一种筛选抗心律失常药物新模型的建立

目的　建立一种细胞水平的心律失常模型 ,以用于抗心律失常药物的筛选和评价。方法　酶解法分离单个大鼠心室肌细胞 ,在细胞水平给予传统诱发心律失常药物乌头碱 ,应用膜片钳技术观察记录应用乌头碱后心肌动作电位时程 (APD)、钠电流 (INa)、L 型钙电流 (ICa L)、内向整流钾电流(IK1)及瞬时外向钾电流 (Ito)的变化。结果　应用乌头碱 1μmol·L-1使大鼠单个心室肌细胞 90 %复极化动作电位时程(APD90 )从给药前的 ( 15 0 2 3± 7 0 2 )ms延长至 ( 2 3 6 0 3±2 3 2 2 )ms(n =8,P <0 0 1)。应用奎尼丁 10 μmol·L-1后动作电位时程延长与乌头碱组比较 ,APD90 进一步延长 (n =6,P <0 0 5 ) ,但应用维拉帕米 10 μmol·L-1后被乌头碱延长的APD恢复近于正常 ,在乌头碱的作用下 ,除极电压为 0mV时ICa L从 ( 72 7 9± 178 0 ) pA增加至 ( 10 82 1± 2 2 2 2 ) pA(n =6,P <0 0 1) ;钠电流 (INa)在 - 5 0mV刺激电压下从( 2 5 4± 5 5 3 ) pA增加至 ( 45 3 0 2± 475 1) pA(n =4,P <0 0 5 ) ;IK1在 - 12 0mV的刺激电压下 ,Ik1的内向成分从( 2 0 0 7 1± 3 5 9 3 ) pA增加至 ( 2 3 17 7± 40 1 8)pA(n =10 ,P <0 0 1) ;奎尼丁、维拉帕米对乌头碱诱发的钠电流和钙电流增加有抑制的作用。结论　乌头碱使?     

药物相关性尖端扭转型室性心动过速性别差异的离子通道研究

目的　探讨药物相关性尖端扭转型室性心动过速 (TdP)发生率性别差异的离子流基础。方法　♀、♂兔各 2 0只 ,酶解法分得左室心尖部单个细胞 ,应用全细胞膜片钳技术记录APD、Ito、IK、IK1和ICa ,L。结果　♀、♂兔心肌细胞膜电容差异无显著性 (P >0 0 5 )。♀兔APD90 (5 6 0 4± 2 6 5ms,n =15 )比♂兔APD90 (489 0± 2 0 7)ms ,n =14长 (P <0 0 5 )。IK ,tail、Ito、IK1和ICa,L在♀兔分别为 (0 71± 0 0 5 )pA/ pF、n =17,(8 2 8± 1 0 3) pA/pF、n =18,(2 4 5± 3 6 ) pA/ pF、n =12 ,(9 0± 2 3)pA/ pF、n =15 ,在♂兔分别为 (0 84± 0 0 7) pA/pF、n =18,(8 6 0± 1 2 0 ) pA/pF、n =18,(2 5 9± 4 5 ) pA/pF、n =14 ,(9 3± 2 6 )pA/ pF、n =16。♀兔IK ,tail明显低于♂兔 (P <0 0 5 ) ,而Ito、IK1和ICa,L在♀、♂兔差异无显著性 (P >0 0 5 )。结论　♀兔IK ,tail较低可能是♀兔APD90 较♂兔长及更易发生药物相关性TdP的原因。     

过氧化氢对培养大鼠海马神经元瞬时外向钾电流的影响

目的　研究过氧化氢对海马神经元上瞬时外向钾电流的影响。方法　采用全细胞膜片钳技术记录培养大鼠海马神经元瞬时外向钾电流的变化。结果　 3 0 μmol·L-1H2 O2 孵育 12h后 (1)明显抑制IA,电流密度由 (5 3 8±15 8) pA·pF-1变为 (18 5± 6 2 ) pA·pF-1(n =10 ,P <0 0 1) ;(2 )明显抑制IA 激活作用 ,半数最大激活电压由 (-15 2± 3 6)mV左移至 (- 18 2± 2 7)mV(n =10 ,P <0 0 1) ;(3 )明显抑制IA 失活作用 ,失活常数由 (42 2± 10 1)ms变为 (81 9± 3 5 0 )ms(n =10 ,P <0 0 5 ) ,半数最大灭活膜电位V1/ 2 由 (- 87 5± 12 6)mV变为 (- 99 8± 2 1)mV(n =10 ,P <0 0 1) ;(4)明显抑制IA 电流失活后复活作用 ;恢复时间常数由 (2 7 9± 14 1)ms变为 (5 8 6± 10 0 )ms(n=10～ 11,P <0 0 1) ;(5 )降低静息膜电位 ,由 (- 64 9±9 4)mV变为 (- 46 0± 12 8)mV(n =6～ 11,P <0 0 1) ,延长动作电位时程 ,由 (8 7± 3 4)ms增至 (16 0± 6 2 )ms(n =6～ 11,P <0 0 5 )。结论　H2 O2 对IA 的抑制作用可能参与其对神经元的氧化应激损伤毒性     

CGRP对正常及模拟缺血缺氧状态下豚鼠心肌细胞L型钙通道电流的影响

目的　探讨降钙素基因相关肽 (CGRP)对正常及模拟缺血缺氧状态下豚鼠心肌细胞钙通道电流的作用。方法　标准全细胞膜片钳记录方式。结果　当心室肌细胞由保持电压 - 40mV除极到 0mV时 ,10 -9、10 -8、和 10 -7mol·L-1的CGRP分别使正常状态下ICa L由 (1 2 6± 0 18)nA (n=8)增加到 (1 87± 0 2 5 )nA (P <0 0 5 ,n =8) ,(1 90±0 2 6 )nA (P <0 0 5 ,n =6 )和 (2 10± 0 2 7)nA (P <0 0 5 ,n=5 ) ;使模拟缺血缺氧状态下ICa L由原来的 (0 71± 0 10 )nA (n =8)增加到 (0 95± 0 12 )nA (P <0 0 1,n =6 ) ,(1 13± 0 15 )nA (P <0 0 5 ,n =4)和 (1 2 6± 0 13)nA(P <0 0 5 ,n =4) ,且对ICa L的最大激活电位无明显影响 ,两者差异无统计学意义。结论　CGRP对正常及模拟缺血缺氧状态下ICa L有明显的促进作用 ,该作用可能是CGRP发挥其心血管效应的离子通道机制之一。     

水杨酸镁对胎鼠脑细胞内钙的影响

目的　观察水杨酸镁对脑细胞内钙的影响 ,探讨其中枢神经系统的钙拮抗作用。方法　应用新一代钙离子指示剂Fura 2 /AM技术 ,用双波长荧光分光光度计测定细胞内钙浓度。结果　在不同外钙条件下 (外钙 0 ,0 0 1,0 1,1 0 ,1 3mmol·L-1)细胞内静息钙浓度分别 41± 5 ,5 9± 6 ,84 7± 2 5 ,10 4± 7,(12 6± 5 )nmol·L-1(各组n =8)。水杨酸镁0 2mmol·L-1对静息细胞内钙无显著影响 (P >0 0 5 )。但水杨酸镁 (0 0 5～ 0 4mmol·L-1)可以剂量依赖性抑制高钾及L 谷氨酸诱发的细胞内钙增高。其IC50 分别为 0 32 3mmol·L-1(95 %CI为 0 12 2～ 0 85 4mmol·L-1)和 0 12 4mmol·L-1(95 %CI为 0 0 73～ 0 2 10mmol·L-1)。结论　水杨酸镁通过抑制电压依从性及受体操纵型的钙通道 ,对中枢神经系统具有较强的钙拮抗作用。     

藻酸双酯钠对豚鼠心室肌细胞动作电位及L-型钙电流的影响

目的　研究藻酸双酯钠 (PSS)对豚鼠心室肌细胞动作电位和L 型钙电流的影响。方法　采用全细胞膜片钳记录技术。结果　PSS明显缩短动作电位时程 (APD) ,5 0、10 0和 2 0 0mg·L-1浓度 ,分别使APD90 缩短 2 4 9% (P <0 0 5 ,n=6 )、37 7%和 4 7 7% (P <0 0 1,n =6 ) ,使APD50 缩短2 1 1% (P <0 0 5 ,n =6 )、4 5 0 %和 6 3 2 % (P <0 0 1,n =6 ) ,呈明显的剂量依赖关系。PSS浓度依赖性减小L 型钙电流 (Ica L) ,5 0、10 0和 2 0 0mg·L-1浓度 ,分别使其峰值降低34 3% (P <0 0 5 ,n =6 )、5 8 4 %和 74 9% (P <0 0 1,n =6 )。随着PSS浓度的增加 ,L 型钙电流的I U曲线逐渐上移 ,但其最大激活电压保持为 0mV不变。结论　PSS明显缩短APD ,抑制Ica L,且呈浓度依赖关系     

葛根素对2型糖尿病病人胰岛素抵抗的影响

目的 :观察葛根素对 2型糖尿病病人胰岛素抵抗的影响。方法 :将 88例控制不良的 2型糖尿病病人随机分为 2组 ,葛根素组 4 8例在常规治疗基础上加用葛根素 5 0 0mg加入氯化钠注射液 2 5 0mL中静脉滴注 ,qd× 6 0d。另外 4 0例单用常规治疗 6 0d为对照组。观察葛根素对 2型糖尿病病人空腹、餐后血糖、胰岛素及血压、血脂、血液流变学、胰岛素敏感性指数 (ISI)的影响。结果 :葛根素组治疗后空腹、餐后 2h血糖、胰岛素、糖化血红蛋白等指标明显下降 ,分别为 (2 .2±s 0 .6 )mmol·L- 1,(6 .4±0 .8)mmol·L- 1,(7.2± 1.7)mU·L- 1,(1.6±0 .4 ) % ;胰岛素敏感性指数明显升高 ,差异均有显著意义 ,均P <0 .0 5 ,与对照组比较差异有显著意义 ,P <0 .0 5。结论 :葛根素具有改善 2型糖尿病病人胰岛素抵抗的作用。     

阿霉素对豚鼠单一心肌细胞钙电流(I_(Ca-L))的影响

目的　探讨阿霉素 (adriamycin ,ADR)诱发心肌病的发病机制。方法　采用膜片钳全细胞记录方法 ,研究ADR对豚鼠单一心肌细胞L型钙通道电流 (ICa L)的影响。结果　用 0 1mmol·L-1ADR灌流前后豚鼠心肌细胞ICa L电流 电压 (I U)关系曲线近似倒钟形 ,其峰值电压在 + 10mV ;0 1mmol·L-1ADR可使ICa L明显增大 ,由灌流前的 ( -0 93± 0 0 5 )nA(n =8)增大到 ( - 1 3 1± 0 0 8) (n =8) (P <0 0 1) ,其增大百分率为灌流前的 ( 4 1 6± 12 3 ) % (n =8)。结论　ADR激活电压依赖性钙通道促进钙内流很可能是ADR造成心肌细胞内钙超载 ,从而诱发心肌病的机制之一。     

3,6-(二甲氨基)-二苯并碘杂六环葡萄糖酸盐对大鼠缺血再灌注心肌的保护作用

3 ,6 (二甲氨基 ) 二苯并碘杂六环葡萄糖酸盐 (3,6 dimethamidodibenzopyriodoniumgluconate ,IHC 93)是迄今本类药物中水溶性最好的药物。大鼠冠状动脉闭塞 4 0min ,再灌注 12 0min ,造成心肌缺血再灌注损伤(n =10 )。测定大鼠心肌梗死范围 (41± 4 ) % ,肿胀度 (81± 4 ) % ,血清肌酸激酶〔CK ,(5 .6± 0 .9)mmol·min- 1·L- 1〕和肌酸激酶同工酶〔CK MB ,(0 .88± 0 .0 9)mmol·min- 1·L- 1〕活性明显升高 ,血清内皮素 1〔ET 1,(0 .34± 0 .0 4 ) μg·L- 1〕水平明显升高。于冠脉结扎前和再灌注前 1min分别ivIHC 930 .12 5 ,0 .2 5和 0 .5mg·kg- 1(n =10～ 11) ,与缺血再灌组比 ,大鼠心肌梗死范围不同程度缩小 ,分别为 (38± 5 ) % ,(35± 4 ) %和(33± 3) % (中、大剂量组P <0 .0 1) ;心肌肿胀度有所减轻〔(78± 4 ) % ,(76± 3) %和 (77± 2 ) % ,中、大剂量组P <0 .0 1〕 ;CK活性降低〔(5 .1± 0 .8) ,(4.7± 1.0 )和 (4.4± 1.3)mmol·min- 1·L- 1,中、大剂量组P <0 .0 5〕 ;CK MB活性降低〔(0 .12± 0 .0 4 ) ,(0 .11± 0 .0 3)和 (0 .0 9± 0 .0 4 )mmol·min- 1·L- 1,均P <0 .0 1〕 ;ET 1水平降低〔(0 .2 6± 0 .0 3) ,(0 .2 6± 0 .0 3)和 (0 .2 7± 0 .0 3) μg·L- 1,均P <0 .0     

渗透压、肾上腺素、激活PKC对血管平滑肌细胞Cl~-运动的影响

目的　探讨血管平滑肌细胞容积性调节Cl- 运动的机制。方法　用Cl- 特异的荧光探针 MEQ及生物荧光双波长影像分析系统 ,观察渗透压、肾上腺素、PKC的激活以及细胞外Cl- 浓度 ([Cl- ] o)的改变对容积性调节Cl- 运动的影响。结果　A10细胞静息时胞质氯离子浓度 ([Cl- ] i)为(3 0 3 9± 3 0 1)mmol·L- 1(n =3 0 ) ;低渗条件使Cl- 外流 ,[Cl- ] i 由静息时 (3 0 87± 3 11)mmol·L- 1降低到 (2 4 3 9±2 56)mmol·L- 1(n =3 0 ,P <0 0 5) ;高渗时则从 (2 4 3 9±2 56)mmol·L- 1增加到 (3 4 64± 3 46)mmol·L- 1(n =3 0 ,P <0 0 5) ;肾上腺素 (10 μmol·L- 1)能降低 [Cl- ] i,BAPTA AM (2 0 μmol·L- 1)能完全抑制 10 μmol·L- 1肾上腺素引起的[Cl- ] i 变化 ,但是两者对渗透性改变引起的 [Cl- ] i 变化均无影响 ;10 0nmol·L- 1PDBu可以完全抑制容积性调节的Cl-运动 ;降低 [Cl- ] o 可以显著增加低渗时Cl- 的外流。结论　在A10细胞上 ,存在着容积性调节的Cl- 运动及Ca2 + 依赖性的Cl- 运动。容积性调节的Cl- 运动在低渗时激活 ,高渗时失活 ;不受胞内外Ca2 + 的影响 ;PKC的激活参与了容积性调节的Cl- 运动的调节     

红花黄素对豚鼠单个心室肌细胞动作电位和钙电流的影响

目的　观察红花黄素对豚鼠单个心室肌细胞动作电位和钙电流的影响。方法　采用膜片钳全细胞式记录技术。结果　红花黄素（３３ μｇ· Ｌ－ １） 能延长单个心室肌细胞动作电位时程,由（３５９３３ ±２７１８） ｍｓ 延长至（４１３３３ ±６１８８）ｍｓ（ Ｐ＜ ００５ ,ｎ ＝ ６） 。同时增加内向 Ｌ 型钙电流的峰值,由（ － １０２１ ±７４） ｐ Ａ 至（ － １４３６ ±２１２） ｐ Ａ（ Ｐ＜ ００５ ,ｎ ＝ ７） 。结论　由于红花黄素具有上述电生理作用,可用于心力衰竭和快速性心律失常的治疗     

阿魏酸钠对家兔心室肌单相动作电位的影响

目的　探讨阿魏酸钠对心肌细胞单相动作电位的影响。方法　健康家兔 2 0只 ,随机平均分为两组 :对照组 (苄基四氢巴马汀组 )和实验组。按传统心内膜MAP记录方法经右颈外静脉插入四极接触电极导管至家兔右心室内膜记录MAP信号并同时记录Ⅱ导联心电图。对照组经耳缘静脉给予苄基四氢巴马汀 ( 5mg·kg-1) ,实验组给予阿魏酸钠( 0 6g·kg-1) ,给药前、后观察MAPA、MAPD5 0、MAPD90及ERP。结果　对照组用药前MAPA及MAPD2 0分别为( 2 7 0 1± 0 67)mV及 ( 79 0 5± 7 0 4 )ms,用药后分别为( 2 6 87± 0 73 )mV及 ( 77 5± 7 170 )mV(P >0 0 5 ) ;用药2 0 0 1 0 2 15收稿 ,2 0 0 1 0 4 13修回1 贵州省人民医院心内科 ,贵阳　 5 5 0 0 0 22 包头钢铁职工医院 ,包头　 0 14 0 0 0作者简介 :李　屏 ,女 ,36岁 ,医学硕士 ,副主任医师。Tel:0 85 1 5 934 319,E mail:lipingb @hotmail.com ;曾秋棠 ,男 ,36岁 ,医学博士 ,副教授 ,硕士生导师前MAPD5 0、MAPD90、ERP分别为 ( 97 5± 6 770 )ms、( 12 3 5± 5 80 )ms、( 111± 13 5 0 )ms,用药后分别为 ( 12 4 5± 8 96)ms、( 15 3± 7 5 3 )ms、( 14 2± 13 3 7)ms (P <0 0 1) ;实验组用药前MAPA及MAPD2 0分别为 ( 2 6 5 8±1 0 3 )mV及 ( 75± 5 77)ms,用     

7－氯苄基四氢巴马汀对豚鼠乳头肌迟后去极，触发活动及猫心单相动作电位的影响

７一氯苄基四氢巴马汀对豚鼠乳头肌迟后去极，触发活动及猫心单相动作电位的影响夏国瑾，曾维忠，姚伟星，戴水平，江明性，黄文龙，黄忱亚，彭司勋（同济医科大学药理学教研室，武汉４３００３０；中国药科大学药物化学研究室，南京２１０００９）７－氯苄基四氢巴马汀（...     

Atrial-selective prolongation of refractory period with AVE0118 is due principally to inhibition of sodium channel activity

The action of AVE0118 to prolong effective refractory period (ERP) in atria but not in ventricles is thought to be due to its inhibition of IKur. However, in nonremodeled atria, AVE0118 prolongs ERP but not action potential duration (APD70-90), which can be explained with the inhibition of sodium but not potassium channel current. ERP, APD, and the maximum rate of increase of the AP upstroke (Vmax) were measured in the canine-isolated coronary-perfused right atrial and in superfused ventricular tissue preparations. Whole-cell patch-clamp techniques were used to measure sodium channel current in HEK293 cells stably expressing SCN5A. AVE0118 (5-10 μM) prolonged ERP (P < 0.001) but not APD70 and decreased Vmax (by 15%, 10 μM, P < 0.05; n = 10 for each). Ventricular ERP, APD90, and Vmax were not changed significantly by 10 μM AVE0118 (all P = ns; n = 7). AVE0118 effectively suppressed acetylcholine-mediated persistent atrial fibrillation. AVE0118 (10 μM) reduced peak current amplitude of SCN5A-WT current by 36.5% ± 6.6% (P < 0.01; n = 7) and shifted half-inactivation voltage (V0.5) of the steady-state inactivation curve from -89.9 ± 0.5 to -96.0 ± 0.9 mV (P < 0.01; n = 7). Our data suggest that AVE0118-induced prolongation of atrial, but not ventricular ERP, is due largely to atrial-selective depression of sodium channel current, which likely contributes to the effectiveness of AVE0118 to suppress atrial fibrillation.     

左旋体盐酸非洛普的抗实验性心律失常作用

目的　研究左旋体盐酸非洛普 [levo 1 (2 ,6 二甲基苯氧基 ) 2 (3 ,4 二甲氧基苯乙氨基 )丙烷盐酸盐 ,l DDPH对实验性心律失常的抑制作用。方法　iv哇巴因、乌头碱或氯化钙制造大鼠、豚鼠室性心律失常模型 ;标准微电极技术记录动作电位 ;全细胞膜片钳技术记录L型钙电流 (ICa,L)。结果　l DDPH 5 0mg·kg-1抑制哇巴因诱发的豚鼠室性心律失常以及乌头碱和氯化钙诱发的大鼠室性心律失常 ;l DDPH 3 0 μmol·L-1缩短豚鼠右心室乳头肌细胞 5 0 %动作电位时程 (APD50 )并延长有效不应期 (ERP) (n =6,P <0 0 5 ) ;l DDPH抑制单个豚鼠心室肌细胞ICa,L,其IC50 值为 12 9(95 %可信限 :7 0～ 18 8) μmol·L-1(n =5 )。结论　l DDPH具有抗实验性心律失常作用 ;其机制与抑制ICa,L、缩短APD50 并延长ERP有关     

雌二醇抑制豚鼠心室肌细胞内向整流和延迟整流钾通道电流

研究雌二醇对心室肌细胞动作电位,内向整流钾通道电流及延迟整流钾通道电流的影响。方法：全细胞膜片箝技术。结果：ＥＳＴ１０μｍｏｌ．Ｌ＾－１使豚鼠心室肌细胞ＡＰ时程明显缩短,ＡＰＤ５０由给药前（４７４±７１）ｍｓ缩短至（３３０±７５）ｍｓ（Ｐ〈０．０５）,Ｅｓｔ１００μｍｏｌ．Ｌ＾－１使ＡＰＤ５０缩短至（２２９±６７）ｍｓ,ＡＰＤ９０由（５８７±６０）ｍｓ缩短至（４１８±７９）ｍｓ,Ｅｓｔ浓度依赖性地     

Role of action potential shortening in the prevention of arrhythmias in canine cardiac tissue

1. The effects of the K+ channel opener diazoxide and the oxime-containing Ca2+ and K+ channel blocker salicylaldoxime were tested in canine cardiac Purkinje tissue. 2. Both drugs shortened action potential duration (APD). For salicylaldoxime (0.1-1.0 mmol/L), the reductions in APD were statistically significant at the 25% level of repolarization (APD25) for 0.1 mmol/L (P < 0.05, n = 14) and 0.5 and 1.0 mmol/L (P < 0.01, n = 6), at the 50% level of repolarization (APD50) for 0.1 mmol/L (P < 0.05, n = 14) and 0.5 and 1.0 mmol/L (P < 0.01, n = 6) and at the 90% level of repolarization (APD90) for 0.5 and 1.0 mmol/L (P < 0.01, n = 6). In contrast, diazoxide (0.05-0.1 mmol/L) significantly shortened APD at all levels of repolarizations, with the APD50 and APD90 reduced most significantly (P < 0.01, n = 6) for higher concentrations of the drug (0.07-0.1 mmol/L). Both drugs significantly reduced the force of contraction. 3. Diazoxide (10 experiments) was more potent in suppressing strophanthidin-induced arrhythmias than salicylaldoxime (three of seven experiments). Salicylaldoxime reduced APD even further in the presence of diazoxide. 4. Although salicylaldoxime and diazoxide modulate different ion channels, it appears APD shortening may be a necessary, but insufficient, factor for the suppression of strophanthidin-induced arrhythmias.     

N-甲基小檗胺对豚鼠单一心室肌细胞ATP敏感钾电流的影响

目的　研究Ｎ 甲基小檗胺对豚鼠单一心室肌细胞ＡＴＰ敏感钾电流的作用。方法　膜片钳制技术全细胞记录模式。结果　Ｎ 甲基小檗胺抑制心室肌细胞ＡＴＰ敏感钾电流（ＩＫＡＴＰ）且具浓度依赖关系。指令电位为０ｍＶ时,３种浓度Ｎ 甲基小檗胺（０－１,１,１０μｍｏｌ·Ｌ－１）可使ＩＫＡＴＰ分别由给药前的（０－４６±０－０９）ｎＡ,（０－４３±０－１５）ｎＡ和（０－４７±０－１０）ｎＡ减少至给药后的（０－３７±０－０７）ｎＡ（ｎ＝４,Ｐ＜０－０５）,（０－２９±０－１８）ｎＡ（ｎ＝５,Ｐ＜０－０５）和（０－２１±０－０７）ｎＡ（ｎ＝４,Ｐ＜０－０５）。其抑制率分别为１８－８１％±６－１６％（Ｐ＜０－０５）,４１－４７％±２４－０５％（Ｐ＜０－０５）和５５－００％±１２－９４％（Ｐ＜０－０５）。其它指令电位下的ＩＫＡＴＰ的改变也符合此趋势。结论　Ｎ 甲基小檗胺阻断豚鼠心肌细胞ＡＴＰ敏感Ｋ＋钾通道。