海参硫酸多糖的高温高压降解工艺及其降解机制

目的 分析海参硫酸多糖的高温高压降解工艺和降解产物的结构,探究硫酸多糖的高温高压降解的机理。方法 采用聚丙烯酰胺凝胶电泳法、分子排阻凝胶色谱法、薄层层析法、离子高效液相色谱法和PMP柱前衍生-高效液相色谱法分析多糖的分子量、硫酸根含量和单糖组成的变化,并利用液相色谱-质谱联用技术分析降解产物中硫酸寡糖的结构特征。结果当pH>7时,海参硫酸多糖在高温加压条件下未见明显降解。添加醋酸使溶液的pH降至6以下,海参硫酸多糖在100～121 ℃加热后,pH越低、温度越高、加热时间越长,分子量降低越明显。海参硫酸多糖的硫酸根和单糖组成在降解后变化很小,降解产物中存在一系列奇数和偶数的硫酸岩藻寡糖和硫酸软骨素寡糖,说明高温高压降解为无规断裂型和解聚断裂混合型。相同条件下,岩藻聚糖硫酸酯比硫酸软骨素更易被降解。 结论 本研究建立了高温高压法高效降解海参硫酸多糖的技术,该方法是一种回收率高、易控制、绿色环保的低分子量海参硫酸多糖的制备方法。     

不同分子量海参岩藻聚糖硫酸酯的制备及消化吸收特性的初步研究

目的 比较分子量大小对海参岩藻聚糖硫酸酯(SC-FUC)消化吸收特性的影响.方法 采用酶解法制备不同分子量的海参岩藻聚糖硫酸酯.SD大鼠随机分为4组,每组6只,分别灌胃不同分子量的海参岩藻聚糖硫酸酯(1 000 mg·kg-1)后,于0、0.5、2、6、15、24、36和48 h尾静脉取血,采用柱前衍生高效液相色谱法测...     

不同性质海洋硫酸多糖的制备及其改善大鼠脂肪肝作用的比较研究

目的 探索了不同来源、不同分子量的海洋硫酸多糖对脂肪肝大鼠脂肪代谢的调节作用.方法 SD大鼠随机分为7组,正常对照组、脂肪肝模型对照组、0.1%低分子量海参岩藻聚糖硫酸酯组、0.1%海参岩藻聚糖硫酸酯组、0.2%海参岩藻聚糖硫酸酯组、0.2%海藻岩藻聚糖硫酸酯组、0.2%海参硫酸软骨素组,每组6只.饲料中添加1%乳清酸...     

小有刺参硫酸软骨素和岩藻聚糖硫酸酯抗血小板聚集活性的比较

目的 从小有刺参中制备纯化硫酸软骨素和岩藻聚糖硫酸酯及其低分子量组分,并比较不同结构硫酸多糖的抗血小板聚集活性,揭示海参硫酸多糖抗血小板聚集活性的构效关系。方法 利用离子交换色谱和自由基降解技术,从小有刺参中制备硫酸软骨素和岩藻聚糖硫酸酯及各自的低分子量组分。采用体外凝血酶诱导血小板聚集模型,比较不同结构的硫酸软骨素和岩藻聚糖硫酸酯对血小板聚集率的影响。结果 4～60 μg/mL硫酸软骨素和低分子量硫酸软骨素具有显著的抑制血小板聚集的活性,在浓度为20 μg/mL时对血小板聚集的抑制率高达94.6%和95.3%,且分子量的降低对其活性无影响。比较不同来源的岩藻聚糖硫酸酯的活性发现,在4～60 μg/mL浓度范围内,海参与海带来源的岩藻聚糖硫酸酯都显著抑制血小板聚集,且活性没有显著差异,但经过自由基降解后,海参和海带来源的岩藻聚糖硫酸酯的抗血小板聚集活性都显著降低。结论 海参硫酸软骨素的抗血小板聚集活性显著高于岩藻聚糖硫酸酯,海参硫酸多糖可以应用于新型抗血小板聚集药物的研究开发。     

海带低分子量岩藻聚糖硫酸酯的制备和抗血小板聚集活性研究

目的：研究低分子量海带岩藻聚糖硫酸酯的制备和纯化技术,筛选抗血小板聚集活性的低分子量海带岩藻聚糖硫酸酯。方法：以海带硫酸多糖为原料,采用自由基降解和强阴离子交换色谱技术,制备纯化出高硫酸根和高岩藻糖的低分子量岩藻聚糖硫酸酯;采用体外凝血酶诱导血小板聚集模型,筛选出抗血小板聚集活性的低分子量岩藻聚糖硫酸酯。结果：强阴离子交换色谱能够有效地将复杂的低分子量海带岩藻聚糖硫酸酯分离纯化,得到4个纯度较高的高硫酸根、高岩藻糖的低分子量多糖,其岩藻糖含量超过85% ~ 95%,硫酸根含量35%以上,分子量在20 ku ~ 30 ku。体外抗血小板聚集试验结果证明,这4个高硫酸根高岩藻糖组分的抗血小板聚集活性最高,而低硫酸根组分含有较高的半乳糖、甘露糖和糖醛酸,其抗血小板活性非常低。结论：采用自由基氧化降解和强阴离子交换色谱法,可获得抗血小板活性高的高硫酸根高岩藻糖的低分子量岩藻聚糖硫酸酯。     

海带岩藻聚糖硫酸酯对头孢哌酮诱导肠道损伤保护作用的研究

摘要：目的 研究了不同分子量的海带岩藻聚糖硫酸酯对抗生素诱导肠道损伤和菌群破坏的预防作用及其作用机制。方法 利用热降解和超滤技术,从海带中制备低分子量（LF）和中分子量岩藻聚糖硫酸酯（MF）。采用头孢哌酮诱导小鼠肠道损伤模型,观察不同分子量岩藻聚糖硫酸酯对小鼠体重、肠道黏膜组织病理学、肠道炎症因子（TNF-α、IFN-γ、IL-6）水平和盲肠的肠道菌群结构的影响。结果 口服海带低分子量和中分子量岩藻聚糖硫酸酯200 mg﹒kg-1能够显著提高头孢哌酮诱导肠道损伤模型小鼠的体重,减轻小肠、盲肠和结肠黏膜组织的损伤,显著改善小肠和盲肠中TNF-α、IFN-γ和IL-6免疫因子降低,但是能够抑制结肠中TNF-α、IFN-γ和IL-6因子的过度表达。口服海带岩藻聚糖硫酸酯能够大大提高头孢哌酮小鼠盲肠中葡萄球菌、鼠杆菌和鲍曼不动杆菌等细菌的比例,而环状芽孢杆菌、梭菌等有害菌的比例显著下降。不同分子量岩藻聚糖硫酸酯对肠道损伤小鼠的肠道菌群结构有不同的影响。结论 海带岩藻聚糖硫酸酯对抗生素诱导的肠道损伤和微生物破坏有很好的保护作用。     

海带岩藻聚糖硫酸酯对栓塞性脑缺血损伤的保护及作用机制的研究D

目的 对不同分子量海带岩藻聚糖硫酸酯对大鼠栓塞性脑缺血损伤的保护活性及其作用机制进行研究比较。方法 以海带高分子量和低分子量岩藻聚糖硫酸酯为研究对象,采用电刺激造栓法建立大鼠动脉栓塞性脑缺血损伤模型,观察岩藻聚糖硫酸酯对神经行为学评分、脑梗死体积、大脑皮层形态学、血液中花生四烯酸代谢产物（TXB2和6-kelo-PGF1α）、磷脂代谢产物（PA和LPA）和纤溶系统（t-PA和u-PA）的影响。结果 静脉注射高分子量和低分子量岩藻聚糖硫酸酯对大鼠栓塞性脑缺血损伤具有很好的保护作用,显著降低神经行为学评分、脑梗死体积和脑皮层神经细胞的损伤,低分子量岩藻聚糖硫酸酯的保护活性是高分子量组分的1/10。岩藻聚糖硫酸酯预防栓塞性脑缺血损伤的作用机理为：抑制TXB2生成,提高6-kelo-PGF1α的水平,抑制LPA的释放,从而抑制血栓的进一步发展;促进t-PA和u-PA的生成从而激活纤溶系统。结论：岩藻聚糖硫酸酯在预防栓塞性脑缺血损伤方面具有很好的应用潜质。     

相对低分子质量海带岩藻聚糖硫酸酯的制备及其对纤溶系统的影响

目的 研究自由基氧化降解得到的相对低分子质量岩藻聚糖硫酸酯化学性质以及对新西兰大白兔体內纤溶系统的影响.方法 采用H2O2-Cu2+自由基氧化结合分步超滤法,制备了重均分子量为7.68 kD和3.89 kD的两个相对低分子质量岩藻聚糖硫酸酯组分.采用静脉注射的方式研究两个相对低分子质量岩藻聚糖硫酸酯组分对新西兰大白兔的...     

相对低分子量海带岩藻聚糖硫酸酯对乙酸慢性胃溃疡的辅助治疗作用

目的研究相对低分子质量岩藻聚糖硫酸酯对慢性乙酸胃溃疡的治疗效果。方法采用慢性乙酸胃溃疡大鼠模型,用灌胃的方式给予相对低分子质量岩藻聚糖硫酸酯(LMW fucoidan)40、100和200mg.kg-1 3个剂量,研究了相对低分子质量岩藻聚糖硫酸酯对胃溃疡大鼠的溃疡指标、氧化程度、NO产生以及MPO的影响。结果灌胃给予LMW fucoidan对大鼠的乙酸胃黏膜损伤有一定辅助治疗作用,与模型组相比胃壁溃疡面积有明显减少。同时对胃组织中的抗氧化酶SOD和GSH-Px有很好的保护作用,显著抑制脂质过氧化产物MDA的产生。与模型组比较,LMW fucoidan组大鼠的胃组织中NO的含量显著上升,MPO的活性显著下降。结论相对低分子质量岩藻聚糖硫酸酯对胃溃疡大鼠的辅助治疗作用与其体内抗氧化活性有关,并通过调节NO产生和炎症细胞的地浸润辅助慢性乙酸胃溃疡的愈合。     

岩藻聚糖硫酸酯F2靶向SGLT2的抗糖尿病肾病活性研究

目的 旨在从细胞水平上探讨岩藻聚糖硫酸酯F2对SGLT2的抑制作用及抗糖尿病肾病(DN)活性,并阐述其抗DN机制。方法 通过Q-Sepharose Fast Flow强阴离子交换层析法对墨角藻来源岩藻聚糖硫酸酯(FvF)进行分离纯化,并采用高效液相、离子色谱等方法测定其分子量、单糖组成、硫酸根含量等基本理化性质,利用流式细胞术,通过评价样品对SGLT2稳转细胞转运葡萄糖能力的影响,来分析样品对SGLT2的抑制活性,确定活性最优化合物。通过计算机模拟技术,探讨了岩藻寡糖与SGLT2的相互作用。采用大鼠肾系膜细胞(HBZY-1细胞),利用高糖诱导,建立HBZY-1细胞增殖模型,通过MTT法评价F2的抗DN活性,并利用Western Blot方法探究最优化合物对HBZY-1细胞模型中SphK1、NF-κB、p38、ERK1/2蛋白的影响。结果 纯化后获得了5个组分,SGLT2抑制剂筛选确定F2为最优组分,其具有分子量低、硫酸根含量高且单糖组成较为单一的特点,并且岩藻糖中硫酸根含量和聚合度影响其与SGLT2的相互作用,而2-硫酸岩藻八糖与SGLT2的亲和力最强。成功建立了HBZY-1细胞增殖模型,发现F2在较低浓度下即可发挥抗肾系膜增生作用,并且其活性随着浓度增加而增强,且F2是通过抑制SphK1、NF-κB、p38蛋白的表达,抑制ERK1/2蛋白的磷酸化来发挥抗DN活性。     

岩藻聚糖硫酸酯降血糖作用机制的研究进展

糖尿病是以高血糖和胰岛素抵抗为特征的内分泌和代谢系统疾病,已成为世界范围内一种普遍疾病。岩藻多糖基于其特定的化学结构,如单糖组成和糖苷键,具有良好的降糖作用和理想的糖尿病治疗潜力。岩藻聚糖硫酸酯具有多种生物活性,但其结构复杂、高分子量和高粘性的特性限制了其应用,而低分子量岩藻多糖粘度低、溶解度好,且研究表明低分子量岩藻多糖具有更好的降血糖作用,因此其低分子量产物的研究具有重大意义。本文讨论了岩藻多糖的结构特征,包括主干结构、糖苷键位置、单糖类型、硫酸盐含量,着重介绍了多糖分子量和降血糖活性的关联,继而引申出低分子量降血糖作用及其作用机理,以期为明晰岩藻多糖的构效关系及进一步的应用提供理论基础。     

天花粉多糖的组成及组分Ⅱ相对分子质量分析

目的：对天花粉多糖的组分及组分Ⅱ相对分子质量进行分析。方法：采用水提醇沉提取天花粉多糖,经纯化后进行气相-质谱联用分析得出多糖的组成。相对分子质量分析则采用高效凝胶渗透色谱法（HPGPC）。结果：天花粉多糖组分Ⅰ是含有葡萄糖,未知单糖一和未知单糖二的杂多糖。天花粉多糖组分Ⅱ是含有鼠李糖、甘露糖、葡萄糖、半乳糖和未知单糖三的杂多糖。天花粉多糖组分Ⅱ经高效凝胶渗透色谱法得重均相对分子质量（M_w）=42 025;10%大分子部分重均相对分子质量=197 011;10%小分子部分重均相对分子质量=6 676;分布系数（D）=2.56;数均相对分子质量（M_n）=16 427。结论：天花粉多糖组分Ⅰ和天花粉多糖组分Ⅱ的单糖组成不相同,天花粉多糖组分Ⅱ是一个相对分子质量段在42 025左右的大分子。     

海参多糖结构表征的研究进展

海参多糖是1种富含硫酸基团的杂多糖，结构复杂，具有多种生物活性，其生物活性与海参多糖本身的化学组成、相对分子质量、硫酸化模式等结构特征息息相关。为了更好地研究海参多糖的生物活性，全面总结海参多糖结构的分析方法，综述海参中性聚糖、海参岩藻糖基化硫酸软骨素和海参岩藻聚糖硫酸酯的结构特征，以期为海参多糖的生物活性及构效关系等后续研究提供理论基础。     

相对低分子质量岩藻聚糖硫酸酯治疗慢性乙酸胃溃疡的临床研究

目的：观察慢性乙酸胃溃疡在低分子质量的岩藻聚糖硫酸酯作用下的疗效。方法：用灌胃方法对患有乙酸胃溃疡的白鼠灌输分子质量较低的岩藻聚糖硫酸酯,设为试验组;单纯乙酸胃溃疡白鼠设为对照组。观察胃溃疡白鼠在岩藻聚糖硫酸酯作用下胃部溃疡的情况、受氧程度、一氧化氮产生情况以及对过氧化物酶活性的影响。结果：胃溃疡白鼠接受低分子质量岩藻聚糖硫酸酯灌输后,胃黏膜损伤得到一定修复,与对照组白鼠相比,溃疡面积有所减少,同时,在岩藻聚糖硫酸酯的作用下,胃部抗氧化酶得到了很好的保护,过氧化物酶得到了明显抑制。相比对照组白鼠,试验组白鼠胃中一氧化氮含量明显上升,过氧化物活性大幅度下降。结论：抗氧化物的活性影响了岩藻聚糖硫酸酯对辅助治疗的效果,同时,岩藻聚糖硫酸酯对白鼠慢性乙酸胃溃疡有辅助治疗的效果。乙酸慢性胃溃疡在一氧化氮的产生以及炎症细胞辅助下得到了很好的修复,溃疡也得到了愈合的效果。     

盐藻多糖单糖组成分析的四种色谱方法比较

目的 通过对几种单糖组成分析的色谱方法进行比较,选择一种准确有效的方法测定盐藻多糖(PDS3)的单糖组成.方法 分别采用薄层色谱(TLC)法、糖腈乙酸酯衍生气相色谱(AA-GC)法、离子排阻液相色谱(IEC)法及1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮柱前衍生高效液相色谱(PMP-HPLC)法测定PDS3的单糖组成.结果 TLC法和IEC法无需衍生化处理,操作简便、快捷,但各单糖间的分离效果较差,只适合于单糖组成较为简单的多糖样品的定性分析.AA-GC法测定单糖组成灵敏度高,各单糖具有良好的分离度,并可进行定量分析,与质谱联用还在PDS3中新发现了一种2-甲氧基戊糖,但AA-GC法不适合糖醛酸和氨基糖的分析;PMP-HPLC法不仅灵敏度高,分离效果好,而且还可同时检测PDS3中11种中性、酸性和碱性单糖,该法测得PDS3中各单糖的摩尔比为:Gal:Man:Ara:Glc:Rha:Xyl:GlcUA:GalUA:GlcNAc:GlcN=19.3:10.6:6.9:1.6:1.1:1.0:12.9:6.4:4.1:1.6.另外,本实验还确定了PMP-HPLC法的最适衍生条件为:反应时间60min,反应温度70℃,NaOH与单糖的摩尔比为6:1,衍生试荆PMP与单糖的摩尔比为12:1.结论 PMP-HPLC法较其它色谱方法更适合于PDS3这类复杂样品的单糖组成分析.     

Metabolic fate of exogenous chondroitin sulfate in the experimental animal

After the administration of tritiated chondroitin sulfate (CS) by oral and intramuscular route, the distribution of radioactivity was investigated in two opportunist omnivorous animals, namely the rat and the dog. More than 70% of the orally administered radioactivity was absorbed. Independently of the administration route, radioactivity was mainly excreted through the urine. Plasma levels showed a rapid increase after oral administration, followed by a large plateau with a maximum at the 14th and 28th h in the rat and in the dog, respectively. A tropism of the radioactivity was observed towards glycosaminoglycan-rich tissues, such as joint cartilage. The analysis of the molecular weight of the radioactive material showed that compounds with a molecular weight corresponding to those of CS, poly-, oligo- and monosaccharides as well as of tritiated water, were present in the plasma, urine, synovial fluid and cartilage. The level of radioactive low molecular weight material, derived from the metabolism of CS and from the exchange reaction, increased with the time after administration. The high molecular weight fraction represented at least 10% of the orally administered CS.     

胡萝卜果胶的化学结构特征研究与含量测定

目的:研究胡萝卜果胶的化学结构特征,并测定其含量。方法:采用高效凝胶渗透液相色谱法测定胡萝卜果胶的相对分子质量;纸色谱、高效液相色谱法鉴别果胶中主要单糖组成;紫外、红外光谱法鉴别其化学结构特征;硫酸-咔唑法测定果胶的含量。结果:胡萝卜果胶的平均相对分子质量为1750625,主要单糖组成为D-半乳糖和D-半乳糖醛酸;单糖的连接方式主要为β-吡喃型糖苷键连接。果胶含量以半乳糖醛酸计为66.06%。结论:胡萝卜果胶提取物多糖含量较高、化学结构特征明显。本试验结果可为胡萝卜果胶的进一步开发提供理论和试验基础。     

Use of fluorescein isothiocyanate isomer I to study the mechanism of intestinal absorption of fucoidan sulfate in vivo and in vitro

A new method to label fucoidan sulfate was established with tyramine and fluorescein isothiocyanate isomer I (FITC). Fluorescence spectrophotometry and high performance liquid chromatography verified the successful labelling of fucoidan by FITC. The results of the single‐pass intestinal perfusion indicated that the jejunum and ileum are the main absorption sites, and there was carrier saturation. In addition, fucoidan sulfate at 1 mg/ml had no inhibitory effect on Caco‐2 cell proliferation. Studies on the transmembrane transport mechanism showed that fucoidan can be absorbed because the apparent permeability coefficient of the drugs (P_app) A → B was 3.78 + 0.03 ×10^?6 and that of B → A was 1.42 + 0.19 ×10^?6. The peak absorption of fucoidan occurred at 120 min after administration; moreover, the higher the concentration used, the worse the absorption was, suggesting the saturation of transport carriers. The absorption was temperature dependent: the absorption at 37°C was much better than that at 4°C. Further, the absorption of fucoidan sulfate might rely on clathrin endocytosis as chlorpromazine (10 μg/ml) significantly inhibited it.