颅内注射淀粉样β蛋白片段1-42和thiorphan对恒河猴脑内淀粉样β蛋白表达的影响

目的探讨颅内注射淀粉样β蛋白片段1-42(Aβ1-42)和thiorphan对恒河猴脑内Aβ表达的影响。方法将恒河猴随机分为模型组(n=3)和正常对照组(n=1),模型组开颅后于大脑皮质和基底神经节先注射thiorphan以消耗已存在的脑啡肽酶,然后缓慢注射纤丝状Aβ1-42,再植入含有thiorphan的微渗透泵到基底神经节,持续28d;正常对照组仅注射生理盐水。至50d时处死恒河猴,开颅取大脑,免疫组织化学法观察海马、基底神经节和大脑皮质等部位Aβ1-42的表达。结果正常对照组恒河猴海马、基底神经节和大脑皮质Aβ1-42免疫反应阳性,30个高倍视野(×400)的积分吸光度(IA)分别为0.22±0.06,0.20±0.04和0.19±0.07。模型组3只恒河猴海马、基底神经节和大脑皮质Aβ1-42免疫反应均明显增强,海马IA分别为0.57±0.05,0.60±0.05和0.61±0.05;基底神经节IA分别为0.62±0.06,0.63±0.05和0.65±0.05;大脑皮质IA分别为0.67±0.06,0.68±0.05和0.65±0.07。结论颅内联合注射Aβ1-42和thiorphan可增加脑内Aβ1-42的表达。     

恒河猴大脑注射Aβ1-42和Thiorphan诱发脑内广泛炎症反应

目的：观察颅内给Aβ1-42和thiorphan后是否可以在恒河猴大脑内诱发类似AD患者的炎症反应．探讨该法建立猕猴AD模型的可行性。方法：开颅后先注射thiorphan到猕猴的大脑皮质和基底核消耗已存在的Neprilysin,然后再缓慢的注射孵育好的纤丝状Aβ1-42,后植入含有thiorphan的微渗透泵到基底核。HE染色及免疫组化观察大脑的炎症反应情况。结果：HE染色显示侧脑室室管膜的单层上皮结构消失．大量小胶质细胞浸润,形成多细胞层,小胶质细胞增生聚集成灶。免疫组化结果显示实验组恒河猴海马、基底核及皮质等部位出现星形胶质细胞增生。结论：Aβ1-42和thiorphan联合颅内给药后可以在恒河猴大脑内诱发广泛的炎症反应。     

左甲状腺素对淀粉样β蛋白所致痴呆模型小鼠空间学习记忆的影响

目的探讨甲状腺激素对淀粉样β蛋白(Aβ)所致痴呆模型小鼠空间学习记忆的影响,并初步探讨其作用机制。方法小鼠海马内注射1.0μL的Aβ1-4210mmol·L-1制备阿尔茨海默病(AD)模型。小鼠一次性ip左甲状腺素(T4)5mg·kg-1后,Morris水迷宫实验测定对AD模型小鼠学习记忆的影响。分别采用比色法、黄嘌呤氧化酶法、碱性羟胺法和硫代巴比妥酸法检测小鼠海马胆碱乙酰转移酶(ChAT)和超氧化物歧化酶(SOD)活性,以及乙酰胆碱(ACh)和丙二醛(MDA)含量。结果与正常对照组比较,AD模型小鼠空间学习记忆能力受损。与AD模型组比较,T4治疗组小鼠在第3次到第6次训练中,在水迷宫中找到平台的时间明显缩短〔(105±9)vs(64±18)s;(90±11)vs(44±14)s;(71±14)vs(28±12)s;(65±11)vs(23±12)s〕;ChAT活性升高〔(21.9±6.7)vs(43.9±9.4)μmo.lg-1蛋白〕;SOD活性增高〔(2.40±0.12)vs(3.52±0.24)MU.g-1蛋白〕;ACh含量上升〔(4.74±0.60)vs(7.46±0.91)g.g-1蛋白〕;MDA减少〔(1.37±0.06)vs(0.74±0.09)μmol.g-1蛋白〕。结论T4可明显改善Aβ1-42所致痴呆模型小鼠空间学习记忆,其机制可能与增加脑内胆碱能神经功能,减少自由基损伤有关。     

旱莲苷对阿尔茨海默病大鼠学习记忆的影响

目的研究旱莲苷对阿尔茨海默病(AD)大鼠学习记忆及海马组织乙酰胆碱酯酶(AchE)、糖原合酶激酶3β(GSK-3β)、乙酰胆碱转移酶(ChAT)的影响。方法将60只大鼠随机分为对照组(n=20)、模型组(n=20)及实验组(n=20)。实验组及模型组大鼠均用腹腔注射D-半乳糖联合双侧海马注射β-淀粉样蛋白(Aβ)25-35构建AD大鼠模型,对照组大鼠注射等量生理盐水。造模后,实验组大鼠灌胃24 g·kg^-1·d^-1旱莲苷,模型组与对照组灌胃等量生理盐水,连续干预8周。用Morris水迷宫检测大鼠空间学习记忆能力;用免疫组化法及蛋白质印迹(Wb)法检测海马组织AchE、GSK-3β、ChAT蛋白表达。结果对照组、模型组及实验组大鼠第4天逃逸潜伏期分别为(9.82±3.06),(50.69±9.51)和(26.87±8.12)s;首次到达原平台位置的时间分别为(15.42±1.31),(41.12±20.34)和(22.76±5.87)s;穿越原平台次数分别为(5.39±2.01),(1.53±1.21)和(3.36±0.58)次;海马组织AchE蛋白相对表达量分别为0.23±0.11,0.96±0.04和0.47±0.03;GSK-3β蛋白相对表达量分别为0.28±0.13,0.98±0.02和0.41±0.04;ChAT蛋白相对表达量分别为0.95±0.05,0.46±0.12和0.84±0.09。以上指标:模型组与对照组比较,差异均有统计学意义(均P<0.05);实验组与模型组比较,差异均有统计学意义(均P<0.05)。模型组大鼠海马组织AchE、GSK-3β蛋白阳性细胞百分比均高于对照组,与模型组比,实验组以上指标均降低;而ChAT蛋白阳性细胞百分比降低,且实验组高于模型组(均P<0.05)。结论旱莲苷可改善AD大鼠海马组织病变,提高其学习记忆能力,作用机制可能与下调海马组织AchE、GSK-3β蛋白表达,上调ChAT蛋白表达有关。     

IL-10对Aβ1-42诱导的阿尔茨海默病模型大鼠的保护作用

目的研究IL-10对β-淀粉样蛋白(Aβ1-42)诱导的阿尔茨海默病(AD)模型大鼠海马淀粉样前体蛋白(APP)表达的影响。方法 48只大鼠随机均分为正常对照组(A组)、PBS对照组(B组)、Aβ1-420.1、0.2、0.4mM注射模型组(分别为C1、C2、C3组)和IL-10 80μg/ml预处理注射组(D组)。注射2d后,Morris水迷宫测定大鼠潜伏期,Western blot法检测海马组织中APP的表达量。结果与A、B组相比,C1、C2、C3组大鼠水迷宫实验潜伏期、APP蛋白表达均呈浓度依赖性的增加(P<0.01);而D组潜伏期、APP蛋白表达较C3组明显减少(P<0.05)。结论海马内注射IL-10能抑制Aβ1-42诱导的AD大鼠水迷宫潜伏期及海马内APP表达的增加,提示IL-10可能抑制由Aβ1-42诱导的AD神经炎症。     

淫羊藿苷对淀粉样β蛋白片段25-35所致大鼠学习记忆障碍的改善作用

目的观察淫羊藿苷对淀粉样β蛋白片段25-35(Aβ25-35)所致阿尔茨海默病(AD)模型大鼠学习记忆能力的保护作用,并探讨其可能的作用机制。方法Wistar雄性大鼠,右侧海马内注射Aβ25-3510μg制备AD模型,次日起淫羊藿苷30,60和120mg.kg-1灌胃给药,连续14d,d15～19Morris水迷宫检测大鼠空间辨别学习记忆能力;d20检测海马组织中谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)、超氧化物歧化酶(SOD)及一氧化氮合酶(NOS)的活性,免疫组化法检测海马内乙酰胆碱酯酶(AChE)和胆碱乙酰转移酶(ChAT)的表达。结果与模型对照组比较,淫羊藿苷给药14d明显改善大鼠学习记忆能力;海马组织中SOD和GSH-PX活性升高,NOS活性降低;海马内AChE及ChAT的表达增加。结论淫羊藿苷可以改善Aβ25-35海马内注射所致AD模型大鼠的学习记忆能力,其作用可能与其增加AChE和ChAT表达,增强SOD和GSH-PX等自由基清除酶活性,降低NOS活性,减少NO释放等多种机制,促进胆碱能递质系统功能的恢复有关。     

知母总皂苷对Aβ_(1-42)引起的老年大鼠学习记忆能力及海马炎症反应的影响

目的观察知母总皂苷(SAaB)对淀粉样β蛋白片段1-42(Aβ1-42)引起的老年大鼠学习记忆能力改善作用及其对海马炎症反应的影响。方法脑室注射Aβ1-42后第2天进行Morris水迷宫训练,连续训练5 d,在第6天进行空间探索实验,训练期间继续给药,记录逃避潜伏期及各象限游泳时间;Nissl染色观察海马CA1区锥体神经元改变及免疫组织化学染色观察胶原纤维酸性蛋白(GFAP)改变;Western blot检测GFAP表达水平改变。结果Aβ1-42组大鼠出现明显的空间学习障碍,表现为逃避潜伏期较对照组明显延长,在原平台象限游泳时间占总游泳时间的百分比明显降低;海马CA1区锥体神经元的排列较对照组不整齐且稀疏;GFAP阳性细胞数明显增多,染色增强,突起增多并延长。GFAP蛋白表达明显增加。SAaB可明显抑制Aβ1-42引起的这些变化,呈明显剂量依赖性。结论 SAaB能够明显的改善Aβ1-42引起的老年大鼠学习记忆能力障碍及海马神经元损伤。     

恒河猴大脑注射Aβ1-42 和Thiorphan对胆碱能神经元影响的研究

目的 观察颅内灌注Aβ1-42和Thiorphan给药后恒河猴基底、核大脑皮质等部位胆碱能神经元的改变.方法 将恒河猴4只,分为对照组(1只)与实验组(3只),对照组开颅后只注射0.9%氯化钠溶液,实验组开颅后先注射Thiorphan到猕猴的基底核和大脑皮质消耗已存在的Neprilysin,然后再缓慢的注射孵育好的纤丝状Aβ1-42,再植入含有Thiorphan的微渗透泵到基底核.免疫组织化学方法检测大脑切片胆碱乙酰转移酶(ChAT)免疫反应活性及阳性神经元数量及形态学改变.结果 给药后实验组恒河猴基底核、皮质等部位的胆碱能神经元数量减少和ChAT水平降低.结论 Aβ1-42和Thiorphan联合颅内给药后损害大脑基底核、皮质等部位的胆碱能神经元.     

JNK信号通路参与Aβ毒性对大鼠海马神经元的损伤

目的探讨β-淀粉样蛋白(β-amyloid peptide,Aβ)毒性对大鼠海马神经元的损伤以及JNK信号转导通路在此过程中的作用。方法应用Aβ1-40注射大鼠双侧海马CA1区建立毒性损伤模型,通过HE染色、Nissl染色、TUNEL染色、免疫组化法、透射电镜并结合图像分析技术研究海马的病理学变化以及神经元的存活与凋亡、超微结构及p-JNK阳性细胞率。结果与对照组比较,大鼠注射Aβ后,海马CA1区锥体细胞排列松散,数目减少,神经元固缩、浓染,胶质细胞明显增生,超微结构可见明显凋亡特征,TUNEL阳性细胞数明显增多(P<0.01),p-JNK阳性细胞比例明显升高(P<0.01)。结论 Aβ可明显诱导海马神经元凋亡,JNK信号转导通路参与了Aβ的神经毒性损伤作用。     

七氟烷对 β淀粉样蛋白 1-40诱导的大鼠认知功能障碍影响及机制

目的探讨七氟烷吸入对 β淀粉样蛋白( Aβ)1-40诱发的大鼠认知功能障碍影响及其可能的机制。方法于 2021年 8月至 2022年 8月,将 32只成年雄性 Sprague-Dawley大鼠以随机数字表法分为生理盐水( NS)+氧气组、 NS+七氟烷组、 Aβ+氧气组和 Aβ+七氟烷组,每组 8只,分别给予双侧海马内注射 NS或 Aβ1-40。吸入 30%氧气或 2.5%七氟烷过程中监测生命体征,采用 Morris水迷宫实验检测大鼠认知功能;酶联免疫吸附测定检测海马 Aβ1-40水平;免疫组织化学法检测胶质纤维酸性蛋白(GFAP)和离子钙接头蛋白分子 1(IBA1)的表达;实时荧光定量逆转录聚合酶链反应检测白细胞介素 -1β(IL-1β)、核因子 -κB(NF-κB)、诱导型一氧化氮合酶( iNOS)的 mRNA表达;蛋白质印迹法检测 B淋巴细胞瘤 -xL(Bcl-xL)、胱天蛋白酶 -9(caspase-9)、脑源性神经营养因子( BDNF)和晚期糖基化终末产物受体( RAGE)的蛋白表达。结果维持吸入 2.5%七氟烷在 4个不同时间点( 1、2、3和 4h)对大鼠生命体征无影响。与 NS+氧气组比较, Aβ+氧气组大鼠原始平台探索时间减少,逃逸潜伏期增加;与 Aβ+氧气组相比, Aβ+七氟烷组大鼠原始平台探索时间减少,逃逸潜伏期增加( P<0.05)。 Aβ+七氟烷组大鼠海马区 Aβ1-40水平［( 42.18±5.72)ng/L］,GFAP和 IBA1阳性细胞数［( 24.33±1.21)个和( 37.82±3.23)个］,caspase-9和 RAGE蛋白表达( 0.74±0.11和 0.81±0.07)IL-1β、NF-κB和 iNOS mRNA表达( 28.98±12.32、25.91±12.31和 43.92±17.21)均高于 NS+七氟烷组［(18.13±2.89)ng/ L、(10.51±06)个、(17.17±1.77)个、 0.23±0.02、0.29±0.03、1.35±0.04、1.37±0.05、1.42±0.06］和 Aβ+氧气组［( 32.61±4.82)ng/L、.9(15.76±1.25)个、(24.76±2.31)个、 0.45±0.08、0.68±0.08、10.23±6.56、6.51±2.34、13.23±4.81］; Bcl-xL和 BDNF蛋白表达(0.13±0.04和 0.18±0.04)低于 NS+七氟烷组( 1.07±0.31和 0.58±0.07)和 Aβ+氧气组( 0.46±0.11和 0.33±0.04)(P<0.05)。而 NS+氧气组和 NS+七氟烷组之间各指标差异无统计学意义( P>0.05)。结论七氟烷通过启动大鼠海马的神经毒性、神经炎症和神经元凋亡,加剧了 Aβ1-40诱发的大鼠认知功能障碍。     

吡格列酮对淀粉样β蛋白片段1-42引起的大鼠海马c-Jun氨基端激酶信号传导通路改变的作用

目的探讨吡格列酮(Pio)对淀粉样β蛋白片段1-42(Aβ1-42)所致大鼠海马神经细胞损伤保护作用的信号传导机制。方法 SD大鼠左侧脑单次icv给予5μlAβ1-422.0mmol.L-1制备大鼠痴呆模型。65只大鼠随机分为正常对照组、Aβ1-42模型组及Pio20,40和80mg.kg-1组;Pio组大鼠在icv单次给予Aβ1-42前24h先ig给予Pio20,40及80mg.kg-1,每天一次,连续给药7d。Western印迹法检测海马CA1区磷酸化丝裂原激活蛋白激酶激酶4(MKK4)、磷酸化c-Jun氨基端激酶1(JNK1)和磷酸化c-Jun的蛋白表达水平;应用激光共聚焦显微镜观察磷酸化JNK在小胶质细胞表达部位。结果与正常对照组比较,Aβ1-42模型组大鼠icv给予Aβ1-42后,可引起海马CA1区磷酸化的MKK4,JNK1和c-Jun的表达明显增加(P<0.01);与Aβ1-42模型组比较,Pio20,40和80mg.kg-1可剂量依赖性地对抗Aβ1-42引起的磷酸化MKK4,JNK1和c-Jun表达的增加(P<0.01),Pio40mg.kg-1使磷酸化MKK4蛋白与总量MKK4蛋白之比从Aβ1-42模型组的1.02±0.35降低到0.44±0.06,磷酸化JNK1从0.94±0.17降低到0.55±0.05,磷酸化c-Jun从4.64±0.41降低到2.48±0.12(P<0.01)。荧光免疫组织化学双染,激光共聚焦显微镜观察结果显示,磷酸化的JNK主要在小胶质细胞表达。结论 Pio通过抑制小胶质细胞内JNK激酶信号传导通路的活化,对抗Aβ1-42引起的海马神经细胞损伤。     

大蒜皮中肉桂酰胺N-trans-feruloyloctopamine对老年痴呆大鼠模型的治疗作用

目的 研究大蒜皮中的肉桂酰胺类化合物N-trans-feruloyloctopamine(FO)对老年痴呆模型大鼠的治疗作用。方法 采用Meynert基底核注射Aβ_1-40建立老年痴呆大鼠模型,再给予FO进行灌胃后,测定大鼠脑内乙酰胆碱(Ach)、乙酰胆碱转移酶(ChAT)及乙酰胆碱酯酶(AchE)活性等指标,HE染色后观察大鼠海马区神经细胞形态变化。结果 与模型组比较,酪氨酸酶抑制剂FO组的Ach,ChAT和AchE均具有显著性差异(P<0.05,P<0.01);病理结果显示FO对Aβ引起的大鼠海马皮层神经元变性坏死症状明显改善。结论 FO对大鼠AD模型具有较好防治作用。     

两种阿尔茨海默病树鼩模型的探究

目的比较两种不同的阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease,AD)树鼩模型大脑神经病理改变,探索优化的AD树鼩模型。方法 50只树鼩随机分为5组:D-半乳糖复合鹅膏蕈氨酸(IBO)高、低剂量组(腹腔注射D-半乳糖复合双侧大脑基底注射IBO),Aβ_(25-35)复合IBO高、低剂量组(双侧基底前脑注射)及对照组,10只/组。HE染色法观察各组树鼩大脑神经细胞形态;免疫组化法检测各组树鼩大脑胆碱乙酰基转移酶(Ch AT)和突触素(SYP)的表达;免疫印迹法检测β淀粉样蛋白1-42(Aβ_(1-42))、淀粉样蛋白前体蛋白(APP)和磷酸化tau蛋白(p-tau)的表达。结果 HE染色显示,造模树鼩大脑神经细胞均出现程度不同的形态损伤改变,以D-半乳糖复合IBO高剂量组和Aβ_(25-35)复合IBO高剂量组改变明显;免疫组化染色结果显示,造模组的Ch AT和SYP的表达均明显下降(P<0.01),其中以Aβ_(25-35)复合IBO高剂量组下降明显。免疫印迹检测结果显示,造模组的Aβ_(1-42)、APP和p-tau的表达均明显升高(P<0.05或P<0.01),其中以Aβ_(25-35)复合IBO高剂量组升高明显。结论 Aβ_(25-35)合并IBO注射Meynert核损毁造模方法更适合构建AD树鼩模型。     

β-淀粉样蛋白对大鼠学习记忆、病理及tau蛋白磷酸化的影响

目的研究大鼠海马区内注射β-淀粉样蛋白（Aβ）的神经毒性,建立阿尔茨海默病（AD）动物模型,探讨Aβ毒性机制。方法选取雌性成年SD大鼠24只,随机分为止常对照组、生理盐水组、AD组,每组8只。Morris水迷宫检测大鼠学习记忆功能,HE染色及B ielschowsk i染色法观察海马神经元形态,免疫组化法观察tau蛋白异常磷酸化变化。结果与正常对照组大鼠相比,AD组大鼠水迷富测试结果明显减退（P〈0.01）;海马CA1区神经元纤维形态紊乱,tau蛋白磷酸化阳性细胞数明显增多（P〈0.01）。结论大鼠海马内注射凝集态Aβ可产生神经毒性作用,能较好地模拟AD行为和病理表现,其神经毒性可能是通过tau蛋白的异常磷酸化起作用。     

Aβ1-42诱导阿尔茨海默病模型大鼠海马内细胞因子表达变化的研究*

目的探讨β淀粉样蛋白（Aβ）1-42诱导的阿尔茨海默病（AD）模型大鼠海马内致炎细胞因子和抗炎细胞因子表达的变化。方法24只SD大鼠随机分为正常对照组（intact组）、PBS对照组和AD模型组。PBS对照组为海马CA1区注射PBS,AD模型组为海马CA1区注射Aβ1-42。应用Morris水迷宫测试大鼠逃避潜伏期;Nissl染色观察海马CA1区神经元的损害情况;Western blot方法检测海马组织中淀粉样前体蛋白（APP）以及蛋白质磷酸酶-2A （PP2A）的表达量;Real-time PCR法检测海马内细胞因子白介素（IL）-1β、肿瘤坏死因子（TNF）-α、干扰素（IFN）-γ、IL-4、IL-10和转化生长因子（TGF）-β的mRNA水平。结果大鼠双侧海马内注射Aβ1-42后,动物的空间学习记忆能力降低、海马CA1区神经元胞体丢失、海马内APP表达上调而PP2A表达下调。AD模型大鼠的海马内,致炎细胞因子IL-1β、TNF-α和IFN-γ的mRNA表达上调,而抗炎细胞因子IL-4、IL-10和TGF-β的mRNA表达下调。结论 AD大鼠脑内存在致炎/抗炎失衡的神经炎症,它参与了AD的发病机制。     

神经干细胞对AD大鼠行为及突触素Ⅰ表达的影响

目的:探究神经干细胞(NSCs)移植对β-淀粉样蛋白(Aβ1-42)诱导的阿尔茨海默病(AD)大鼠学习记忆能力及海马组织内突触素I表达的影响。方法:采用β-淀粉样蛋白(Aβ1-42)注射到大鼠海马组织内建立阿尔茨海默病(AD)大鼠动物模型,通过Y迷宫测试大鼠学习记忆能力和Western blot技术检测大鼠海马组织内Synapsin I表达。结果:与对照组比较,AD模型组、细胞移植组大鼠学习记忆和大鼠海马组织内Synapsin I蛋白表达量均低(P<0.05),与AD模型组比较,细胞移植组大鼠学习记忆能力和大鼠海马组织内Synapsin I蛋白表达量均较高(P<0.05)。结论:NSCs能显著改善AD大鼠的学习记忆能力,可能与上调突触素Ⅰ的表达有关。     

MAP激酶家族在淀粉样β蛋白片段25～35引起的大鼠海马炎症反应及细胞凋亡中的作用(英文)

目的　研究淀粉样β蛋白片段2 5～35(Aβ2 5～35)引起的大鼠海马炎症反应、细胞凋亡机制及抗炎药物布洛芬的保护作用。方法　大鼠灌胃给予布洛芬7.5mg·kg- 1,连续应用3周,脑室内单次注射Aβ2 5～35(10 μL ,1mmol·L- 1) ,注射后继续应用布洛芬1周后,取脑,进行尼氏染色和胶质原纤维酸性蛋白(GFAP)免疫细胞化学染色,研究海马CA1区锥体神经元形态学改变和星形胶质细胞激活。Western印迹观察白细胞介素 1β(IL 1β) ,胞外信号调节激酶1/ 2 (ERK1/ 2 ) ,有丝分裂原活化蛋白激酶p38(p38MAPK) ,蛋白激酶C(PKC)和半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶 3(caspase 3)蛋白表达。RT PCR分析IL 1βmRNA表达水平。结果　脑室内注射Aβ2 5～35可引起海马CA1区星形胶质细胞激活和浸润,IL 1β蛋白表达和IL 1βmRNA表达水平明显增加,这种炎症反应伴有海马CA1区锥体神经元损伤。另外,Aβ2 5～35也能引起磷酸化的p38MAPK蛋白表达较对照组明显增加,从对照组0 .16 7±0 .0 91增加到0 .4 97±0 .0 5 9(P <0 .0 1,n =4 )。使磷酸化的ERK1/ 2蛋白表达下调,ERK1的表达从对照组0 .14 6±0 .0 10下降到0 (P <0 .0 1,n =4 )。ERK2表达从对照组的0 .4 12±0 .0 5 4下降到0 .131±0 .0 38(P <0 .0 1,n =4 )。这些改变伴随有caspase 3蛋白表达的增加     

丁苯酞对阿尔茨海默病模型大鼠海马CA1区Wnt3a及β-连环蛋白表达的影响

目的观察丁苯酞( dl-3-n-butylphthalidle)软胶囊对阿尔茨海默病( Alzheimer disease,AD)模型大鼠海马 CA1区 Wnt3a蛋白及 β-连环蛋白( β-catenin)表达的影响,探寻丁苯酞发挥脑保护作用的可能机制。方法将 72只雄性 SD大鼠按随机数字表法分为假手术组( Sham组)、 AD模型组( AD组)、丁苯酞治疗组(丁苯酞组)。向双侧海马区注射 β-淀粉样蛋白 1-42(beta-amy- loid people 1-42,Aβ1-42)制作 AD模型, Sham组注射 5 μL 0.9%氯化钠溶液。造模成功后 4周,丁苯酞组给予丁苯酞与食用油混合后制成的丁苯酞混合溶液灌胃; Sham组和 AD组采用同等剂量的食用油进行灌胃。采用免疫组织化学法和蛋白质印迹法分别于给药后 1、2、4和 8周检测海马 CA1区 Wnt3a及 β-catenin表达情况。结果蛋白质印迹法表明与 Sham组给药后 1、2、4和 8周［(3 845.25±52.35)(4 385.06±108.85)(9 392.19±81.07)(6 833.15±76.03)］相比, AD组各时间点 Wnt3a蛋白表达量增多［(5595.54±94.60)(7223.89,±86.73)(13 671.83,±312.38)(11 641.,04±203.65)均P＜0.01］;各时间点 β-catenin蛋白表达量差异无统计学意义(P＞0.05),。与 AD组［(4132,.90±79.63)(4 758.7,4±155.14)(5 188.92,±111.82),(5 912.07±83.26)］相比,丁苯酞组各时间点 Wnt3a蛋白［(6261.26±206.51)(8427.83±293.61),(16469.74±204.5,5)(13438.21±12399.19)］、β-catenin蛋白表达量明显增多［(5 569.53±96.52)(7 127.78±69.64),(11 454.94±396.4,3)(9 937.91±157.87),均P＜0.01］。免疫组织化学法和蛋白质印迹法检测结果相同。结论丁苯,酞可通过上调W,nt3a及β-catenin蛋白,的表达,发挥对 AD模,型大鼠的脑保护作用。     

鞘内注射三氯化铝建立阿尔茨海默病大鼠模型

目的探讨鞘内注射A lC l3建立阿尔茨海默病(AD)大鼠模型的可行性。方法手术显微镜下行大鼠蛛网膜下腔插管并留置5 d。大鼠鞘内注射1.5%A lC l340μL,每日1次,连续5 d。最后1次给A lC l3后28 d进行避暗及跳台行为学实验;取脑皮质和海马,切片,HE染色观察颗粒空泡变性变化和锥细胞计数,B ielschowsky染色观察神经原纤维缠结,免疫组化染色观察淀粉样β蛋白(Aβ)、淀粉样β蛋白前体(β-APP)和tau蛋白阳性细胞数量。结果大鼠鞘内注射A lC l3后避暗及跳台实验错误次数明显增加,潜伏期明显缩短。海马颗粒空泡变性细胞明显增多,海马和皮质锥体细胞明显减少。大脑皮质和海马Aβ,β-APP和tau免疫阳性神经细胞数量明显增多。可见神经原纤维缠结样病理改变和Aβ沉积。结论鞘内注射A lC l3建立AD大鼠模型方法简便、实用并能较好地模拟AD行为和病理表现。     

阿尔茨海默病患者血清β-淀粉样蛋白和空腹血糖表达水平的临床研究

目的探讨阿尔茨海默病(AD)患者血清β-淀粉样蛋白(Aβ)和空腹血糖(FPG)表达水平。方法随机选取40例AD患者和50名健康人分别作为试验组和对照组,检验其血清Aβ1-40、Aβ1-42和FPG水平。结果与对照组比较,随着AD病情严重程度增加,血清Aβ1-40水平逐渐升高,Aβ1-42水平先升高后降低(P<0.05),FPG表达水平逐渐升高(P<0.05)。结论 AD患者血清β-淀粉样蛋白和空腹血糖表达水平的改变,与AD的严重程度有关。