S100A8基因在肺纤维化大鼠模型肺组织中的表达

目的 探讨S100A8基因在肺纤维化大鼠模型肺组织中的表达.方法 SD大鼠20只,随机分为正常对照组和肺纤维化模型组,模型组气管内注射博莱霉素5 mg/kg诱导肺纤维化,对照组气管内注射等量生理盐水.28 d后处死两组大鼠,HE染色观察肺纤维化情况,RT-PCR检查两组S100A8 mRNA的表达情况.结果 与对照组相比,S100A8 mRNA在肺纤维化大鼠肺组织中表达增强.结论 S100A8 mRNA在肺纤维化大鼠模型肺组织中表达增强,提示S100A8可能参与肺纤维化的病理过程.     

雌激素作用下输卵管上皮细胞S100A8和S100A9的表达及其作用探讨

目的研究基因S100A8和S100A9是否可能参与雌激素对输卵管的功能调控,并探讨它们对输卵管可能的影响。方法免疫组织化学法检测S100A8和S100A9在健康间情期,绵羊输卵管壶腹部中的基础表达及分布;利用E2作用绵羊输卵管上皮细胞,在不同作用时间及不同浓度E2作用下,q-PCR及免疫荧光法检测输卵管上皮细胞S100A8和S100A9 mRNA及蛋白的表达情况。结果在健康间情期绵羊输卵管,S100A8和S100A9高表达于黏膜上皮及腺上皮,并在血管中也有表达。输卵管上皮细胞在高浓度E2作用下,S100A8和S100A9的表达在不同时间出现动态变化,并均在E2作用6 h后出现表达高峰,在该时间下不同浓度的E2均显著诱导S100A8和S100A9的高表达,但在10-7 mol·L^-1和10-8 mol·L^-1浓度下表达最高,两组差异不显著。结论输卵管上皮细胞中S100A8和S100A9受到雌激素调控,高浓度雌激素促进S100A8和S100A9的高表达,可能与交配时生殖道的天然防御有关,并可能参与卵子在输卵管的运输。     

脂多糖对S100A8和S100A9在Hepa 1-6细胞内定位的影响

目的观察S100钙结合蛋白A8（S100A8）和S100钙结合蛋白A9（S100A9）在细胞内定位及脂多糖（lipopolysaccharide,LPS）刺激对其细胞内定位的影响。方法将带有血凝素（HA）标签的S100A8或S100A9真核表达载体瞬时转染至小鼠Hepa1-6肝癌细胞,通过细胞免疫荧光方法观察S100A8、S100A9的胞内表达、定位及LPS对其定位的影响。结果静息状态下,S100A8、S100A9在细胞浆和细胞核都有分布;LPS刺激细胞2h后,S100A8移位入核,而S100A9在细胞内分布无明显变化。结论LPS刺激后S100A8、S100A9在细胞内的差异分布,提示两者在炎症反应中的作用不同,S100A8可能参与LPS诱导的基因表达调控。     

吡格列酮对STZ糖尿病大鼠肾组织氧化应激的影响

目的观察不同剂量盐酸吡格列酮对STZ诱导的糖尿病大鼠肾组织氧化应激的影响。方法 STZ腹腔注射建立糖尿病大鼠模型。成模糖尿病大鼠随机分为模型组和不同剂量吡格列酮组,并设正常对照组,干预8周后检测肾皮质MDA含量,SOD活性,肾组织NADPH氧化酶亚单位p22phoxmRNA和p47phox mRNA表达。结果各吡格列酮组较模型组MDA含量,p22phox mRNA和p47phox mRNA表达明显降低,SOD活性明显升高(P<0.05)。结论吡格列酮可抑制STZ糖尿病大鼠肾脏NADPH氧化酶表达,降低肾脏氧化应激水平,并具有一定的剂量依赖性,该作用可能与其肾脏保护部分有关。     

吡格列酮对糖尿病大鼠认知功能及海马组织TNF-α、Aβ的影响

目的:观察吡格列酮对糖尿病大鼠认知功能及海马组织TNF-α、β-淀粉样蛋白(Aβ)的影响。方法:随机将45只Wistar大鼠分为正常对照组、糖尿病组、吡格列酮组,STZ25mg.kg-1腹腔注射建立糖尿病大鼠模型,给予吡格列酮10mg.kg-1.d-1灌胃干预12周后,采用Morris水迷宫试验测试其认知能力,ELISA法检测各组大鼠海马组织TNF-α和Aβ表达。结果:吡格列酮组与糖尿病组Morris水迷宫测试中逃避潜伏期分别较正常对照组明显延长(P<0.05);与糖尿病组比较,吡格列酮组Morris水迷宫测试中潜伏期明显缩短(P<0.05);中心区停留时间百分比和通过原平台位置次数增加(P<0.05);TNF-α表达吡格列酮组和糖尿病组与对照组相比明显升高(P<0.01);Aβ表达吡格列酮组和糖尿病组与对照组相比明显升高(P<0.01);吡格列酮组TNF-α和Aβ表达较糖尿病组降低(P<0.05)。结论:糖尿病大鼠认知功能受损;吡格列酮对糖尿病大鼠的认知功能减退具有改善作用,其机制可能与海马组织TNF-α、Aβ的表达降低有关。     

吡格列酮对谷氨酸诱导的皮质神经元损伤的保护作用

目的观察吡格列酮对谷氨酸所致培养皮质神经元损伤的保护作用及其机制。方法乳大鼠大脑皮质神经元,培养7d后用于实验。实验分为对照组,加入0.1%二甲亚砜;谷氨酸损伤组,加入谷氨酸100μmol·L-1作用2h或24h;吡格列酮组,先分别加入吡格列酮0.01,0.1和1μmol·L-1作用1h,然后加入谷氨酸;谷氨酸+吡格列酮+GW9662组,先加入GW966210μmol·L-1作用30min,然后加入吡格列酮1μmol·L-1,作用1h后加入谷氨酸。MTT法测定细胞存活率;Hoechst33258核染色观察细胞凋亡的形态学改变;Western印迹法检测Bcl-2蛋白、钙蛋白酶Ⅰ蛋白和磷酸化c-Jun氨基端激酶1(JNK1)表达水平;免疫荧光染色法检测钙蛋白酶Ⅰ及磷酸化活化转录因子2(ATF2)表达。结果谷氨酸作用24h可使体外培养神经元细胞存活率明显下降,从对照组的(100.0±15.4)%降低至(71.5±6.1)%;细胞凋亡百分率明显增加,从对照组的(8.7±1.3)%增加至(35.4±6.9)%;磷酸化JNK1、钙蛋白酶Ⅰ蛋白和磷酸化ATF2表达增加,Bcl-2蛋白表达水平降低。吡格列酮0.1及1μmol·L-1明显对抗谷氨酸引起的神经元损伤,神经元细胞存活率分别为(91.1±4.7)%和(96.6±3.4)%;细胞凋亡百分率分别为(15.5±3.8)%和(9.2±0.9)%。过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)的特异性阻断剂GW9662不能拮抗吡格列酮对神经元的保护作用,谷氨酸+吡格列酮+GW9662组细胞存活率为(91.3±6.7)%,细胞凋亡百分率为(10.2±1.8)%。单独应用GW966210μmol·L-1对细胞存活率和细胞凋亡百分率没有影响。吡格列酮也可抑制谷氨酸引起的磷酸化JNK1、磷酸化ATF2、钙蛋白酶Ⅰ表达增多及Bcl-2蛋白表达减少。结论吡格列酮对谷氨酸引起的培养皮质神经元损伤具有明显的保护作用,可能与吡格列酮抑制磷酸化JNK1和钙蛋白酶Ⅰ表达,以及增强Bcl-2蛋白表达有关,与PPARγ激活无关。     

S100A12在小鼠脓毒症继发急性肺损伤的表达及功能研究

目的 探究S100钙结合蛋白A12(S100A12)在小鼠脓毒症继发急性肺损伤的表达及功能,寻找潜在的急性肺损伤标志物及可能的干预靶点。方法 共48只雄性C57BL/6小鼠,采用随机分组法分为两大组：盲肠结扎穿孔（CLP）组、假手术（SHAM）组。两组动物按实验后4、8、12、24 h分为4个亚组,每亚组各6只。CLP小鼠结扎盲肠全长,无菌针头穿孔3个;SHAM组仅做剖腹术。各组在相应时间点对各组小鼠进行麻醉,麻醉方式为腹腔注射戊巴比妥钠。采集小鼠心脏血液0.5 ml左右,制备血清,并采集小鼠右肺组织。酶联免疫吸附测定（ELISA）法检测小鼠血清中S100A12蛋白含量;逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）测定小鼠右肺中的S100A12、晚期糖基化终末产物受体（RAGE）、核因子κB(NF-κB)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)等mRNA表达水平;苏木精-伊红（HE）染色法对小鼠右肺组织进行病理学观察、病理学评分。结果 CLP组小鼠肺部有淤血、肿胀表征,随着实验时间的加长,情况越发严重。小鼠肺部颜色偏向暗红,肺部表面有明显的出血点。SHAM组小鼠肺部组织完整,表面无明显出血点,肺部色泽偏向...     

吡格列酮对大鼠痛风性关节炎滑膜细胞因子表达的作用

目的：研究过氧化物酶体增殖物激活受体γ（peroxisome　proliferator-activated　receptor　gamma，PPARγ）激动剂吡格列酮。对大鼠急性痛风性关节炎滑膜表达细胞因子的调控作用，探讨其作用机制。方法：大鼠单侧踝关节注射人工尿酸钠晶体制作急性痛风性关节炎模型，于注射48h后取关节滑膜，以RT—PCR法检测吡格列酮（20mg·kg^-１·d^-1）口服给药对滑膜表达肿瘤坏死因子α（TNF—α）、白介素1β（IL-1β）、白介素1受体拮抗剂（IL—IRα）、细胞因子诱导中性粒细胞化学趋化因子（CINC，相当于人的白介素8）、干扰素γ（IFN-γ）和白介素4（IL-4）的作用。结果：吡格列酮用药组滑膜表达TNF—α、CINC和IFN-γ显著低于对照组，抑制率分别为81．7％、90．9％、65.3％；IL-4表达高于对照组，增加率为340．0％；IFN-1／IL-4比值显著低于对照组，抑制率为92．6％。2组IL-1β和IL-IRa的表达差别无统计学意义。结论：吡格列酮对急性痛风性关节炎的抗炎作用与抑制TNF—α和CINC的表达。并促使Th1／Th2平衡向Th2为优势转化有关。     

吡格列酮对糖尿病大鼠肾脏的保护作用

目的 :探讨胰岛素增敏剂吡格列酮对糖尿病大鼠肾脏的保护作用及其机制。方法 :将雌性SD大鼠 30只分为 3组 :正常对照组、糖尿病组和吡格列酮组。检测各组wk 4 ,8时血糖、糖化血红蛋白、肾功能、血脂 ,血转化生长因子 β1(TGF β1)水平等指标的变化 ,免疫组织化学检测纤维连接蛋白 (FN )和层粘连蛋白 (LN)表达水平。结果 :wk 8时吡格列酮组较糖尿病组尿蛋白排泄量明显减少 ,(2 0 .8±s 0 .7) μg·2 4h- 1vs (12 .6± 1.4 ) μg·2 4h- 1,P <0 .0 1;血TGF β1水平下降 (P <0 .0 1) ;wk 8时吡格列酮组肾小管FN和肾小球LN表达低于糖尿病组 ,P <0 .0 1和P <0 .0 5。结论 :吡格列酮对于糖尿病肾脏病变具有部分保护作用 ,可抑制血中TGF β1水平 ,减少细胞外基质的沉积。     

关于瑞格列奈对吡格列酮及其主要活性代谢物在健康人体的药代动力学影响

目的研究探讨关于瑞格列奈对吡格列酮及其主要活性代谢物在健康人体的药代动力学影响的研究。方法选取20名健康受试者高脂饮食后随机交叉口服单独吡格列酮30mg和吡格列酮30mg联合瑞格列奈0.5mg,清洗周期为2周。按顺序分为对照组和观察组。采用HPLC-MS法测定吡格列酮及其主要活性代谢产物M-Ⅳ、M-Ⅲ的血药浓度。结果给药吡格列酮15mg联合瑞格列奈药0.5mg(观察组)后,抗糖尿病药吡格列酮(PIO)、羟基吡格列酮(M-Ⅳ)、酮基吡格列酮(M-Ⅲ)的tmax(h)分别为(2.0±1.4)、(40.2±29.9)、(13.2±1.4);AUC0-324[μg/(L h)]分别为(6.42±2.28)、(13.08±5.41)、(6.01±2.91);Cmax(μg/L)分别为(641.03±198.87)、(301.16±102.21)、(141.09±80.31)。与吡格列酮单药给药组相比,均无显著性差异(P>0.05)。吡格列酮单药和吡格列酮与瑞格列奈片联合给药在健康人体的药代动力学行为基本相近。结论瑞格列奈对吡格列酮及其主要活性代谢物在健康人体的药代动力学基本无显著性影响。     

S100A4蛋白在乳腺癌中的表达和意义

目的探讨乳腺癌中S100A4的表达及意义。方法采用免疫组织化学SP法检测62例乳腺癌中S100A4表达情况,分析其表达与临床病理特征之间的关系。结果①S100A4表达率在组织学分级Ⅰ级、Ⅱ级、Ⅲ级乳腺癌中分别为45.0%(9/20)、64.0%(16/25)和88.2%(15/17),差异有统计学意义;在淋巴结转移阳性组和阴性组中分别为78.1%(25/32)和50.0%(15/30),差异亦有统计学意义。②S100A4的表达与组织学分级、淋巴结转移呈正相关(P<0.05),然而与年龄、肿瘤大小、TNM分期无显著相关。结论乳腺癌中S100A4的表达与肿瘤的进展密切相关,是判断乳腺癌侵袭、预测转移趋势的有价值的指标。     

二苯乙烯苷对C反应蛋白诱导的小鼠巨噬细胞明胶酶A和B表达的影响

目的为探讨二苯乙烯苷(TSG)预防动脉粥样硬化斑块不稳定的可能机制,观察TSG对C反应蛋白(CRP)诱导的巨噬细胞表达明胶酶A和B的影响。方法体外培养的小鼠腹腔巨噬细胞,分为空白对照组、模型组(给CRP20mg·L-1)、模型+辛伐他汀100μg·L-1组、模型+TSG120及60μg·L-1组。给予CRP12h后加入干预药物,共同培养24h后进行指标的检测。用蛋白免疫印迹法观察各组细胞明胶酶A和B蛋白表达的差异;用逆转录聚合酶链反应法(RT-PCR)观察各组细胞明胶酶A和B mRNA表达的差异;ELISA法测定细胞培养液中白细胞介素6(IL-6)和肿瘤坏死因子α(TNFα)含量。结果蛋白免疫印迹分析显示,模型组明胶酶A和B蛋白的表达较空白对照组明显增加;与模型组(明胶酶A:1.14±0.26,明胶酶B:1.26±0.24)相比,辛伐他汀(明胶酶A:0.71±0.12,明胶酶B:0.73±0.15)及TSG(120μg·L-1组:明胶酶A,0.74±0.11,明胶酶B,0.88±0.13;60μg.±0.18,明胶酶B,1.12±0.18)均能降低明胶酶A和B蛋白的表达,并随TSG处理浓度的增加有下降趋势。RT-PCR显示,模型组明胶酶A和B的mRNA表达较空白对照组明显增加;与模型组(明胶酶A:2.45±0.18,明胶酶B:2.59±0.19)相比,辛伐他汀(明胶酶A:0.86±0.06,明胶酶B:0.98±0.10)及TSG(120μg·L-1组:明胶酶A,0.98±0.09,明胶酶B,1.24±0.13;60μg·L-1组:明胶酶A,1.32±0.12,明胶酶B,1.80±0.15)均能降低明胶酶A和B的mRNA表达,并随TSG处理浓度的增加有下降趋势。ELISA结果显示,与空白对照组比较,模型组IL-6和TNF-α水平明显升高;与模型组IL-6(614±52)ng·L-1,TNFα(82.5±4.7)mg·L-1相比,辛伐他汀IL-6(290±32)ng·L-1,TNFα(36.3±2.7)mg·L-1及TSG120μg·L-1组:IL-6(310±28)ng·L-1,TNFα(42.1±3.1)mg·L-1;60μg·L-1组:IL-6(498±46)ng·L-1,TNFα(58.6±3.4)mg·L-1能明显降低细胞培养液中IL-6和TNFα含量。结论TSG可通过抑制上调的明胶酶A和B的表达、IL-6及TNFα的分泌以抑制斑块不稳定。     

S100A4蛋白在膀胱癌中的表达及其临床意义

目的探讨膀胱癌中S100A4的表达及意义。方法采用免疫组化S-P法检测65例膀胱癌中S100A4的表达情况,分析其表达与临床病理特征之间的关系。结果S100A4的表达与组织学分级、淋巴结转移呈正相关(P<0.05)。结论膀胱癌中S100A4的表达与肿瘤的进展密切相关,是判断膀胱癌生物学行为、预测转移趋势的有价值的指标。     

S100-alarmins: potential therapeutic targets for arthritis

Introduction: In arthritis, inflammatory processes are triggered by numerous factors that are released from joint tissues, promoting joint destruction and pathological progression. During inflammation, a novel family of pro-inflammatory molecules called alarmins is released, amplifying inflammation and joint damage.

Areas covered: With regard to the role of the alarmins S100A8 and S100A9 in the pathogenesis of arthritis, recent advances and the future prospects in terms of therapeutic implications are considered.

Expert opinion: There is still an urgent need for novel treatment strategies addressing the local mechanisms of joint inflammation and tissue destruction, offering promising therapeutic alternatives. S100A8 and S100A9, which are the most up-regulated alarmins during arthritis, are endogenous triggers of inflammation, defining these proteins as promising targets for local suppression of arthritis. In murine models, the blockade of S100A8/S100A9 ameliorates inflammatory processes, including arthritis, and there are several lines of evidence that S100-alarmins may already be targeted in therapeutic approaches in man.     

钙囊素对胰腺癌预后判断的价值

目的研究人胰腺癌组织中钙囊素(S100A11)的表达与胰腺癌切除术患者生存期关系。方法免疫组化法检测78例胰腺癌组织及其癌旁组织中S100A11表达,并对术后患者进行随访,单因素及多因素分析S100A11及各临床病理参数与胰腺癌预后的关系。结果 S100A11在胰腺癌组织中的阳性表达率明显高于癌旁组织(79.5%vs.24.4%)(P<0.01)。单因素分析表明,患者的年龄、肿瘤病理类型、伴有淋巴结转移及远处转移、肿瘤的分化程度、TNM分期、血清肿瘤相关抗原19-9(CA19-9)浓度及S100A11阳性这些病理参数与胰腺癌患者术后生存期长短均有相关性(P<0.05);但经Cox比例风险回归模型分析显示,仅年龄≥65岁、CA19-9≥1000U/ml及S100A11阳性为胰腺癌预后的独立指标(P<0.05)。结论 S100A11可作为胰腺癌独立的预后指标。     

Upregulation of S100A4 after spinal cord transection in adult rats

AIM: To investigate whether spinal cord transection induces changes of gene expression of S100A4 protein. METHODS: In a spinal cord transection model, S100A4 expression and cellular localization were examined using cDNA microarray, Northern blot, immunohistochemistry, and immunofluorescence double-labeling methods. RESULTS: There was very limited S100A4 mRNA expression in the control spinal cord. However, S100A4 mRNA expression was increased significantly in both the rostral and caudal spinal cord segments adjacent to the injury site. Specifically, S100A4 gene expression was substantially increased at d 2, peaked at d 7 and d 14, and remained high up to 28 d post-injury. During its peak expression, S100A4 protein was localized in astrocytes of the spinal cord within 5 mm from the site of spinal transection. CONCLUSION: Spinal cord transection induces prolonged S100A4 expression at both mRNA and protein levels in areas close to the injury site. Increased expression of S100A4 in astrocytes after spinal cor     

钙囊素及半乳凝素-3在胰腺癌中的表达及临床意义

目的 探讨钙囊素(S100 A11)及半乳凝索3(Gal-3)在胰腺癌组织中的表达及临床意义.方法 利用Elivison免疫组化法检测36例手术切除的胰腺癌及21例旁正常胰腺组织,以及胃癌、食管癌、肝癌、结肠癌、肺癌和乳腺癌纽织各10例中 S100 A11 及Gal-3的表达情况,分析指标与胰腺癌大小、分化程度及淋巴结转移的相关性.结果 S100 A11及Gal-3 在胰腺组织中的表达阳性率(86.1、97.2% )显著高于癌旁正常胰腺组织(28.6% 、33.3% )(P<0.05).S100 A11及Gal-3在其他肿瘤组织中的表达阳性率为40% ～80% .在胰腺癌组织中的表达与各临床病理参数之间均无明显的相关性.结论 S100 A11及Gal-3在胰腺癌组织、胰外恶性肿癌高表达,提示两者可能在胰腺癌发病过程中起一定作用,S100 A11及Gal-3为非器官特异性肿癌相关蛋白.     

癫痫大鼠血清和脑脊液中S100B水平及其在海马组织的表达

目的探讨S100B与癫痫的关系。方法采用侧脑室注射红藻氨酸建立SD大鼠颞叶癫痫动物模型(癫痫组,40只),在痫性发作后6、12、24、72h和1周,用ELISA方法测定血清和脑脊液中S100B的含量,用免疫组化染色法观察各组大鼠海马组织中S100B蛋白的表达。其结果与正常SD大鼠(对照组,8只)比较。结果血清和脑脊液中S100B含量在癫痫发作后6h逐渐增加,24h达高峰;海马CA3和齿状回区S100B免疫阳性胶质细胞致痫后24、72h显著增高。结论 S100B蛋白在癫痫后的海马组织中大量表达,提示S100B蛋白参与了癫痫早期的病理过程;血清和脑脊液中S100B水平可作为判断癫痫所致脑损伤的早期生化指标。