川芎嗪对内毒素诱导的急性肺损伤大鼠肺纤维化和炎症反应的调节作用

目的：探索川芎嗪对内毒素诱导的急性肺损伤大鼠肺纤维化和炎症反应的影响及其机制。方法：大鼠随机分为5组：对照组、LPS模型组、LPS+川芎嗪（50,100,200 mg·kg^-1）组。苏木素伊红（HE）染色观察肺组织病变。Masson染色分析肺纤维化。酶联免疫吸附实验（ELISA）检测白细胞介素（interleukin,IL）-6,IL-1β,肿瘤坏死因子（tTNF-α）和IL-18水平。蛋白印记检测α平滑肌肌动蛋白（α-SMA）,转化生长因子β1（TGF-β1）,Ⅰ型胶原蛋白（collagen type Ⅰ）,Ⅲ型胶原蛋白（collagen type Ⅲ）,PI3K,P-PI3K,AKT,P-AKT,mTOR和P-mTOR的蛋白水平。结果：LPS模型组大鼠肺组织湿/干重之比高于对照组（P<0.01）。与LPS模型组相比,LPS+川芎嗪（100,200 mg·kg^-1）组大鼠肺组织湿/干重之比降低（P<0.01）。川芎嗪处理可改善LPS模型组大鼠肺组织病变及纤维化。LPS模型组大鼠α-SMA,TGF-β1,collagen type Ⅰ和collagen type Ⅲ表达高于对照组（P<0.01）。与LPS模型组相比,LPS+川芎嗪（50,100,200 mg·kg^-1）组大鼠α-SMA、TGF-β1、collagen type Ⅰ和collagen type Ⅲ表达降低（P<0.01）。与对照组相比,LPS模型组大鼠IL-6、IL-1β、IL-18和TNF-α水平升高（P<0.01）。LPS+川芎嗪（50,100,200 mg·kg^-1）组大鼠IL-6、IL-1β、IL-18和TNF-α水平低于LPS模型组（P<0.01）。LPS模型组大鼠P-PI3K/PI3K,P-AKT/AKT和P-mTOR/mTOR比值高于对照组（P<0.01）。与LPS模型组相比,LPS+川芎嗪（50,100,200 mg·kg^-1）组大鼠P-PI3K/PI3K,P-AKT/AKT和P-mTOR/mTOR比值下降（P<0.01）。结论：川芎嗪可通过抑制PI3K/AKT/mTOR信号通路活化减轻内毒素诱导的急性肺损伤大鼠肺纤维化和炎症反应。     

中药川贝对哮喘模型小鼠气道重塑及TGF-β1/Smad信号通路的影响

目的：观察中药川贝对哮喘模型小鼠气道重塑及转化生长因子-β1（TGF-β1）/Smad信号通路的影响,探讨其治疗哮喘的作用机制。方法：BALB/c小鼠,随机分为正常组、模型组、高剂量组、低剂量组、阳性对照组。除正常组外,其他各组用卵蛋白（OVA）建立小鼠哮喘模型。造模成功后高剂量组和低剂量组分别按18.0 mg·kg^-1和9.0 mg·kg^-1剂量给予中药川贝灌胃;阳性对照组雾化吸入0.5 mg·kg^-1地塞米松;正常组和模型组等量生理盐水灌胃,每天 1次,连续28 d。观察各组小鼠支气管管壁厚度和平滑肌厚度的变化以及支气管肺泡灌洗液（BALF）中嗜酸性粒细胞（EOS）计数的变化;酶联免疫吸附剂测定（ELISA）检测BALF和血清中TGF-β1浓度;蛋白印记分析（Western-blot）检测肺组织TGF-β1、磷酸化Smad2（p-Smad2）、Smad2、磷酸化Smad3（p-Smad3）、Smad3的表达;实时荧光定量PCR（Real Time-PCR）检测肺组织TGF-β1 mRNA、Smad2 mRNA、Smad3 mRNA的表达。结果：模型组小鼠支气管管壁厚度和平滑肌厚度,BALF中EOS计数,BALF和血清中TGF-β1浓度,肺组织TGF-β1、p-Smad2、Smad2、p-Smad3、Smad3的表达,肺组织TGF-β1 mRNA、Smad2 mRNA、Smad3 mRNA的表达均明显高于对照组（P<0.01）,高剂量组,低剂量组和阳性对照组上述指标则明显低于模型组（P<0.05或P<0.01）。结论：中药川贝可改善哮喘模型小鼠气道重塑状态,其机制可能与其抑制TGF-β1/Smad信号通路有关。     

丹参多酚酸盐对肝纤维化小鼠Notch-Hes1信号通路的影响

目的 研究丹参多酚酸盐对四氯化碳（CCl₄）致肝纤维化小鼠的保护作用及其对Notch-Hes1信号通路的影响。方法 50只小鼠按照体质量随机分为正常组、模型组、对照组和低、高剂量实验组,每组10只。模型组、对照组和低、高剂量实验组小鼠腹腔注射40%CCl₄橄榄油溶液3 mL·kg^-1建立肝纤维化模型,然后低、高剂量实验组小鼠分别按26和52 mg·kg^-1的剂量灌胃给予丹参多酚酸盐;对照组小鼠按0.4 mg·kg^-1的剂量灌胃给予秋水仙碱;正常组和模型组灌胃给予等量0.9%NaCl,每天1次,连续28 d。用酶联免疫吸附实验法检测血清谷丙转氨酶（GPT）和谷草转氨酶（GOT）水平,用实时荧光聚合酶链反应法检测肝Notch1、Jagged1和Hes1基因的表达水平。结果 低、高剂量实验组和对照组、模型组、正常组的GPT含量（28.13±6.26）,（27.40±6.25）,（27.23±3.09）,（78.22±12.16）和（27.08±3.40）U·L^-1     

丹参多酚酸盐对肝纤维化小鼠Notch-Hes1信号通路的影响

目的 研究丹参多酚酸盐对四氯化碳（CCl₄）致肝纤维化小鼠的保护作用及其对Notch-Hes1信号通路的影响。方法 50只小鼠按照体质量随机分为正常组、模型组、对照组和低、高剂量实验组,每组10只。模型组、对照组和低、高剂量实验组小鼠腹腔注射40%CCl₄橄榄油溶液3 mL·kg^-1建立肝纤维化模型,然后低、高剂量实验组小鼠分别按26和52 mg·kg^-1的剂量灌胃给予丹参多酚酸盐;对照组小鼠按0.4 mg·kg^-1的剂量灌胃给予秋水仙碱;正常组和模型组灌胃给予等量0.9%NaCl,每天1次,连续28 d。用酶联免疫吸附实验法检测血清谷丙转氨酶（GPT）和谷草转氨酶（GOT）水平,用实时荧光聚合酶链反应法检测肝Notch1、Jagged1和Hes1基因的表达水平。结果 低、高剂量实验组和对照组、模型组、正常组的GPT含量（28.13±6.26）,（27.40±6.25）,（27.23±3.09）,（78.22±12.16）和（27.08±3.40）U·L^-1     

糖肝煎浓缩丸对2型糖尿病合并非酒精性脂肪肝大鼠肝组织PI3K/AKT通路的影响

目的：利用2型糖尿病合并非酒精性脂肪肝模型探讨糖肝煎浓缩丸通过调控胰岛素受体-α（InsR-α）/IRS （胰岛素受体）/PI3K （磷脂酰肌醇3激酶）信号通路,改善2型糖尿病合并非酒精性脂肪肝的机制。方法：选择健康雄性Wistar大鼠进行研究,分为正常组和模型组。采用高脂高糖饲料喂养加腹腔注射30 mg·kg^-1STZ缓冲液的方法建立2型糖尿病合并非酒精性脂肪肝的动物模型。模型符合糖耐量异常的标准后,随机分为模型组,吡格列酮组（1 g·kg^-1·d^-1）,糖肝煎浓缩丸中剂量组（5.6 g·kg^-1·d^-1）和糖肝煎浓缩丸低剂量组（2.8 g·kg^-1·d^-1）。药物干预8周后,生化法检测大鼠空腹血糖、肝糖原含量,ELISA法检测大鼠空腹胰岛素、肝脏GK、G-6-Pase含量,Western-Blot法检测肝脏组织InsR-α、IRS和PI3K的蛋白表达水平,采用HE染色法观察各组大鼠肝脏组织病理切片。结果：与正常组比较,模型组大鼠空腹血糖、空腹胰岛素、GK含量显著性升高,肝糖原、G-6-Pase含量显著性降低,肝脏InsR-α、IRS和PI3-K 3种蛋白的表达含量均显著减低（P<0.01）;与模型组比较,吡格列酮组和糖肝煎浓缩丸组均能显著降低大鼠空腹血糖、空腹胰岛素、GK含量,提高肝糖原、G-6-Pase含量,增加肝脏InsR-α、IRS和PI3-K 3种蛋白的表达含量（P<0.01）;与吡格列酮组相比,糖肝煎浓缩丸中剂量组效果与之无显著差异（P>0.05）。结论：糖肝煎浓缩丸可能是通过调节InsR-α/IRS/PI3K信号通路改善2型糖尿病合并非酒精性脂肪肝大鼠的糖代谢紊乱及肝脏损伤。     

十二味穿甲片原料抗CCl4所致大鼠肝纤维化的实验研究

目的:探讨十二味穿甲片原料对四氯化碳(CCl₄)所致大鼠肝纤维化的保护作用。方法:将雄性SPF级SD 大鼠98只随机分为空白对照组,模型对照组,阳性对照组,中药十二味穿甲片原料4.2,2.8,1.4,0.7 g·kg^-1剂量组。除空白对照组腹腔注射同体积的注射用大豆油外,其余各组均腹腔注射40%的CCl₄大豆油溶液2 mL·kg^-1,每周2次并连续8周建立大鼠肝纤维化模型,造模同时给药进行抗肝纤维化干预,共59 d。通过测定体质量,检测肝功能指标丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)、总蛋白(TP)、白蛋白(ALB),比色法测定肝脏羟脯氨酸(Hyp)含量并进行肝内胶原定量分析,HE染色以观察肝组织病理变化,评价药物的抗纤维化作用。结果:与模型对照组比较,十二味穿甲片原料药粉4.2,2.8 g·kg^-1剂量组大鼠肝脏Hyp和胶原含量显著降低(P<0.05),2.8,0.7 g·kg^-1剂量组大鼠血清ALT、AST含量及1.4 g·kg^-1剂量组血清ALT均显著下降,差异具有显著性意义(P<0.05或P<0.01),而4.2 g·kg^-1剂量组血清ALT、AST和1.4 g·kg^-1剂量组AST含量亦呈下降趋势,但无显著性差异(P>0.05)。2.8 g·kg^-1剂量组大鼠血清ALB和TP呈明显升高趋势,但较模型对照组统计学意义不显著(P>0.05),病理结果显示2.8 g·kg^-1剂量组大鼠肝纤维化改善显著。结论:本实验条件下,十二味穿甲片原料具有抗CCl₄所致大鼠肝纤维化的作用,以2.8 g·kg^-1剂量抗肝纤维化作用最为明显。     

阿司匹林对TGF-β1诱导的心肌成纤维细胞增殖的抑制作用

目的：研究阿司匹林（ASA）对转化生长因子β1（TGF-β1）诱导心肌成纤维细胞（CFs）异常增殖的干预作用并探讨其可能的作用机制。方法：通过组织块法以及差速贴壁法获得并培养CFs，免疫细胞化学法检测波形蛋白的表达用于鉴定CFs，建立TGF-β1诱导CFs增殖模型，实验分为对照组（无血清DMEM）、TGF-β1组（TGF-β1，20 ng·mL^-1）、TGF-β1+ASA组（ASA，0.5、1、2 μmol·L^-1）。MTT法检测ASA对TGF-β1诱导CFs增殖的影响，羟脯氨酸含量试剂盒检测细胞内以及培养液上清中羟脯氨酸的含量，蛋白质免疫印迹法（Western blot）分析Smad2、Smad3蛋白表达的变化。结果：MTT结果显示，与对照组比较，TGF-β1显著诱导CFs增殖，与TGF-β1组相比，ASA可显著抑制TGF-β1诱导的CFs增殖；羟脯氨酸含量检测显示，与对照组比较，TGF-β1组羟脯氨酸含量明显升高，与TGF-β1组相比，ASA可降低其含量；Western blot结果显示，与对照组比较，TGF-β1显著诱导Smad2、Smad3蛋白水平表达升高，与TGF-β1组相比，ASA可显著降低Smad2、Smad3蛋白水平的表达。结论：ASA对TGF-β1诱导的CFs增殖具有显著的抑制作用，其作用机制可能与抑制TGF-β1/Smads信号通路下游蛋白Smad2、Smad3的表达相关。     

基于TGF-β1/Notch信号通路研究杠板归对二甲基亚硝胺诱导大鼠肝纤维化的作用机制

目的：从TGF-β₁/Notch信号通路探讨杠板归对二甲基亚硝胺（DMN）诱导HF大鼠的保护作用机制。方法：按1.6 mL·kg^-1剂量腹腔注射0.5% DMN溶液,每周3次,共42 d建立大鼠肝纤维化（HF）模型。造模同时灌胃秋水仙碱（0.1 g·kg^-1）和杠板归高、中、低（10,5,2.5 g·kg^-1）干预,每天1次,末次给药后,禁食不禁水16 h,眼球取血,收集血清和肝组织。生化法检测血清中ALT和AST活性,Elisa法测定血清中HA、LN、PCⅢ和Ⅳ-C含量;Western-blot法检测肝组织中TGF-β₁、Notch-1、α-SMA和E-cadherin蛋白表达情况;HE染色观察肝组织病理学变化。结果：与模型组相比,杠板归各剂量组大鼠血清中ALT和AST活性显著降低（P<0.05或P<0.01）;高、中剂量组大鼠血清中的PCⅢ、Ⅳ-C、LN和HA含量呈下降趋势（P<0.05或P<0.01）,肝组织中TGF-β₁、Notch-1和α-SMA蛋白表达下降,而E-cadherin蛋白表达升高（P<0.05或P<0.01）;HE染色结果显示,杠板归各剂量组大鼠HF程度得到不同程度改善。结论：杠板归对HF大鼠具有显著的保护作用,其作用机制可能与调控TGF-β₁/Notch信号通路有关。     

德都红花-7味散对四氯化碳所致慢性肝损伤大鼠凋亡蛋白表达的影响

目的 观察德都红花-7味散对四氯化碳（CCl₄）所致肝纤维化大鼠B淋巴细胞瘤-2（Bcl-2）和Bcl-2相关X蛋白（Bax）mRNA表达的影响。方法 将40只SD雄性大鼠按体质量分层随机分为空白组、模型组、对照组和实验组,每组10只。用腹腔注射CCl₄的方法建立肝纤维化模型。空白组和模型组均灌胃给予等量蒸馏水;对照组灌胃给予21.0 mg·kg^-1水飞蓟宾;实验组灌胃给予0.3 g·kg^-1德都红花-7味散。4组大鼠每天给药1次,连续给药7周。用Masson染色法观察肝纤维化的情况,用实时荧光定量聚合酶链反应法检测大鼠肝组织中Bcl-2和Bax mRNA的表达水平。结果 实验组、对照组、模型组和空白组的胶原百分比分别为（7.99±1.71）%,（8.82±2.63）%,（14.84±4.45）%和（0.80±0.29）%,Bcl-2 mRNA表达量分别为0.64±0.13,0.78±0.18,1.07±0.43和0.48±0.16,Bax mRNA表达量分别为0.95±0.10,0.98±0.26...     

苦参碱调控mTOR/p70S6K信号通路对大鼠心肌肥厚的保护作用

目的:研究苦参碱对异丙肾上腺素致大鼠心肌肥厚的保护作用及其对mTOR/p70S6K信号通路的调控。方法:大鼠皮下注射异丙肾上腺素建立慢性病理性心肌肥厚模型,将大鼠随机分为正常对照组、异丙肾上腺素(ISO)模型组、苦参碱(50,100,200 mg·kg^-1·d^-1)+ISO组和单用苦参碱(200 mg·kg^-1·d^-1)组。HE染色观察心肌病理变化;Western blot检测左心室组织中mTOR/p70S6K信号通路相关蛋白的表达。结果:与正常对照组比较,ISO模型组大鼠的心肌细胞肥大、排列紊乱,可见不同程度的纤维化、间质水肿和炎细胞浸润;苦参碱(50,100,200 mg·kg^-1·d^-1)可减轻大鼠心肌细胞肥大、纤维化、间质水肿和炎细胞浸润等ISO致心肌组织病理学结构的异常改变。与正常对照组相比,ISO模型组心肌组织内p-mTOR、p-p70S6K和p70S6K的表达显著增加;苦参碱(50,100,200 mg·kg^-1)可逆转ISO致大鼠心肌组织中p70S6K表达的上调,同时下调mTOR Ser2448和p70S6K Thr389位点的磷酸化水平,且呈剂量依赖性;mTOR表达在各组之间均无差异;单用苦参碱组与正常对照组比较无显著性差异。结论:苦参碱具有抑制ISO致大鼠心肌肥厚的作用,其机制与抑制mTOR/p70S6K信号通路有关。     

注射用右旋兰索拉唑家兔胚胎-胎仔发育毒性比较及伴随毒代与组织分布

目的：研究注射用右旋兰索拉唑对孕兔胚胎-胎仔发育的影响。方法：孕兔于妊娠第6~18天分别给予静脉注射用右旋兰索拉唑3.6,12,36 mg·kg^-1,qd。另设兰索拉唑和左旋兰索拉唑（36 mg·kg^-1）作为消旋和左旋对照,环磷酰胺（10 mg·kg^-1）作为阳性对照,溶媒对照采用氯化钠注射液,第29天处死解剖。观察并记录给药前后孕兔一般症状,处死后,观察母兔生殖状态与胎仔发育情况。于首、末次给药进行伴随毒代采血,解剖时取组织样本,采用LC-MS/MS测定样本内药物浓度。结果：与溶媒对照组相比,右旋兰索拉唑中、高剂量组、消旋、左旋对照组孕兔厌食、体质量下降明显。消旋、左旋和阳性对照组给药后期个别孕兔出现流产。率转换后,右旋高剂量组、消旋、左旋对照组胎仔活胎率显著低于溶媒对照组。胎仔骨骼检查中,右旋高剂量组、消旋和左旋对照组的部分种类骨骼缺失数量,显著高于溶媒对照组。伴随毒代结果可知,右旋兰索拉唑在孕兔体内达峰迅速,代谢较快,未见蓄积。组织分布研究表明右旋兰索拉唑在母体内广泛分布,无特殊脏器亲和,易通过胎盘屏障。结论：右旋高剂量（36 mg·kg^-1）家兔体内表现出一定的母体毒性和胚胎-胚仔发育毒性,右旋中剂量（12 mg·kg^-1）仅表现出母体毒性。     

基于MAPK信号通路研究4-羟基苯并恶唑-2-酮抗肝纤维化的作用机制

目的： 探讨4-羟基苯并恶唑-2-酮（HBOA）对四氯化碳（CCl₄）诱导的大鼠肝纤维化的保护作用。方法： 采用CCl₄橄榄油溶液灌胃建立大鼠肝纤维化模型。第8周确定建模成功后,将雄性SD大鼠随机分成正常对照组,模型对照组,秋水仙碱阳性药组,HBOA高、中、低药物组。从第9周起,相应药物干预4周后,测定血清中总蛋白（TP）,白蛋白（Alb）的含量以及肝组织中羟脯氨酸（Hyp）的含量;免疫组织法检测肝组织中α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）蛋白含量的表达;Westerns blot法检测肝组织中MAPK,P-MAPK,P38的蛋白含量的表达。结果： 与模型组相比,HBOA可降低肝纤维化大鼠血清TP、Alb水平（P<0.01）以及肝组织中Hyp水平（P<0.01）,HBOA高中低剂量组显著降低大鼠肝组织中的α-SMA蛋白的表达（P<0.01）,并显著下调MAPK,P-MAPK,P38的蛋白表达水平（P<0.01）。结论： HBOA对CCl₄诱导的肝纤维化大鼠有一定的改善作用,通过抑制MAPK的信号通路,显著减轻了CCl₄诱导的纤维化。     

头顶一颗珠醇提物对CCl4所致急性肝损伤的影响

目的： 探讨头顶一颗珠（Trillium tschonoskii Maxim.,TTM）对CCl₄诱导的大鼠急性肝损伤的影响。方法： 36只SD大鼠随机抽出6只为正常对照组,余予以腹腔注射5 mL·kg^-1的25% CCl₄花生油溶液进行造模,再随机将注射CCl₄的大鼠分为5组,分别为模型组,联苯双酯组（0.2 g·kg^-1）,头顶一颗珠低、中、高剂量组（0.1,0.5,1.0 g·kg^-1）,各治疗组大鼠予以相应药物灌胃5天后取材,计算各组的肝脏脏器系数,检测血清ALT、AST的活性,观察HE染色及Tunel检测结果,QPCR检测Caspase-3,Bax,Bcl-2 mRNA的表达。结果： 与模型组相比,TTM低、中、高组均能明显降低肝脏脏器系数及血清ALT、AST的活性。HE染色结果表明与模型组相比,TTM各治疗组均可减轻肝损伤。Tunel检测结果显示TTM各治疗组的凋亡细胞较模型组降低。QPCR结果显示TTM各剂量组都可降低Caspase-3、Bax mRNA的表达,增强Bcl-2 mRNA的表达。结论： TTM对CCl₄所致的大鼠急性肝损伤具有保护作用,该作用主要与降低肝细胞凋亡有关。     

熊果酸含药血清对大鼠肾小球系膜细胞增殖及TGF-β1表达的影响

目的：观察熊果酸（ursolic acid,UA）含药血清对体外脂多糖（LPS）刺激下大鼠肾小球系膜细胞（mesangial cells,MCs）增殖与转化生长因子β1（TGF-β1）表达的影响,探讨其保护肾脏的作用机制。方法：体外原代培养并鉴定大鼠肾小球系膜细胞;熊果酸含药血清分为3个剂量干预组,按高剂量（100 mg·kg^-1）、中剂量（50 mg·kg^-1）、低剂量（25 mg·kg^-1）每日1次连续给大鼠灌胃,7 d后取血制备含药血清;正常对照组灌胃同体积生理盐水制备正常血清。系膜细胞用LPS（10 mg·L^-1）诱导后,分别加入正常血清对照或不同剂量熊果酸含药血清培养48 h。采用CCK-8法观察系膜细胞增殖,ELISA法检测细胞分泌TGF-β1水平,RT-PCR测定TGF-β1 mRNA的表达。结果：LPS明显诱导系膜细胞增殖,上调TGF-β1的表达。高、中、低剂量熊果酸含药血清均能抑制LPS刺激下系膜细胞增殖,并在基因水平呈剂量依赖性抑制 TGF-β1 的表达。结论：熊果酸含药血清可抑制炎症状态下系膜细胞增殖,并下调 TGF-β1 的表达,提示熊果酸对肾小球疾病可能发挥保护作用。     

美洲大蠊提取物通过介导Nrf2/HO-1通路抑制氧化应激的抗肝纤维化作用

目的:探究美洲大蠊提取物(PA-B)对四氯化碳(CCl4)诱导的大鼠肝纤维化Nrf2/HO-1通路及氧化应激指标的影响.方法:采用腹腔注射40％ CCl4橄榄油溶液建立大鼠肝纤维化模型,48只大鼠随机分成正常对照组、肝纤维化模型组、秋水仙碱组、PA-B低剂量组、PA-B中剂量组、PA-B高剂量组,每组8只.治疗第4周末...