基于模型群体分析的淫羊藿抗骨质疏松活性成分筛选研究

筛选淫羊藿中对破骨细胞生长具有抑制作用的活性成分。搜集不同产地淫羊藿药材,MTT法考察不同产地淫羊藿抗前破骨细胞RAW264.7生长活性。结果显示不同产地淫羊藿的抗RAW264.7生长活性具有显著差别。采用模型群体分析,一个具有潜在活性的化合物宝霍苷I被筛选出。通过破骨细胞活性验证,发现宝霍苷I活性优于淫羊藿苷。模型群体分析方法适用于指导中药活性成分预测及发现,为中药活性成分筛选提供了新方法。     

RP-HPLC测定淫羊藿不同品种和部位中柔藿苷和淫羊藿苷

目的:为了对中药淫羊藿中柔藿苷和淫羊藿苷含量进行系统研究,测定了淫羊藿不同品种和药用部位的柔藿苷和淫羊藿苷含量。方法:采用RP-HPLC法对3个品种多个样品进行测定,以BECKMAN COULTER_(TM)-C_(18)柱(带预柱)为色谱柱,流动相为乙腈-水(25∶75),流速1.0mL·min~(-1),检测波长为270nm。结果:柔藿苷在0.19642-1.9642μg范围内呈良好的线性关系,淫羊藿苷在0.19335-1.9335μg范围内呈良好的线性关系。巫山淫羊藿同一植株体的不同部位中柔藿苷和淫羊藿苷的分布均为叶>根>茎。巫山淫羊藿同一植株的任何部位都是柔藿苷含量高于淫羊藿苷,而淫羊藿和箭叶淫羊藿叶中都是淫羊藿苷含量高于柔藿苷。结论:巫山淫羊藿中以柔藿苷为主要成分,淫羊藿和箭叶淫羊藿中以淫羊藿苷为主要成分。     

淫羊藿苷药理研究概况

淫羊藿是小檗科淫羊藿属植物,包括粗毛淫羊藿（Epimedium acuminatum Franch．）、朝鲜淫羊藿（Epimedium koreanum Nakai）、心叶淫羊藿（Epimedium brevicornum Maxim．）、巫山淫羊藿（Epimedium wushanense）、箭叶淫羊藿（Epimedium sagittatum Maxim．）和柔毛淫羊藿（Epimedium pubescens）等。淫羊藿苷（Ica）是淫羊藿中的主要活性成分,分子式为C33H40O15,分子量为676．67。     

RP—HPLC法测定巫山淫羊藿中4种成分的含量

目的:用 HPLC 梯度洗脱法测定巫山淫羊藿中4种主要成分的含量,考察了淫羊藿属苷 A、双藿苷 A、朝藿定 C 和淫羊藿苷在巫山淫羊藿不同部位中的分布。方法:采用 RP-HPLC 法测定,以 BECKMAN COULTER_(TM)-C_(18)(10μm,4.6 mm×250mm)为色谱柱,流动相为乙腈-水,梯度洗脱(0 min,乙腈-水比例为20:80;5 min,比例为30:70;10 min,比例为50:50),流速为1 mL·min~(-1),检测波长270 nm。结果:淫羊藿属苷 A 在0.188μg～1.880μg,淫羊藿苷在0.214μg～2.140μg,双藿苷 A在0.240μg～2.400μg,朝藿定 C 在0.282μg～2.820μg范围内呈良好线性关系;重复性实验的 RSD 分别为1.2%,1.3%,1.2%,1.2%。巫山淫芋藿不同部位双藿苷 A 和朝藿定 C 的含量较大,同一植株的不同部位中朝藿定 C 的分布为根>叶>茎。双藿苷 A 的分布为根>茎>叶,淫羊藿属苷 A 和淫羊藿苷含量较少。结论:巫山淫羊藿根中的化学成分以朝藿定 C 为最高,双藿苷 A 为次,而巫山淫羊藿叶中也以朝藿定 C 含量为最高。     

不同厂家炙朝鲜淫羊藿饮片主成分含量比较

目的:对不同厂家炙朝鲜淫羊藿饮片主成分进行比较。方法:以反相高效液相色谱(PR-HPLC)法同时测定炙朝鲜淫羊藿饮片中5种主要黄酮类成分朝藿定A、朝藿定B、朝藿定C、淫羊藿苷和宝藿苷I的含量。结果:朝藿定A以亳州千草药业有限公司的炙朝鲜淫羊藿饮片含量最高;朝藿定B、朝藿定C以药都集团茗都中药饮片有限公司的炙朝鲜淫羊藿饮片含量最高;淫羊藿苷、宝藿苷I以安徽滕王药业有限公司的炙朝鲜淫羊藿饮片含量最高。结论:建立多种成分的含量测定方法可全面控制炙朝鲜淫羊藿饮片质量。     

RP-HPLC法测定朝鲜淫羊藿提取物中4种成分的含量

目的建立HPLC法同时测定朝鲜淫羊藿提取物中淫羊藿苷A、淫羊霍苷、朝藿定B、淫羊藿次苷Ⅱ含量的方法。方法色谱柱为Diamonsil C18(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为甲醇-水梯度洗脱[0~25 min,w(甲醇)=55%~70%;25~40 min,w(甲醇)=70%~90%;40~45 min,w(甲醇)=90%~55%;45~60 min,w(甲醇)=55%],流速为0.8 mL.min-1,检测波长为270 nm,柱温为25℃。结果淫羊藿苷A、淫羊霍苷、朝藿定B、淫羊藿次苷Ⅱ的线性关系良好,线性范围分别为16.5~82.5、96.0~480.0、30.6~153.0、1.5~7.5 mg.L-1,平均回收率分别为103.7%、100.9%、102.2%、100.1%,RSD分别为1.4%、2.9%、1.2%、2.5%(n=5)。结论该方法可作为朝鲜淫羊藿提取物的含量测定方法 ,为其质量控制提供参考依据。     

正交设计优化淫羊藿总黄酮最佳提取条件

目的：研究淫羊藿总黄酮最佳提取条件。方法：采用正交设计试验研究不同浓度的乙醇,溶剂体积和提取时间对淫羊藿总黄酮回流提取的影响;采用紫外分光光度法和HPLC法测定提取物中总黄酮和淫羊藿苷含量。结果：淫羊藿总黄酮最佳提取条件是采用90％乙醇,20倍量提取溶剂,提取时间为1h。结论：采用以上提取条件,所得提取物中总黄酮和淫羊藿苷含量最高。     

HPLC法测定不同产地淫羊藿饮片中淫羊藿苷的含量

目的：研究不同产地的淫羊藿饮片中淫羊藿苷的含量。方法从市场上随机采购7批淫羊藿饮片,采用稀乙醇超声萃取提取淫羊藿苷,然后采用高效液相色谱法测定淫羊藿苷含量,考察其合格率。结果按《中国药典》对淫羊藿苷含量要求,用 HPLC 法检测淫羊藿苷浓度,7批淫羊藿饮片有4批合格。结论不同产地的淫羊藿中淫羊藿苷含量不同。     

不同产地和品种淫羊藿中淫羊藿苷的HPLC分析

目的 :对中药淫羊藿中淫羊藿苷的含量分析进行方法学研究 ,并测定淫羊藿的不同产地、不同品种、不同药用部位的淫羊藿苷的含量。方法 :采用RP HPLC技术对 7个品种 2 3个样品进行测定。以PERKIN EIMER SH/5C18柱为分析柱 ,流动相为乙腈 水 36%乙酸 ( 2 5∶73.5∶1 .5)流速 1 .0ml/min。UV检测波长 2 70nm。结果 :本方法测定淫羊藿苷含量在 0 .0 2 1 2～ 0 .1 2 7μg ,0 .53～ 1 .696μg范围内呈良好的线性关系。不同产地、不同品种、不同药用部位的淫羊藿其淫羊藿苷的含量为 0 .0 0 30 7%～ 1 .55%。同一植株不同部位中淫羊藿苷的含量分布叶 >叶茎 >茎 >根。结论 :淫羊藿由于产地不同、品种不同其淫羊藿苷的含量相差悬殊。本测定方法为筛选优良品种和扩大药源提供了简便易行的方法     

不同方法炮制对巫山淫羊藿中主要成分朝藿定C和淫羊藿苷的影响

目的:研究不同方法炮制对巫山淫羊藿中主要成分朝藿定C及淫羊藿苷的影响。方法:采用RP-HPLC法,使用Shim-pack VP-ODS(5μm,150 mm×4.6 mm)色谱柱,以乙腈-水(25∶75)流动相,流速为1 mL·min-1,检测波长270 nm,柱温30℃,比较不同炮制品中朝藿定C及淫羊藿苷含量的变化。结果:巫山淫羊藿不同炮制品中活性成分淫羊藿苷含量均有较大程度的上升;而朝藿定C变化则比较复杂,除羊脂油炙巫山淫羊藿中朝藿定C含量有较大的下降外,其余均有较小程度的上升。结论:加热炮制可能促使巫山淫羊藿中的其他成分分解或转化为淫羊藿苷;羊脂油炙巫山淫羊藿中朝藿定C含量有较大的下降,提示朝藿定C可能不是淫羊藿中的助阳成分;不同方法炮制对巫山淫羊藿主要成分影响较大,提示巫山淫羊藿在临床应用时必须选择合适的炮制方法。     

In vitro screening and toxic mechanism exploring of leading components with potential hepatotoxicity of Herba Epimedii extracts

Herba Epimedii is a famous Chinese edible herb, and due to its potential hepatotoxic effects, the safety associated with this herb has attracted a great deal of attention. In this study, the components of four types of the Herba Epimedii extracts were identified by HPLC-MS/MS. Among these components, 11 components that were present in all four extracts and could be obtained as reference substances were evaluated for their ability of cytotoxicity in HL-7702 and HepG2 cells, resulting in the identification of icarisid I and sagittatoside A as the most relevant with respect to the toxicity of the extracts. The targeted toxicological effects were further investigated using a series of correlated biological indicators to elucidate potentially hepatotoxic mechanisms. The results showed that the extracts and the selected compounds had varying degrees of influence on the leakage of ALT, AST and LDH; the activity of SOD, GSH and MDA; the increase in intercellular ROS; and the decrease in MMP. Among the tested substances, the ethanol extracts exhibited stronger hepatotoxicity, with icarisid I and sagittatoside A correlating with this toxic effect, and the hepatoxic mechanisms of which may be associated with damaged cell structure, increased oxidative stress and induction of apoptosis.     

淫羊藿苷改善中枢神经系统疾病的研究进展

淫羊藿苷是淫羊藿中主要活性成分,具有抗肿瘤、抗炎、增强免疫、抗肝毒性、抗氧化等多种药理活性。淫羊藿苷可通过多靶点、多途径对中枢神经系统疾病产生保护作用,如淫羊藿苷具有抗抑郁作用,对阿尔茨海默病、帕金森病、缺血性脑卒中、多发性硬化具有保护作用。为了进一步扩大淫羊藿苷在临床治疗中的应用,综述了淫羊藿苷改善中枢神经系统疾病及其作用机制。     

淫羊藿苷和仙茅苷协同抑制破骨细胞的形成、分化和骨吸收功能

目的 研究淫羊藿苷和仙茅苷配伍抑制破骨细胞形成、分化和骨吸收的相互作用关系.方法 用1,25-(0H)2Vitamin D3和地塞米松;或人巨噬细胞集落刺激因子(MCSF)和核因子κB受体活化因子配体(RANKL)诱导骨髓单核细胞使其分化为破骨细胞抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)染色进行阳性破骨细胞鉴定;磷酸苯二钠法测定抗酒石酸酸性磷酸酶活性;将破骨细胞和骨片共同培养,以计算机图像分析测定骨吸收陷窝的面积;以Hoechst 33258和罗丹明-鬼笔环肽染色,激光共聚焦显微镜观察破骨细胞肌动蛋白环(F-actin Ring)的形态;用Western-blot分析细胞骨架相关蛋白的表达.结果 淫羊藿苷和仙茅苷在1×10-6mol/L浓度下可协同抑制破骨细胞的形成、降低抗酒石酸酸性磷酸酶的活性,减少破骨细胞在骨片上形成的骨吸收陷窝面积,抑制破骨细胞骨架F-actin环的构建及其调控因子Rho GTPases和灶性黏附激酶(focal adhesion kinase,FAK)的表达.结论 淫羊藿苷和仙茅苷协同抑制破骨细胞性的骨吸收,为药对淫羊藿仙茅的配伍提供了实验依据.     

北青龙衣乙醇提取物中成分在大鼠脑组织中的分布研究

目的利用超高压色谱–四极杆–飞行时间串联质谱技术(UPLC-Q-TOF/MS)对大鼠ig北青龙衣乙醇提取物后在脑组织中成分分布进行分析。方法将北青龙衣醇提物按20 mL/kg ig大鼠后,采集脑组织,采用UPLC-Q-TOF/MS法分析;正负离子模式使用ESI源对数据进行采集,并通过数据分析软件进行处理,对入脑成分分子式的鉴别采用精确质量数、同位素峰度比比较进行,进一步将其二级质谱图与对照品或数据库的二级谱图进行比对、结合已知的文献报道和对化合物的裂解规律分析,确定入脑成分的结构式。结果从大鼠脑组织中鉴定了11种来源于北青龙衣的成分,包含7个原型成分、4个代谢产物,其中7个萘醌,2个二芳基庚烷,2个酚酸。结论北青龙衣乙醇提取物在大鼠脑组织中分布的成分以萘醌类为主,为北青龙衣脑毒性的深入研究提供物质基础,也为其体内成分、组织分布研究提供方法学借鉴。     

肉桂多次ig给药在肾阳虚大鼠体内的积累和代谢分析

目的 考察肉桂多次ig给予肾阳虚大鼠后,鉴定大鼠肾脏、血液、尿液、粪便中原型成分和代谢产物。方法 采用ip氢化可的松方法制备大鼠肾阳虚模型,造模成功后按照生药量1.35g·kg^-1·d^-1ig肉桂提取物,连续15d。末次给药后,收集大鼠血浆、尿液、粪便和肾组织样品,进行UPLC-LTQ-Orbitrap-MS分析。根据色谱保留时间、精确相对分子质量、多级质谱碎片信息结合文献报道对各样本中的成分进行确认,并推测代谢物的代谢途径。结果 从肾阳虚模型大鼠各样本中共鉴定出24个成分,其中3个原型成分,21个代谢产物,包括12个原花青素类、8个木脂素类、2个二萜类、2个有机酸。结论 肉桂成分在肾阳虚大鼠体内代谢广泛,代谢途径主要包括甲基化、硫酸化和葡萄糖醛酸化反应。尿液中检出的化学成分最多,其次为血液、肾组织、粪便。长期给药情况下以原型存在于靶器官和血中成分很少,推测代谢物发挥药效的可能性较大。     

基于UHPLC-Q/TOF-MS技术鉴定青钱柳叶在大鼠体内的入血成分及代谢产物

目的 研究青钱柳叶在大鼠体内的入血成分及代谢产物。方法 采用超高效液相色谱-飞行时间质谱联用技术(UHPLC-Q/TOF-MS)鉴定大鼠血清中的化学成分,通过比对青钱柳叶、空白血清和含药血清的图谱差异,解析青钱柳水提液经大鼠灌胃后血清中的原型成分和代谢产物。结果 共鉴定得到15个入血成分,6个为原型成分,9个为原型成分的代谢产物。入血的原型成分主要为咖啡酰奎宁酸类、黄酮类和皂苷类,代谢途径主要有甲基化和羟基化。结论 该研究表明入血的原型成分可能是青钱柳叶的有效成分,为阐明其药效物质基础提供了一定的依据。     

二至丸药理作用研究进展

二至丸由女贞子、墨旱莲两味药材组成,具有补益肝肾、滋阴止血的功效,在妇科疾病、肾病、肝病等领域均有广泛的临床应用基础。现代药理研究发现二至丸在保肝补肾、改善骨质疏松、围绝经期综合征、免疫调节、抗衰老、改善神经系统疾病等方面具有广泛的药理活性,并对二至丸保护肝脏、抗骨质疏松、抗衰老的作用机制与潜在通路开展了研究。对二至丸的药理作用研究进展进行综述,为进一步利用现代药理学手段阐明二至丸治疗肝肾阴虚证的机制、挖掘中药经典方“多成分、多靶点、多通路”的作用特点以及指导二至丸临床应用提供参考。     

巴戟天丸防治D-半乳糖损伤成骨细胞骨丢失的作用及机制研究

目的 研究巴戟天丸防治D-半乳糖（D-gal）损伤成骨细胞骨丢失的作用及机制。方法 采用新生24 h Wistar大鼠提取的原代成骨细胞,利用D-gal对细胞进行干预,并给予巴戟天丸提取物行药物治疗。分别采用MTT法和碱性磷酸酶试剂盒评价细胞的增殖和分化水平;采用DCFH-DA荧光探针对成骨细胞内活性氧（ROS）水平进行测定。采用Western blotting法对磷酸化蛋白激酶B(p-AKT)、蛋白激酶B(AKT)、血红素氧合酶1(HO-1)、醌NADPH脱氢酶1(NQO1)等氧化相关蛋白的表达进行检测,并采用免疫荧光法测定细胞核因子E2相关因子2(Nrf2)的核内表达水平。结果 巴戟天丸能显著提高D-gal干预细胞的增殖水平和ALP活性,并显著降低细胞内ROS水平。巴戟天丸能够显著促进细胞AKT蛋白的磷酸化,提高HO-1、NQO1的表达水平,进而激活PI3K/AKT信号通路。此外,巴戟天丸提取物还可显著促进成骨细胞核内Nrf2的表达,激活Nrf2信号通路,促进骨形成。结论 本研究首次明确了巴戟天丸可防治D-半乳糖损伤引起的成骨细胞骨丢失,其作用机制可能与调控PI3K/AKT和Nrf...     

莲必治注射液联合奥司他韦治疗病毒性肺炎的临床研究

目的 归纳大鼠寒凝血瘀模型在基因表达层面的肝脏功能变化和潜在的分子标记,并探讨淫羊藿多糖（EFPS）对基因表达的影响。方法 雄性SD大鼠随机分为3组：对照组、模型组和EFPS（38.7 mg/kg）组,将模型组和EFPS组大鼠连续15 d每天14∶00时置于冰水浴1 h,造模的同时每天给药1次。取3组大鼠肝脏进行转录组测序,通过构建差异表达基因（DEGs）的基因本体（GO）中生物过程（BP）与京都基因和基因组百科全书（KEGG）网络,同时结合基因富集分析（GSEA）,分别分析并比对各组大鼠的肝脏功能变化。结果 与对照组比较,模型组大鼠肝脏基因表达变化表现为脂质代谢下调、细胞生长受负向调控、产生免疫反应以及对于温度的自稳态调节;与模型组比较,EFPS组大鼠肝脏基因表达变化表现出免疫回调、激素调控和基因表达调控发生改变。通过二者DEGs的等量共表达模式初步确立EFPS干预寒凝血瘀模型的分子标记为Ccl5、Cxcl13、Jund。结论 长期冰冷导致的体寒通过大鼠肝脏表现出脂质代谢下调、细胞生长减缓、促进炎症反应,EFPS发挥免疫和激素调节作用。     

肉苁蓉炮制的研究进展

肉苁蓉为临床常用中药,有"沙漠人参"之称。肉苁蓉的化学成分主要包括苯乙醇苷类、生物碱类、环烯醚萜苷类、有机酸类、木脂素苷以及一些挥发性成分。其药理作用主要表现为促激素样作用、促进免疫、抗氧化、抗衰老、通便等作用。主要对肉苁蓉炮制的历史沿革及现代炮制工艺、炮制前后化学成分和药理作用的变化进行综述,以期为深入开展炮制研究及原理解析提供文献依据。