.36、5.99、15.47,P<0.05）。与空白对照组比较,阿帕替尼组、单纯照射组及阿帕替尼联合照射组G₂/M期比例均增高,差异均具有统计学意义（t=8.81、39.69、20.61,P<0.05）。阿帕替尼组、阿帕替尼联合照射组分别与空白对照组及单纯照射组相比,S期比例均增高,差异均具有统计学意义（t=6.06、3.82、8.81、6.24,P<0.05）。而阿帕替尼组与阿帕替尼联合照射组相比,S期比例差异无统计学意义（P> 0.05）。结论 阿帕替尼能增加食管癌Kyse-150细胞的放射敏感性,其机制可能与抑制细胞增殖、促进细胞凋亡及诱导细胞周期再分布有关。     

二甲双胍对不同雌激素受体状态乳腺癌细胞的放射增敏作用及其机制研究

目的 探讨二甲双胍对不同雌激素受体（ER）状态乳腺癌细胞MCF-7和MDA-MB-231是否具有放射增敏作用,并对其机制进行初步探索。方法 取指数生长期的人乳腺癌细胞MCF-7和MDA-MB-231,分为对照组、二甲双胍组、单纯照射组和二甲双胍联合照射组。采用MTT法测定二甲双胍对细胞的增殖抑制作用;克隆形成实验评估二甲双胍对乳腺癌细胞的放射增敏作用;碘化丙啶（PI）染色法检测细胞周期;Hoechst 33342染色法检测细胞凋亡率;Western blot法检测各组p-AMPK、p-mTOR蛋白的表达情况。结果 不同浓度二甲双胍对这两种细胞均具有明显的增殖抑制作用,且呈剂量依赖性。在乳腺癌细胞MCF-7和MDA-MB-231中,二甲双胍联合照射组的D_q、D₀和SF₂值均较单纯照射组明显降低（MCF-7：t=9.305、14.528、13.708,P<0.05;MDA-MB-231：t=19.560、16.893、36.048,P<0.05）,放射增敏比（SER_D0）分别为1.29和1.21。二甲双胍联合照射组与单纯照射组相比,G₂/M期阻滞更明显（t=6.103、38.431,P<0.05）,增加了放射诱导的细胞凋亡（t=9.143、14.561,P<0.05）。在MCF-7细胞中,二甲双胍联合照射组p-AMPK的表达明显高于其他处理组（t=35.194、8.647、10.316,P<0.05）,但在MDA-MB-231细胞中,p-AMPK的表达未见明显变化（P>0.05）;而对p-mTOR蛋白的抑制作用在这两种细胞中均可见到,差异有统计学意义（MCF-7：t=80.133、31.820、11.308,P<0.05;MDA-MB-231：t=12.436、15.757、8.402,P<0.05）。结论 二甲双胍对不同ER状态乳腺癌细胞（MCF-7和MDA-MB-231）均有放射增敏作用,其作用机制可能是通过激活AMPK或非AMPK依赖的途径,抑制mTOR信号级联通路,以及增加细胞G₂/M期阻滞,诱导细胞凋亡等途径实现的。     

Ta4C3-PVP纳米片对4T1三阴性乳腺癌小鼠移植瘤的放射增敏作用

目的 研究Ta₄C₃-PVP纳米片对三阴性乳腺癌4T1细胞小鼠移植瘤的放射增敏作用。方法 于雌性BALB/c小鼠右侧腹皮下注射4T1细胞建立4T1荷瘤小鼠模型,按肿瘤体积大小均匀分为空白对照组、单纯Ta₄C₃-PVP组、单纯照射组、Ta₄C₃-PVP联合照射组。尾静脉注射20 mg/kg Ta₄C₃-PVP预处理24 h后给予8 Gy单次肿瘤局部X射线照射,测量移植瘤体积、瘤重,检测肿瘤细胞增殖标志物Ki-67蛋白表达、DNA双链断裂（DSBs）分子标志物γ-H2AX焦点形成,绘制肿瘤生长曲线并计算放射增敏系数（EF）及抑瘤率。结果 与空白对照组相比,单纯照射组、Ta₄C₃-PVP联合照射组于照射后16 d均能明显抑制肿瘤生长（t=5.41、9.59,P<0.05）、降低瘤重（t=2.67、4.40,P<0.05）,其中Ta₄C₃-PVP联合照射组的EF达1.57,抑瘤率约为64%,明显优于单纯照射组（42%）。免疫组织化学结果显示,与空白对照组相比,单纯照射组和Ta₄C₃-PVP联合照射组肿瘤细胞Ki-67蛋白表达受到明显抑制（t=5.73、8.02,P<0.05）、γ-H2AX焦点产额明显增加（t=2.97、9.86,P<0.05）,且Ta₄C₃-PVP联合照射组较单纯照射组Ki-67表达抑制更显著（t=4.75,P<0.05）、γ-H2AX焦点产额更多（t=4.42,P<0.05）。结论 Ta₄C₃-PVP纳米片可通过增加射线诱导的DNA DSBs,增强4T1荷瘤小鼠移植瘤的放射敏感性。     

黄连素对乳腺癌细胞生长、迁移和放射敏感性的影响

目的 研究黄连素对乳腺癌细胞生长、迁移和放射敏感性的影响.方法 选取人乳腺癌细胞MDA-MB-231和MCF-7,用MTT法检测细胞的生长和增殖;划痕愈合法观察细胞迁移能力;细胞流式技术测定细胞周期改变;磷脂酰丝氨酸外翻分析法检测细胞凋亡;Western blot法测定蛋白表达水平;细胞克隆形成法观察黄连素与辐射的联合作用.结果 黄连素明显抑制人乳腺癌MCF-7和MDA-MB-231细胞的生长,并显现剂量-效应和时间-效应关系,MCF-7和MDA-MB-231细胞对黄连素表现出同样的敏感性.黄连素可以诱导剂量依赖性的G0/G1期细胞阻滞,40 μmol/L的黄连素处理后MDA-MB-231和MCF-7细胞早期凋亡分别高达86.63％和66.62％,与未处理的对照组相比,差异均有统计学意义(t=75.15和43.75,P＜0.01).黄连素明显降低了细胞周期调节相关蛋白Cyclin B1和抑凋亡蛋白Bcl-2的表达水平,而增加了促凋亡蛋白Bax和Caspase-3的表达水平,但不影响细胞周期调节蛋白Cyclin D1的表达水平.低剂量(≤5μmol/L)黄连素可以明显降低细胞的迁移能力.采用单靶多击模型拟合曲线发现,与单独照射组相比,5 μmol/L黄连素预处理4h后MDA-MB-231细胞和MCF-7细胞的辐射增敏比分别为1.12和1.22.结论 黄连素通过调节细胞凋亡和细胞周期阻滞抑制乳腺癌细胞生长和迁移,并可提高乳腺癌细胞的放射敏感性.     

骨形态发生蛋白和转化生长因子—β及碱性成纤维细胞生长因？…

观察骨形态发生蛋白（ＢＭＰ）、转化生长因子－β、碱性成纤维细胞生长因子在骨折修复中的表达及分布情况,进而探讨其作用机制。方法以成年雄性新西兰兔为研究对象,制作桡骨骨折愈合模型。伤后不同时期处死取材,分别进行这和ＢＭＰ、ＴＧＦ－β和ｂＦＧＦ免疫组化染色观察。结果（１）伤后３ｄ开始形成原始骨痂。１周时肉芽组织中的间质细胞开始分化为软骨细胞,软骨形成后再进行软骨内化骨。４周时形成连接骨折端的桥接骨痂。２     

肝细胞移植实验研究中大鼠肝细胞的冻存与复苏初探

目的：以大鼠为实验对象，研究冷冻复苏及降温速率对肝细胞活率、形态和功能的影响。方法：改良Seglen门静脉－下腔静脉双插管胶原酶灌注法分离获取游离肝细胞。分别将肝细胞按B程序（渐进式降温程序：－1．5℃/min至－18℃，保持5min,-20℃/min至－80℃，投入液氮保存）；C程序（慢速线形冷冻程序：－2．5℃/min至－80℃，投入液氮保存）进行处理。2组冷冻细胞分别在液氮中冷藏3、15、30d后，40℃水浴复苏。 检测复苏肝细胞活率、形态结构、蛋白质合成功能的改变。结果：（1）B组、C 组冻存后各时间点细胞活率及3H－亮氨酸合成量较新鲜组（A组）均有明显改变。结果：（1）B组、C组冻存后各时间点细胞活率及3H－亮氨酸合成量较新鲜组（A组）均有明显下降（P＜0．001），C组明显低于B组（P＜0．005），2组各组内在不同时间点的活率及3H－亮氨酸合成量无明显差别（P＞0．05）。（2）光学显微镜下见复苏细胞与新鲜细胞无明显区别。电子显微镜下可见B、C组细胞超微结构有明显改变，但B组程度较C组轻。结论：降温速率的快慢直接关系冻存肝细胞的效果。冷冻复苏过程使细胞膜完整性受损、细胞质内内容 丢失导致细胞的复苏后活率降低、细胞功能丧失。肝细胞在液氮中保存，其活率及蛋白质合成功能并不随保存时间的延长而降低。     

Cell refractive index: Models,insights, applications and future perspectives

Cell refractive index (RI) is an intrinsic optical parameter that governs the propagation of light (i.e., scattering and absorption) in the cell matrix. The RI of cell is sensitively correlated with its mass distribution and thereby has the capability to provide important insights for diverse biological models. Herein, we review the cell refractive index and the fundamental models for measurement of cell RI, summarize the published RI data of cell and cell organelles and discuss the associated insights. Illustrative applications of cell RI in cell biology are also outlined. Finally, future research trends and applications of cell RI, including novel imaging techniques, reshaping flow cytometry and microfluidic platforms for single cell manipulation are discussed. The rapid technological advances in optical imaging integrated with microfluidic regime seems to enable deeper understanding of subcellular dynamics with high spatio-temporal resolution in real time.     

Radiation risk of tissue late effects,a net consequence of probabilities of various cellular responses

Late effects from the exposure to low doses of ionizing radiation are hardly or not at all observed in man probably due to the low values of risk coefficients that preclude statistical analyses of data from populations that are exposed to doses less than 0.2 Gy. In order to arrive at an assessment of potential risk from radiation exposure in the low dose range, the microdosimetry approach is essential. In the low dose range, ionizing radiation generates particle tracks, mainly electrons, which are distributed rather heterogenously within the exposed tissue. Taking the individual cell as the elemental unit of life, observations and calculations of cellular responses to being hit by energy deposition events from low LET type are analysed. It emerges that besides the probability of a hit cell to sustain a detrimental effect with the consequence of malignant transformation there are probabilities of various adaptive responses that equip the hit cell with a benefit. On the one hand, an improvement of cellular radical detoxification was observed in mouse bone marrow cells; another adaptive response pertaining to improved DNA repair, was reported for human lymphocytes. The improved radical detoxification in mouse bone marrow cells lasts for a period of 5–10 hours and improved DNA repair in human lymphocytes was seen for some 60 hours following acute irradiation. It is speculated that improved radical detoxification and improved DNA repair may reduce the probability of spontaneous carcinogenesis.Thus it is proposed to weigh the probability of detriment for a hit cell within a multicellular system against the probability of benefit through adaptive responses in other hit cells in the same system per radiation exposure. In doing this, the net effect of low doses of low LET radiation in tissue with individual cells being hit by energy deposition events could be zero or even beneficial. Since there was no simple additivity of equal effects from repeated exposures to equal doses and because of the potential effect of adaptive cell responses on the spontaneous evolution of malignancy in tissue, the extrapolation of risk with absorbed dose reaching down to zero, does not appear to be generally valid.     

[131I]FIAU labeling of genetically transduced, tumor-reactive lymphocytes: cell-level dosimetry and dose-dependent toxicity

Purpose Donor T cells have been shown to be reactive against and effective in adoptive immunotherapy of Epstein-Barr virus (EBV) lymphomas which develop in some leukemia patients post marrow transplantation. These T cells may be genetically modified by incorporation of a replication-incompetent viral vector (NIT) encoding both an inactive mutant nerve growth factor receptor (LNGFR), as an immunoselectable surface marker, and a herpes simplex virus thymidine kinase (HSV-TK), rendering the cells sensitive to ganciclovir. The current studies are based on the selective HSV-TK-catalyzed trapping (phosphorylation) of the thymidine analog [¹³¹I]-2′-fluoro-2′-deoxy-1-β-D-arabinofuransyl-5-iodo-uracil (FIAU) as a means of stably labeling such T cells for in vivo trafficking (including tumor targeting) studies. Because of the radiosensitivity of lymphocytes and the potentially high absorbed dose to the nucleus from intracellular ¹³¹I (even at tracer levels), the nucleus absorbed dose (D _n ) and dose-dependent immune functionality were evaluated for NIT⁺ T cells labeled ex vivo in [¹³¹I]FIAU-containing medium. Methods Based on in vitro kinetic studies of [¹³¹I]FIAU uptake by NIT⁺ T cells, D _n was calculated using an adaptation of the MIRD formalism and the recently published MIRD cellular S factors. Immune cytotoxicity of [¹³¹I]FIAU-labeled cells was assayed against ⁵¹Cr-labeled target cells [B-lymphoblastoid cells (BLCLs)] in a standard 4-h release assay. Results and conclusion At median nuclear absorbed doses up to 830 cGy, a ⁵¹Cr-release assay against BLCLs showed no loss of immune cytotoxicity, thus demonstrating the functional integrity of genetically transduced, tumor-reactive T cells labeled at this dose level for in vivo cell trafficking and tumor targeting studies.     

12C重离子束对人淋巴细胞增殖、周期和凋亡的影响

目的 探讨¹²C重离子束对人淋巴细胞增殖以及周期、凋亡的影响.方法 ¹²C重离子束照射人淋巴细胞Peng-EBV,吸收剂量分别为0(对照组)、0.5、2.0 Gy.照射后用MTS法检测细胞增殖活力,流式细胞仪检测细胞周期和细胞凋亡.结果 与对照组相比,0.5 Gy照射可以增加细胞增殖活力(t=2.66~14.45, P<0.05),而2.0 Gy照射降低了细胞活力(t=7.65~64.45, P<0.05).受照射细胞的活力存在一个恢复和下降过程,受照后48 h内,细胞数量呈增加趋势,但72 h时细胞数量下降.照射后48 h,两组细胞G₂/M期呈明显上升趋势,高于对照组(t=2.01~99.80,P<0.05),且2.0 Gy组的周期阻滞较0.5 Gy组严重;照射后30 d,细胞周期阻滞恢复到正常水平.照射后12、24、48 h,两照射组与对照组相比,细胞凋亡率差异有统计学意义(t=-3.05~-1.05,P<0.05),在照后24 h最高,48 h明显下降,30 d恢复到对照水平.结论 ¹²C离子束辐射影响人淋巴细胞增殖,诱导人淋巴细胞发生明显的G₂/M期阻滞,并且明显地促进细胞凋亡.     

蛋白酶体抑制剂MG132联合X射线对人肺腺癌细胞生长迁移和周期的影响及作用机制

目的 研究蛋白酶体抑制剂MG132联合X射线对人肺腺癌A549细胞生长、迁移、侵袭、细胞周期分布的影响及机制。方法 MTT法检测不同MG132浓度处理后不同时间肺腺癌A549细胞的增殖;克隆形成实验检测A549细胞的存活能力;划痕实验测定A549细胞的迁移能力;Transwell小室测定其侵袭能力;流式细胞术测定细胞周期分布的改变;Western blot法测定蛋白表达水平。结果 MG132明显抑制人肺腺癌A549细胞的生长,并呈现剂量-效应和时间-效应关系。MG132联合X射线对A549细胞克隆存活能力有显著抑制作用（F=554.78、954.64,P<0.01）,且加MG132组克隆存活率均低于照射组（t=4.44、12.41、3.52、6.72,P<0.05）。MG132在无毒性剂量下联合X射线可显著抑制A549细胞的迁移及侵袭能力（t=12.79,P<0.01）,并明显增加G₁期细胞阻滞（t=4.29,P<0.05）;MG132联合X射线明显降低A549细胞中基质金属蛋白酶-2,-9和G₁期相关蛋白Cyclin D1的表达水平,同时增加细胞中P53的表达。结论 MG132可以显著抑制人肺腺癌A549细胞的生长,且在无毒性剂量下联合X射线可以明显降低其转移和侵袭能力,显著增加肿瘤细胞的G₁期阻滞。     

洛伐他汀对HL-60细胞Fas抗原表达的影响

目的：观察洛伐他汀（LOV）对HL-60细胞Fas抗原表达的影响，探讨其抑制细胞增殖、诱导细胞凋亡的可能分子机制。方法：采用流式细胞仪检测HL-60细胞的细胞周期相分布，细胞凋亡率，Fas抗原表达水平。结果：4、8、16μmol／L LOV处理HL-60细胞48h后，G0／G1期细胞增多、细胞凋亡百分率增加、增殖指数降低、Fas抗原的平均荧光强度增加，与剂量呈正相关。结论：LOV对HL-60细胞有增殖抑制和诱导凋亡作用，上调节Fas抗原表达可能是其分子机制之一。     

低强度He-Ne激光照射对小鼠皮肤成纤维细胞、胸腺细胞和骨髓细胞的影响

目的观察不同照射条件的低强度He-Ne激光照射对离体培养的小鼠皮肤成纤维细胞、骨髓细胞和胸腺细胞增殖的影响。方法采用MTT法检测不同照射强度和照射时间的低强度He-Ne激光对不同细胞增殖的影响。结果结果表明在(1·108~4·433)mW/cm2功率密度下照射2~5min能促进皮肤成纤维细胞增殖,照射时间>5min各功率密度的He-Ne激光均抑制其增殖;在此功率密度范围内照射2~20min均促进骨髓细胞和胸腺细胞增殖;照射时间>60min,骨髓细胞和胸腺细胞的生长明显受抑。结论相同照射条件下低强度He-Ne激光促骨髓细胞和胸腺细胞增殖的程度较皮肤成纤维细胞高,而且皮肤成纤维细胞较另两种细胞更易于被抑制增殖。