创伤后反抑制T细胞的变化及其对细胞免疫功能的影响

创伤后Ｔ细胞的辅助—抑制免疫调节网络失衡是导致机体细胞免疫功能异常的重要环节，作为执行机体反抑制功能的重要成员——反抑制Ｔ细胞（ｃｏｎｔｒａｓｕｐｐｒｅｓｏｒＴｃｅｌｓ，Ｔｃｓ）是否也参与了这一过程，则是尚须探讨的问题。本课题利用细胞培养及分离技术，...     

8-Br-cAMP和~(60)Co照射诱导宫颈癌Hela细胞凋亡及相关基因表达的研究

应用８ Ｂｒ ｃ Ａ Ｍ Ｐ 和６０ Ｃｏ 照射体外诱导 Ｈｅｌａ 细胞凋亡。探讨ｂｘ Ｌ ２ ,ｗ ｐ５３ ,ｍ ｐ５３ ,ｃ ｍ ｙｃｉ Ｎｏｓ 的基因表达和ｉ Ｎｏｓ , Ｆａｓ 蛋白表达之间的关系,为探讨无毒性８ Ｂｒ ｃ Ａ Ｍ Ｐ 对宫颈癌治疗的新途径提供依据。采用 Ｔ Ｕ Ｎ Ｅ Ｌ 法和 Ｆｅｕｌｇｅｎ 法进行细胞凋亡实验;采用本实验室创新的完整细胞原位 Ｒ Ｎ Ａ 斑点印迹技术检测 Ｆａｓ 和ｉ Ｎｏｓ蛋白,应用高速薄层色谱扫描仪对斑点印迹信号进行定量测定。结果８ Ｂｒ ｃ Ａ Ｍ Ｐ 和６０ Ｃｏ 照射均可上调 Ｈｅｌａ ｗｐ５３ ,ｉ Ｎｏｓ 的基因表达;下调ｍ ｐ５３ ,ｂｃｌ ２ ,ｃ ｍｙｃ 的基因表达。可增强ｉ Ｎｏｓ 蛋白质的酶活性,降低 Ｆａｓ 蛋白质的免疫反应性。显示出８ Ｂｒ ｃ Ａ Ｍ Ｐ 可能代替放疗作为一种治疗宫颈癌的新途径。     

bcl-2反义寡核苷酸对HL-60细胞作用的研究

探讨ｂｃｌ－２反义寡核苷酸对ＨＬ－６０细胞的作用,将人工合成的ｂｃｌ－２反义寡核苷酸片段与ＨＬ－６０细胞共培养,在作用的第０、１、３、５天通过细胞计数和锥虫蓝染色法检测细胞的生长、存活情况,并通过免疫组化法（ＡＰＡＡＰ法）检测细胞内ｂｃｌ－２蛋白表达水平的变化,通过流式细胞仪分析细胞凋亡的情况。结果表明,ｂｃｌ－２反义寡核苷酸可显著地抑制ＨＬ－６０细胞增殖,而且可以调ＨＬ－６０细胞内ｂｃｌ－２蛋白     

移植pSVPoMcat微基因修饰雪旺氏细胞对脊髓损伤后细胞凋亡的影响

目的探讨ｐＳＶＰｏＭｃａｔ微基因修饰雪旺氏细胞（ＳＣ）移植对脊髓损伤（ＳＣＩ）后细胞凋亡的作用。方法将实验动物分为ｐＳＶＰｏＭｃａｔ微基因修饰ＳＣ组（Ａ组），ＳＣ移植组（Ｂ组），损伤对照组（Ｃ组）。移植后１２周，对ＳＣＩ区的脊髓组织切片进行细胞凋亡的检测（甲基绿－派诺宁染色法和荧光原位标记法）以及Ｂｃ１～２和Ｆａｓ蛋白表达的测定（免疫组化法）。结果在Ａ、Ｂ、Ｃ组中，均发现凋亡细胞及Ｂｃ１～２和Ｆａｓ蛋白阳性表达。体视学计量发现，细胞凋亡率为Ｃ＞Ｂ＞Ａ；Ｂｃ１～２蛋白阳性表达顺序为Ａ＞Ｂ＞Ｃ；Ｆａｓ蛋白阳性表达顺序为Ｃ＞Ｂ＞Ａ。结论ｐＳＶＰｏＭｃａｔ微基因修饰ＳＣ移植能抑制ＳＣＩ后的细胞凋亡，而创伤则可诱发细胞凋亡     

细胞凋亡抑制基因Bcl—2对NIH3T3细胞增殖及辐射敏…

以含Ｂｃｌ－２的重组逆转录病毒转染包装细胞系ＰＡ３１７，经Ｇ４１８抗性筛选，获得单克隆细胞，扩增并收集培养上清感染ＮＩＨ３Ｔ３细胞，进而完成Ｂｃｌ－２基因向ＮＩＨ３Ｔ３细胞的导入。后者软琼脂集落形成率与细胞增殖速率均高于对照组，而辐射敏感性低于对照组。表明Ｂｃｌ－２基因对ＮＩＨ３Ｔ３细胞的增殖和辐射敏感性均具有一定的影响。     

细胞凋亡抑制基因Bcl－2对NIH3T3细胞增殖及辐射敏感性的影响

以含Ｂｃｌ－２的重组逆转录病毒转染包装细胞系ＰＡ３１７，经Ｇ４１８抗性筛选，获得单克隆细胞，扩增并收集培养上清感染ＮＩＨ３Ｔ３细胞，进而完成Ｂｃｌ－２基因向ＮＩＨ３Ｔ３细胞的导入。后者软琼脂集落形成率与细胞增殖速率均高于对照组，而辐射敏感性低于对照组。表明Ｂｃｌ－２基因对ＮＩＨ３Ｔ３细胞的增殖和辐射敏感性均具有一定的影响。     

辐射诱导发育脑细胞凋亡的分子调节

近年来辐射诱导脑细胞损伤研究表明，某些基因如即早基因、Ｂｃｌ－２家族、Ｐ５３热休克蛋白、ＡＴ基因 电脑辐射放育的细胞凋亡中发挥重要的调控作用；而神经生长因子、等生物因子在抑制辐射诱导细胞凋亡中具有重要的保护作用。     

He-Ne激光照射对豚鼠表皮Langerhans细胞的影响

目的 观察不同剂量Ｈｅ－Ｎｅ激光照射对Ｌａｎｇｅｒｈａｎｓ细胞产生的影响。方法 ５６只Ｄｕｎｋｉｎ－Ｈａｒｔｌｅｙ雄性白色豚鼠分７组,每组８只。６组为激光照射组,分别给予１．１６、２．３２、４．６５Ｊ／ｃｍ＾２的Ｈｅ－Ｎｅ激光照射（各２组）,每日１次;另１组为对照组。连续照射７天后,第１、３天麻醉下活体取豚鼠照射区皮肤,采用ＡＴＰ酶染色法测定ＡＴＰ酶阳性细胞（Ｌａｎｇｅｒｈａｎｓ细胞）密度。结果 ２．３２Ｊ／ｃｍ＾２的Ｈｅ－Ｎｅ激光照射后第１、３天组和４．６５Ｊ／ｃｍ＾２的Ｈｅ－Ｎｅ激光照射后第１天组的豚鼠,其表皮ＡＴＰ酶阳性细胞密度均高于对照组,差异均有非常显著意义（Ｐ〈０．０１）。结论 一定剂量的Ｈｅ－Ｎｅ激光照射可增加豚鼠表皮Ｌａｎｇｅｒｈａｎｓ细胞的数量,其数量的增加可能影响Ｌａｎｇｅｒｈａｎｓ细胞的抗     

创伤对小鼠淋巴细胞IL－2R mRNA及IL－2R的影响

研究了创伤（闭合伤、截肢伤、烧伤）后小鼠不同来源淋巴细胞（脾脏、胸腺、肠系膜淋巴结）白介素２受体（ＩＬ－２Ｒ）ｍＲＮＡ及ＩＬ－２Ｒ的变化，并观察了创伤后血清，巨噬细胞、Ｔｓ细胞的抑制作用。结果显示：３种类型创伤组小鼠不同来源淋巴细胞ＩＬ－２ＲｍＲＮＡ水平均降低，淋巴细胞膜ＩＬ－２Ｒ的变化与此相一致，二者呈非常显著的正相关。创伤后血清、巨噬细胞、Ｔｓ细胞在体外均可抑制正常小鼠脾细胞ＩＬ－２ＲｍＲＮＡ及ＩＬ－２Ｒ水平，去除创伤小鼠脾细胞中的巨噬细胞或Ｔｓ细胞均可致ＩＬ－２ＲｍＲＮＡ及ＩＬ－２Ｒ水平的提高。提示创伤后血清、巨噬细胞、Ｔｓ细胞可通过抑制淋巴细胞ＩＬ－２Ｒ的转录从而导致淋巴细胞膜ＩＬ－２Ｒ的减少。     

99Tcm-PnAO-硝基咪唑和99Tcm-HL91对乏氧心肌的实验研究

目的 探讨＾９９Ｔｃ＾ｍ－ＰｎＡＯ－硝基咪唑和＾９９Ｔｃ＾ｍ－ＨＬ９１２种乏氧心肌显像剂用于实验性心肌缺血、缺氧的作用。方法 进行小鼠体内分布与离体大鼠心脏模型研究,以９５％Ｏ２和５％ＣＯ２平衡的Ｋｒｅｂｓ－Ｈｅｎｓｅｌｅｉｔ缓冲液进行主动脉逆行灌注为对照组;以Ｎ２取代Ｏ２和ＣＯ２平衡的Ｋｒｅｂｓ－Ｈｅｎｓｅｌｅｉｔ缓冲液进行逆行灌注为乏氧组;以９５％Ｏ２和５％ＣＯ２平衡的Ｋｅｒｂｓ－Ｈｅｎｓｅｌ     

大鼠头颅侧向旋转致脑弥漫性轴索损伤的NF68免疫组化形态学观察

目的探讨大鼠头颅侧向旋转后脑弥漫性轴索损伤(DAI)的形态学改变。方法大鼠12只,随机均分为损伤后30min、2h、24h及对照组,制作头颅侧向旋转脑DAI模型。脑矢状切片经用小鼠抗神经纤维丝(NF)蛋白NF68亚单位的血清、免疫组化ABC法与DAB+H2O2显色技术等处理。选延髓部分,薄片间包埋,光镜定位,阳性区超薄切片,电镜观察。结果伤后30min光镜下延髓轴索迂曲肿胀;电镜下髓鞘轻度分离,轴浆NF结构紊乱。伤后2～24h,轴索破坏随时间渐重,光镜下轴索明显肿胀、断裂并形成轴缩球;电镜下髓鞘显著分离,局部断裂,线粒体空泡变并移向周边,部分胞浆溶解。和正常对照比,伤后轴索轴浆NF68染色也明显增强;伴随轴索结构的变化,NF68阳性轴索染色强度和数量逐步递增。结论大鼠头颅侧向旋转后脑神经轴索内NF蛋白的NF68亚单位免疫活性显著增强,引起NF结构紊乱,终致轴索肿胀、断裂并形成轴缩球。     

不同剂型5-氟尿嘧啶对靶动脉壁影响的实验研究

目的探讨５氟尿嘧啶（５Ｆｕ）多相脂质体与５Ｆｕ注射液对靶动脉壁的影响。方法实验用兔１４只,分为５Ｆｕ注射液组和５Ｆｕ多相脂质体组,每组７只（５只股动脉给药,２只耳动脉给药）。股动脉给药后７天作Ｘ线造影和光学显微镜（简称光镜）检查,耳动脉给药后２４小时作电子显微镜（简称电镜）检查。结果给５Ｆｕ注射液的５例中４例股动脉造影出现明显局限性变窄,光镜下可见内皮细胞脱落、破碎或增生,内弹力膜断裂、不完整或内弹力纤维聚集;电镜下见血管内皮细胞膜破裂,胞浆严重空泡变,线粒体结构模糊。而给５Ｆｕ多相脂质体的股动脉造影无明显异常改变,光镜下表现为轻度内皮细胞脱落或内皮细胞轻度增生,呈多层;电镜下见内皮细胞膜完整,胞浆空泡化,线粒体肿胀,嵴尚可见,核不规则。结论５Ｆｕ多相脂质体对靶动脉壁的刺激和损伤明显轻于５Ｆｕ注射液。     

从IL—2和Bcl—2基因转录水平探讨模拟失重鼠T淋巴细胞功能发迹的机制

为探讨模拟失重条件下Ｔ淋巴功能改变的机制，观察了小鼠脾脏Ｔ淋巴细胞增殖能力、ＩＬ－２产生、ＩＬ－２基因和Ｂｃｌ－２癌基因转录的变化。     

兔间接视神经损伤的组织病理学观察

目的观察间接视神经损伤病理过程听规律以指导临床救治。方法 日本大耳白兔８４０只,按不同时相分为８个组,左眼致伤,右眼为对照。建立兔间接视神经损伤模型后,分别于伤后１２ｈ、１,３,７,１５,３０,６０,９０ｄ处死动物取视神经,按常规方法制备光、电镜标本后,切片观察。结果 伤后１２～２４ｈ神经软膜及神经组织水肿,毛细 管扩张、血管周围间隙增宽。鞘膜下血肿及神经实质内灶性出血,血管内皮细胞肿胀,管和管腔     

康赛宁联合白细胞介素Ⅱ抑制C_(57)BL/6小鼠Lewis肺癌生长及诱导原发瘤细胞凋亡

目的 :研究康赛宁与白细胞介素Ⅱ (IL 2 )联用 ,抑制近交系小鼠C57BL/ 6Lewis肺癌的作用。方法 :以C57BL/ 6小鼠Lewis肺癌为模型 ,观察康赛宁联合IL 2对肿瘤发生、生长、转移的影响 ,及体内对肿瘤细胞的作用。结果 :二者联用明显增强对肿瘤体积和重量的抑制作用 (P <0 0 1) ,增强抑瘤率 (P <0 0 5 ) ,肺转移灶的数目明显减少。肿瘤组织电镜观察 ,瘤细胞核染色质浓集成块 ,核膜清楚 ,瘤细胞内质网扩张 ,线粒体肿胀 ;光镜下显示肿瘤灶中出现许多凋亡细胞。结论 :在二者剂量减半的情况下 ,联合用药的抑瘤效应仍得到加强 ,克服了IL 2的毒副作用 ,其杀瘤过程主要为对瘤细胞的直接攻击 ,和促进体内多种反应细胞相互作用 ,诱导瘤细胞的凋亡。     

高能电子线皮肤辐射损伤动物模型的超微病理学研究

目的 通过动物模型研究高能电子线皮肤辐射损伤产生延迟性坏死和溃疡难以愈合的病理改变和机理,为进一步临床研究打下基础。方法 本实验以ＳＤ大鼠作为实验对象,以直线加速器产生的４ＭｅＶ的电子线照射臀部皮肤制作皮肤放射损伤模型。实验动物分５Ｇｙ、１５Ｇｙ、３０Ｇｙ、４５Ｇｙ４个剂量组,一次性照射后２个月作病理学肉眼、光镜、电镜观察。结果 ５Ｇｙ组光镜形态改变不明显,电镜下可见棘细胞肿胀,基底细胞核固缩,核膜下染色质边集,血管内皮细胞肿胀,部分细胞核固缩,管腔狭小,皮下胶原纤维断裂水肿：１５Ｇ６ｙ组棘细胞和基底细胞肿胀明显,基底细胞胞浆内张力微丝、桥粒、半桥粒显著减少,血管内皮和毛囊上皮细胞变性;３０Ｇｙ组电镜下棘细胞、基底细胞核固缩、水肿明显。ｙ组３周时可见皮肤溃疡形成,电镜见基底细胞层有凋亡细胞和凋亡小体形成,基底膜     

高+Gx过载后恒河猴脑组织损伤的病理学研究

目的 研究实验动物恒河猴在经受抛物线型高 Gx过载后，大脑顶叶皮层和海马区在光镜和电镜下的病理形态学变化，以期深入了解不同高 Gx与脑组织的病理性损伤程度的关系。方法 实验选用健康恒河猴于清醒状态下，在动物离心机上经受相应峰值(实验组： 15Gx／200S、 18Gx／165S、 21Gx／140S和对照组 1Gx／200S)的抛物线型过载作用后，取材、进行病理形态学研究。结果 1)在光镜下，可见大脑顶叶皮层和海马区锥体细胞均表现为不同程度的缺血性萎缩，而星形胶质细胞核周出现空晕，这种病变随着 Gx值的增加而逐渐加重，此外，海马区较大脑顶叶皮层的病变表现的更为明显；2)电镜下随着 Gx值的增加，可见锥体细胞核染色质聚集形成团块状、染色质边集，核膜皱缩，最后形成凋亡小体；胞浆内线粒体由肿胀、嵴模糊不清最后到空泡化；内质网池逐渐扩张。结论 15～ 21G的高 Gx值可以导致恒河猴脑组织出现急性损伤性病理变化，而且损伤的程度随 Gx的增加而加重。     

加热复合电离辐射对人骨髓细胞的影响

目的：研究了加热与电离辐射后对人离体骨髓细胞存活率及形态等方面的影响。结果：骨髓细胞存活率随加热时间增加而呈直线下降，温度越高直线斜率越大。在形态学上，骨髓细胞受热后可出现非特异性退行性变化，随着时间的延长，这些变化更加明显。骨髓细胞受单纯Ｘ射线照射后，可见随着照射剂量的增大，细胞存活率明显下降。形态学上单纯３ＧｙＸ射线照射可使少数细胞出现空泡变性，线粒体肿胀，核膜破裂等变化。骨髓细胞受Ｘ射线照射后立即给予４２℃３０分钟的加热使骨髓细胞存活率下降的程度比各自单独作用之和要大（Ｐ＜０．０１）。电镜显示结构破坏明显，细胞支架系统、细胞器均受到破坏，细胞膜、核膜破坏乃至溶解，核浆、细胞浆外溢。     

氨基酸维生素制剂对力竭疲劳大鼠下丘脑超微结构及神经递质的影响

目的 探讨氨基酸维生素制剂对力竭运动大鼠下丘脑超微结构及中枢神经递质变化的影响.方法 雄性SD大鼠36只,适应性游泳后随机分为胶囊组、对照组和冲剂组,每组12只.3组分别给予复方氨基酸胶囊、正常饮用水和氨基酸果糖粉固体饮料(2.5ml/100g,每日灌胃2次,连续14d).采用无负重游泳方式建立大鼠力竭游泳模型,实验持续14d.末次游泳力竭结束后,取大鼠下丘脑组织,采用电镜观察下丘脑超微结构;采用高效液相色谱仪(HPLC-ECD)检测下丘脑组织5-羟色胺(5-HT)、5-羟吲哚乙酸(5-HIAA)、对羟基苯乙酸(HOPAC)和y-氨基丁酸(GABA)的浓度.结果 胶囊组和冲剂组脑细胞胞质内线粒体结构基本完整;对照组细胞肿胀变性,线粒体可见不同程度肿胀,电镜下超微形态变异较明显,膜、嵴均有溶解、断裂现象,甚至整个线粒体崩解,出现空泡化.胶囊组和冲剂组大鼠下丘脑中5-HT、5-HTAA、HOPAC和GABA浓度均明显低于对照组(P＜0.05).结论 复方氨基酸维生素制剂可通过降低下丘脑超微结构改变和神经递质水平来提高中枢抗疲劳能力.     

大鼠急性胰腺炎模型的建立及不同压力高压氧治疗效果的实验研究

目的 探讨大鼠急性胰腺炎模型的建立及采用不同压力高压氧(HBO)治疗对胰腺炎的影响.方法 40只SD大鼠按随机数字表法分组,其中8只为假手术组,8只为非治疗对照组,24只为HBO治疗组,又按所用氧压不同分为3个亚组,每亚组为8只.采用胰管结扎的方法 制备胰腺炎模型,然后分别用不同压力的HBO治疗.在造模后的第7天处死大鼠,留取胰腺标本及血液进行分析.假手术组仪进行腹壁的切开和缝合.结果 造模后第1天胰腺淀粉酶水平假手术组为(798.5±113.5)U/L,对照组为(3156.2±639.9)U/L,假手术组与对照组之间差异有统计学意义(P＜0.05).不同压力HBO治疗7 d之后,在各炎症细胞因子方面,各HBO治疗组与对照组的差异均有统计学意义(P＜0.05),各HBO治疗组之间IL-2、IL-6及IL-10差异有统计学意义(P＜0.05);细胞因子TNF-α在治疗压力0.15 MPa与0.20 MPa之间以及0.15 MPa与0.25 MPa之间差异均有统计学意义(P＜0.05),而0.20 MPa与0.25MPa组之间差异无统计学意义(P＞0.05).胰腺病理及电镜图片显示0.25 MPa治疗压力下改善最明显.结论 HBO治疗可以显著地减少大鼠胰腺腺泡的坏死和出血,抑制血液炎症因子的活性.