吴茱萸不同炮制品中吴茱萸碱、吴茱萸次碱、柠檬苦素含量测定

目的:考察不同炮制方法及炮制前后吴茱萸中吴茱萸碱、吴茱萸次碱和柠檬苦素的含量变化情况。方法:采用高效液相色谱法,Hypersil ODS C₁₈（250 mm×4.6 mm,5μm）;流动相:乙腈-水-四氢呋喃-乙酸（41:59:1:0.2）;流速:1.0 ml·min^-1;检测波长:225 nm;柱温:25℃。结果:吴茱萸碱、吴茱萸次碱、柠檬苦素进样量分别在0.156～3.120μg（r=0.999 6,n=6）、0.116～2.320μg（r=1.000 0,n=6）、0.620～12.400μg（r=0.999 1,n=6）范围内与峰面积呈良好线性关系,平均回收率分别为97.2%（RSD=1.33%）、97.1%（RSD=1.56%）、97.3%（RSD=1.52%）。结论:不同炮制方法吴茱萸碱、吴茱萸次碱、柠檬苦素含量不同,砂烫法优于其他炮制方法。     

HPLC法测定吴茱萸超微速溶饮片中吴茱萸碱、吴茱萸次碱及柠檬苦素的含量

目的建立一种同步测定吴茱萸超微速溶饮片中吴茱萸碱,吴茱萸次碱及柠檬苦素含量的高效液相色谱方法。方法采用Hypersil ODS2C18柱(4.6mm×250mm,5μm),岛津LC-20AD高效液相色谱仪,流动相为乙腈-水-四氢呋喃-冰醋酸(34:64.7:1.1:0.2),流速:1.0mL/min,检测波长:225nm,柱温:30℃。结果吴茱萸碱、吴茱萸次碱、柠檬苦素进样量分别在0.1016～2.032μg(r2=0.9999,n=6)、0.0974～1.948μg(r2=0.9999,n=6)、0.7010～14.02μg(r2=0.9999,n=6)范围内与峰面积呈良好线性关系,平均回收率分别为100.37%(RSD=1.29%,n=6)、99.11%(RSD=0.83%,n=6)、99.30%(RSD=0.52%,n=6)。结论该测定方法简便,测定结果准确,重复性好,可作为质量控制方法。     

正交试验法优选吴茱萸醇提工艺

目的 优选吴茱萸的乙醇提取工艺。方法 以柠檬苦素、吴茱萸碱和吴茱萸次碱为评价指标,采用正交试验法,对乙醇浓度、乙醇用量、提取时间和回流次数进行优选。结果 吴茱萸最佳乙醇提工艺为,药材以12倍量70%乙醇回流提取2次,每次3 h。结论 优选的吴茱萸醇提工艺合理可行,可为实际生产提供参考。     

HPLC法同时测定吴茱萸中吴茱萸碱、吴茱萸次碱与吴茱萸内酯的含量

目的:建立同时测定吴茱萸中吴茱萸碱、吴茱萸次碱与吴茱萸内酯含量的方法。方法:采用高效液相色谱法。色谱柱为迪马C1(8200mm×4.6mm,5μm),流动相为乙腈-0.04%庚烷磺酸钠溶液(48:52,V/V),流速为1.0mL·min-1,检测波长为225nm,柱温为35℃。结果:吴茱萸碱、吴茱萸次碱、吴茱萸内酯的进样浓度分别在5.38～53.80、5.02～50.20、10.30～103.00μg·mL-(1r均为0.9999)范围内与各自峰面积积分值呈良好线性关系;三者平均加样回收率分别为99.75%、97.66%、85.68%,RSD分别为0.67%、1.16%、1.54%(n=6)。结论:本方法简便、可行、重复性好,可用于吴茱萸中吴茱萸碱和吴茱萸次碱的含量测定;但吴茱萸内酯的回收率较低,需进一步改进其测定方法。     

HPLC方法测定华佗再造丸中阿魏酸、吴茱萸内酯、吴茱萸碱和吴茱萸内碱的研究

目的 建立HPLC法测定华佗再造丸中阿魏酸、吴茱萸内酯、吴茱萸碱及吴茱萸次碱的含量.方法 采用Waters SunFire C18（4.6mm×250mm,5μm）色谱柱,以乙腈-0.1%磷酸进行梯度洗脱,流速1.0mL·min-1,阿魏酸检测波长为323nm,吴茱萸内酯、吴茱萸碱检测波长为225nm,吴茱萸次碱检测波长为343nm,柱温30℃.结果 表明阿魏酸、吴茱萸内酯、吴茱萸碱和吴茱萸次碱分别在3.91～39.10μg·mL-1（r=1.0000）、10.70～64.20μg·mL-1（r=0.9998）、7.60～76.00μg·mL-1（r=0.9999）、3.65～36.50μg·mL-1（r=0.9999）范围内与峰面积呈良好的线性关系;平均回收率（n=6）分别为96.6%（RSD=1.0%）、98.1%（RSD=2.2%）、100.3%（RSD=0.8%）、95.3%（RSD=1.2%）.结论 本文方法简便准确,可用于华佗再造丸中阿魏酸、吴茱萸内酯、吴茱萸碱及吴茱萸次碱的含量测定.     

高效液相色谱法测定小儿腹泻凝胶膏中吴茱萸碱及吴茱萸次碱含量

目的建立测定小儿腹泻凝胶膏中吴茱萸碱及吴茱萸次碱含量的高效液相色谱(HPLC)法。方法小儿腹泻凝胶膏中加入80%乙醇超声提取吴茱萸碱及吴茱萸次碱,采用HPLC法,色谱柱为Cosmosil 5 C18-MS-Ⅱ柱(250 mm×4.6 mm,5μm),乙腈-水(51∶49)为流动相,流速为1.0 mL/min,检测波长为225 nm,进样量为10μL。结果吴茱萸碱和吴茱萸次碱进样量分别在0.089～0.89μg和0.077～0.768μg范围内与峰面积呈良好线性关系,吴茱萸碱和吴茱萸次碱的平均回收率为97.80%和99.87%,RSD为0.88%和1.27%。结论该方法简单、准确、重现性好,可用于小儿腹泻凝胶膏中吴茱萸碱及吴茱萸次碱的含量测定。     

超临界流体萃取吴茱萸中吴茱萸碱和吴茱萸次碱

目的研究超临界流体萃取(SFE)吴茱萸中吴茱萸碱和吴茱萸次碱的提取工艺,并用高效液相色谱法(HPLC)测定吴茱萸碱和吴茱萸次碱的含量.方法采用95%乙醇作夹带剂,运用超临界流体的萃取工艺,含量测定时,在Water-C18柱上,以乙腈-水(43∶57)为流动相,流速1.0 mL*min-1,检测波长290 nm,柱温40℃.结果吴茱萸碱和吴茱萸次碱的标准曲线在0.024～0.120 μg(r=0.9994)和0.026～0.130 μg(r=0.9995)之间有较好的线性关系;加样平均回收率分别为102.7%(RSD=1.58)和101.7%(RSD=1.79%). 结论采用SFE萃取吴茱萸中吴茱萸碱和吴茱萸次碱的提取工艺速度快,HPLC法测定吴茱萸碱和吴茱萸次碱的含量精确,重现性好.     

HPLC法测定超微戊己丸中吴茱萸碱和吴茱萸次碱含量

目的：建立超微戊己丸中吴茱萸碱和吴茱萸次碱的含量测定方法。方法采用Kromasail C18色谱柱（250mm×4.6mm,5μm）,流动相为流速1.0mL/min的乙腈-乙腈10%（50：50）,测定波长为225nm。结果吴茱萸碱和吴茱萸次碱理论板数分别为2681和2067,Y吴茱萸碱=1.965×10^-7X ＋0.07646,r=0.9999）, Y吴茱萸次碱=3.658×10^-7X-0.2199,r=0.9999）,吴茱萸碱与吴茱萸次碱的线性区间分别为10.2～51.0μg/mL以及10.0～50.0μg/mL ,两者平均回收率分别为97.3%和101.4%,其相对标准偏差分别为3.2%和3.9%,最低检测限为0.05μg/mL和0.1μg/mL。结论使用高效液相色谱法对超微戊己丸当中的吴茱萸碱以及吴茱萸次碱含量进行检测的精确率较高,重现性好。     

34种吴茱萸中吴茱萸碱和吴茱萸次碱的含量测定

建立了吴茱萸中吴茱萸碱和吴茱萸次碱的反相高效液相色谱法 ,并用该法测定了 34种不同产地及不同炮制方法吴茱萸中吴茱萸碱和吴茱萸次碱的含量 .采用峰面积内标法定量 .吴茱萸碱和吴茱萸次碱在 0 5～ 2 0g/mL范围内均呈线性 ,相关系数分别为 0 9999、0 9998,平均回收率分别为 96 6 %、96 0 %     

吴茱萸化学成分研究

目的 研究吴茱萸的活性成分。方法用硅胶色谱技术和重结晶等方法分离化学成分，用IR、NMR和MS等波谱方法确定其结构。结果获得4个化合物，分别鉴定为吴茱萸碱(Ⅰ)、吴茱萸次碱(Ⅱ)、吴茱萸内酯(Ⅲ)和羟基吴茱萸碱(Ⅳ)。结论 首次系统归属吴茱萸碱和吴茱萸次碱的波谱数据。     

中药成分吴茱萸次碱及柠檬苦素可引起的药物相互作用

目的:掌握中药所含成分对临床安全用药的影响。方法:以中国药典2005年版中收载的成药处方中是否含有吴茱萸次碱及柠檬苦素2种化学成分的中药为条件,对药典收载的成药进行归纳。结果:药典收载含吴茱萸次碱及柠檬苦素2种化学成分的常用中药吴茱萸、黄柏、陈皮、青皮、枳实、枳壳和橘核等7种中药的口服成药123种,约占药典成方和单味制剂目录中收载口服制剂总量28%(123∶440)。结论:临床中使用(特别是长期使用)含有吴茱萸次碱及柠檬苦素两种化学成分的中药与CYP3A4底物药物(特别是治疗窗浓度较窄的药物)联合使用时,应加以考虑引起药物代谢性相互作用的可能性。     

提取物纯度对吴茱萸碱和吴茱萸次碱溶解度与表观分配系数的影响

分别采用平衡法和摇瓶法测定高、中、低纯度(71.0%,49.2%和25.4)吴茱萸提取物中吴茱萸碱和吴茱萸次碱的溶解度及表观分配系数,采用HPLC法测定两者的浓度.高中低纯度吴茱提取物中吴茱萸碱和吴茱萸次碱均在PEG-400中溶解度最高,分别为8～14mg/ml和13～19mg/ml:异丙醇中的溶解度最低(均小于7mg/ml).吴茱萸碱和吴茱萸次碱在介质中的溶解度依次为PEG-400＞Tween-80＞RH-40＞MCT>无水乙醉=1,2-丙二醇=1,3-丁二醇=异丙醇.两者的表观分配系数的对数值(1gp)为0.6～1.2.吴茱萸提取物纯度越高,吴茱萸碱和吴茱萸次碱的溶解度越低:纯度与表观分配系数无相关性.pH对溶解度和表观分配系数均无明显影响.     

高效液相色谱法测定吴茱萸药材及其制剂中吴茱萸碱和吴茱萸次碱的含量

报道了用高效液相色谱法测定吴茱萸汤颗粒剂及吴茱萸药材中吴茱萸碱和吴茱萸次碱的含量。采用ＯＤＳ柱，以乙腈—水（４３５７）为流动相，于２９０ｎｍ处检测。吴茱萸汤颗粒剂中吴茱萸碱和吴茱萸次碱的回收率分别为１０１．５％、９７．０％；ＲＳＤ分别为１．２４％、２．１３％。     

反相高效液相色谱法测定吴茱萸中吴茱萸碱和吴茱萸次碱含量

目的建立测定吴茱萸中吴茱萸碱及吴茱萸次碱含量的反相高效液相色谱法。方法采用Boston Symmetrix ODS-R C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为乙腈-0.04%辛烷磺酸钠溶液(50∶50),流速为1 mL/min,检测波长为225 nm。结果该法准确可靠,重现性好。结论反相高效液相色谱法可以同时测定吴茱萸中吴茱萸碱及吴茱萸次碱的含量。     

不同生产工艺的戊己丸中吴茱萸碱和吴茱萸次碱含质量比较

目的:建立戊己丸中吴茱萸碱和吴茱萸次碱含质量的高效液相(HPLC)测定方法,并对超微戊己丸和常规戊己丸中吴茱萸碱和吴茱萸次碱的含质量进行比较。方法:采用色谱柱HypersilC18柱(4.6mm×250mm,5μm),流动相:乙腈水(48∶52),流速:1mL/min,检测波长:225nm。结果:吴茱萸碱和吴茱萸次碱的理论塔板数均大于3000,吴茱萸碱回归方程:A吴茱萸碱=107.73ρ-14.331,r=0.9999,线性范围1.02～20.4μg/mL;吴茱萸次碱回归方程:A吴茱萸次碱=15.596ρ-45.09,r=0.9998,线性范围4.4～176μg/mL。超微戊己丸中吴茱萸碱平均回收率为:99.61%,RSD为0.50%,质量分数为(0.096±0.0148)%;吴茱萸次碱平均回收率为94.85%,RSD为1.00%,质量分数为(0.343±0.0467)%。常规戊己丸中吴茱萸碱平均回收率为98.56%,RSD为1.70%,质量分数为(0.81±0.003)%;吴茱萸次碱平均回收率为99.55%,RSD为0.50%,质量分数为(0.161±0.0075)%。结论:超微戊己丸中吴茱萸碱和吴茱萸次碱的质量分数高于常规戊己丸。     

吴茱萸中4种单体成分致肾细胞毒性的初步研究

目的探讨吴茱萸中成分吴茱萸碱、吴茱萸次碱、吴茱萸内酯和辛弗林在体外对人胚肾细胞(HEK-293)的影响。方法采用MTT法检测吴茱萸碱、吴茱萸次碱、吴茱萸内酯和辛弗林对肾细胞活力的影响;给药后检测肾细胞培养上清液中的功能性指标乳酸脱氢酶(LDH)含量;采用倒置相差显微镜对给药后的细胞形态进行观察。结果 MTT法显示,8.3～33.2 g.mL-1的吴茱萸碱、5～40 g.mL-1的吴茱萸次碱和50～200 g.mL-1的吴茱萸内酯对HEK-293细胞活力有明显的抑制作用(P<0.01 or 0.05),辛弗林对肾细胞活力无明显影响。4.15～33.2 g.mL-1的吴茱萸碱、5～20 g.mL-1的吴茱萸次碱和50～200 g.mL-1的吴茱萸内酯能显著升高肾细胞上清液中的LDH(P<0.01),给予辛弗林后LDH无变化。给予4.15～33.2 g.mL-1的吴茱萸碱和100～200 g.mL-1的吴茱萸内酯后,肾细胞均不同程度的皱缩、减少、甚至死亡,吴茱萸次碱和辛弗林对肾细胞形态无明显影响。结论吴茱萸碱、吴茱萸次碱和吴茱萸内酯对肾细胞均有毒性作用,而辛弗林对肾细胞无毒性作用。     

吴茱萸化学成分研究

目的研究吴茱萸Evodia rutaecarpa ［Juss.］ Benth.的化学成分。方法采用溶剂法、硅胶柱色谱和重结晶等方法进行分离纯化，根据化合物的理化性质和光谱数据鉴定结构。结果从吴茱萸中分离得到14个化合物。鉴定出其中的10个化合物，分别为吴茱萸宁碱(evodianinine, 1)、吴茱萸次碱(rutaecarpine, 2)、 吴茱萸碱(evodiamine, 3)、吴茱萸酰胺I(wuchuyuamide I, 4)、羟基吴茱萸碱(hydroxyevodiamine, 5)、柠檬苦味素(limonin, 6)、胡萝卜苷(daucosterol, 7)、三十碳酸(triacontanoic acid, 8)、二十九烷(nonacosane, 9)和β-谷甾醇(β-sitosterol, 10)。结论通过UV，IR，ESI-MS，HREIMS，¹HNMR，¹³CNMR，HMQC，HMBC和NOESY分析，鉴定化合物1是新化合物，命名为吴茱萸宁碱。     

市售制吴茱萸中甘草汁成分质量标准研究

目的探讨市售制吴茱萸中甘草汁成分的质量标准。方法用甘草药材与吴茱萸药材自行炮制制吴茱萸,采用高效液相色谱梯度洗脱法检测并比较自行炮制吴茱萸与市售吴茱萸中甘草汁成分含量。结果自行购买吴茱萸与甘草中特征性成分吴茱萸碱、吴茱萸次碱、柠檬苦素及甘草苷、甘草酸符合2015年版《中国药典(一部)》要求,且其中甘草汁成分相近,均符合2015年版《中国药典(一部)》要求。结论通过试验可掌握市售吴茱萸甘草汁炮制品中甘草苷、甘草酸含量情况。应以2015年版《中国药典(一部)》对制吴茱萸的各项规定为基础,明确规定制吴茱萸的制法、检查、浸出物、含量测定,为制订甘草汁制吴茱萸更完善的质量标准提供参考。     

艾附暖宫胶囊中吴茱萸次碱含量测定的研究

目的采用高效液相色谱法,建立吴茱萸次碱的含量测定方法。方法选择合适的固定相,调整流动相组成、配比、流速以及柱温,在最大吸收波长下测定,使指标峰分离完全,理论塔板数符合要求。配制系列浓度的对照品溶液,以色谱峰的峰面积为纵坐标,以进样浓度为横坐标,进行线性回归,得回归曲线并考察线性范围。分别考察测定方法的精密度、重现性、稳定性和加样回收率。取3批样品分别测定指标成分的含量。结果吴茱萸次碱色谱条件为:Thermo(200 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,流动相:0.04%辛烷磺酸钠-乙腈(45∶55),流速0.8 mL.min 1,柱温25℃,检测波长345 nm。吴茱萸次碱在8.52~85.2μg.mL 1范围内线性关系良好,r为0.999 8。该方法精密度、中间精密度、耐用性、重复性、在12 h内稳定性和加样回收率的RSD分别为0.37%、0.87%、1.02%、1.34%、1.24%、0.41%,加样回收率为99.6%,样品中吴茱萸次碱含量不低于0.067 mg.粒1。结论以公认的有效成分作为含量测定指标,采用高效液相色谱法进行检测,准确度高,专属性强,重复性好,能有效控制制剂质量。     

HPLC法同时测定不同配伍比例黄连-吴茱萸药对中4种有效成分的含量

目的:建立同时测定黄连-吴茱萸药对中4种有效成分含量的方法,探讨该药对的合理比例。方法:采用高效液相色谱法。色谱柱为Welch XB C_(18),流动相为乙睛-1.5 mmol/L十二烷基硫酸钠溶液(磷酸调p H至5.0)(梯度洗脱),流速为1.0 mL/min,检测波长为265 nm,柱温为30℃,进样量为10μL。结果:盐酸小檗碱、盐酸巴马汀、吴茱萸碱、吴茱萸次碱检测质量浓度线性范围分别为2.24～44.80μg/m L(r=0.999 9)、1.26～31.50μg/mL(r=0.999 8)、2.70～81.00μg/mL(r=0.999 8)、1.65～49.50μg/mL(r=0.999 9);精密度、稳定性、重复性试验的RSD<3.0%;加样回收率分别为98.11%～100.73%(RSD=1.04%,n=6)、96.54%～103.47%(RSD=1.86%,n=6)、95.49%～102.36%(RSD=2.05%,n=6)、97.19%～103.24%(RSD=2.19%,n=6)。当黄连-吴茱萸比例(m/m)为2∶1时,各成分综合含量最高。结论:该方法操作简便,精密度、稳定性、重复性好,可用于不同配伍比例黄连-吴茱萸药对中4种有效成分含量的同时测定;该药对中黄连-吴茱萸比例(m/m)为2∶1较合理。