西兰花中葡萄糖异硫氰酸盐诱导肿瘤细胞凋亡作用及机理研究

目的：探讨西兰花中葡萄糖异硫氰酸盐体内、体外抗肿瘤作用，并初步探讨作用机理。结果：在体内研究中，实验以S180和H22小鼠为研究对象。实验结果表明，GS对S180／小鼠具有抑瘤作用，其中，以中、高剂量组效果最好，与阴性对照组相比具有显著性差异（P〈0.01），抑瘤率呈现一定量效关系（45.45％、57.58％、63.64％）；在生存时间方面，GS能延长H22小鼠的生存时间，其中以高剂量的生存时间延长显著（P〈0．05）。GS还能升高S180小鼠胸腺指数和脾指数，与阴性组比较有显著性差异（P〈0．05，P〈0.01），说明GS对荷瘤小鼠两大免疫器官具有良好的保护作用。在体内抗肿瘤研究中。GS可提高S180和H22小鼠红细胞中SOD、CAT和全血中GSH的活性，并降低全血中红细胞MDA含量。GS的抗肿瘤作用可能是通过提高SOD、CAT、GSH活性，和降低自由基水平来实现的。在体外研究中GS对SGC-7901和HepG2细胞的凋亡过程及其可能机理。从SRB实验结果可看出，1、10、100和1000μg／mL的GS作用于SGC-7901和HepG2细胞72h后，均可抑制肿瘤细胞的增殖，采用荧光倒置显微镜观察GS作用于SGC-7901和HepG2细胞18h后，细胞均出现早期凋亡细胞的形态；通过流式细胞仪检测得300、600、1200μg／mL的GS作用于SGC-7901和HepG2细胞18h后，SGC-7901细胞凋亡率分别为14．544％、10．110％、34．117％，对细胞周期作用显著；HepG2细胞凋亡率分别为2．159％、16．538％和54．455％。可见GS具有一定程度诱导肿瘤细胞凋亡的作用。在GS诱导肿瘤细胞凋亡机理实验中，300、600、1200％μg／mL的GS作用于SGC-7901和HepG2细胞18h后，肿瘤细胞内的Ca^2＋。浓度剂量升高，此作用可能是GS诱导肿瘤细胞凋亡的作用机理之一。线粒体是细胞凋亡的调控中心。所以，通过流式细胞仪检测300、600、1200μg／mL的GS作用于SGC-7901和HepG2细胞18h后，肿瘤细胞内活性氧均增加，线粒体跨膜电位均降低。GS诱导肿瘤细胞凋亡可能是Ca^2＋、活性氧和线粒体之间相互作用的结果，这也许是GS诱导肿瘤细胞凋亡的机理之一。结论：GS无论在体内还是在体外研究中均表现出良好的肿瘤抑制作用，具有一定的诱导肿瘤细胞凋亡的作用。     

艾迪冻干粉抗肿瘤作用的实验研究

目的 研究艾迪冻干粉的抗癌活性，为临床应用提供实验依据。方法应用小鼠S180、H22肿瘤体内抗肿瘤试验和体外MTT法检测艾迪冻干粉对S180、H22、HepG2等3种不同来源肿瘤细胞的生长抑制作用；采用Hoechst 33342/PI双染法检测药物对人肝癌细胞株HepG2诱导凋亡的作用。结果艾迪冻干粉可以通过直接的细胞毒作用和诱导细胞凋亡对小鼠肿瘤细胞S180、H22 和人肝癌细胞HepG2 起到生长抑制作用；MTT法研究结果表明，该药物对S180、H22、HepG2细胞的半数抑制浓度(IC50)分别为(0.521±0.272)，(0.801±0.333)，(0.588±0.376) mg·mL^-1。结论艾迪冻干粉具有抗肿瘤作用，可能成为临床治疗癌症的有效药物。     

长叶胡颓子体外抑制肿瘤细胞增殖的研究

目的研究长叶胡颓子乙醇提取物、三萜酸部位、熊果酸对4株肿瘤细胞增殖的体外抑制作用以及熊果酸抗肿瘤作用机制。方法采用MTT法测定长叶胡颓子乙醇提取物、三萜酸部位和熊果酸在25、50、100、200μg/mL时对人胃癌细胞SGC-7901、BGC-823、肠癌细胞LOVO、HCT-8实体瘤细胞增殖的体外抑制作用;并在上述药物剂量下,观察熊果酸作用72 h后对SGC-7901细胞形态的影响,以及作用24 h后对SGC-7901细胞凋亡的诱导作用。结果长叶胡颓子乙醇提取物、三萜酸部位、熊果酸对4株肿瘤细胞的增殖具有较强的体外抑制作用,其中对于胃癌细胞的抑制作用为熊果酸>三萜酸部位>乙醇提取物;对肠癌细胞的抑制作用为三萜酸部位>熊果酸>乙醇提取物,同时熊果酸能显著改变SGC-7901细胞的形态,并且SGC-7901细胞的凋亡率与熊果酸的剂量呈相关性。结论三萜酸是长叶胡颓子发挥体外抗肠癌细胞增殖作用的主要有效部位;熊果酸是其发挥体外抗胃癌细胞增殖作用的主要活性成分,熊果酸抑制胃癌细胞增殖机制为诱导细胞凋亡,为开发新的抗癌药物提供参考。     

羧甲基壳聚糖抗肿瘤及免疫增强活性研究

目的:评价羧甲基壳聚糖抗肿瘤和免疫增强活性。方法:MTT法研究羧甲基壳聚糖体外活性,S180实体瘤模型用于评价羧甲基壳聚糖体内抗肿瘤活性,流式细胞术分析肿瘤细胞的周期变化和细胞凋亡,ELISA法测定羧甲基壳聚糖对免疫功能的调节。结果:羧甲基壳聚糖抑制肿瘤细胞增殖,IC_(50)为30μg/mL,肿瘤抑制率为27.9%～43.6%。用药后细胞周期阻滞在G_1期,肿瘤细胞凋亡明显增加。体内具有明显的抑瘤和免疫增强作用。结论:羧甲基壳聚糖可以通过直接杀伤肿瘤细胞和增强免疫而发挥抗肿瘤效应。     

异紫堇二酮体内外抗肿瘤活性研究

目的异紫堇二酮的体内外抗肿瘤活性及其作用机制的初步研究。方法通过异紫堇二酮对体外培养肿瘤细胞的生长抑制,体内荷S180瘤和荷H22瘤昆明种小鼠的肿瘤生长抑制、体重以及对小鼠免疫器官的影响(脾脏指数、胸腺指数),对其抗肿瘤活性进行综合评价,并通过流式细胞术检测异紫堇二酮作用下肺腺癌细胞(A549)的细胞凋亡及周期分布情况,初步探讨该化合物的抗肿瘤作用机制。结果异紫堇二酮对9种所选肿瘤细胞具有一定的生长抑制作用,IC50值在1.452×104～2.460×104 mol.L-1之间;流式细胞术检测结果显示异紫堇二酮可诱导A549细胞凋亡,使A549细胞阻滞于G0/G1期并随作用时间延长出现明显的凋亡峰;剂量为100和200 mg.kg-1.d-1时,异紫堇二酮对荷S180瘤和荷H22瘤小鼠的抑瘤率均大于40%,但剂量在200 mg.kg-1.d-1时,荷瘤小鼠的胸腺指数与脾脏指数相比较生理盐水组均有明显降低。结论异紫堇二酮具有一定的抗肿瘤活性,其主要是阻断肿瘤细胞由G0/G1期向S期转变来诱导肿瘤细胞死亡。     

参麦注射液的抗肿瘤作用研究

目的 研究参麦注射液体内外抗肿瘤作用.方法 以小鼠肉瘤S180、肝癌H22、Lewis肺癌实体瘤模型考察参麦注射液的体内抑瘤作用;通过MTT法考察参麦注射液体外对人宫颈癌HeLa细胞和人肝癌HepG 2细胞的增殖抑制作用.结果 参麦注射液在体内对小鼠肉瘤S180、肝癌H22、Lewis肺癌均有显著的抑制作用,且呈剂量相关性,中、高剂量抑瘤率可达35％以上;体外对人宫颈癌HeLa细胞和人肝癌HepG 2细胞亦有增殖抑制作用,且呈浓度-时间相关性,48 h的IC50值分别为0.36、0.72 g/mL,72h的IC50值分别为0.21、0.29 g/mL.结论 参麦注射液体内外均有显著的抗肿瘤活性.     

化积方胶囊抗肿瘤活性研究

目的:研究化积方胶囊体内外抗肿瘤活性方法:采用MTr法观察化积方对S180细胞生长抑制情况;鼠肝癌H22细胞株接种小鼠体内观察化积方对肿瘤抑制率和对小鼠的体质量抑制率;流式细胞仪定量检测其细胞周期和凋亡发生率的影响.结果:10,100,500 μg· ml-1化积方对小鼠S180肿瘤细胞的增殖抑制率(％)分别为23.44,40.35,48.79(P＜0.05),小鼠S180细胞的半数抑制浓度(IC50)为(0.554±0.027)mg·ml-1;5,15,45 mg·kg-1·d-1化积方均对H22细胞产生了抑制作用,抑制作用(％)分别为26.94,48.34,68.27 (P＜ 0.05).10,100,500μg· ml-1的化积方给药组的细胞凋亡率分别为5.77％,12.03％和15.48％,均明显高于阴性对照组,两组差异有统计学意义(P＜0.05).结论:化积方胶囊具有抗肿瘤作用,这一作用可能与促进肿瘤细胞凋亡有密切联系.     

丹酚酸C诱导肝癌HepG2细胞有丝分裂阻滞及凋亡的研究

目的研究丹酚酸C(salvianolic acid C,SalC)的体外抗肿瘤细胞增殖作用及其分子机制。方法 MTT法检测Sal C对人肿瘤细胞的增殖抑制作用,流式细胞术检测细胞周期分布及细胞凋亡,Giemsa染色进行细胞有丝分裂的形态学观察,微管蛋白聚合实验检测Sal C对微管蛋白聚合活性的影响,比色法检测细胞中Caspase-3和Caspase-6的活性。结果丹酚酸C能抑制多种人肿瘤细胞增殖,其中对HepG2细胞的抑制作用较明显。流式细胞术分析发现Sal C使HepG2细胞阻滞于G2/M期并随作用时间延长出现明显的凋亡峰,细胞中Caspase-3和Caspase-6的活性升高。Gi-emsa染色提示HepG2细胞发生有丝分裂阻滞。Sal C能明显抑制微管蛋白的聚合。结论 Sal C具有抗肿瘤细胞增殖活性,通过抑制微管蛋白聚合诱导细胞有丝分裂阻滞从而诱导凋亡。     

熊果酸抑制骨肉瘤细胞的生物学功能

目的检测熊果酸对骨肉瘤细胞生长转移的影响。方法将不同浓度熊果酸分别作用于人骨肉瘤细胞系U2OS细胞,MTT实验检测细胞增殖情况,Hochest 33258染色检测细胞凋亡情况,Transwell实验检测细胞转移情况。利用Western blot方法检测熊果酸对相关蛋白的作用。结果 10、20、30μg/mL熊果酸处理U2OS细胞24 h后,对其增殖的抑制率分别为39.51%±0.75%、48.91%±3.64%、56.49%±1.54%。熊果酸通过抑制cyclin d1蛋白抑制U2OS细胞的增殖,通过调节bcl-2和bax蛋白促进U2OS细胞的凋亡。Transwell实验发现,熊果酸可以剂量依赖的方式抑制U2OS细胞的迁移,其抑制作用是通过其对MMP2蛋白的抑制实现的。结论熊果酸可以抑制骨肉瘤细胞系U2OS细胞的增殖与转移,可以作为临床骨肉瘤治疗的潜在化疗药物进行进一步探索。     

无蹼壁虎抗肿瘤活性成分对HepG2细胞增殖、迁移及凋亡的影响

目的观察无蹼壁虎抗肿瘤活性成分(Gekko Swinhonisanti-neoplasm active component,GSAAC)对人肝癌HepG2细胞增殖、迁移及凋亡的影响。方法 GSAAC与体外培养的人肝癌HepG2细胞共培养,分别以MTT法和Transwell小室检测其对细胞增殖及迁移、侵袭的影响;免疫组化法检测PCNA的表达;Hochest33342荧光染色法、TUNEL法观察GSAAC对HepG2细胞的作用;流式细胞术检测细胞周期及早期凋亡率。结果 GSAAC(25～400 mg.L-1)可明显抑制HepG2细胞的增殖、迁移和侵袭能力,呈浓度依赖性;Ho-chest33342、TUNEL染色及流式细胞术结果显示,GSAAC可诱导细胞发生早期凋亡,阻滞HepG2细胞从S期进入G2期。结论 GSAAC可能通过影响细胞周期进而抑制HepG2细胞增殖和迁移并诱导细胞发生凋亡,进而实现抑制肿瘤的作用。     

杨梅素诱导人肝癌HepG2凋亡机制研究

目的对杨梅素诱导人肝癌HepG2细胞凋亡机制进行研究。方法采用MTT法测定细胞死亡率;采用倒置显微镜观察细胞形态学变化;用琼脂糖电泳观察DNA片段化。用Western印迹法分析相关蛋白的变化。结果杨梅素明显抑制HepG2细胞的增殖,诱导HepG2细胞调亡。Caspase-3,caspase-9抑制剂可明显抑制100μg/ml杨梅素诱导的凋亡。Western印迹结果显示100μg／ml杨梅素作用于细胞后,细胞色素c水平明显升高。结论杨梅素（100μg／ml）通过激活线粒体途径诱导HepG2细胞凋亡。     

骆驼蓬总碱体外抗肿瘤实验研究

目的研究骆驼蓬总碱对体外培养肿瘤细胞的抑制作用。方法采用MTT法检测不同质量浓度骆驼蓬总碱分别在给药24,48和72h时对鼠源S180肉瘤细胞、H22肝癌细胞及人源HepG2肝癌细胞体外增殖的抑制情况,倒置显微镜下观察HepG2肝癌细胞形态的变化。结果骆驼蓬总碱各质量浓度对体外培养的S180,H22和HepG2肝癌细胞均有较好的抑制作用,且以72h抑制作用相对较好,半数抑制质量浓度(IC50)分别为299.99,306.34和28.21μg.mL-1。结论骆驼蓬总碱对体外培养肿瘤细胞有较好的抑制作用。     

山核桃叶提取物体外对HepG2细胞增殖抑制作用研究

目的研究山核桃叶提取物体外对人肝癌细胞株HepG2的抑制作用及其可能机理,为进一步开发利用山核桃奠定基础。方法采用系统溶剂法将山核桃叶70%乙醇浸膏分成五个部位,然后通过MTT法观察其对人肝癌细胞株HepG2的抑制作用,并通过吖啶橙染色法和流式细胞术观察其诱导凋亡作用。结果山核桃叶氯仿层和石油醚层对HepG2细胞均具有较强的增殖抑制作用,氯仿层相对较强,IC50为（49.70±4.42）mg.L-1,并可剂量依赖性诱导HepG2发生细胞凋亡,其中100mg.L-1处理组凋亡率达28.0%。结论山核桃叶氯仿层中和石油醚层含有抗肿瘤活性成分,其中诱导细胞凋亡是氯仿层提取物发挥抗肿瘤活性的作用机理之一,值得进一步深入研究。     

2-(N-丙基)-6-三氟甲氧基苯并噻唑抗肿瘤活性研究

目的研究2-(N-丙基)-6-三氟甲氧基苯并噻唑的抗肿瘤活性和机制。方法采用CCK-8法测定药物对HeLa、HepG2、MCF-7和SP2/0肿瘤细胞增殖的影响;Hoechst 33258染色和Annexin V-FITC/PI双染法,检测药物对MCF-7细胞的促凋亡作用,观察药物作用后肿瘤细胞的形态;采用细胞划痕实验,检测药物对肿瘤细胞迁移能力的影响。结果 2-(N-丙基)-6-三氟甲氧基苯并噻唑能明显抑制4种肿瘤细胞的增殖,且具有较好的选择性,特别是对MCF-7作用最明显,其IC_(50)值为(12.91±0.69)μmol·L~(-1)。对MCF-7细胞有比较强的抗迁移作用,划痕愈合率较对照组明显降低,还可诱导MCF-7细胞的早期凋亡。结论 2-(N-丙基)-6-三氟甲氧基苯并噻唑可抑制肿瘤细胞的增殖,并且通过诱导MCF-7细胞的早期凋亡,抑制MCF-7细胞迁移,从而发挥其增殖抑制作用。     

土贝母皂苷-Ⅱ对人肝癌细胞HepG2增殖及细胞周期的影响

目的探讨土贝母皂苷-Ⅱ对人肝癌细胞HepG2增殖、细胞周期的影响及其抗肿瘤效应。方法用不同浓度土贝母皂苷-Ⅱ0、2、4、6、8、10、12μg/ml处理HepG2细胞后,MTT法检测细胞生长的抑制率,荧光染色和流式细胞术分别观察凋亡细胞形态和细胞周期的变化。同时,以H22肝癌小鼠模型初步探讨土贝母皂苷-Ⅱ的抗肿瘤作用。结果土贝母皂苷-Ⅱ能剂量依赖性地抑制HepG2细胞生长,24-h半数抑制剂量(IC50)为4.05μg/ml。HepG2细胞经土贝母皂苷-Ⅱ处理后,呈现典型的凋亡细胞形态,G2/M期细胞数量增加,而G0/G1期细胞数明显减少。体内抗肿瘤实验结果证明,土贝母皂苷-Ⅱ对肿瘤的生长有显著的抑制作用。结论土贝母皂苷-Ⅱ可能是通过使肿瘤细胞滞留于G2/M期,从而抑制肿瘤细胞的增殖。     

野苋菜提取物抗肿瘤作用及诱导人肝癌HepG2细胞凋亡的分子机制

目的研究野苋菜提取物的抗肿瘤作用及诱导人肝癌HepG2细胞凋亡的可能机制。方法采用Alamar blue法检测野苋菜提取物对肿瘤细胞的抑制作用;光学显微镜和Hoechst 33258荧光染色观察HepG2细胞的形态变化;流式细胞术检测该提取物对HepG2细胞凋亡的影响;Western blot和caspase-3活性检测试剂盒分析野苋菜提取物诱导HepG2细胞凋亡的作用机制;caspase-9、caspase-3抑制剂(Z-LEHDFMK和Ac-DEVD-CHO)验证相关的调控信号转导通路。结果野苋菜提取物对多种肿瘤细胞均有抑制作用,其中HepG2细胞最敏感;经提取物处理过的HepG2细胞出现明显的凋亡特征,流式细胞术进一步证实野苋菜提取物能够诱导HepG2细胞的凋亡;野苋菜提取物处理48h后的HepG2细胞中Bcl-2、survivin表达下调,Bax、PARP、Apaf-1、caspase-9表达量增加,并且caspase-3、caspase-9酶活性明显提高;caspase-9和caspase-3的抑制剂能够逆转野苋菜提取物对HepG2细胞的抑制活性。结论野苋菜提取物具有抗肿瘤作用,并且能够激活caspase-9内源性凋亡信号通路,发挥其促进HepG2细胞凋亡的作用。     

艾迪注射液抑制肿瘤细胞生长及诱导肿瘤细胞凋亡的研究

目的:对艾迪注射液体外抗癌活性进行研究,探讨其抗肿瘤作用及机制。方法:应用四甲基偶氮盐(MTT)法检测艾迪注射液在体外对小鼠S180,H22及人HepG2细胞的生长抑制作用;流氏细胞仪(FCM)分析其诱导HepG2细胞凋亡和对周期的阻滞作用;用荧光显微镜观察其诱导HepG2细胞凋亡作用。结果:艾迪注射液对小鼠S180、H22及人HepG2细胞的IC50分别为(9．82±0．272),(4．25±0．333),(6．78±0．268)mg·ml-1。4．1 mg·ml-1艾迪注射液作用48 h后的HepG2细胞凋亡率达到12．43％。结论:艾迪注射液对肿瘤细胞具有直接杀伤和促进肿瘤细胞凋亡的作用。     

沙枣提取物对某些肿瘤细胞株及小鼠实体瘤和腹水瘤的抑制作用

目的探讨沙枣提取物对4种肿瘤细胞株及小鼠实体瘤和腹水瘤的抑制作用及机制。方法应用MTT法检测了提取物对4个肿瘤细胞株生长的抑制作用,检测提取物对实体瘤肿瘤生长的抑制率和腹水瘤小鼠的生命延长率,探讨提取物对肿瘤细胞凋亡的影响及机制。结果体外实验中观察到高中低剂量组具有明显抑制4种肿瘤细胞生长作用(P<0.01)。体内实验观察到沙枣提取物高中低剂量均有抑制S180实体瘤小鼠肿瘤生长、延长S180腹水瘤小鼠的生存时间作用。形态学观察发现提取物诱导了4种肿瘤细胞的凋亡,提取物诱导4种肿瘤细胞早期凋亡率在14.1%～24.5%之间,明显高于未处理肿瘤细胞(P<0.05)。提取物处理T24细胞后,bax、caspase-3蛋白表达明显增强,bcl-2表达降低。结论在本试验条件下,沙枣提取物有抑制肿瘤生长作用,其机制可能与下调bcl-2表达和上调bax的表达,高表达caspase-3诱导肿瘤细胞凋亡有关。     

吴茱萸碱体外抗肿瘤作用

目的：研究吴茱萸碱（evodiamine,Evo）的体外抑瘤谱,并初步探讨其抗肿瘤的作用机制。方法：MTT法测定Evo对肿瘤细胞的生长抑制情况;采用光镜和电镜观察Evo对人肺腺癌细胞SPC-A1形态的影响;流式细胞术检测Evo对SPC-A1细胞的抑制作用和细胞周期的影响。结果：Evo对SPC-A1等10种肿瘤细胞有选择性的生长抑制作用,5μg/mL的Evo处理后,细胞变圆,体积变小,分泌颗粒增多,细胞折光性下降,大部分细胞脱壁。透射电镜下可见细胞表面微绒毛消失、核染色质浓集、边聚,核碎裂,并可见凋亡小体;流式细胞仪检测Evo作用后,G0/G1期和S期细胞减少,大量细胞停滞在G2/M期,凋亡细胞增多。结论：Evo选择性的抑制肿瘤细胞的生长,引起SPC-A1细胞典型的凋亡形态学改变并使细胞停滞于G2/M期,其机制可能与诱导细胞凋亡和周期阻滞有关。     

蜂胶抗肿瘤活性成分的研究

采用溶媒萃取法和硅胶柱层析法从蜂胶中获得了两种具有抗肿瘤活性的组分PPLCC和PPLSE,体外抗肿瘤细胞人肝癌细胞(HepG2)和人口腔癌细胞(KB)试验表明,浓度为50μg/ml的PPLCC和PPLSE对HepG2细胞的抑制率分别达87.4%和35.1%,IC50分别为17.5μg/ml和1151.2μg/ml;对KB细胞的抑制率分别为84.9%和59.8%,IC50分别为21.0μg/ml和33.6μg/ml。结果表明,蜂胶可作为抗肿瘤活性物质的天然来源。