赖氨肌醇维B_(12)口服溶液中赖氨酸与维生素B_(12)含量测定

目的建立赖氨肌醇维B12口服溶液中赖氨酸与维生素B12含量测定方法。方法采用电位滴定法测口服液中盐酸赖氨酸含量;高效液相色谱法测定维生素B12的含量,色谱条件为C18柱,以乙腈-0.05mol/L磷酸二氢钠(16︰84)用磷酸调节pH=3.3为流动相,流速1mL/min,检测波长210nm。结果电位滴定法测定口服液中盐酸赖氨酸的回归方程为V=0.1055G-0.3425,r=0.9996。精密度试验的RSD%为0.44%,溶液稳定性试验的RSD%为0.59%,低中高三个浓度的平均回收率分别为99.54%、100.08%、99.71%,3批样品含量测定分别为100.72%、99.45%和99.76%;测定维生素B12的回归方程为A=0.8407C-0.0425,r=0.9998,精密度试验RSD为0.99%,溶液稳定性试验RSD为1.08%,最低检出限与定量限分别是0.12μg/mL和0.40μg/mL,低中高三个浓度平均回收率分别是98.20%、99.00%和99.07%,对3批样品的检测结果分别是100.81%、99.43%、98.25%。结论本研究测定盐酸赖氨酸和维生素B12的方法均准确可行,可用于本口服液的质量控制。     

两种方法检测血清甲胎蛋白(AFP)的比较

目的对电化学发光免疫法与微粒子酶联免疫法检测血清甲胎蛋白作对比分析.方法随机抽取150份临床送检的标本,用电化学发光免疫法与微粒子酶联免疫法测试甲胎蛋白的含量,对测试数据进行相关性试验、线性试验、精密度试验、回收试验.结果两法无显著性差异(P＞0.05),但电化学发光免疫法的线性范围较宽(1-980ng/ml),重复性较好(批内CV值3.4%,批间CV值3.5%),回收率较高(97.2%).结论电化学发光免疫法检测血清甲胎蛋白优于微粒子酶联免疫法检测血清甲胎蛋白     

HPLC法测定天元克痛方主要成分的研究

目的建立天元克痛方的主要成分的含量测定方法.方法应用HPLC法测定对方中的主要成分延胡索乙素和东莨菪碱进行含量测定,考察方法线形范围、精密度及回收率等.结果采用HPLC法对延胡索乙素进行测定,标准曲线为y=0.0774x+1.1044;r=0.9999,高、中、低三个浓度的日间精密度分别为0.15%、0.3%、0.4%;日内精密度分别为0.43%、0.69%、0.58%;回收率分别为100.8%、101.2%、104.5%.HPLC法对东莨菪碱进行含量测定,标准曲线为y=0.0667x-0.6352;r=0.9999,高、中、低三个浓度日内精密度分别为3.04%、1.66%、0.46%;回收率分别为104.34%、95.05%、95.79%.结论采用HPLC法对天元克痛方中主要成分延胡索乙素和东莨菪碱进行含量测定,方法灵敏可靠、重现性好.     

HPLC法测定天元克痛方主要成分的研究

目的:建立天元克痛方的主要成分的含量测定方法.方法:应用HPLC法测定对方中的主要成分延胡索乙素和东莨菪碱进行含量测定,考察方法线形范围、精密度及回收率等.结果:采用HPLC法对延胡索乙素进行测定,标准曲线为y=0.0774x+1.1044;r=0.9999,高、中、低三个浓度的日间精密度分别为:0.15%、0.3%、0.4%;日内精密度分别为:0.43%、0.69%、0.58%;回收率分别为:100.8%、101.2%、104.5%.HPLC法对东莨菪碱进行含量测定,标准曲线为y=0.0667x-0.6352;r=0.9999,高、中、低三个浓度日内精密度分别为:3.04%、1.66%、0.46%;回收率分别为:104.34%、95.05%、95.79%.结论:采用HPLC法对天元克痛方中主要成分延胡索乙素和东莨菪碱进行含量测定,方法灵敏可靠、重现性好.     

口服洗肠盐的含量测定

目的 建立口服洗肠盐的含量测定方法.方法 利用口服洗肠盐中各组分的特点,设计实验方案,进行精密度试验(重复性试验)、加样回收试验及样品的测定.结果 用本试验法测得总氯、氯化钾、碳酸氢钠精密度RSD分别为0.16%、0.73%、0.60%;9批加样回收的平均回收率分别为100.04%、100.08%、99.27%,其RSD分别为0.90%、0.92%、0.48%.结论 采用本试验设计的含量测定方法 准确可靠、回收率高,可作为该制剂的含量测定方法.     

雅培ARCHITECT12000SR化学发光CEA残余试剂再利用评估

目的：评估雅培ARCHITECT I2000SR化学发光仪CEA残余试剂再利用的性能。方法回收合并残余试剂,评价其检测精密度和回收率,并依据美国临床实验室标准化委员会（NCCLS）EP9-A2文件方案,与原装试剂进行对比试验。结果残余试剂检测CEA的批内精密度2.84％～3.69％,天间精密度3.28～4.86％,回收率为92.31％～104.53％,均符合相关规定;两种试剂检测CEA的相关系数r=0.996,回归方程为Y=1.049X-0.521,在各医学决定水平（Xc）的预期偏倚（Bc）在允许偏倚内,两方法相当,可以被接受。结论雅培ARCHITECT I2000SR化学发光仪CEA残余试剂的性能符合临床要求,可以回收再利用。     

首次应用酶联免疫法检测血浆纤维结合蛋白

目的 探讨血清纤维结合蛋白(Fn)含量的检测方法。方法 首次应用酶联免疫法(ELISA)检测待测血清,测定其光密度(D值),判定待测血清中Fn的含量。结果 该方法线性范围50～300mg/L,批内、日内、日间的CV分别为2.37％、2.89％、3.24％;回收率98.79％。结论 该方法线性范围适宜,准确度、精密度较好,符合临床检验工作要求。     

雅培ARCHITECT I2000SR化学发光CEA残余试剂再利用评估

目的评估雅培ARCHITECT I2000SR化学发光仪CEA残余试剂再利用的性能。方法回收合并残余试剂,评价其检测精密度和回收率,并依据美国临床实验室标准化委员会(NCCLS)EP9-A2文件方案,与原装试剂进行对比试验。结果残余试剂检测CEA的批内精密度2.84%~3.69%,天间精密度3.28~4.86%,回收率为92.31%~104.53%,均符合相关规定;两种试剂检测CEA的相关系数r=0.996,回归方程为Y=1.049X-0.521,在各医学决定水平(Xc)的预期偏倚(Bc)在允许偏倚内,两方法相当,可以被接受。结论雅培ARCHITECT I2000SR化学发光仪CEA残余试剂的性能符合临床要求,可以回收再利用。     

时间分辨荧光免疫分析法检测游离F-βHCG的方法学评价

目的对时间分辨荧光免疫分析法(TRFIA)定量检测F-βHCG的各种性能指标进行方法学评价,验证其临床适用性。方法通过灵敏度、批内和批间精密度、标准曲线稳定性参数等指标评价TRFIA检测F-βHCG的性能,同时通过回收试验分析其准确度。结果 F-βHCG的最小测定值为0.09ng/ml,低、中、高3种质控品批内和批间变异系数均小于10%,标准曲线稳定性参数各变异系数小于5%,回收试验结果在97%～104.7%之间。结论 TRFIA法检测F-βHCG具有准确性好、灵敏度高、特异性强、能自动化分析等优点,能充分满足临床检测的需求。     

胃蛋白酶原光激化学发光免疫测定方法的建立

目的建立一种检测人血清胃蛋白酶原浓度的光激化学发光免疫测定方法。方法采用双抗体夹心法建立检测人血清中胃蛋白酶原Ⅰ和胃蛋白酶原Ⅱ浓度的方法,评估其分析灵敏度、回收率和批内精密度,并与雅培(化学发光法)进行比较。结果胃蛋白酶原Ⅰ/Ⅱ的分析灵敏度分别为0.8ng/mL和0.6ng/mL,回收率分别为100.3%、106.5%,批内变异系数(CV)为0.93%~4.1%、1.2%~4.3%,与化学发光法的相关性较好(r=0.99)。结论该方法测定胃蛋白酶原具有较高灵敏度、精密度和准确性,适用于临床。方法建立后可进一步进行长期稳定性试验。     

凝胶电泳法及荧光光度法测定siRNA阳离子脂质体的含量和包封率

建立siRNA含量测定方法,用于阳离子脂质体中siRNA的含量和包封率测定。利用荧光染料SYBR Gold和Ribogreen与siRNA结合后能发出强烈荧光的原理,分别采用电泳法和荧光分光光度法测定脂质体中的siRNA含量, 计算阳离子脂质体的包封率。SYBR Gold电泳法的检测线性范围为0.2～2.0 μmol·L^-1 (R=0.993 0), 高、中、低3个浓度的回收率分别为96.35%、96.92%和100.74% (n = 3); 日内日间精密度的RSD均小于5% (n = 5)。Ribogreen荧光分光光度法的检测线性范围为10～50 nmol·L^-1 (R = 0.997 1), 高、中、低3个浓度的回收率分别为98.22%、99.88%和99.64% (n = 3);日内日间精密度的RSD均小于5% (n = 5)。利用这两种方法所测得3批阳离子脂质体中siRNA平均含量分别为98.52%和97.85%,平均包封率分别为99.20%和96.45%,经方差分析, 两种方法无显著性差异。两种方法准确可靠、稳定性高和方便实用,均可用于阳离子脂质体中siRNA的含量和包封率测定。

     

参草宁心颗粒的薄层鉴别及含量测定研究

目的:建立参草宁心颗粒的薄层鉴别与含量测定方法。方法:鉴别采用薄层色谱(thin layer chromatography,TLC)法,含量测定采用高效液相色谱(high performance liquid chromatchromatography,HPLC)法。结果:实验建立了方中5味药丹参、苦参、炙甘草、地锦草和仙鹤草的薄层鉴别,所建立的方法均分离良好、斑点清晰、阴性无干扰;建立的含量测定方法同时评价了方中丹参、炙甘草、地锦草3味药中的活性成分丹酚酸B、甘草苷、没食子酸,3种成分分别在0.107~1.070,0.119~1.19,0.15~1.5μg范围内呈现良好的线性,回归方程分别为y=793 255x+133 630,y=489 205x+113 434,y=177 863x+69 444,相关系数r分别为0.999 6,0.999 1,0.999 4。精密度、稳定性、重复性实验的RSD值均<3%,加样回收率分别为99.47%,100.44%,100.04%,RSD分别为2.61%,2.34%,2.45%。结论:实验建立的TLC鉴别方法和HPLC含量测定方法均专属性强、重现性好,可用于参草宁心颗粒的质量控制。     

流式微球分析技术检测人心肌钙蛋白T的方法学性能评价

目的对自建的流式微球分析技术（Cytoometric bead assay,CBA）检测人肌钙蛋白T（cTnT）的方法进行性能评价。方法参照美国临床和实验室标准化协会（CLSI）系列文件,结合工作实际,对方法的精密度、准确度、分析灵敏度、分析测量范围、回收试验、干扰试验进行了评价,并进行试验比对。结果 CBA检测cTnT在高低浓度范围内批内变异系数分别为5.21%和11.31%,批间变异系数分别为6.24%和13.16%,准确度相对偏倚在3.17%～5.39%之间,回收率在94.7%～111.5%之间;检测灵敏度为16.00ng/L,分析测量范围为16.00～5000ng/L,人体正常含量或含量偏高的三酰甘油、胆固醇和胆红素对cTnT检测的干扰很小,与电化学发光分析技术无显著差异。结论自建CBA检测cTnT技术性能较好,符合公认的质量指标,可在临床工作中推广使用。     

血清乙型肝炎e抗原手工和全自动酶联免疫吸附试验测定的精密度评价

目的评价手工操作和高通量全自动酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测血清乙型肝炎e抗原(HBe Ag)的精密度性能。方法参考美国临床和实验室标准协会(CLSI)EP5-A2文件,对稳定的高低浓度的HBe Ag实验样品,每天做2批实验,每批对样品做双份检测,共做20 d实验,计算批内不精密度、批间精密度、天间不精密度和总不精密度,并与厂商声称的不精密度比较。结果手工法和全自动ELISA测定高低浓度HBe Ag样品的批内不精密度的变异系数为4.6%、3.2%和1.1%、1.9%,天间精密度的变异系数为3.2%、2.0%和1.6%、1.9%,且小于厂商声明的不精密度质量目标。结论手工法和高通量全自动酶联免疫吸附试验法测定血清HBe Ag的精密度性能均良好,可满足临床要求。     

雅培AXSYM化学发光残留试剂检测癌胚抗原的初步评估

目的评估雅培AXSYM化学发光残留试剂检测癌胚抗原（CEA）的性能。方法回收残留试剂,评价其检测CEA的精密度和回收率,并依据美国临床实验室标准化委员会（NCCLS）EP9-A2文件方案,每天选取临床样本4～5份,分别用新试剂和残留试剂进行测定,共测定10 d 41个样本,以新试剂为比较方法,残留试剂作为实验方法,比较检测结果的相关性和偏倚。结果残留试剂检测CEA的批内精密度2.81%～3.20%,日间精密度3.35%～4.71%,回收率为96.78%～104.84%,两种试剂检测CEA的相关系数r=1.000,回归方程为Y=1.069X-0.256,在各医学决定水平（X1=5μg·L-1,X2=20μg·L-1,X3=100μg·L-1）的预期偏倚在允许偏倚内。结论雅培AXSYM化学发光仪残留试剂检测CEA的性能符合临床要求,可以回收利用。     

HPLC法同时测定补骨脂药材中补骨脂二氢黄酮和补骨脂酚的含量

目的:建立同时测定补骨脂药材中补骨脂二氢黄酮和补骨脂酚含量的方法。方法:采用高效液相色谱法。色谱柱为Shim-Pack VP-ODS,流动相为乙腈-水(梯度洗脱),流速为1.0 mL/min,检测波长为246 nm,柱温为30℃,进样量为10μL。结果:补骨脂二氢黄酮、补骨脂酚检测进样量线性范围分别为48.9～489 ng(r=0.999 8)、784～7 840 ng(r=0.999 9);精密度、稳定性、重复性试验的RSD<2.0%;加样回收率分别为95.30%～99.63%(RSD=1.45%,n=9)、96.89%～100.82%(RSD=1.36%,n=9)。结论:该方法操作简便,精密度、稳定性、重复性好,可用于补骨脂药材中补骨脂二氢黄酮和补骨脂酚含量的同时测定;不同辐照剂量下药材样品中待测成分的含量均无明显变化。     

RP-HPLC法同时测定血浆中硝苯地平及其代谢产物氧化硝苯地平的浓度

目的建立测定硝苯地平(抗冠心病)及其代谢产物氧化硝苯地平的血药浓度的反相高效液相色谱法。方法色谱柱为Diamosil C18(4.6mm×250mm,5μm),以甲醇-水(62∶38)为流动相,检测波长为237nm,流量为1.0mL·min-1,内标为地西泮。结果硝苯地平和氧化硝苯地平的线性范围分别为2.04～204.00ng·mL-1(γ=0.9957)和2.52～252.00ng·mL-1(γ=0.9954);硝苯地平的提取回收率为(85.29±4.10)%～(90.60±9.36)%;批内、批间精密度分别为1.91%～8.43%和6.48%～9.90%。氧化硝苯地平的提取回收率为(81.90±6.34)%～(88.26±4.89)%,批内、批间精密度分别为6.22%～8.95%和7.92%～9.28%。结论本法快速、准确,重现性好,可同时测定血浆硝苯地平及其代谢产物氧化硝苯地平的浓度。     

重组人干扰素α-2b脂质体包封率测定方法的研究

目的:本文研究了重组人干扰素α2b 脂质体包封率的测定方法,为干扰素α2b 脂质体的研究和质量控制提供方法。方法:薄膜分散法制备重组人干扰素α2b 脂质体,应用双抗体夹心酶联免疫法(ELISA)测定其药物含量,考察了方法的回收率、板内及板间精密度和专属性,应用超速离心法分离脂质体中的游离药物,ELISA 法测定游离药量,从而测定脂质体药物包封率。结果:ELISA 法测定重组人干扰素α2b 的板内精密度的 RSD<9.4%(n=5),板间精密度 RSD<18.5%(n=3);超速离心(60000 r·min~(-1),2h,4℃)可将脂质体中的游离药物与脂质体完全分离,3批重组人干扰素α2b 脂质体药物包封率测定结果分别为30.3%,32.0%和29.4%。结论:超速离心-ELISA 测定法可用于重组人干扰素α2b 脂质体包封率的测定。     

滴宝第五代循环酶法总胆汁酸测定试剂盒的实验评价

目的 对滴宝第五代循环酶法总胆汁酸测定试剂盒进行试验评价.方法 通过试剂的批内精密度、批间精密度、线性测试、稳定性、干扰试验等进行系统评估.结果 滴宝总胆汁酸(TBA)测定试剂盒批内精密度和批间精密度测定的变异系数均＜3%,回收率在91%～95%.线性测定良好,可达160μmol/L.对胆红素、血红蛋白、甘油三酯均具有良好的抗干扰能力,与临床对照试剂具有良好的线性相关性.结论 该试剂完全符合临床需求.     

HPLC法测定汉防己甲素自微乳中汉防己甲素的含量

目的 建立测定汉防己甲素自微乳含量的高效液相色谱法.方法 采用HPLC法,色谱柱为C18色谱柱,流动相为0.06％二乙胺甲醇-水(80∶20),检测波长为282nm,进样量为10μL,流速为1.0mL·min-1,柱温为30℃.结果 汉防己甲素质量浓度在0.1004mg·mL-1 ～1.004mg·mL-范围内与峰面积呈良好的线性关系y=4365774x+ 9472(r=0.999),精密度试验结果的RSD％=0.08％,稳定性试验结果的RSD为0.32％,重复性试验结果的RSD为0.35％,回收试验结果平均回收率为100.34％,RSD为0.79％.结论 该方法简便、灵敏、准确、重复性好,结果可靠,可作为汉防己甲素自微乳的含量测定方法.