补肾温肺合剂中淫羊藿苷的稳定性考察

目的:考察补肾温肺合剂的稳定性.方法:采用经典恒温加速试验法和留样观察法,以淫羊藿苷的含量作为考察指标,采用高效液相色谱法测定其含量的变化.结果:补肾温肺合剂中淫羊藿苷的含量变化符合一级动力学过程,2种考察方法的结果基本一致.在室温(25℃)条件下,补肾温肺合剂的有效期为1.25年.结论:建议补肾温肺合剂质量标准中有效期订为室温保存1年.     

HPLC法测定活力苏口服液中迷迭香酸、紫草酸、丹酚酸B、淫羊藿苷、宝藿苷I、二苯乙烯苷和虎杖苷

目的 建立高效液相色谱法同时测定活力苏口服液中迷迭香酸、紫草酸、丹酚酸B、淫羊藿苷、宝藿苷I、二苯乙烯苷和虎杖苷。方法 采用Agilent Eclipse XDB-C₁₈色谱柱（250 mm×4.6 mm,5μm）,流动相为乙腈-0.1%磷酸溶液,梯度洗脱,检测波长280 nm,体积流量1.0 mL/min,柱温30℃,进样量10 μL。结果 迷迭香酸、紫草酸、丹酚酸B、淫羊藿苷、宝藿苷I、二苯乙烯苷和虎杖苷分别在0.59~14.75、0.81~20.25、5.07~126.75、1.86~46.50、1.18~29.50、8.79~219.75、2.07~51.75μg/mL线性关系良好（r ≥ 0.999 1）;各成分平均加样回收率分别为96.95%、97.80%、99.43%、98.53%、99.19%、100.01%、98.77%,RSD值分别为1.13%、1.28%、0.91%、0.88%、0.97%、0.62%、1.33%。结论 所建立的方法操作便捷,结果准确,为全面评价活力苏口服液的内在产品质量提供了科学依据。     

黄麦颗粒的质量标准研究

目的:建立黄麦颗粒的质量控制方法,为该制剂的质量控制提供依据。方法:采用薄层色谱(TLC)法对黄麦颗粒中的黄芪进行鉴别,采用高效液相色谱(HPLC)法测定黄麦颗粒中的淫羊藿苷、金丝桃苷及二苯乙烯苷的含量。结果:该品TLC色谱斑点清晰,重复性好;HPLC法测定淫羊藿苷、金丝桃苷及二苯乙烯苷线性范围分别为9.969~319.0μg/ml(r=0.999 9)、12.3~196.8μg/ml(r=0.999 9)、12.64~202.2μg/ml(r=0.999 8);精密度、稳定性、重复性试验的RSD均≤2.92%;平均加样回收率分别为95.44%、101.06%、100.51%,RSD分别为1.46%、1.90%、1.73%(n=6)。结论:该方法操作简便、重复性好、结果准确可靠,可用于黄麦颗粒的质量控制。     

SPE-HPLC法同时测定安神补脑液中二苯乙烯苷和淫羊藿苷的含量

摘 要 目的: 建立安神补脑液中二苯乙烯苷和淫羊藿苷的含量测定方法。方法: 以XTerra RP C₁₈色谱柱为分离柱,以甲醇-水(60∶40)为流动相,检测波长：320 nm;柱温：30℃;流速：1.0 ml·min^-1;进样量：10 μl。结果:二苯乙烯苷的线性范围为10.62～127.44 μg·ml^-1,r=0.999 6,平均回收率为98.26％,RSD＝1.01％（n=6）;淫羊藿苷的线性范围为0.82～9.89 μg·ml^-1,r=0.999 7,平均回收率为98.59％,RSD＝1.33％（n=6）。结论:该方法简便、快速、准确,可用于安神补脑液中二苯乙烯苷和淫羊藿苷的含量测定。     

补肾温肺微乳中淫羊藿苷的大鼠在体肠吸收特征研究

摘 要 目的： 研究补肾温肺微乳中淫羊藿苷的大鼠不同肠段的吸收特性,并考察P 糖蛋白( P gp)对其肠吸收的影响。方法: 采用大鼠在体单向肠灌流实验,采用HPLC法测定淫羊藿苷的含量,分别研究肠段不同吸收部位、不同淫羊藿苷浓度、 P gp抑制药维拉帕米对淫羊藿苷单体及其在补肾温肺微乳中吸收的影响。结果: 淫羊藿苷单体在各肠段的吸收速率常数(Ka)和表观吸收系数(P_app)差异显著(P<0.01);在0.10～0.40 ml·min^-1流速内和0.1～1.0 mg·ml^-1质量浓度内,十二指肠吸收速率常数和表观吸收系数无显著差异;补肾温肺微乳中淫羊藿苷的肠灌流试验结果与淫羊藿苷单体相比略小,但无显著差异; P gp抑制药对淫羊藿苷的肠吸收有影响,加入0.1 mmol·L^-1盐酸维拉帕米后,Ka和P_app分别为（2.13±0.66）×10^-2h·cm^-1和（0.23±0.051）×10^-6 cm·s^-1,与不加P gp 抑制药组相比较差异显著(P<0.01)。结论: 淫羊藿苷属于难吸收化合物,淫羊藿苷和补肾温肺微乳中淫羊藿苷在大鼠不同肠段的吸收具有相似的吸收特性;其在大鼠肠内的吸收受 P gp外排转运影响。因此,推测淫羊藿苷可能是P gp的底物。     

淫羊藿苷对脂多糖诱导成骨细胞骨架F-actin损伤的保护作用

目的 考察淫羊藿苷对成骨细胞骨架F-actin损伤的保护作用及其对相关信号通路的调控。方法 采用脂多糖诱导大鼠成骨细胞损伤模型。实验分为空白对照组、模型组和0.1,1,10 μg·mL^-1淫羊藿苷组,MTT法观察淫羊藿苷对成骨细胞活性的影响,TRITC-Phalloidin荧光染色观察淫羊藿苷对细胞骨架的影响,ELISA法测定各组成骨细胞中F-actin的含量,RT-PCR法测定细胞骨架Rho A和Cofilin的mRNA表达量。结果 与空白对照组比较,100 μg·mL^-1脂多糖能显著降低成骨细胞存活率（P<0.01）;与模型组比较,1~10μg·mL^-1淫羊藿苷预处理后能显著提高细胞存活率（P<0.05或P<0.01）;而0.1 μg·mL^-1淫羊藿苷则无显著影响。与模型组比较,1~10μg·mL^-1淫羊藿苷能显著抑制成骨细胞F-actin解聚（P<0.05）,抑制Rho A的mRNA表达（P<0.05或P<0.01）,0.1~10 μg·mL^-1淫羊藿苷能抑制Cofilin的mRNA表达（P<0.01）。结论 淫羊藿苷对脂多糖诱导的细胞骨架F-actin损伤具有保护作用,其机制与抑制细胞骨架相关因子Rho A和Cofilin的mRNA表达有关。     

补肾强身胶囊中4种黄酮苷类成分的含量测定及转移率研究

目的 建立HPLC同时测定补肾强身胶囊中4种黄酮苷类成分朝藿定A、朝藿定B、朝藿定C和淫羊藿苷的方法，并考察淫羊藿苷在工艺过程中的转移率。方法 采用50%乙醇超声提取，Agilent Zorbax SB-C₁₈（4.6 mm×250 mm，5 μm）分离，以乙腈-水为流动相，梯度洗脱，流速1.0 mL·min^–1，柱温40 ℃，检测波长为270 nm。结果 朝藿定A、朝藿定B、朝藿定C和淫羊藿苷在相应浓度范围内呈良好线性关系（r≥0.999），平均加样回收率分别为104.2%，103.2%，105.3%和103.7%，RSDs分别为1.4%，1.9%，0.9%和1.6%。9批自制成药中淫羊藿苷平均转移率为56.04%，计算确定补肾强身胶囊中淫羊藿苷含量限度应≥0.73 mg·g^–1，11个生产企业45批样品中有12批样品低于此限度，占比26.7%。结论 本方法重复性好，专属性强，简便易行，可用于补肾强身胶囊中淫羊藿的质量评价和转移率考察。     

用HPLC法测定黄麦合剂中淫羊藿苷含量的不确定度分析

目的：建立HPLC法测定黄麦合剂中淫羊藿苷含量的不确定度分析方法。方法：对HPLC法测定淫羊藿苷含量的流程进行分析,确定不确定度来源,得出扩展不确定度。结果：HPLC法测定黄麦合剂中淫羊藿苷含量的不确定度的主要因素包括对照品溶液配制、样品制备、重复性、拟合回归模型和其他因素,扩展不确定度为0.039μg/ml,含量测定结果为（5.299±0.039）μg/ml,k=2。结论：该方法可作为HPLC法测定淫羊藿苷含量不确定度评定的参考。     

乳疾灵颗粒辐照前后淫羊藿苷含量变化研究

摘 要 目的： 对比乳疾灵颗粒辐照前后淫羊藿苷含量差异。方法: 采用HPLC色谱法,色谱柱为Thermo ODS-2 HYPERSIL色谱柱(250 mm×4.6 mm,5 μm);流动相为乙腈-0.033 mol·L^-1磷酸二氢钾(30∶70);检测波长为265 nm;流速为1.0 ml·min^-1;柱温30℃。结果:淫羊藿苷在浓度3.44～34.40 μg·ml^-1范围内呈现良好的线性关系,r=0.999 7(n=6);平均回收率为98.18%,RSD=0.32%。乳疾灵颗粒辐照前后淫羊藿苷含量变化差异无统计学意义(P>0.05)。结论: 常规剂量照射处理对乳疾灵颗粒中淫羊藿苷影响较小。     

不同方法提取淫羊藿苷的正交试验研究

目的 :筛选淫羊藿苷最佳提取方法和提取工艺条件。方法 :分别采用乙醇回流法和乙醇超声波法提取淫羊藿苷 ,并以淫羊藿苷的含量为指标 ,对提取工艺中的乙醇用量、乙醇浓度、提取时间、提取次数等因素进行考察。结果与结论 :乙醇回流法对淫羊藿苷的提取效果优于乙醇超声法 ;乙醇回流法提取淫羊藿苷的最佳提取工艺条件是用8倍药材量的60 %乙醇提取淫羊藿3次 ,每次40min。     

HPLC法测定黄麦合剂中淫羊藿苷的含量

目的:建立HPLC测定黄麦合剂中淫羊藿苷含量的方法。方法:色谱柱:Diamonsil^TM C₁₈（250mm×4.6mm,5μm）,流动相:乙腈-水-醋酸（30:70:1）,检测波长:270nm,柱温:30℃,流速:1.0ml·min^-1。结果:淫羊藿苷浓度在3.12～100.00μg·ml^-1的范围之内,峰面积与浓度呈良好的线性关系（r=0.9999）。平均回收率为92.65%,RSD为2.57%。结论:本方法简便、快速、准确、重复性好,可用于黄麦合剂中淫羊藿苷的含量测定。     

高效液相色谱法测定淫羊藿与黄芪配伍后淫羊藿苷煎出量的变化

目的:考察淫羊藿与黄芪按不同比例配伍对淫羊藿苷煎出量的影响。方法:将淫羊藿与黄芪分别按2∶1,1∶1,1∶2等3个比例配伍合煎,采用反相高效液相色谱法测定合煎液和淫羊藿单煎液中淫羊藿苷的含量。结果:淫羊藿与黄芪配伍合煎后淫羊藿苷的含量较单煎时高,配伍比例为1∶1时含量最高。结论:淫羊藿与黄芪配伍煎煮能促进淫羊藿苷的煎出,配伍比例为1∶1时作用更明显,这为二药配伍增效作用研究提供了参考。     

淫羊藿中淫羊藿苷提取工艺研究

目的:优选淫羊藿中淫羊藿苷的提取工艺。方法:以淫羊藿苷提取转移率为考察指标,对不同提取方法和提取条件进行考察。结果:最佳提取工艺为采用渗漉法,用60%～75%乙醇作溶媒,收集渗漉液的量为药材的8倍。此时,淫羊藿苷提取转移率为90%。结论:该提取工艺效率高、节约能源,方法可行。     

TLC法定性鉴别黄麦合剂中6味中药

目的:进一步完善黄麦合剂的质量标准。方法:采用薄层色谱法,鉴别黄麦合剂中的制何首乌、淫羊藿、菟丝子、麦冬、巴戟天、黄芪。结果:供试样品在与对照品色谱相应位置上显相同颜色的斑点,清晰,无干扰,重复性好。结论:TLC法定性鉴别黄麦合剂中的6味中药,结果可靠,可用于控制黄麦合剂的质量。     

基于Micro-CT技术分析淫羊藿苷和朝藿定C对糖皮质激素性骨质疏松症小鼠骨组织微结构的影响

目的 应用Micro-CT技术观察淫羊藿苷和朝藿定C对糖皮质激素性骨质疏松症（GIOP）小鼠模型骨组织骨量、骨微结构的影响。方法 8周龄C57/BL6雄性小鼠随机分为4组：对照组、模型组、淫羊藿苷（200 mg/kg）组和朝藿定C（200 mg/kg）组,除对照组外,其他3组小鼠im地塞米松5 mg/kg,0.125 mg/次,每周3次,制备GIOP模型,对照组im等体积的生理盐水,造模同时,每天ig给药1次,连续60 d后取材,采用micro-CT方法对胫骨近端骨微结构进行三维分析;HE染色病理切片观察胫骨近端骨组织病理形态。结果 骨量参数：与对照组比较,模型组骨矿物质含量（BMC）、骨矿物质密度（BMD）、组织矿物含量（TMC）、组织矿物质密度（TMD）均显著下降（P<0.05、0.01）;与模型组比较,淫羊藿苷组、朝藿定C组BMC、BMD、TMC、TMD指标均显著提高（P<0.05）;其中朝藿定C组各指标均较淫羊藿苷组显著升高（P<0.05）。与对照组比较,模型组相对骨体积（BV/TV）、骨小梁数量（Tb.N）、骨小梁厚度（Tb.Th）指标均显著下降（P<0.05）,骨小梁分离度（Tb.Sp）、结构模型指数（SMI）均显著提高（P<0.05）;与模型组比较,淫羊藿苷、朝藿定C组BV/TV、Tb.N、Tb.Th显著升高,Tb.Sp、SMI显著下降（P<0.05）,其中朝藿定C组各指标均较淫羊藿苷组改善显著（P<0.05）。HE染色病理切片示,模型组骨小梁数目明显减少,稀疏断裂,大部分不能连接成网状,骨髓腔明显增大,骨小梁结构出现较大的空白区域;淫羊藿苷及朝藿定C组小鼠骨小梁明显宽厚,数目也显著增加,骨小梁断裂较少,骨小梁光滑,接近对照组,其中朝藿定C组增加较淫羊藿苷组明显。结论 地塞米松诱导的骨质疏松小鼠模型成功建立,朝藿定C和淫羊藿苷抗骨质疏松活性明显,主要通过增加骨量和改善骨小梁微结构来最终提高骨强度,其中朝藿定C抗骨松作用更强;Micro-CT技术与传统的检测方法相比,在中药干预GIOP骨微结构参数分析上具有便捷、高效,经济,图像多维、全面,准确的优势。     

淫羊藿苷在大鼠胃肠道内容物中的降解动力学研究

目的考察淫羊藿苷在大鼠胃肠道内容物中的稳定性与降解动力学特征,为淫羊藿苷口服制剂的开发及阐明淫羊藿苷的作用机制提供依据。方法制备大鼠胃内容物和各肠段内容物,采用HPLC法测定不同条件下匀浆液中淫羊藿苷的质量浓度。结果淫羊藿苷降解半衰期随肠道内容物质量浓度的升高而显著减小;淫羊藿苷在不同内容物中的代谢速率有差异,回肠、空肠、十二指肠、胃和结肠半衰期依次为0.83,1.26,2.81,18.48和87.72 h,降解速率常数依次为0.835 3 h~(-1),0.021 0 mL·μg~(-1)·h~(-1),0.018 3 mL·μg~(-1)·h~(-1),0.037 5 h~(-1)和0.007 9 h~(-1);其中十二指肠和空肠降解反应级数为二级,其余均为一级。结论淫羊藿苷在胃和结肠内容物中较稳定,易被小肠内容物降解。     

淫羊藿苷介导PI3K/Akt信号通路干预大鼠早期激素性股骨头坏死的研究

目的 探讨淫羊藿苷调控磷脂酰肌醇3激酶（PI3K）/蛋白激酶B（Akt）信号通路干预大鼠早期激素性股骨头坏死的作用机制。方法 50只SD大鼠随机分为对照组、模型组和淫羊藿苷10、20、40mg/kg组,每组10只。除对照组外,其余各组ip脂多糖和im甲泼尼龙制备激素性股骨头坏死大鼠模型。淫羊藿苷组大鼠分别ig10、20、40mg/kg的淫羊藿苷,对照组、模型组均ig等量生理盐水,每天1次,连续6周。采用Micro-CT评估造模是否成功并分析骨密度（BMD）、骨体积密度（BV/TV）、骨表面积密度（BS/TV）、骨小梁厚度（Tb.Th）、骨小梁数量（Tb.N）、骨小梁分离度（Tb.Sp）;ELISA法检测血清中血管内皮生长因子（VEGF）、一氧化氮（NO）水平;Western blotting法检测股骨头PI3K、Akt、磷酸化Akt（p-Akt）蛋白的表达。结果 与对照组比较,模型组BMD、Tb.Th、BV/TV、Tb.N、BS/TV、VEGF和NO水平明显降低,Tb.Sp明显增高（P＜0.05）;与模型组比较,淫羊藿苷组的BMD、Tb.N、BV/TV、Tb.Th、BS/TV、VEGF和NO水平明显增高,Tb.Sp明显降低（P＜0.05）。与对照组比较,模型组PI3K和p-Akt蛋白表达均减少（P＜0.05）;与模型组比较,淫羊藿苷组PI3K和p-Akt蛋白表达均增加（P＜0.05）。结论 淫羊藿苷能够有效缓解激素性股骨头坏死的进展,其机制可能与调节血清中VEGF、NO水平和增加骨组织中PI3K、Akt、p-Akt蛋白的表达有关,从而诱导血管修复与新生,促进骨形成和愈合。     

肾安颗粒中淫羊藿和黄芪半仿生提取工艺研究

目的优选肾安颗粒的提取工艺。方法以方中君药淫羊藿、臣药黄芪的主要成分淫羊藿苷,黄芪甲苷为指标,用半仿生设计法对淫羊藿苷、黄芪甲苷的提取工艺进行优选。结果淫羊藿、黄芪的最佳提取工艺为A1B1C1D1,即第1次提取pH=2,第2次提取pH=7,第3次提取pH=9,共提取5h。结论用半仿生设计法对胃安颗粒中淫羊藿苷黄芪甲苷的提取工艺进行优选,优选出的工艺科学、合理。     

八珍益智合剂3种成分的含量测定及稳定性考察

目的 建立一测多评法同时测定八珍益智合剂中甘草苷、芹糖甘草苷和橙皮苷3种成分的含量，并对八珍益智合剂3种成分的稳定性进行考察。方法 采用HPLC-DAD法，以橙皮苷为参照物，测定其他2种成分的相对校正因子和相对保留时间，并计算各成分含量；以外标法为对照，比较一测多评法（single marker，QAMS）与外标法（external standard method，ESM）实测值的差异，探讨一测多评法的可行性。同时测定八珍益智合剂在高温、强光照射、加速试验和长期室温条件下的稳定性，为其贮藏条件和保质期提供数据。结果 经过方法学验证，3种成分在4.512~108.2，10.13~101.30，4.496~107.90 μg·mL^-1内线性关系良好（r>0.999）；平均加样回收率为95.9%~104.7%，RSD ≤ 3%；2种成分相对橙皮苷的相对校正因子分别为0.49和0.38，且在不同实验条件下相对校正因子重复性良好；含量测定QAMS计算结果与ESM实测值无明显差异。稳定性考察结果表明，在高温条件下长时间放置芹糖甘草苷和橙皮苷含量下降速度较快，甘草苷含量下降较为平缓，提示中药合剂在高温条件下不宜放置过长时间。结论 本研究所建方法准确可靠、重复性好，可用于八珍益智合剂的质量控制，本合剂应密封置阴凉处保存。     

二丁二仙合剂质量标准的建立

摘 要 目的：建立二丁二仙合剂质量标准。方法: 采用TLC法对二丁二仙合剂中紫花地丁、黄柏进行定性鉴别;用HPLC法对制剂中淫羊藿苷、仙茅苷进行含量测定。结果:定性鉴别分离度较好,专属性强;淫羊藿苷的含量测定线性范围为5.77～184.50 μg·m^-1 （r=0.999 9）,平均回收率为96.55%（RSD=1.14%,n=9）;仙茅苷的含量测定线性范围为12.36～395.50 μg·m^-1 （r=1.000 0）,平均回收率为100.58%（RSD=2.92%,n=9）。结论:所建立方法准确可靠、灵敏度高、专属性强,可用于二丁二仙合剂的质量控制。