青蒿素及其衍生物的抗病毒作用机制研究进展

青蒿素提取于传统中药黄花蒿,具有强大的抗疟作用。随着研究的深入,青蒿素及其衍生物还被发现对疱疹病毒科、黄病毒科和冠状病毒科等不同病毒科的多种病毒具有抗病毒作用,并可以抑制病毒诱导的炎症反应。青蒿素及其衍生物抗病毒的可能机制是烷基化宿主核因子κB(NF-κB)p65亚基的DNA结合域、抑制NF-κB p65的质核转运或产生活性氧或激活碳中心自由基调控宿主Keap1/Nrf2/ARE通路以抑制病毒复制,并通过抑制病毒诱导的NF-κB通路、ERK通路激活以减轻炎症反应。通过对青蒿素及其衍生物抗病毒可能的作用机制进行综述,以期为青蒿素抗新发病毒提供参考,促进老药新用。     

隐丹参酮体外抗病毒作用及机制研究

目的 探索隐丹参酮在细胞水平的抗病毒作用,从药物调控宿主抗病毒免疫角度,阐释隐丹参酮抑制病毒复制的分子机制。方法 通过流式细胞术、实时荧光定量PCR（qRT-PCR）、免疫印迹实验（Western blotting）等方法检测隐丹参酮对水疱性口炎病毒（VSV）、甲型流感病毒（H1N1）、脑心肌炎病毒（EMCV）、Ⅰ型单纯疱疹病毒（HSV-1）复制的影响。基于基因集富集分析（GSEA）,结合qRT-PCR、流式细胞术,分析隐丹参酮抗病毒的作用机制。在干扰素受体IFNAR1敲除A549细胞（Ifnar1^-/-A549）中,检测I型干扰素（IFN-I）通路对隐丹参酮抗病毒功能的影响。结果 隐丹参酮显著抑制VSV、H1N1、EMCV和HSV-1病毒的复制,在病毒进入前期和进入后阶段发挥抗病毒作用,对病毒吸附过程无影响;通过GSEA分析结合qRT-PCR验证,证明隐丹参酮促进IFN-I信号通路的激活;在Ifnar1^-/-A549细胞中,隐丹参酮的抗病毒功能受到抑制。结论 隐丹参酮通过促进IFN-I信号通路激活抑制多种病毒复制。     

血红素加氧酶-1的研究进展

血红素加氧酶(heme oxygenase,HO)是一种最广泛存在的抗氧化防御酶,是热休克蛋白家族中的一个成员,可代谢血红素生成CO、胆红素和游离铁.在大多数组织内呈低水平表达,可被多种伤害性刺激包括血红素、高氧、缺氧、热休克、内毒素、过氧化氢、细胞因子、紫外线、重金属和NO等诱导产生高水平的表达.HO-1基因表达的调控主要发生在转录水平.HO-1具有抗炎抗氧化、抗凋亡、抗增生效应,但其保护作用的机制仍不是很清楚.HO-1的产生作为一种对伤害性刺激的适应性和保护性反应,与临床上一些相关疾病密切相关.有关此方面的研究现越来越多并且取得了重大的进展.本文就HO-1的产生、基因调控、功能及其与肺部和其他系统疾病的关联方面的研究现状作一综述.     

血红素氧合酶-1与心肌肥厚

血红素氧合酶-1（heineoxygenase-1，HO-1）是哺乳动物中血红素代谢的限速酶。越来越多的研究发现HO-1及其催化代谢产物通过各种途径在心血管疾病中发挥着抗炎、抗氧化、抗增殖、抑制凋亡、抑制血小板凝集、细胞保护及调节血管张力等许多重要生物学作用。近年来发现HO—1具有抗心肌肥厚的作用，现就HO-1与心肌肥厚的研究进展作一综述。     

塞络通对OGD/R诱导hCMEC/D3细胞抗氧化损伤的作用机制

目的研究塞络通(SLT)对氧糖剥夺复氧(OGD/R)所致人脑微血管内皮细胞(hCMEC/D3)损伤的保护作用及其作用机制。方法建立hCMEC/D3细胞OGD/R模型,实验分5组:对照组、OGD/R模型组、Nrf2抑制剂(BML385)组、SLT组、SLT+BML385组。采用CCK-8法测定各组hCMEC/D3细胞的细胞活性,同时测定细胞超氧化物歧化酶(SOD)活力,细胞还原型谷胱甘肽(GSH)含量及细胞上清液血红素加氧酶(HO-1)含量;Western印迹法检测各组细胞抗氧化蛋白HO-1、Nrf2的表达水平。结果 OGD/R处理后导致h CMEC/D3细胞活性、SOD活力、GSH含量显著下降,HO-1含量增加;SLT处理对细胞活性、SOD活力、GSH及HO-1含量显著增加并上调Nrf2/HO-1信号通路抗氧化蛋白的表达,Nrf2抑制剂干预后减弱SLT对hCMEC/D3细胞的抗氧化保护作用。结论 SLT可作用于Nrf2/HO-1信号通路发挥其对OGD/R诱导hCMEC/D3细胞氧化应激损伤保护作用。     

展枝马尾藻硫酸多糖对呼吸道合胞病毒的抗病毒活性及其机理研究

目的研究从褐藻展枝马尾藻Sargassumpatens中分离到的一种硫酸多糖SP2的抗病毒活性及抗病毒作用机理。方法通过细胞致病效应实验、MTT测定和空斑形成抑制实验对该多糖的抗病毒活性、细胞毒性和可能的抗病毒机理进行测定。结果通过空斑形成抑制实验测定结果显示,该多糖对呼吸道合胞病毒有好的抗病毒活性,其EC50值为1.1但没有抗流感病毒A和B、副流感病毒的活性。多糖的CC50高达3000μg.mL-1。其对呼吸道合胞病毒的抗病毒选择性指数被估计大于2727。用SP2预处理宿主细胞,不显示任何对病毒感染的保护作用。SP2对呼吸道合胞病毒有一定的杀病毒活性,其EC50值超过100μg.mL-1。时间加入实验证明,只有在37℃呼吸道合胞病毒吸附时期加入SP2才能完全抑制病毒的复制。结论SP2可能是一种有潜力的抗呼吸道合胞病毒感染的多糖。其对呼吸道合胞病毒的抗病毒作用机制与抑制病毒的吸附有关。     

褐藻多糖硫酸酯在小鼠N2a细胞缺血再灌注损伤中的作用

目的 观察褐藻多糖硫酸酯(FPS)对氧糖剥夺/复糖复氧(OGD/R)诱导小鼠N2a细胞缺血再灌注损伤中的作用并探讨其可能的分子机制。方法 在细胞水平上,建立小鼠N2a细胞的OGD 2 h后复灌24 h的缺血再灌注损伤模型。实验分为对照组、OGD/R模型组和FPS处理组(1、2、5、10μg/ml)。3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑溴盐(MTT)比色法和乳酸脱氢酶(LDH)释放率试剂盒分别检测各组细胞存活率和死亡率;Western blot检测Nrf2的核转位及其下游靶蛋白血红素加氧酶1(HO-1)的表达情况。结果 与OGD/R模型组比较,不同浓度的FPS均能提高N2a细胞存活率,降低死亡率,且增加Nrf2的核转位及其下游靶蛋白HO-1的表达(P<0.05)。结论 FPS对OGD/R诱导N2a细胞缺血再灌注损伤具有保护作用,其机制可能与激活Nrf2通路有关。     

血红素氧化酶功能和调节及其在肝病发生中的研究进展

血红素氧化酶是血红素降解过程中的一种限速酶,有3种亚型:HO-1、HO-2和HO-3,其中HO-1的研究较多。而HO-1所降解的产物是CO、铁和胆红素,它们具有重要的抗过氧化特性而保护细胞的功能;同时,在细胞内调节HO-1基因表达的信号通路以及HO-1基因启动因子均可诱导HO-1基因的抗过氧化应激能力,这就为因过氧化应激或非应激性所致的HO-1相关肝病的发病和治疗提供了新的方法。     

格尔德霉素衍生物TC-GM的合成及体外抗病毒活性研究

本文以发现新型抗病毒结构化合物为目的,将不同作用机制的抗病毒活性化合物格尔德霉素和拉米夫定化学偶联得到新结构化合物TC-GM。分别采用p24抗原、斑点杂交法以及细胞病变法(CPE)测定了TC-GM对HIV-1、HBV、HSV和CoxB病毒的抑制活性。结果显示,TC-GM具有与格尔德霉素相似的广谱抗病毒特性,对HIV-1、HBV、HSV 1型和2型、CoxB6等病毒的复制均具有抑制作用,并且抗HIV-1和HBV的活性较强。     

抗病毒药物的应用与儿童病毒感染性疾病

感染性疾病仍是儿童的常见病和多发病,病毒是儿童感染最常见的病原,既往认为抗病毒药物不同于抗生素能有效地抑制细菌复制那样抑制病毒,病毒一旦侵入宿主细胞并在其中复制,对正常细胞的损伤将不可避免.     

氧化苦参碱心脏保护作用的研究进展

氧化苦参碱对心脏具有正性肌力、负性频率和负性自律性的作用,因此具有广谱抗心律失常作用。氧化苦参碱对冠脉狭窄缺血、缺血再灌注以及异丙肾上腺素、阿霉素、感染和免疫引起的心肌损伤都有保护作用,并能阻滞心肌肥大和纤维化发生发展。氧化苦参碱心脏保护作用的基本机制是其抗氧化、抗炎和免疫抑制以及抑制盐皮质激素（醛固酮）受体的表达,产生心肌保护作用。即通过激活Nrf2/HO-1信号通路和抑制转化生长因子（TGF）-β1及I型TGF-β1受体的表达,从而抑制下游的JAK/STAT、MAPK/Smad2/3和Notch的信号通路的机制,减少心肌细胞凋亡,减轻心肌损伤和抑制胶原合成,产生抑制心肌肥大和纤维化的作用。     

鼠尾草酸对甲型流感病毒的体外抑制作用研究

鼠尾草酸(carnosic acid, CA)是迷迭香与鼠尾草等植物中主要的酚二萜类活性成分,具有抗氧化、抗炎等作用,但目前未见CA抗流感病毒的相关报道。本研究通过病毒滴度测定方法评价了迷迭香中主要活性成分迷迭香酸、CA和熊果酸的抗流感病毒活性,发现CA在A549细胞中显著抑制流感病毒H5N1增殖,进一步通过间接免疫荧光、Western blot和实时荧光定量PCR等方法对CA的体外抗流感病毒作用进行了系统评价并初步探讨其作用机制。结果表明, CA在A549和MDCK细胞中可显著抑制流感病毒H5N1复制,半数有效浓度(EC₅₀)分别为4.30和3.64μmol·L^-1。同时, CA也抑制流感病毒2009panH1N1(EC₅₀:10.1μmol·L^-1)和H3N2(EC₅₀:12.8μmol·L^-1)在A549细胞中的复制。机制研究发现, CA对H5N1复制的抑制作用与其诱导A549细胞血红素加氧酶-1(HO-1)的表达并减少H5N1感染细胞中活性氧的水平...     

血必净注射液对多种病毒的抑制作用及机制研究

目的 在细胞水平评价血必净注射液（简称血必净）对水疱性口炎病毒（VSV）、甲型流感病毒（H1N1）、Ⅰ型单纯疱疹病毒（HSV-1）等多种病毒复制的影响,并探讨其与免疫系统相关的作用机制。方法 通过CCK-8法检测血必净对A549细胞活力的影响;采用流式细胞术及实时荧光定量PCR（qRT-PCR）技术检测血必净对VSV-eGFP、H1N1、HSV-1复制的影响;利用碘化丙啶（PI）染色检测血必净对病毒引起的细胞死亡的影响;qRT-PCR检测血必净对干扰素（IFN）及干扰素刺激基因（ISGs）mRNA水平的影响,以及其对病毒引起的促炎细胞因子基因表达的影响。结果 血必净以剂量相关方式抑制VSV、H1N1及HSV-1等病毒的复制（P＜0.001）,并显著减少病毒诱发的细胞死亡（P＜0.05）;血必净能有效降低病毒感染诱导的IL1Β、IL6、TNFΑ基因的表达（P＜0.05）,并抑制IFIT1、IFIT2等ISGs的表达（P＜0.05）。结论 血必净能在体外抑制多种病毒的复制,降低病毒诱导的细胞死亡和炎症反应,其抗病毒的机制可能独立于Ⅰ型IFN信号通路。     

大剂量干扰素治疗儿童病毒性脑炎质疑

目前 ,许多医疗机构以大剂量干扰素 (10 0万ＩＵ或以上 ,甚至 3 0 0万ＩＵ)治疗儿童病毒性脑炎 ,我们认为这种治疗方法值得商榷。1　干扰素的作用1 1　抗病毒作用　干扰素具有广谱抗病毒作用 ,可以抑制病毒的复制 ;有利于病毒的最终清除。机制[1 ] :干扰素与人体细胞上的干扰素特异受体系统结合并进入细胞内 ,引起一系列变化 ,使位于人体细胞第 2 1号染色体长臂远端的抗病毒蛋白基因去抑制 ,转录并翻译抗病毒蛋白质 ,如蛋白激酶、2′ -5′Ａ合成酶、磷酸二酯酶等 ,它们分别从降解病毒的ｍＲＮＡ、抑制病毒蛋白质的翻译等方面发挥抗病毒作用…     

黄蓝颗粒体外的抗巨细胞病毒、风疹病毒作用

目的：探讨黄蓝颗粒体外抗巨细胞病毒（HCMV）、风疹病毒（RuV）活性及其作用机制。方法：根据病毒复制周期，设计3种药物抗病毒作用方式来观察黄蓝颗粒对HCMV、RuV的作用。通过观察细胞病变效应（CPE）、噻唑蓝比色法（MTT）检测细胞存活率，以确定该药物体外抗HCMV、RuV的活性。结果：黄蓝颗粒既不能阻断病毒吸附，亦不能直接杀灭病毒，而是通过抑制病毒生物合成发挥抗病毒活性。黄蓝颗粒对HEL细胞的半数毒性浓度（TC50）为1．71g·L^-1，对HCMV半数抑制质量浓度（IC50）为0．09g·L^-1，治疗指数（TI）为19．0；黄蓝颗粒对Vero细胞的TC50为1．96g·L^-1，对RuV的IC50为0．10g·L^-1，TI为19．6。结论：黄蓝颗粒通过抑制病毒生物合成机制发挥抗HCMV、RuV的作用。     

大黄素对胃肠道黏膜损伤保护作用的机制研究进展

大黄素是一种蒽醌衍生物,具有抑菌、抗炎、抗纤维化、保护胃肠道黏膜屏障等功效。大黄素能通过多种作用机制对胃肠道黏膜产生保护作用,具体体现在其可减少缺血后再灌注损伤、抑制炎症的产生、清除或抑制氧自由基、调节胃肠道内分泌、促进损伤后修护、保护细胞间紧密连接等,研发以大黄素为主要成分的新型胃肠道黏膜保护剂,可为胃肠道黏膜损伤性疾病的治疗提供新的治疗手段。     

钝顶螺旋藻多糖抗病毒作用的实验研究

目的探讨钝顶螺旋藻多糖(polysaccharide fromSpirulina platensis,PSP)抗单纯疱疹病毒及乙型肝炎病毒的作用及可能机制,为进一步开发该药提供理论依据。方法以不同剂量的PSP分别作用于HSV-1及HSV-2病毒复制周期的各个环节,以病毒半数感染量(TCID50),细胞病变效应(CPE),蚀斑形成单位(PFU),MTT法作为评价指标,判断PSP的抗病毒效果;ELISA法定量检测PSP对HepG2 2.2.15细胞HbsAg,HBeAg分泌的影响;FQ-PCR检测PSP对HBV-DNA合成的影响。结果PSP对Vero细胞及HepG2 2.2.15细胞毒性极低,对HSV-1及HSV-2均无直接灭活作用,可阻滞HSV-1及HSV-2病毒的吸附并抑制感染细胞内病毒的复制,但不影响病毒的释放。在HepG2 2.2.15细胞培养中PSP可显著抑制HB-sAg、HBeAg的分泌以及HBV-DNA的合成,并具有量效和时效关系。结论PSP抗HSV-1及HSV-2病毒作用的机制与抑制病毒吸附和感染细胞内病毒的生物合成有关,而PSP抗HBV作用的机制则与抑制HBV抗原分泌及病毒DNA复制有关。     

穿心莲内酯对脂多糖诱导RAW264.7细胞炎症反应的抑制作用

目的探讨穿心莲内酯对脂多糖诱导RAW264.7细胞炎症反应的抑制作用及其作用机制。方法采用噻唑蓝比色(MTT)法分析穿心莲内酯对RAW264.7细胞活力的影响。通过脂多糖处理RAW264.7细胞24 h建立细胞炎症模型,造模前1 h用穿心莲内酯2.5、5、10、20μmol/L预处理。荧光定量PCR法检测RAW264.7细胞内相关抗氧化应激酶基因和i NOS水平。穿心莲内酯单独处理RAW264.7细胞24 h,Western blotting法检测Keap1/Nrf2/HO-1信号通路相关蛋白和Keap1、Nrf2、HO-1蛋白水平。免疫荧光检测转录因子Nrf2在胞质及核内的分布情况。结果与对照组比较,穿心莲内酯剂量相关性地抑制RAW264.7细胞活力,差异具有统计学意义(P0.05、0.01、0.001)。穿心莲内酯显著抑制脂多糖诱导RAW264.7细胞的i NOS水平(P0.001),增加相关抗氧化酶基因HO-1、NQO1 m RNA水平。穿心莲内酯抑制Keap1表达,增加Nrf2和HO-1蛋白水平的表达。结论穿心莲内酯可抑制脂多糖诱导的炎症反应,其作用机制可能与激活Keap1/Nrf2/HO-1信号通路从而调控抗氧化酶HO-1、NQO1 m RNA表达水平相关。     

槐定碱抗病毒作用的研究进展

槐定碱(sophoridine, SRI)主要是从豆科槐属植物中提取的喹诺里西啶生物碱，是苦豆子、苦参和白刺花的主要活性成分之一。现代研究发现SRI具有广泛的药理活性，包括抗肿瘤、抗炎、抗心律失常、抗病毒和镇痛等。近年来，SRI的抗病毒作用受到学者们的关注，迄今尚未见其抗病毒作用及机制的详细总结。由此，该文通过查阅和梳理近15年来关于SRI抗病毒的国内外文献报道，对SRI抗柯萨奇病毒、呼吸道合胞病毒、乙型肝炎病毒、肠道病毒71等的抗病毒作用及机制进行归纳和总结，发现SRI对RNA和DNA病毒均具有良好抑制作用，能通过干扰病毒吸附、RNA复制、调节细胞因子及代谢产物发挥作用。同时，对SRI结构类似物的抗病毒机制研究进行了一定总结，提示SRI抗病毒作用的潜在机制尚可能与抑制病毒复制、提高免疫功能、抗氧化及抗炎等路径有关。该综述为SRI抗病毒方面的深入研究及临床应用提供了一定参考。