鲨肝活性肽的免疫调节和抗细胞凋亡作用

目的　为了选择鲨肝活性肽 (SHAP)临床应用的适应症并了解其作用机制。方法　分离培养人外周血单核细胞 (PBMC) ,检测SHAP对其分泌IFN α和IFN γ的影响 ;用环磷酰胺 (Cy)建立免疫低下模型 ,检测SHAP对免疫低下小鼠血清溶血素的生成及血清IL 2水平的影响 ;用流式细胞仪分析SHAP对对乙酰氨基酚 (AAP)诱导小鼠肝损伤模型中细胞凋亡的影响 :用Fas单克隆抗体诱导小鼠暴发性肝炎和抑制肝癌细胞株SMMC772 1的增殖 ,用SHAP处理后 ,分析小鼠血清谷丙转氨酶 (GPT)的水平及SMMC772 1增殖的变化情况。结果　SHAP能够有效诱导PBMC分泌IFN α和IFN γ ,促进免疫低下小鼠血清溶血素的生成和提高血清IL 2的水平 ,显著降低AAP诱导的肝细胞凋亡。 5 0mg·L- 1的SHAP可消除 5mg·L- 1Fas单克隆抗体对SMMC772 1增殖的抑制作用。 3mg·kg- 1的SHAP能显著降低Fas单克隆抗体诱导的暴发性肝炎小鼠的血清GPT水平。结论　SHAP具有免疫调节作用和抗细胞凋亡的作用 ,可能是SHAP防治肝炎的作用机制之一。     

丹参多糖对小鼠免疫性肝损伤的保护作用

目的探讨丹参多糖对卡介苗（BCG）和脂多糖（LPS）诱导的小鼠免疫性肝损伤的保护作用。方法尾静脉注射BCG和LPS诱导小鼠免疫性肝损伤,对比小鼠脏器系数,检测血清谷草转氨酶（AST）、谷丙转氨酶（ALT）、一氧化氮（NO）的水平以及比较肝组织匀浆中肿瘤坏死因子α（TNF-α）、白介素1β（IL-1β）的含量。结果丹参多糖可显著改善免疫性肝损伤小鼠的胸腺、肝脏、脾脏系数,降低血清中ALT、AST、NO的活性以及肝组织匀浆中TNF-α、IL-1β的含量。结论丹参多糖对免疫性肝损伤具有显著的保护作用。     

芒果苷滴丸对小鼠实验性肝损伤的保护作用

目的：研究芒果苷滴丸（MDP）对小鼠实验性肝损伤的保护作用及其机制。方法：以MDP对小鼠灌胃给药,对MDP进行最大耐受量（MTD）测定;采用四氯化碳（CCl4）、D-氨基半乳糖盐酸盐（D—GaIN）诱导小鼠急性肝损伤模型;卡介苗（BCG）加脂多糖（LPS）联合诱导小鼠免疫性肝损伤模型。分光光度法检测血清中丙氨酸氨基转移酶（ALT）、天门冬氨酸氨基转移酶（AST）含量和肝组织匀浆中超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH—Px）含量,苏木精-伊红（HE）染色法对肝脏组织作病理切片法检查。结果：①以MDP对小鼠灌胃给药,其MTD为180g·kg^-1,相当于原药材36g·kg^-1。②MDP能显著降低急性、免疫性肝损伤小鼠血清中ALT、AST含量（P〈0．01）,能降低急性肝损伤小鼠肝匀浆MDA含量（P〈0．01）,升高肝匀浆SOD、GSH—PX活性（P〈0．01）,病理结果表明MDP能减轻免疫性小鼠肝损伤的肝损伤程度。结论：MDP对急性、免疫性肝损伤小鼠具有显著保护作用,其作用机制可能与抗脂质过氧化有关。     

金银花总黄酮对免疫性肝损伤小鼠的影响

目的观察金银花总黄酮（LJTF）对卡介苗（BCG）联合脂多糖（LPS）所致小鼠免疫性肝损伤炎症因子的影响。方法采用BCG2．5mg静脉注射致敏小鼠,d10给予LPS7．5μg静脉攻击造成小鼠免疫性肝损伤模型,ig给予IJTF（100、200、400mg·kg。）连续10d。观察肝组织形态学改变,称量体重,肝脏、脾脏重量,计算肝、脾脏器指数,分光光度法测定肝匀浆中NO、iNOS的含量,免疫组化测定肝脏TNF—d的表达。结果LJTFig能提高免疫性肝损伤小鼠肝、脾脏器指数,改善免疫性肝损伤小鼠肝脏组织学改变,降低肝匀浆中NO、iNOS的水平,LJTF也能降低免疫性肝损伤小鼠TNF-α在肝脏中的强烈表达。结论LJTFig可以减少炎症介质的释放,对免疫性肝损伤小鼠有保护作用。     

星宿菜提取物对小鼠免疫性肝损伤的保护作用

目的：观察星宿菜水提取物及醇提取物对小鼠免疫性肝损伤的保护作用。方法：105只小鼠随机分为正常组、模型组、联苯双酯组、星宿菜水提取物高剂量组、星宿菜水提取物低剂量组、星宿菜醇提取物高剂量组、星宿莱醇提取物低剂量组,每组15只。小鼠尾静脉注射卡介苗（BCG）联合脂多糖（LPS）建立免疫性肝损伤模型。连续给药12d后,测定小鼠血清丙氨酸氨基转移酶（ALT）、天冬氨酸氨基转移酶（AST）活性及肝组织匀浆超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）、谷胱甘肽一过氧化物酶（GSH．Px）水平。结果：与模型组相比,星宿菜提取物可显著降低免疫性肝损伤模型小鼠血清中ALT、AST活性、肝组织MDA含量,升高肝组织SOD、GSH—Px活性（P〈0．05）;高剂量组效果优于低剂量组（P〈0．05）;星宿菜醇提取物效果最佳。结论：星宿莱提取物对小鼠免疫性肝损伤具有保护作用,其机制与抗脂质过氧化有关。     

鲨肝活性肽S-8300对小鼠急性肝损伤的保护作用

目的：研究鲨肝活性肽S-8300对四氯化碳(CCl4)小鼠肝损伤的保护作用。方法：采用CCl4致小鼠肝损伤，观察肝组织切片；测定生化指标，检测小鼠腹腔注射S-8300后血清谷丙转氨酶(sGPT)、血清谷草转氨酶(sGOT)和乳酸脱氢酶(LDH)活性，肝脏超氧化物歧化酶(SOD)活性与丙二醛(MDA)和谷胱甘肽(GSH)含量。结果：S-8300能明显减轻CCl4所致小鼠急性肝损伤；降低血清GPT、GOT、LDH活性及降低肝组织MDA含量，增加肝组织GSH含量和提高SOD活性。结论：鲨肝活性肽S-8300对急性肝损伤有明显的保护作用。     

丹皮总甙对小鼠免疫性肝损伤的保护作用

目的研究丹皮总甙（TGM）对小鼠免疫性肝损伤的保护作用。方法：小鼠分别尾ivBCG和LPS后，检测其血清ALT和AST活性、TPr含量及其脏器重量指数，并用硫代巴比妥酸法测其血清与肝组织中LPO含量。结果：TGM50、100mg·kg(－1)·d(－1)（ig），连用9d，可显著抑制小鼠血清ALT和AST活性，降低其血清与肝组织中LPO含量，并减轻其增大的脾脏重量指数。结论：TGM预防性给药对BCG＋LPS诱导的小鼠免疫性肝损伤具有一定的保护作用。     

白芍总苷对卡介苗加脂多糖引起的小鼠免疫性肝损伤的保护作用

目的　研究白芍总苷对小鼠免疫性肝损伤的保护作用。方法　在建立BCG +LPS诱导免疫性肝损伤小鼠模型的基础上 ,分光光度法检测血清中ALT、AST、NO水平和肝匀浆MDA、GSH Px、SOD含量 ;放免法检测TNF α的生物学活性 ;细胞增殖法测定脾淋巴增殖反应。结果　白芍总苷 (6 0、12 0、2 4 0mg·kg-1)ig给药可明显降低免疫性肝损伤小鼠增高的血清ALT、AST活性 ,同时能减少肝匀浆MDA含量 ,使降低的肝匀浆GSH Px、SOD活性升高 ,进一步研究发现白芍总苷可明显抑制免疫性肝损伤小鼠血清NO和TNF α的产生。白芍总苷还可抑制小鼠腹腔巨噬细胞TNF α的产生 ,对ConA诱导的脾淋巴增殖反应具有恢复作用 ,而对LPS诱导的脾淋巴增殖反应无明显影响。结论　白芍总苷对免疫性肝损伤具有保护作用。     

七味净肝灵对卡介苗联合脂多糖诱导的小鼠免疫性肝损伤的保护作用及其机制

目的：研究七味净肝灵（牛大力、黑老虎、地耳草、叶下珠、虫牙药、白花蛇舌草、甘草）对卡介苗（BCG）+脂多糖（LPS）诱导的免疫性肝损伤小鼠的保护作用及其作用机制。方法：建立BCG+ LPS致小鼠免疫性肝损伤模型,取血,收集肝脏,脾脏和胰腺。生化法测定血清中ALT, AST, MDA, SOD的活性或含量,ELISA法检测肝组织中IL-4,IL-6和NO含量,Western-blot分析肝组织中TNF-α和NF-κB蛋白的表达情况;HE染色,显微镜观察肝组织病理改变。结果：七味净肝灵各剂量组可降低免疫性肝损伤小鼠血清或肝组织中ALT、AST、MDA、IL-4,IL-6和NO的活性或含量,抑制肝组织中TNF-α和NF-κB蛋白的表达,升高SOD活性;病例检查显示其各剂量组均能显著改善肝组织坏死损伤。结论：七味净肝灵对BCG+ LPS诱导的小鼠免疫性肝损伤有明显的保护作用,其机制可能通过抗脂质过氧化、抑制肝内的炎症反应及细胞毒性作用来介导保肝作用。     

褪黑素对免疫性肝损伤小鼠自由基和细胞因子的影响

目的　研究褪黑素对小鼠免疫性肝损伤的保护作用。方法　在诱导BCG +LPS免疫性肝损伤模型的基础上 ,用分光光度法检测血浆中ALT、AST、NO水平和肝匀浆MDA、SOD含量 ;L92 9细胞株法检测血浆中TNF α的生物学活性 ;胸腺细胞增殖法测定血浆中IL 1活性。结果　在BCG+LPS诱导的免疫性肝损伤中 ,褪黑素 (0 2 5 ,1,4mg·kg-1)ig预防给药均明显降低免疫性肝损伤小鼠增高的血浆ALT、AST活性 ,且以 1mg·kg-1的剂量作用最明显 ;并能减少肝匀浆MDA含量 ,使降低的肝匀浆SOD活性升高 ,抑制免疫性肝损伤小鼠血浆NO、TNF α和IL 1的升高。结论　褪黑素对小鼠免疫性肝损伤具保护作用     

山芝麻水提取物对小鼠免疫性肝损伤的保护作用

目的观察山芝麻水提取物对小鼠免疫性肝损伤的保护作用。方法将60只小鼠随机分为正常对照组、模型组、日达仙阳性对照组(4.2μg.kg-1.d-1),以及山芝麻高、中、低剂量组(20,10,5 g.kg-1.d-1),各组预防性给药15 d,除正常对照组外,其余各组小鼠尾静脉注射20 mg.kg1刀豆蛋白A(Con A)。12 h后测定血清谷草转氨酶(AST)、谷丙转氨酶(ALT)的活性,流式细胞术测定全血中CD3+、CD4+、CD8+T细胞亚群比率,ELISA方法测定血清肿瘤坏死因子(TNF-α)和γ干扰素(IFN-γ)的水平。结果与模型组比较,10,20μg.kg-1.d-1剂量的山芝麻能明显降低Con A介导的肝损伤小鼠血清中AST、ALT的水平,显著提高CD3+、CD4+、CD4+/CD8+比率,明显降低血清中炎性细胞因子IFN-γ和TNF-α的含量。结论山芝麻水提取物对免疫性肝损伤具有保护作用,其机制可能与调整T细胞亚群的活性和减少炎性细胞因子的作用有关。     

Alpha-lipoic acid protects mice against concanavalin A-induced hepatitis by modulating cytokine secretion and reducing reactive oxygen species generation

BackgroundAlpha-lipoic acid (α-LA), which exits in almost all types of prokaryotic and eukaryotic cells, is a key regulator of energy metabolism in mitochondria. This study was designed to explore the protective effect of α-LA against concanavalin A (Con A)-induced hepatitis in mice and explore the potential mechanism.MethodsAcute autoimmune hepatitis was induced by intravenous (IV) injection of Con A (15 mg/kg) in C57BL/6 mice. α-LA (100 mg/kg) was administered four days before Con A injection. Serum alanine aminotransferase (ALT) and aspartate aminotransferase (AST) and histopathological change of the liver tissue were measured. Serum cytokine TNF-α, IL-6, IFN-γ and IL-10 were detected by ELISA. The mRNA levels of these inflammatory cytokines in the liver were detected by RT-PCR. Malondialdehyde (MDA), myeloperoxidase (MPO), superoxide dismutase (SOD) and reduced/oxidized glutathione (GSH/GSSG) in liver were determined using commercial kits. Phosphorylated NF-κB p65, IκBα and phosphorylated MAPK were measured by Western blot.ResultsCon A injection induced severe immune responses and extensive hepatocellular apoptosis within 12 h. Pretreatment of α-LA markedly reduced the serum ALT and AST activity and the increase of plasma TNF-α, IL-6, IFN-γ and IL-10. In addition, α-LA pretreatment decreased the tissue MPO activity and lipid peroxidation, but increased SOD and GSH levels. α-LA inhibited the phosphorylation of NF-κB p65, IκBα and JNK.ConclusionPretreatment of α-LA markedly attenuated Con A-induced hepatitis by modulating cytokine secretion and reducing reactive oxygen species generation.     

Complement C3a binding to its receptor as a negative modulator of Th2 response in liver injury in trichloroethylene-sensitized mice

Trichloroethylene (TCE) is a major occupational health hazard and causes occupational medicamentosa-like dermatitis (OMLDT) and liver damage. Recent evidence suggests immune response as a distinct mode of action for TCE-induced liver damage. This study aimed to explore the role of the key complement activation product C3a and its receptor C3aR in TCE-induced immune liver injury. A mouse model of skin sensitization was induced by TCE in the presence and absence of the C3aR antagonist SB 290157. Liver function was evaluated by alanine aminotransferase (ALT) and aspartate aminotransferase (AST) in conjunction with histopathological characterizations. C3a and C3aR were detected by immunohistochemistry and C5b-9 was assessed by immunofluorescence. IFN-γ and IL4 expressions were determined by flow cytometry and ELISA. The total sensitization rate was 44.1%. TCE sensitization caused liver cell necrosis and inflammatory infiltration, elevated serum ALT and AST, expression of C3a and C3aR, and deposition of C5b-9 in the liver. IFN-γ and IL-4 expressions were up-regulated in spleen mononuclear cells and their serum levels were also increased. Pretreatment with SB 290157 resulted in more inflammatory infiltration in the liver, higher levels of AST, reduced C3aR expression on Kupffer cells, and decreased IL-4 levels while IFN-γ remained unchanged. These data demonstrate that blocking of C3a binding to C3aR reduces IL4, shifts IFN-γ and IL-4 balance, and aggravates TCE-sensitization induced liver damage. These findings reveal a novel mechanism whereby modulation of Th2 response by C3a binding to C3a receptor contributes to immune-mediated liver damage by TCE exposure.     

注射用鲨鱼肝再生因子对小鼠免疫性肝损伤的影响

观察鲨鱼肝再生因子 (sHRF)对小鼠免疫性肝损伤的影响。小鼠注射BCG后再注射低剂量LPS ,造成免疫性肝损伤模型。测定血清中ALT、AST、NO的含量及对肝组织进行病理组织学检查。sHRF能显著降低BCG和LPS诱导的免疫性肝损伤小鼠血清ALT、AST和NO含量的升高 (P <0 .0 5 ) ;并减轻对肝脏细胞的病理性损伤。实验表明sHRF对小鼠免疫性肝损伤有保护作用。     

虎杖提取物对ConA诱导肝损伤小鼠保护作用的研究

目的观察虎杖提取物对ConA诱导肝损伤小鼠的保护作用。方法通过测定血清ALT、AST及TNF-α、肝匀浆SOD、MDA,评价其对肝脏的保护作用。结果虎杖提取物高剂量组明显降低ConA诱导肝损伤小鼠模型的血清ALT、AST、TNF-α、肝匀浆MDA,提高肝匀浆SOD（P〈0.01）。结论虎杖提取物对ConA诱导肝损伤小鼠具有一定的保护作用。     

免疫介导再生障碍性贫血小鼠模型外周血单个核细胞及脾脏干扰素-γ的表达

目的研究免疫介导再生障碍性贫血(AA)小鼠模型外周血单个核细胞(PBMC)及脾脏干扰素-γ(IFN-γ)表达,探讨免疫介导AA小鼠模型的免疫发病机制。方法①采用免疫介导方法建立(60Co-γ射线照射后输入淋巴细胞)AA小鼠模型。②用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法检测AA小鼠PBMC中IFN-γmRNA的表达,对结果进行半定量分析。③用免疫组织化学方法检测AA小鼠脾脏组织石蜡切片中IFN-γ蛋白表达水平,以每个视野内的阳性细胞数量作为IFN-γ蛋白的量化指标,进行阳性细胞率分析。结果①AA小鼠外周血常规及网织红细胞检测显示全血细胞减少,骨髓活检显示骨髓造血细胞明显减少,非造血细胞增多。造模成功。②RT-PCR结果显示AA小鼠PBMC中IFN-γmRNA表达(1.14±0.06)高于正常小鼠(0.73±0.11),P<0.05。③免疫组织化学结果显示AA小鼠脾脏组织中IFN-γ蛋白阳性率(4.55±0.60)%高于正常小鼠(0.82±0.25)%,P<0.01。结论 AA小鼠PBMC中IFN-γmRNA和脾脏组织中IFN-γ蛋白表达水平增高,提示IFN-γ可能参与AA动物模型免疫发病机制。     

野菊花总黄酮对酒精致急性肝损伤小鼠的保护作用

目的 观察野菊花总黄酮(total flavonoids Chrysanthemum indicum,TFC)对酒精致小鼠急性肝损伤的保护作用及部分机制.方法 用TFC(125、250、500 mg·kg-1)连续给小鼠灌胃7 d,末次给药后1 h,一次性灌胃酒精(50%,6 g·kg-1)致小鼠急性肝损伤模型,测定不...     

蚁皇口服液对小鼠免疫性肝损伤的保护作用

研究蚁皇口服液对小鼠免疫性肝损伤的保护作用。方法 :小鼠分别尾静脉注射卡介苗 +脂多糖造摸 ,灌胃给予蚁皇口服液后检测小鼠血清中ALT、AST及肝、脾重量 ,并在光镜下观察给药前、后小鼠肝损伤的病理变化。结果 :大、中剂量蚁皇口服液可明显降低肝损伤小鼠的血清ALT、AST ,使肿大的肝、脾缩小 ,光镜下可见小鼠肝细胞变性、坏死程度及肝实质与汇管区的炎细胞浸润明显减轻。小剂量蚁皇口服液一方面可抑制正常或亢进的小鼠细胞免疫功能 ,使小鼠迟发性超敏反应减轻 ;另一方面也可提高低下的小鼠细胞免疫功能 ,使小鼠迟发性超敏反应增强。结论 :蚁皇口服液具有调节细胞免疫的功能 ,对免疫性肝损伤确有明显的保护作用。