LC-MS法测定人血浆中尼美舒利的浓度

目的:建立以液-质联用法测定人血浆中尼美舒利浓度的方法。方法:色谱柱为Agilent Zorbox SB-Cl8,流动相为乙腈-0.1%甲酸(65∶35),流速为1.0mL·min-1,柱温为35℃,内标为缬沙坦;正离子检测模式,选择m/z309(尼美舒利,[M+H]+)和m/z436(缬沙坦,[M+H]+)进行监测。结果:尼美舒利血药浓度在5～50ng·mL-1范围内线性关系良好(r=0.9989);方法回收率为87.1%～92.9%;日内、日间RSD分别为3.1%～5.8%、6.4%～9.2%。结论:本方法灵敏、简便,结果准确可靠,重复性好,可用于尼美舒利的临床血药浓度监测和药动学研究。     

尼美舒利分散片在健康人体内的药代动力学及生物等效性的LC-MS/MS研究

目的:建立人血浆中尼美舒利浓度的LC-MS/MS测定法,并用于尼美舒利分散片的药代动力学和生物等效性研究。方法:采用自身双交叉试验设计,20名男性受试者随机分成2组,分别单剂量口服100 mg受试制剂或参比制剂,0～24 h间隔采集血样。以LC-MS/MS内标法测定尼美舒利血药浓度,使用Agilent TC-C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为甲醇-0.1%甲酸溶液(82∶18,v/v);多反应监测[M+H]+离子通道分别为m/z 309.1→m/z 153.9(尼美舒利)和m/z 237.1→m/z 194.0(内标卡马西平),DAS 2.1计算药动学参数。结果:建立的LC-MS/MS法在0.075～12μg·mL-1范围内色谱响应与浓度相关性良好,最低定量限为0.075μg·mL-1,批内及批间精密度RSD均小于15%。受试制剂与参比制剂的Tmax分别为(3.0±0.7)h和(3.5±1.0)h,Cmax分别为(4.863±1.194)μg·mL-1和(4.657±1.038)μg·mL-1,t1/2分别为(3.2±1.0)h和(3.3±1.1)h,AUC0-24 h分别为(32.35±12.50)h·μg·mL-1和(32.32±11.69)h·μg·mL-1,相对生物利用度F为(105.2%±35.0)%。结论:建立的LC-MS/MS法准确、灵敏,结果可靠,测得尼美舒利受试制剂和参比制剂生物等效。     

高效液相色谱法测定尼美舒利颗粒的含量

目的建立 HPLC法测定尼美舒利颗粒含量的方法.方法色谱柱为 KromasilC18柱(4.6mm×250mm,5μm);流动相:甲醇 乙腈 0.1%三氟乙酸溶液(20∶30∶50);流速1.0ml·min-1;柱温:30℃;检测波长298nm.结果尼美舒利在4.1254~82.5086mg·L-1范围内线性关系良好(r=1.0000,n=6),平均加样回收率为98.2%,RSD为1.1%(n=9).结论该方法简便快速,结果准确,可作为尼美舒利颗粒质量控制方法.     

UPLC-MS/MS法测定人血浆中卡马西平浓度

目的:建立UPLC-MS/MS法测定人血浆中卡马西平浓度并进行方法验证,应用于室间质评的样品测定。方法:采用UPLC-MS/MS法,以卡马西平-d8为内标,XSelect CSH C18柱(2.1 mm×75 mm,2.5μm)为分析柱,流动相A为含0.05%甲酸的水溶液,流动相B为含0.05%甲酸的乙腈溶液,流速为0.3 mL·min^-1,梯度洗脱;采用电喷雾离子源,以多反应监测(MRM)正离子模式进行检测,用于定量分析的离子对为m/z 237.1→194.1(卡马西平)、m/z 245.0→202.1(卡马西平-d8)。结果:卡马西平在5~1000 ng·mL^-1范围内线性关系良好(r≥0.9993),批内批间精密度和准确度、回收率和基质效应以及稳定性均符合生物样品测定要求。应用该方法测定的室间质评样品结果全部通过。结论:该方法准确、灵敏、选择性好、重现性高,适用于血浆中卡马西平浓度测定及室间质评。     

固相萃取LC-MS/MS法测定人血浆中头孢呋辛的浓度

目的建立人血浆中头孢呋辛浓度的LC-MS/MS检测方法。方法以头孢拉定为内标,血浆样品酸化后用固相小柱萃取处理;分析柱为Thermo Hypurity C18柱(2.1 mm×150 mm,5μm),流动相为甲醇-20mmol·L-1甲酸铵水溶液(65:35);流速为0.2 m L·min-1,柱温30℃;使用电喷雾离子源(ESI),负离子多反应监测(MRM)方式进行检测。结果头孢呋辛监测离子为m/z 423.1→m/z 207.1,内标头孢拉定监测离子为m/z 348.2→m/z 235.2,样品分析时间为3 min,血浆中内源性物质对测定无干扰,头孢呋辛线性范围为0.1024~20.00μg·m L-1(r2=0.998 8),定量下限为0.102 4μg·m L-1。批内、批间精密度(RSD)均<8.5%,头孢呋辛与内标的平均回收率分别为104.4%和95.5%,平均基质效应为95.8%和93.9%,且均不存在浓度依赖性。结论该方法特异性强,灵敏度高,测定结果可靠,适用于血浆样品的高通量分析。     

慢性髓系白血病患者体内尼洛替尼血药浓度测定方法建立与应用

摘要：目的:采用高效液相色谱-串联质谱法（HPLC-MS/MS）建立测定人血浆中尼洛替尼浓度的检测方法。方法:血样经甲醇除蛋白后,流动相分别为0.1%甲酸的甲酸铵缓冲液（A相）和0.1%甲酸的乙腈溶液（B相）梯度洗脱,Luna???C18柱（20 mm×2.0 mm, 3μm）色谱柱分离,流速为0.6 ml·min-1;柱温35℃;电喷雾离子源（ESI）,正离子模式,多反应监测,离子对为m/z 530.1→m/z 288.9 （尼洛替尼）、m/z 502.3→m/z 394.1（伊马替尼-D8）。结果:尼洛替尼的线性范围为50～10 000 ng·ml-1,定量下限为50 ng·ml-1;日内及日间RSD均小于10%,尼洛替尼低、中、高浓度的提取回收率分别为98.5%,102.4%,103.3%。结论:本检测方法操作简单、灵敏度高、检测下限低、专属性强,适用于临床慢性髓系白血病（CML）患者血浆中尼洛替尼的检测。     

反相高效液相色谱法测定尼美舒利胶囊的含量

目的 建立测定尼美舒利胶囊含量的反相高效液相色谱法.方法 色谱柱为Kromasil C18柱(150 mm×4.6 mm,5μm),流动相为0.1％磷酸(用氨水调解pH至7.0)-乙腈(56∶44),柱温为室温,流速为1.0 mL/min,检测波长为403 nm,进样量为10 μL.结果 尼美舒利的线性范围为0.047 4 ～0.711 0 μg(r =0.999 9,n=5),尼美舒利胶囊的高、中、低3种质量浓度的平均加样回收率为99.27％,RSD =0.80％ (n =6).结论 该方法灵敏、准确、专属性强、重现性好,可用于尼美舒利胶囊含量的测定.     

反相高效液相色谱法测定尼美舒利分散片的含量

目的建立测定尼美舒利分散片含量的反相高效液相色谱法。方法采用LBondapak C18色谱柱(300 mm×4.0 mm,5μm),乙腈-水(45∶55)为流动相,柱温为25℃,检测波长为254 nm,流速为1.0 mL/min。结果尼美舒利质量浓度在40～200μg/mL范围内与峰面积线性关系良好(r=0.9999),平均回收率为99.60%,RSD为0.47%(n=6)。结论该方法简便、快速、准确、灵敏度高、重复性好,可用于尼美舒利分散片含量的测定。     

LC—MS／MS法测定犬血浆中左卡尼汀

目的:建立 Beagle 犬血浆中左卡尼汀浓度的 LC-MS/MS 测定方法。方法:待测血浆50 μL经甲醇沉淀除去蛋白,离心,取上清液10μL进样分析。流动相为甲醇-0.05%醋酸溶液(30:70),色谱柱为江苏汉邦氰基柱(150 mm×4.6 mm,5μm),流速为1.0 mL·min~(-1),LC-MS/MS 多反应离子检测,正离予模式,用于定量分析的离子分别是左卡尼汀 m/z 162.2→84.7[M H]和茶碱 m/z 181.2→124.0[M H]。结果:血浆中杂质不干扰样品和内标的测定,样品分析时间小于5 min,左卡尼汀的线性范围为0.5～200μg·mL~(-1),方法的回收率人于80%,批内和批问的 RSD 均小于10%,稳定性符合生物样品测定要求。结论:该方法经考察符合血浆样品的测定要求,可以应用于血药浓度的测定和药代动力学研究     

液相色谱-串联质谱法测定人血浆中替扎尼定

目的:建立灵敏的液相色谱-串联质谱法测定人血浆中替扎尼定的浓度。方法:血浆样品碱化后经乙醚液-液萃取,以甲醇-10 mmo·lL-1醋酸铵-甲酸(55∶45∶0.1,v/v/v)为流动相,采用Zorbax SB C18柱(150 mm×4.6 mm,5μm)分离,通过电喷雾电离源,以选择反应监测(SRM)方式进行正离子检测,用于定量分析的离子反应分别为m/z254→44(替扎尼定)和m/z243→210(内标,石杉碱甲)。结果:测定血浆中替扎尼定方法的线性范围为10.0～5000 pg·mL-1,定量下限可达10.0 pg·mL-1。日内、日间精密度(RSD)均小于10.0%,准确度(RE)在±3.6%以内。结论:本方法灵敏度高,血浆用量少,适用于替扎尼定制剂的人体药物动力学研究。     

尼美舒利干混悬剂含量测定方法研究

目的建立尼美舒利干混悬剂含量测定方法。方法色谱柱为迪玛C18柱(250mm×4.6mm,5μm);流动相为0.1%的磷酸溶液(用氨水调节pH值至7.0)-乙腈(60∶40);检测波长为298nm;流速1mL/min;柱温30℃;进样量20μL。结果尼美舒利在0.856～85.60μg/mL质量浓度范围内线型关系良好,r=0.9999(n=7),平均回收率为100.3%,RSD为0.54%。结论方法操作简便,结果准确,可用于尼美舒利干混悬剂的含量测定。     

HPLC-MS/MS法测定人血浆中维格列汀浓度及其应用

目的:建立HPLC-MS/MS法测定人EDTA抗凝血浆中维格列汀的浓度,并将其应用于药代动力学研究。方法:以稳定同位素标记¹³C-¹⁵N-维格列汀为内标,血浆样品用乙腈进行蛋白沉淀处理,采用Hypurity C₁₈(150 mm×2.1 mm, 5μm)色谱柱,以甲醇-5 mmol·L^-1甲酸铵水溶液为流动相,梯度洗脱,流速0.5 mL·min^-1,柱温40℃,进样量2μL,采用电喷雾离子源(ESI源),多反应监测正离子模式进行检测。用于定量分析的维格列汀监测离子对m/z 304.3→154.2,内标监测离子对m/z 310.3→160.3。考察其专属性、标准曲线、定量限、精密度、回收率、基质效应、稳定性,并使用该方法对健康受试者的血浆维格列汀浓度进行测定。结果:血浆中维格列汀质量浓度在1.11～534.0 ng·mL^-1范围内线性关系良好。4个浓度水平的批内、批间精密度(RSD)均在0.9%～8.5%,准确度在99.8%～109.3%。低浓度血浆样品室温...     

LC-MS/MS法测定人血浆中的氨氯地平

目的 采用LC-MS/MS测定人血浆中的氨氯地平.方法 血浆样品经氢氧化钠碱化,乙酸乙酯萃取后进行分析.使用Gmini C18 110A(50 mm×3 mm,5 μm)色谱柱,流动相为甲醇-水-甲酸(55:45:0.025),流速0.2 ml·min-1,通过电喷雾离子化四极串联质谱,以多反应离子方式检测.氨氯地平m/z 409.4→237.9和莫沙比利m/z 422.1→198.0.结果 线性范围为0.0313～20 ng·ml-1,最低定量限为0.0313 ng·ml-1,萃取回收率为74.4%～83.1%,方法回收率为96.1%～108.7%,日内和日间RSD均<8%.结论 所用方法快速、简便、灵敏度高,适用于人血浆中药物浓度的测定及药物动力学和生物利用度的研究.     

UPLC-MS/MS法同时检测人血浆中拉莫三嗪和卡马西平浓度

目的采用高效液相色谱-质谱联用技术同时检测人血浆中拉莫三嗪和卡马西平浓度。方法采用UPLC-MS/MS法,以西替利嗪为内标,血浆经甲醇直接沉淀后进样分析。色谱柱为ACQUITY BEH C_(18)(2.1 mm×50 mm,1.7μm),流动相为甲醇-含0.1%甲酸的水溶液(70∶30,v/v),流速为0.2 ml/min,进样体积为10μl。质谱采用ESI离子源,正离子MRM模式扫描分析,拉莫三嗪、卡马西平和内标西替利嗪的离子对分别为m/z 256.0→211.2、m/z 237.0→194.1、m/z 389.2→201.2。结果拉莫三嗪和卡马西平线性范围分别为5～1 000 ng/ml (r=0.999 5)和5～1 000 ng/ml (r=0.997 5),定量下限均为5 ng/ml。批内、批间精密度RSD<15%;平均提取回收率分别为81.3%～84.9%和82.7%～87.3%。结论本方法样品前处理简便、快速,检测准确、灵敏度高,适用于临床治疗药物检测和药代动力学研究。     

LC-MS/MS法测定人血浆中氯马斯汀浓度

目的:建立LC-MS/MS法测定人血浆中氯马斯汀浓度,并进行其药代动力学和生物等效性研究。方法:血浆样品以苯海拉明为内标,经提取溶剂[正己烷-二氯甲烷-异丙醇(30∶20∶1)]萃取后进行LC-MS/MS分析。采用高效液相色谱分离系统,色谱柱为Inertsil Hilic C18柱(150 mm×3.0 mm,5μm),流动相为乙腈10 mmo·lL-1醋酸铵溶液)-甲酸(40∶60∶1)。采用质谱检测系统,ESI离子源,正离子模式,多级反应监测(MRM)方式,m/z344→215(氯马斯汀),m/z256→167(内标,苯海拉明)。结果:在0.01～5.0 ng·mL-1范围内,氯马斯汀血药浓度呈良好的线性关系(r=0.9972),精密度RSD%均小于10%,准确度在90.8%～102%。结论:本测定方法灵敏准确,适用于人血浆中氯马斯汀浓度的测定。     

HPLC-MS/MS法测定琥乙红霉素颗粒体内活性代谢物

目的:建立琥乙红霉素人体内活性代谢物红霉素的HPLC-MS/MS分析方法。方法:选用克拉霉素为内标,血浆样品经正己烷-二氯甲烷-异丙醇(300∶150∶15)提取处理,通过检测活性代谢物红霉素的浓度来监测琥乙红霉素体内行为。色谱条件Waters C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),甲醇-水(80∶20,含0.5%甲酸)为流动相,流速0.6 mL·min-1,采用HPLC-MS/MS检测系统(SRM模式),质谱采用电喷雾电离源(ESI),红霉素选择检测离子对为m/z 734→m/z 158,内标克拉霉素选择检测离子对为m/z 748→m/z 158。结果:血浆中红霉素检测方法的线性范围为9.724～2431.0 ng·mL-1,最低检测限可达9.724 ng.mL-1。血浆中红霉素的平均回收率为77.6%～80.0%;日内、日间RSD均小于11%。结论:本法灵敏、准确、选择性高,可用于监测琥乙红霉素的体内行为。     

HPLC-MS/MS法同时测定人血浆中依那普利和依那普利拉的浓度

目的建立人血浆中依那普利和依那普利拉含量测定的高效液相色谱-串联质谱(HPLC-MS/M S)方法。方法血浆样品加入内标(贝那普利拉),以含0.1%甲酸的甲醇沉淀蛋白后,进行HPLC-M S/M S分析。色谱柱为Hedera ODS-2 C18(150 mm×2.1 mm,5μm),流动相为甲醇-0.5%甲酸水溶液梯度洗脱,流速为0.4 m L/min,柱温为30℃,采用多反应监测(M RM)方式进行定量分析,用于监测的离子质荷比分别为m/z377.2→m/z 234.3(依那普利)、m/z 349.3→m/z 206.2(依那普利拉)和m/z 397.4→m/z 351.4(内标,贝那普利拉)。结果人血浆中依那普利和依那普利拉的线性范围分别为0.2~200 ng/m L(r=0.999 9)、0.5~120 ng/m L(r=0.999 3);批内、批间精密度均<11.3%。结论该方法快速、灵敏、专属性强,可用于人血浆中依那普利和依那普利拉浓度的测定。     

尼美舒利颗粒剂的人体生物等效性及相对生物利用度研究

目的 建立人血浆中尼美舒利的固相萃取结合HPLC-UV测定法,研究两种尼美舒利颗粒的生物等效性.方法 采用XB-Phenyl柱(250mm×4.6mm,5μm),柱温为40℃,流动相为乙腈-30mM乙酸铵(44:56,v/v),流速为1.0ml·min-1,检测波长为350nm.18例男性健康志愿者自身对照随机交叉给药,分别单次口服不同厂家尼美舒利颗粒剂200mg,不同时间点取血,比较两药主要药动学参数的差异和相对生物利用度.结果 尼美舒利与血浆中内源性杂质分离完全,尼美舒利在0.092～15.300μg·ml-1内与峰面积比线性良好,血浆中尼美舒利最低定量浓度为0.092μg·ml-1.方法 的回收率为92.2%～102.2%,日内、日间精密度(RSD)均<8.0%.单剂量口服尼美舒利200mg后,两种制剂的AUC0→t为(83.51±23.34)μg·h-1·ml-1和(86.54±27.92)μg·h-1·ml-1;AUC0→∞为(87.00±26.23)μg·h-1·ml-1和(91.04±32.57)μg·h-1·ml-1;Cmax为(10.18±1.76)μg·ml-1和(10.60±1.62)μg·ml-1;tmax为(2.1±0.7)h和(2.0±0.8)h.结论 该方法简单快速,灵敏度高,可用于尼美舒利的体内过程研究.方差分析表明,两制剂之间药动学参数无显著差异,试验制剂与参比制剂为生物等效制剂.     

抗风湿类中成药中非法加入尼美舒利的检测

目的采用高效液相色谱（HPLC）法检测抗风湿类中成药中非法添加的化学物质尼美舒利。方法色谱柱采用Kromasil C18柱（250 mm×4.6 mm,5μm）,流动相为0.004 mol/L磷酸二氢钾溶液（磷酸调节pH至4.0）-甲醇（45∶55）,检测波长298 nm。结果尼美舒利对照品质量浓度线性范围为100.04～600.24μg/mL,r=0.999 9（n=6）,平均回收率为99.49%,RSD为1.94%（n=6）。结论 HPLC法灵敏度高,操作简便、准确,可用于定性和定量检测抗风湿类中成药中非法添加的化学物质尼美舒利。     

CB1R部分拮抗剂alisol G的大鼠药动学研究及血脑屏障透过率初评

建立了UPLC-MS/MS方法测定大鼠血浆及脑脊液中大麻素受体1(CB1R)部分拮抗药泽泻醇G(alisol G)的浓度,评价其血脑屏障透过性。以利莫那班为内标,采用液液萃取前处理方法,色谱柱为ACQUITY BEH C18柱,流动相为甲醇∶0.1%乙酸溶液(90∶10),质谱采用正离子扫描的电喷雾离子源,多反应监测(MRM)模式,对m/z 455.16→m/z383.04(泽泻醇G)、m/z 464.88→m/z364.75(内标)进行定量分析。泽泻醇G血浆样品在10~4000ng/ml、脑脊液样品在4~400 ng/ml范围内线性良好;批内、批间RSD≤10.22%,样品回收率稳定(78.5%~86.5%)、贮存和处理条件下稳定性良好。本方法灵敏、可靠,能准确测定大鼠血浆及脑脊液中的泽泻醇G浓度。大鼠灌胃后血浆中cmax为312.64ng/ml,脑脊液中检测不到原型化合物,表明泽泻醇G不易透过血脑屏障。本研究结果为CB1R部分拮抗药泽泻醇G的后续研究开发提供了重要依据。