原花青素对H2O2引起PC12细胞的内质网应激损伤的保护作用

目的：研究H2O2诱导PC12细胞的内质网应激损伤作用及原花青素对其预防作用。方法：H2O2 100μmol/L 诱导PC12细胞损伤18小时复制阿尔茨海默病模型（AD）,原花青素40mg/L、SB203580 10μmol/L、Tempol 800μmol/L于造模前30min预处理后,RT-PCR检测BiP/GRP-78 mRNA水平变化;流式细胞术检测细胞内反应氧产物（ROS）阳性细胞生成率,计算平均荧光强度。结果：H2O2 100μmol/L 诱导PC12细胞损伤后BiP/GRP-78 mRNA表达显著增高,ROS生成增加;原花青素40mg/L可显著降低BiP/GRP-78 mRNA水平（P〈0.01）,减少细胞内ROS生成（P〈0.01）。结论：原花青素可减轻H2O2引起PC12细胞的内质网应激损伤。     

细胞凋亡与内质网应激机制

内质网应激介导的细胞凋亡是一种新的凋亡途径,不同于死亡受体信号途径和线粒体途径.短期的内质网应激有保护细胞的作用,但是长期的内质网应激将激活一些凋亡信号分子如CHOP、JNK、Caspase,而诱导细胞凋亡.     

JNK信号转导通路在黄芩苷诱导肝癌细胞凋亡中的作用

目的探讨黄芩苷对人肝癌Hep G2细胞生长的抑制作用及其对c-Jun氨基末端激酶(JNK)信号通路的影响。方法 50、100、150μg/ml的黄芩苷分别与人肝癌Hep G2细胞共同培养24、48和72 h,MTT测定细胞生长抑制率;采用Western blotting方法检测黄芩苷处理72 h后Hep G2细胞JNK和p-JNK的表达变化并观察JNK抑制剂对细胞凋亡的影响。结果黄芩苷对人肝癌Hep G2细胞增殖抑制作用呈时间依赖性,黄芩苷浓度低于100μg/ml其对细胞的抑制作用随浓度升高而增强,超过100μg/ml其对细胞的抑制作用不再增强。在黄芩苷处理后Hep G2细胞pJNK蛋白表达上调,使用JNK抑制剂后,能阻断JNK蛋白的磷酸化,并且降低黄芩苷诱导细胞凋亡的能力。结论黄芩苷通过激活JNK信号通路诱导人肝癌Hep G2细胞凋亡。     

利拉鲁肽对高糖培养的H9c2心肌细胞氧化应激和内质网应激的影响

摘 要 目的：探讨利拉鲁肽对高糖培养的H9c2心肌细胞氧化应激和内质网应激的影响。方法: 在H9c2细胞的高糖培养液中加入利拉鲁肽（LIRA）、活性氧簇分子（ROS）清除药N-乙酰半胱氨酸（NAC）处理24 h,用流式细胞术检测细胞的ROS水平,用Western blot的方法检测H9c2细胞内质网应激标志蛋白葡萄糖调节蛋白78（GRP78）和C/EBP 同源蛋白（CHOP）的表达水平。结果:与正常糖对照组比较,高糖组细胞内的ROS含量、GRP78和CHOP的蛋白表达水平显著上升（P<0.01）。与高糖组比较,利拉鲁肽显著抑制了细胞内的ROS产生（P<0.01）,降低了GRP78和CHOP的蛋白表达水平（P<0.05）。结论:利拉鲁肽能抑制高糖培养的H9c2细胞的氧化应激和内质网应激水平。     

艾塞那肽通过抑制内质网应激减少脂肪酸诱导肝细胞凋亡的作用北大核心CSCD

目的研究艾塞那肽(EXE)是否通过抑制内质网应激来减少棕榈酸诱导的肝细胞凋亡。方法将人肝细胞株L-02分为对照组、模型组(棕榈酸500μmol·L^(-1)处理24 h)、3个剂量实验组(以棕榈酸500μmol·L^(-1)和EXE 25,50,100 nmol·L^(-1)分别处理24 h)和联合组(以棕榈酸500μmol·L^(-1)、EXE 100nmol·L^(-1)和衣霉素2μg·L^(-1)处理24 h)。用3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑溴盐(MTT)法检测细胞活力;以脱氧核苷酸末端转移酶介导的dUTP缺口末端标记(TUNEL)染色及半胱天冬酶(Caspase)-3活性检测观察细胞凋亡;以实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-PCR)法检测内质网应激标志物C/EBP同源蛋白(CHOP)表达及Caspase-12活性以观察细胞内质网应激水平。结果与模型组比较,EXE能剂量依赖性增加棕榈酸处理后L-02细胞的活力,减少凋亡细胞数,降低Caspase-3和Caspase-12活性,并下调CHOP表达(均P<0.05)。与高剂量实验组比较,联合组的CHOP表达、细胞凋亡数及Caspase-12活性均显著升高,细胞活力显著下降[(78.58±1.78)%vs(87.78±3.66)%](均P<0.05)。结论 EXE可能通过抑制内质网应激减少脂肪酸诱导肝细胞凋亡。     

基于高内涵筛选技术研究生首乌和制首乌醇提物的肝毒性机制

目的应用高内涵筛选技术研究生首乌醇提物(RPM)和制首乌醇提物(RPMP)的肝毒性及其可能机制。方法 RPM(终浓度10,25,50,100,200和300 mg·L~(-1))和RPMP(终浓度10,50,100,300,600和1200 mg·L~(-1))作用于Hep G2细胞3~24 h。采用Cell Titer-GloTM荧光细胞活性检测试剂盒检测Hep G2细胞存活率;应用高内涵筛选技术进行Hep G2细胞计数,并检测线粒体内活性氧(ROS)、线粒体膜电位(MMP)、细胞内谷胱甘肽(GSH)、超氧化物歧化酶2(SOD2)、转录激活因子4(ATF4)水平及细胞凋亡和细胞周期阻滞;Western蛋白质印迹法验证Hep G2细胞SOD2和ATF4蛋白表达水平。结果与细胞对照组相比,RPM 300 mg·L~(-1)作用24 h使Hep G2细胞存活率下降约48%(P<0.01),而相同浓度RPMP对细胞存活率无显著影响;RPM和RPMP均能降低MMP(P<0.05),并升高GSH,ROS,SOD2和ATF4水平(P<0.05)。与细胞对照组相比,RPM 200 mg·L~(-1)作用3 h SOD2水平显著升高(P<0.05),6 h ATF4水平显著升高(P<0.05);RPMP 300 mg·L~(-1)作用6 h ATF4水平显著升高(P<0.05),24 h SOD2水平显著升高(P<0.05)。结论 RPM和RPMP均具有一定的细胞毒性,RPM的细胞毒性强于RPMP,两者的肝毒性可能主要与氧化应激和内质网应激导致的细胞凋亡有关。     

砷及MPST过表达对SH-SY5Y细胞GRP78/CHOP通路的影响

目的探讨内质网应激是否参与亚砷酸钠(NaAsO2)神经毒性损伤,明确3-巯基丙酮酸硫转移酶(3-mercaptopyruvate sulfurtransferase,MPST)过表达是否调节砷诱导的内质网应激。方法通过构建MPST基因慢病毒表达载体来获得稳定表达外源MPST基因的SH-SY5Y细胞株作为SH-MPST过表达组,另设空载体转染细胞为SH-PEB组,染砷组(NaAsO2组),内质网应激阻断剂TUDCA组,TUDCA预处理染砷组。Western blot法分别检测过表达MPST、染砷及TUDCA预处理后细胞内GRP78和CHOP蛋白表达的变化。结果单纯MPST过表达不影响SH-SY5Y细胞内GRP78、CHOP蛋白的表达水平;经NaAsO2处理后,SH-PEB细胞内GRP78、CHOP蛋白明显上调(P<0.01),而被内质网应激阻断剂TUDCA所拮抗;MPST过表达则抑制砷对GRP78、CHOP蛋白的上调(P<0.01);然而,TUDCA预处理则明显逆转MPST过表达对GRP78、CHOP蛋白的影响(P<0.01)。结论GRP78/CHOP内质网应激通路参与了砷诱导的神经毒性损伤;MPST过表达可降低砷诱导的内质网应激水平。     

血根碱通过诱导活性氧促进HepG2细胞凋亡的机制研究

目的研究血根碱对Hep G2细胞中活性氧(ROS)调控细胞凋亡途径的影响。方法采用血根碱干预Hep G2细胞,MTT法检测血根碱对细胞活性的影响;DCFH-DA和DHE染色观察血根碱作用Hep G2细胞12 h后细胞内ROS的变化;Hoechst 33342和Annexin V/PI染色检测细胞凋亡;Rho123染色检测细胞线粒体膜电位;Western blot检测凋亡相关蛋白的表达。结果随着血根碱药物浓度的增加,Hep G2细胞活力明显被抑制;血根碱可以明显提高Hep G2细胞内的ROS含量,并且降低线粒体膜电位,促进细胞凋亡;Western blot检测发现血根碱促进Bax、cleaved-caspase-3和细胞质Cyt-C的表达,抑制Bcl-2蛋白的表达。结论血根碱通过升高细胞内ROS的含量,激活线粒体凋亡途径,进而促进Hep G2细胞发生凋亡。     

Triapine通过ROS/GSH/GPX4轴诱导A549细胞铁死亡北大核心CSCD

目的探究Triapine诱导非小细胞肺癌细胞A549发生铁死亡的作用与机制。方法MTT实验和克隆形成实验评价Triapine对A549细胞增殖的作用;使用DCFH-DA探针分析Triapine对A549细胞内ROS水平的影响;试剂盒检测Triapine处理后A549细胞内谷胱甘肽(glutathione,GSH)和脂质过氧化物(lipid peroxides,LPO)水平变化;Western blot分析Triapine对A549细胞内谷胱甘肽过氧化物酶4(glutathione peroxidase 4,GPX4)蛋白表达的影响;用ROS抑制剂进行干预,检测GPX4蛋白的表达和细胞活性的变化。结果Triapine能够抑制A549细胞增殖,且IC_(50)为(3.7±0.08)mg·L^(-1);Triapine能诱导A549细胞ROS累积,降低GSH水平,提升LPO含量,下调GPX4的表达;ROS抑制剂干预能恢复Triapine引起的GPX4表达降低及细胞活性下降。结论Triapine可能通过提升A549细胞内ROS水平消耗GSH,导致GPX4表达下降,诱导铁死亡发生。     

内质网应激介导白藜芦醇对心肌细胞肥大的保护作用

目的探讨白藜芦醇(resveratrol,Res)对异丙肾上腺素(isoproterenol,ISO)诱导的心肌细胞肥大的保护作用及与内质网应激的关系。方法利用ISO建立乳鼠心肌肥大细胞模型,分为正常对照组、ISO组,白藜芦醇干预组和白藜芦醇对照组。检测心肌细胞表面积和ANP基因表达;流式细胞仪检测细胞凋亡率;检测培养液中乳酸脱氢酶(LDH)和丙二醛(MDA)漏出量;实时定量PCR和Western blot分析GRP78和CHOP的基因和蛋白表达。结果 Res有效抑制ISO诱导的心肌细胞肥大和凋亡,表现为降低心肌细胞表面积和ANP基因表达,减少LDH、MDA漏出量和心肌细胞凋亡率,同时下调GRP78和CHOP的基因和蛋白表达。结论Res可能通过抑制内质网应激相关因子GRP78和CHOP表达发挥对心肌肥大的保护作用。     

二烯丙基二硫通过活性氧介导的JNK信号通路诱导人白血病K562细胞凋亡

目的研究二烯丙基二硫(DADS)诱导人白血病K562细胞凋亡的分子机制。方法应用MTT法检测细胞的活性;用流式细胞术检测细胞凋亡以及细胞内的活性氧(reac-tive oxygen species,ROS)水平;Western blot检测JNK以及磷酸化JNK的活化。结果 DADS能明显抑制K562细胞的增殖,呈时间和剂量依赖性;5.0 mg.L-1DADS处理K562细胞,细胞内ROS水平在1 h后明显增加,8 h达到高峰,随后又开始下降。随着DADS剂量的增加,JNK的活性明显增强,在DADS处理K562细胞8 h后,磷酸化的JNK达到最高值,而在随后的4 h又明显降低。Sp600125和NAC能明显减少磷酸化JNK的表达和抑制DADS诱导的细胞凋亡。结论 ROS是DADS诱导K562细胞凋亡过程中JNK活化的有效调节剂,DADS通过ROS介导的JNK活化诱导人白血病K562细胞凋亡。     

活性氧与内质网应激

内质网(endoplasmic reticulum,ER)是细胞加工蛋白质和贮存Ca2+的主要场所,对应激极为敏感,其功能紊乱时出现错误折叠与未折叠蛋白在腔内聚集以及Ca2+平衡紊乱的状态,称为内质网应激(endoplasmic reticulum stress,ERS)。活性氧(reactive oxygen species,ROS)作为第二信使,在细胞生物学功能的调节中起着重要作用。细胞内氧化还原状态的改变促进了ROS的产生和凋亡诱导因子的激活,致使细胞凋亡的同时又加剧了细胞内氧化还原状态的改变。研究发现细胞内氧化还原水平的改变在ERS介导的细胞凋亡过程中承担重要的角色,推测ROS可能是ERS介导的凋亡通路的上游信号分子,该文就ROS与ERS之间的关系作一综述。     

黄腐醇对肺癌细胞株A549体外抑制作用及其可能机制

目的 探讨黄腐醇对人肺癌细胞株A549的体外抑制作用及其可能机制.方法 体外培养A549细胞,采用MTT法检测黄腐醇10、20 μmol/L或联用N-乙酰-L-半胱氨酸(NAC)5 mmol/L对细胞生长的作用,细胞集落实验检测细胞的集落形成能力,流式细胞术检测细胞凋亡情况和活性氧(ROS)含量,Western blot法检测p53、p21、转录激活因子4(ATF4)和CCAAT/增强子结合蛋白同源蛋白(CHOP)的蛋白表达.结果 黄腐酵呈浓度和时间依赖性地抑制A549细胞生长(P＜0.05).与对照组相比,黄腐醇10,20 μmol/L均可减少A549细胞集落的数量,促进细胞凋亡,增加细胞内ROS含量以及p53、p21、ATF4、CHOP蛋白表达(P＜0.05);而NAC预处理后,可降低黄腐醇诱导的ROS含量以及细胞抑制率(P＜0.05).结论 黄腐酵能够体外抑制肺癌细胞生长并促进细胞凋亡,可能与黄腐酵升高肿瘤细胞内ROS含量、调节细胞周期和内质网应激相关蛋白的表达有关.     

普拉克索下调TXNIP表达对氧糖剥夺/再灌注心肌细胞p38/JNK通路的作用研究

目的 探究普拉克索对氧糖剥夺/再灌注(OGD/R)心肌细胞的作用及其可能的作用机制。方法 CCK-8检测细胞活力；试剂盒检测LDH和CK-MB活性、MDA和SOD含量；流式细胞术检测ROS产生和细胞凋亡；Western blot检测硫氧还蛋白相互作用蛋白(TXNIP)、p-p38、p38、p-JNK和JNK蛋白表达；qRT-PCR检测TXNIP mRNA表达。结果 与对照组比较，OGD/R组心肌细胞活力、SOD含量明显降低(P<0.05),而LDH活性、CK-MB活性、ROS产生、MDA含量和细胞凋亡率明显升高(P<0.05),TXNIP、p-p38/p38和p-JNK/JNK蛋白表达明显升高(P<0.05);与OGD/R组比较，Pra-50μmol/L组和Pra-100μmol/L组心肌细胞活力、SOD含量明显升高(P<0.05),而LDH活性、CK-MB活性、ROS产生、MDA含量和细胞凋亡率明显降低(P<0.05),TXNIP、p-p38/p38和p-JNK/JNK蛋白表达明显降低(P<0.05),且普拉克索的作用呈剂量依赖性；与Pra-100...     

杨桃根DMDD对高糖诱导的肾小管上皮细胞HK-2内质网应激IRE1α通路及炎症反应的抑制作用北大核心CSCD

目的研究杨桃根活性成分2-十二烷基-6-甲氧基-2,5-二烯-1,4-环己二酮(DMDD)对高糖诱导肾小管上皮细胞HK-2内质网应激及炎症反应的抑制作用。方法体外培养HK-2细胞,并分为正常组、高糖组、内质网应激抑制剂4-PBA组(5 mmoL·L^(-1))和DMDD高、中、低浓度组(8、4、2μmol·L^(-1))。各组细胞培养结束后,采用CCK-8法检测细胞存活率;ELISA检测细胞上清液中TNF-α、IL-6的水平;AO/EB染色法检测细胞凋亡;Western blot法检测细胞中凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax的表达水平、内质网应激标志蛋白GRP78、CHOP的表达水平以及IRE1α通路相关蛋白(IRE1α、JNK)的磷酸化水平。结果与高糖组比较,DMDD各浓度组细胞存活率明显升高;TNF-α、IL-6水平,Bax/Bcl-2、GRP78、CHOP蛋白表达水平和IRE1α、JNK蛋白磷酸化水平均明显降低,细胞中橙红色荧光明显减少。结论DMDD可能部分通过抑制内质网应激及IRE1α通路相关蛋白的表达,减少炎症反应,达到HK-2细胞的保护作用。     

枸杞多糖对泡沫细胞泡沫化与胆固醇酯流出的影响及内质网应激作用机制的研究

目的研究枸杞多糖(LBP)对单核细胞源性泡沫细胞泡沫化与胆固醇酯流出的影响及内质网应激的作用机制。方法原代培养单核细胞源性泡沫细胞后,用50、100、200μg.mL-1 LBP孵育72 h,油红O染色法检测泡沫细胞的数量;用荧光分光光度法分析细胞内总胆固醇(TC)、游离胆固醇(FC)和胆固醇酯(CE)的含量;用酶联免疫吸附法检测细胞中氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)及内质网应激蛋白(Grp78,CHOP,Xbp-1)的含量。结果 LBP可减少泡沫细胞的形成和细胞内TC、FC、CE的含量,同时可降低细胞内ox-LDL与内质网应激蛋白的含量(P<0.05,P<0.01)。结论 LBP通过降低ox-LDL及内质网应激蛋白的含量引起泡沫细胞内胆固醇的含量下降从而发挥抗动脉粥样硬化的作用。     

C／EBP同源性蛋白对脑细胞的杀伤作用

脑缺血后，某些特定的生物化学事件可以导致神经元变性，出现一系列病理生理改变。由于其机制尚未阐明，现仍为重要的研究课题。脑缺血时，内质网中蛋白的修饰因葡萄糖和氧的供应不足而导致神经元细胞中内质网的应激。C／EBP同源性蛋白(CHOP或GADD153)是一种内质网相关促凋亡蛋白，发挥转录因子的作用，参与调控与生存、死亡相关的基因的表达。但在脑缺血时，CHOP在内质网应激介导的神绎元凋亡中的作用机制还不明确。     

去甲斑蝥素作用早期对人肝癌细胞活性氧及NF-E2相关因子2/抗氧化反应元件信号通路的激活

目的探究去甲斑螯素(NCTD)诱导人肝癌Hep G2细胞凋亡及G2/M期阻滞的早期事件,分析NCTD作用早期Hep G2细胞内活性氧自由基(ROS)的变化规律及NCTD对NF-E2相关因子/抗氧化反应元件(Nrf2/ARE)信号通路的影响。方法 NCTD30,60和120μmol·L~(-1)分别作用于体外培养的人肝癌Hep G2细胞3,6,12,24,48和72 h,MTT法检测NCTD对细胞存活的影响;流式细胞术检测NCTD60μmol·L~(-1)作用细胞12,24和48 h对细胞周期和细胞凋亡的影响;DCFH-DA探针结合流式细胞术检测NCTD 30,60和120μmol·L~(-1)作用于3,6和12 h对Hep G2细胞内ROS的影响;荧光素酶法测定NCTD同时转染ARE和荧光素酶报告基因的Hep G2C8细胞的荧光强度;实时荧光定量PCR检测对血红素氧合酶-1(HO-1)和醌氧化还原酶-1(NQO1)m RNA表达的影响。结果 NCTD 30,60和120μmol·L~(-1)作用3和6 h对Hep G2细胞存活无明显影响,而作用24,48和72 h对Hep G2细胞有明显生长抑制作用(P<0.01);NCTD 60μmol·L~(-1)作用12 h后可诱导Hep G2细胞发生凋亡及G2/M期阻滞,12,24和48 h凋亡细胞比例分别由12 h细胞对照组(4.00±1.98)%增加到(12.10±1.70)%,24 h对照组(4.05±0.21)%增加到(31.80±6.50)%,48 h对照组(3.90±0.85)%增加到(33.30±1.41)%;12,24和48 h G2/M期细胞比例分别由12 h对照组的(16.51±1.58)%增加到(40.89±0.18)%,24 h对照组的(16.99±1.32)%增加到(55.29±3.99)%,48 h对照组的(14.45±0.59)%增加到(50.66±5.88)%,相应各时相NCTD处理组G1期细胞比例明显下降(P<0.01);NCTD 30,60和120μmol·L~(-1)作用Hep G2细胞3,6和12 h,ROS无明显变化,作用Hep G2C8细胞6和12 h可明显激活Nrf2/ARE信号通路,下游基因HO-1和NQO1 m RNA表达显著上调(P<0.05)。结论NCTD作用Hep G2细胞早期可明显激活Nrf2/ARE信号通路;ROS激活可能不是NCTD诱导人肝癌Hep G2细胞凋亡及G2/M期阻滞的主要原因。     

氧化应激在TRAIL诱导Hela细胞凋亡中的作用

目的 探讨氧化应激在肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(tumor necrosis factor related apoptosis inducing ligand,TRAIL)诱导人宫颈癌Hela细胞凋亡中的作用.方法 40μg·L-1 TRAIL处理细胞后,用MTT法检测TRAIL对细胞增殖的抑制作用;用分光光度法检测细胞内还原型谷胱甘肽(GSH)、丙二醛(MDA)含量;流式细胞仪检测胞浆内的活性氧(ROS)水平;激光共聚焦测定细胞线粒体膜电位(△Ψm);蛋白质印迹法检测Bcl-2、Cyt C、DR 4、DR 5蛋白量.结果 40 μg·L-1 TRAIL对Hela细胞的生长具有显著的抑制作用;使抗氧化因子GSH含量明显下降,氧化应激产物ROS、MDA含量明显增多;到6h时△Ψm不断降低,能明显下调抗凋亡蛋白Bcl-2的表达,引起线粒体Cyt C向细胞质的释放;同时上调死亡受体DR 5的表达.而抗氧化剂N-乙酰半胱氨酸(NAC)能抑制TRAIL引起的这些变化.结论 氧化应激在TRAIL诱导的Hela细胞凋亡中起着重要作用,可能与ROS激活线粒体途径和上调DR 5的表达密切相关.     

冬凌草甲素与西妥昔单抗联用通过线粒体途径及内质网应激途径协同诱导人喉癌细胞凋亡

目的探讨冬凌草甲素与西妥昔单抗联用协同诱导人喉癌细胞凋亡的分子机制。方法首先采用MTT法考察冬凌草甲素与西妥昔单抗联用对两株人喉癌细胞(HEp-2和Tu212细胞)增殖的影响;建立HEp-2裸鼠移植瘤模型考察冬凌草甲素与西妥昔单抗联用体内抗肿瘤效果;采用高内涵技术和流式细胞术检测冬凌草甲素与西妥昔单抗联用对两株人喉癌细胞凋亡比例、线粒体变化及活性氧(ROS)的水平。进一步采用Western印迹法检测线粒体途径相关蛋白(Bax和Bcl-2)及内质网应激相关蛋白(GRP78和CHOP)的变化;同时引入ROS清除剂NAC考察其对联合用药引起的线粒体途径及内质网应激相关蛋白变化的影响。结果 MTT结果显示,与两个单药组相比,冬凌草甲素与西妥昔单抗联用可以明显增加细胞生长抑制作用(P<0.01),且协同指数(CI值)<1。在HEp-2裸鼠移植瘤模型中,西妥昔单抗可以明显增强冬凌草甲素单药对移植瘤的生长抑制作用,说明在体内和体外水平二者联用均可以协同抑制人喉癌细胞生长。高内涵技术及流式细胞术均证明,与单独用药组相比,联合用药可以明显降低线粒体膜电位(P<0.05,P<0.01),同时联合用药也可以明显增加线粒体质量和ROS的含量(P<0.01)。西妥昔单抗可以增加冬凌草甲素单药对于Bax蛋白上调及Bcl-2蛋白下调作用(P<0.05),说明内源性途径参与了冬凌草甲素与西妥昔单抗联用诱导的细胞凋亡过程。此外,联合用药显著上调内质网应激相关蛋白GRP78及CHOP蛋白表达(P<0.05),提示联合用药可能通过激活内质网应激诱导人喉癌细胞发生凋亡。加入ROS的清除剂NAC可以逆转联合用药诱导的Bax,GRP78和CHOP的上调及Bcl-2的下调。结论冬凌草甲素与西妥昔单抗联用具有协同抗喉癌生长的作用,二者联用可以通过ROS介导线粒体途径及内质网应激诱导人喉癌细胞凋亡。