HPLC法同时测定中亚鸢尾中3种抗炎活性成分的含量

摘要：目的:建立HPLC法同时测定中亚鸢尾中3种具有抗炎活性的黄酮类成分4’-羟基-5,3’-二甲氧基-6,7-亚甲二氧基异黄酮-4’-O-β-D-吡喃葡萄糖苷、尼鸢尾黄素-4’-O-β-D-吡喃葡萄糖苷、4’-羟基-5,3’-二甲氧基-6,7-亚甲二氧基异黄酮含量。方法:色谱柱为HC-C18柱（250 mm×4.6 mm,5μm）,流动相为乙腈-0.3%磷酸溶液,流速:1.0 ml·min-1,检测波长:265 nm,柱温:25℃,进样量:5μl。结果:4’-羟基-5,3’-二甲氧基-6,7-亚甲二氧基异黄酮-4’-O-β-D-吡喃葡萄糖苷、尼鸢尾黄素-4’-O-β-D-吡喃葡萄糖苷、4’-羟基-5,3’-二甲氧基-6,7-亚甲二氧基异黄酮质量浓度分别在5.25～84.00μg·ml-1（r=0.999 5）、3.25～52.00μg·ml-1（r=0.999 6）和3.25～52.00μg·ml-1（r=0.999 8）的范围内与峰面积呈良好的线性关系;平均加样回收率分别为98.07%（RSD=1.58%）、98.65%（RSD=2.17%）和97.21%（RSD=3.46%）（n=9）。结论:该方法准确度好,精密度高,可用于中亚鸢尾中3种黄酮类成分的同时测定。     

沙蓬黄酮类和香豆素类化学成分的分离与鉴定

目的对蒙药沙蓬的化学成分进行研究。方法采用大孔树脂柱色谱、反复硅胶柱色谱、Seph-adex LH-20柱色谱、ODS柱色谱和半微量制备高效液相色谱分离纯化,根据ESI-MS、1H-NMR和13C-NMR等谱学数据进行结构鉴定。结果从沙蓬全草的乙醇提取物的正丁醇萃取物和乙酸乙酯萃取物中分离得到7个黄酮类和2个香豆素类化合物,分别鉴定为芦丁(quercetin-3-O-rutinoside,1)、异鼠李糖-3-O-β-D-芸香糖苷(isorhamnetin 3-O-β-D-rutinoside,2)、tamarixetin 3-O-rutinoside(3)、槲皮素-3-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(quercetin 3-O-β-D-glucopyranoside,4)、异鼠李素-3-葡萄糖苷(isorh-amnetin-3-glucoside,5)、二氢木蝴蝶素A(dihydrooroxylin A,6)、5,2'-二羟基-6,7-亚甲二氧基二氢黄酮(5,2'-dihydroxy-6,7-methylenedioxyflavanone,7)、异莨菪亭(isoscopoletin,8)和东莨菪亭(scopoletin,9)。结论化合物3、6、7为首次从藜科植物中分离得到,化合物1、2、4、5、8、9为首次从沙蓬属植物中分离得到。     

6．甲基-3＇,4＇-亚甲二氧基-8-黄酮醋酸的合成及抗炎活性研究

目的研究黄酮醋酸类化合物合成方法及生物活性。方法通过酰基化、Fries重排、氯甲基化、氰化、缩合、关环氧化及水解等七步反应合成目标产物6-甲基-3‘,4‘-亚甲二氧基一8一黄酮醋酸。结果所得的6-甲基-3‘,4‘-亚甲二氧基-8-黄酮醋酸及其前体化合物6-甲基-8-氰甲基-3‘,4‘-亚甲二氧基黄酮均有抗炎活性。结论该合成方法具有反应时间短、操作简便、收率好等优点。     

滨蒿的化学成分

目的进一步研究菊科植物滨蒿(Artemisia scoparia)中的化学成分。方法采用硅胶柱色谱法、中低压柱色谱法、ODS柱色谱法、Sephadex LH 20柱色谱法以及高效液色谱法进行分离和纯化,并依据理化性质和波谱解析鉴定其化学结构。结果从植物滨蒿地上部分的体积分数为60%乙醇提取物(420 g)中分得6个化合物,分别鉴定为3羟基二十二酸2(5乙酰基2,3二氢苯并呋喃2基)丙酯(1)、2′(3′甲氧基3甲基丁烯基)对甲氧基乙酰苯(2)、5,8二甲氧基6,7亚甲二氧基香豆素(3)、8甲氧基6,7亚甲二氧基香豆素(4)、6去甲氧基茵陈色原酮(5)、2,4二羟基6甲氧基乙酰苯(6)。结论化合物1~6均为首次从该植物中得到,其中化合物1、2为新化合物。     

6-甲基-3′,4′-亚甲二氧基-8-黄酮醋酸的合成及抗炎活性研究

目的研究黄酮醋酸类化合物合成方法及生物活性.方法通过酰基化、Fries重排、氯甲基化、氰化、缩合、关环氧化及水解等七步反应合成目标产物6-甲基-3′,4′-亚甲二氧基-8-黄酮醋酸.结果所得的6-甲基-3′,4′-亚甲二氧基-8-黄酮醋酸及其前体化合物6-甲基-8-氰甲基-3′,4′-亚甲二氧基黄酮均有抗炎活性.结论该合成方法具有反应时间短、操作简便、收率好等优点.     

野菊花的化学成分研究

对野菊花的化学成分进行分析。首先,采用95%乙醇组织破碎提取得到野菊花总提取物,然后用石油醚、石油醚：乙酸乙酯（80：20,v/v）、乙酸乙酯、乙酸乙酯：95%乙醇（80：20,v/v）梯度萃取,再利用硅胶、ODS、Sephadex-LH-20等色谱层析方法对石油醚：乙酸乙酯（80：20,v/v）部位进行了分离、纯化,得到3个化合物单体,并通过NMR、MS、IR、UV等手段鉴定其结构分别为：5,7,4＇-二羟基-3＇,5＇-二甲氧基黄酮（1,小麦黄素）;5,7,4＇-三羟基黄酮（2,芹菜素）;5,3＇,4＇-三羟基-6,7-二甲氧基黄酮（3）。其中化合物3为首次从野菊花中分离得到。     

马尾松松针的黄酮类化学成分的分离鉴定

目的：研究松科植物马尾松松针亲水性部分的化学成分。方法：利用Sephadex-LH 20、ODS和硅胶等柱色谱技术进行分离纯化，根据化合物的理化性质和光谱数据进行结构鉴定。结果：从马尾松松针的醋酸乙酯和正丁醇萃取部分分离得7个黄酮类化合物，其化学结构分别确定为3＇，5-二羟基-4＇-甲氧基二氢黄酮-7-O-α-L-鼠李糖基（1→6）-β-D-葡萄糖苷（1），3＇，5-二羟基-4＇-甲氧基二氢黄酮-7-O-β-D-葡萄糖（1→2）-α-鼠李糖苷（2），4＇，5-二羟基二氢黄酮-7-O-α-L-鼠李糖基（1→2）-β-D-葡萄糖苷（3），木犀草素（4），木犀草素-7-O-吡喃葡萄糖苷（5），槲皮素（6）和双氢槲皮素（7）。结论：化合物1～5为首次从本植物中分离得到。     

正相高效液相色谱法测定IMH中氯代烷烃类遗传毒性杂质氯代物

目的:建立抗脂肪肝治疗药4,4’-二甲氧基-5,6,5’,6’-双(亚甲二氧基)-2’-吗啉亚甲基联苯-2-甲酸甲酯甲磺酸盐(简称IMH)中氯代烷烃类遗传毒性杂质4,4’-二甲氧基-5,6,5’,6’-双(亚甲二氧基)-2’-氯甲基-2-甲酸甲酯(简称氯代物)的分析方法。方法:采用正相高效液相色谱(NP-HPLC)法,选用Phenomenex Luna~? Silica色谱柱(250 mm×4.6 mm, 5μm),以正己烷-异丙醇(95∶5)为流动相,流速0.8 mL·min^-1,检测波长226 nm,柱温35℃,进样量50μL;采用外标法对氯代物进行定量。结果:在水相中易分解的氯代物在该正相色谱方法条件下能够达到有效分离,专属性良好;氯代物质量浓度在0.03～3.0μg·mL^-1的范围内呈现良好的线性关系,检测限和定量限分别为0.15 ng和0.31 ng;平均回收率处于99%～103%,精密度及溶液稳定性良好。3批实测样品中均未检出氯代物,表明后续工艺能有效清除本品中的氯代物。结论:该色谱方法快速、准确、灵敏,能够对IMH中的氯代物进行...     

假鹰爪双氢黄酮素Ⅱ：从假鹰爪中获得的新双氢黄酮

从假鹰爪根中分离得到一个新双氢黄酮，根据波谱分析确定其化学结构为7－羟基－5－甲氧基－8－甲酰基－6－甲基双氢黄酮，命名为假鹰爪双氢黄酮素Ⅱ。     

浅裂鳞毛蕨中的一个新二氢黄酮

目的研究浅裂鳞毛蕨(Dryopteris sublaeta Ching et Hsu)的化学成分。方法利用硅胶柱色谱进行分离纯化，根据化合物的理化性质和光谱数据鉴定结构。结果从浅裂鳞毛蕨中分离并鉴定了4个化合物，分别为：2(S)-5,7,3′-三羟基-6,8-二甲基-5′-甲氧基-二氢黄酮(1)，荚果蕨素(5,7-二羟基-6,8-二甲基-4′-甲氧基-二氢黄酮，matteucinol)(2)，去甲氧基荚果蕨素(5,7-二羟基-6,8-二甲基-二氢黄酮，desmethoxymatteucinol)(3)和2′-羟基去甲氧基荚果蕨素(5,7,2′-三羟基-6,8-二甲基-二氢黄酮,2′-hydroxy-desmethoxymatteucinol)(4)。结论化合物1为新化合物，其余化合物均为首次从该属植物中分离得到。     

HPLC法测定注射用阿奇霉素的含量

目的：建立反相高效液相法测定注射用阿奇霉素含量的方法。方法采用Inertsil ODS柱（4．6 mm ×250 mm,5μm）,以0．1 mol·L－1乙酸铵（用氨水调节pH值至8．6）—乙腈—甲醇（50∶30∶20）为流动相,流速1．0 mL·min－1,检测波长218 nm,柱温60℃。结果阿奇霉素的线性范围为100～2000 mg·L－1,r＝0．9998,平均回收率98．8％,RSD＝0．6％（n＝9）。结论该方法简便快速、准确,更适于控制注射用阿奇霉素的质量。     

HPLC 法测定清热暗疮丸中绿原酸的含量

目的：建立 HPLC 法测定清热暗疮丸中绿原酸的含量。方法Thermo U-3000液相色谱系统;ChromeleonTM7工作站;Thermo DAD-3000检测器;Thermo C18（250 mm ×4．6 mm,5μm）色谱柱;流动相：乙腈—0．4％磷酸溶液（14∶86）;流速：1．0 mL ·min －1;柱温：25℃;紫外检测波长327 nm;进样量为10μL。结果绿原酸在2．556～255．6 mg·L －1的范围内呈良好的线性关系（r ＝0．99999）;绿原酸的平均加样回收率为99．8％（n ＝9）;检测限为0．051 mg·L －1;精密度试验 RSD ＝0．039％;重现性实验 RSD ＝0．69％;稳定性实验 RSD ＝0．60％。结论该方法简便、稳定,分离效果好,结果准确,适用于清热暗疮丸中绿原酸的质量控制。     

HPLC 法同时测定痛经贴剂中柚皮苷、橙皮苷和新橙皮苷的含量

目的：建立 HPLC 法同时测定痛经贴剂中柚皮苷、橙皮苷和新橙皮苷的含量。方法采用高效液相色谱法,以 Cosmosil-C18为色谱柱（5μm,4．6 mm ×250 mm）;乙腈—0．1％磷酸（21∶79）为流动相;流速为1．0 mL· min －1;检测波长为283 nm;柱温为25℃;进样量为10μL。结果柚皮苷浓度在10．63～340 mg·L －1,橙皮苷浓度在7．81～250 mg·L －1,新橙皮苷浓度在8．13～260 mg·L －1范围内线性关系良好,平均加样回收率分别为98．01％、97．90％和98．60％。结论该方法简单、准确、可靠,可用于痛经贴剂的质量控制。     

RP-HPLC 法同时测定成人血清中苦参素和阿德福韦酯的浓度方法学研究

目的：建立一种简易的测定联合服用苦参素和阿德福韦酯成人血清中苦参素和阿德福韦酯含量方法。方法采用Shim-pack VP-ODS C18色谱柱（250 mm ×4．6 mm,5μm）,流动相为甲醇∶水（70∶30）,流速为1．1 mL·min －1,检测波长为229 nm。结果苦参素保留时间4．6 min 左右,标准曲线的线性范围为0．0125～2 mg·L －1,r ＝0．9992。阿德福韦酯保留时间7．3 min 左右,标准曲线的线性范围为0．0125～0．75 mg·L －1,r ＝0．9991,苦参素和阿德福韦酯的日间、日内变异系数均在7％以下,回收率＞92％。结论该法简便,灵敏,快速,可用于苦参素和阿德福韦酯临床联用治疗的成人血药浓度的监测。     

HPLC法测定复方利血平片中氢氯噻嗪、盐酸异丙嗪和利血平的含量

目的 建立HPLC法测定复方利血平片中氢氯噻嗪、盐酸异丙嗪和利血平的含量。方法采用C18柱为固定相（150mm×4．6mm×5μm）,0．01mol·L^-1庚烷磺酸钠：乙腈：三乙胺（53：47：0．1）,用磷酸溶液调节pH至5．5为流动相,检测波长为230～380nm。结果氢氯噻嗪在0．1934—2．9013g·L^-1浓度范围内线性关系良好,r=0．9999,平均加样回收率为100．44％,RSD为0．54％（n=6）;盐酸异丙嗪在0．135～2．025g·L^-1浓度范围内线性关系良好,r=1．0000,平均加样回收率为100．25％,RSD为0．18％（n=6）;利血平在1．965—29．475mg·L^-1浓度范围内线性关系良好,r=1．0000,平均加样回收率为100．73％,RSD为0．47％（n=6）。结论该方法具有操作简便、结果准确的优点,可用于复方利血平片中氢氯噻嗪、盐酸异丙嗪和利血平的含量。     

HPLC-PAD法同时测定精制银翘解毒胶囊中对乙酰氨基酚、绿原酸、连翘苷和牛蒡苷的含量

目的:采用HPLC-PAD法同时测定精制银翘解毒胶囊中对乙酰氨基酚、绿原酸、连翘苷和牛蒡苷的含量.方法:色谱柱:Capcell Pak C18(150 mm×4.6 mm,5μm);流动相:乙腈-水(含0.25％的冰醋酸)梯度洗脱;检测波长:300 nm和228 nm;流速:1mL· min-1;柱温:30C.结果:对乙酰氨基酚测定的线性范围28.15～84.45 μg (r=0.9999),平均含量为235.06 mg·g-1,RSD为0.17％;绿原酸测定的线性范围0.2048～0.6144 μg (r=0.9998),平均含量为1.91 mg·g-1,RSD为0.21％;连翘苷测定的线性范围0.1054～0.3162μg (r=0.9994),平均含量为1.00 mg·g-1,RSD为0.32％;牛蒡苷测定的线性范围1.044～3.132 μg (r=0.9998),平均含量为7.04 mg·g-1,RSD为0.16％.结论:该法简便、灵敏、准确,适用于精制银翘解毒胶囊的质量控制.     

HPLC法同时测定清热灵颗粒中黄芩苷和连翘苷含量

目的:建立同时测定清热灵颗粒中黄芩苷和连翘苷含量的HPLC方法。方法:色谱柱:Kromasil C18(250mm×4.6mm,5μm)。流动相:乙腈-0.5%三乙胺水溶液(磷酸调pH至3.05)(30:70)。检测波长为277nm,流速:1.0ml·min-1;柱温:25℃。结果:黄芩苷线性范围为1.65～105.57μg·ml-1(r=0.9999),平均回收率为98.94%,RSD为0.39%(n=6);连翘苷线性范围为1.63～104.55μg·ml-1(r=0.9999),平均回收率为99.00%,RSD为0.46%(n=6)。结论:方法简便可靠,结果重现性好,为控制清热灵颗粒的内在质量提供了科学依据。     

HPLC法测定阿奇霉素干混悬剂中阿奇霉素的含量

目的：建立高效液相色谱法测定阿奇霉素干混悬剂中阿奇霉素含量的方法。方法采用 XTerra RP C18柱（4.6×150mm,5μm）为固定相,以0.075mol· L -1磷酸二氢铵（三乙胺调节pH至6.5）-乙腈（70∶30）为流动相,进样量为25μL,流速为1.0mL· min -1,柱温30℃,紫外检测波长为205nm。结果阿奇霉素检测浓度在0.05～3.20mg· mL -1范围内与峰面积呈良好的线性关系（ r＝0.9995）;平均回收率为100.3％, RSD＝0.177％（n＝9）,精密度＜1.0％。结论测定结果准确可靠,重现性好。与药典法采用的微生物检定法进行比较,测定结果基本一致。     

HPLC-ELSD法测定枸杞子中甜菜碱的含量

目的：建立枸杞子中甜菜碱含量的HPLC-ELSD测定方法。方法：采用Hypersil NH2色谱柱（250 mm×4.6 mm,5μm）,流动相为甲醇-四氢呋喃-0.2%三氟乙酸（30：60：10）,流速为1.0 mL.min-1,柱温为25℃。结果：甜菜碱进样量为1.28～12.8μg时,其与色谱峰面积具有良好的线性关系（r=0.999 2）;平均加样回收率为98.60%,RSD为2.8%（n=6）;测得样品中甜菜碱含量为0.528 1～1.205 4 mg.g-1。结论：该HPLC-ELSD法简便,准确度高,可用于枸杞子的质量控制。     

RP-HPLC法测定阿仑膦酸钠注射液含量

目的建立用于阿仑膦酸钠注射液含量的分析方法。方法采用岛津LC-10Avp高效液相色谱系统,HAMILTON PRP-1不锈钢柱（150mm×4.1mm,5μm）,以乙腈-甲醇-0.05mol.L-1柠檬酸盐/0.05mol.L-1磷酸盐缓冲液（用磷酸调pH8.0）（25∶5∶70）为流动相,流速为1.0mL.min-1,柱温为35℃,检测波长266nm。结果阿仑膦酸钠进样量在0.42~4.20μg范围内,方法的线性关系良好;方法的平均回收率为99.52%;RSD为0.58%。在该色谱条件下,阿仑膦酸钠注射液样品测定不受辅料干扰。结论本法简便、准确、灵敏度高,适用于阿仑膦酸钠注射液的常规检测,为该药的质量控制提供了可靠的分析手段。