红树林内生真菌多样性及其次级代谢产物GH-9-1抗肺癌活性的研究

摘 要：目的 分析湛江观海长廊红树林内生真菌多样性,筛选具有抗肺癌活性的内生真菌次级代谢产物,对其中1株内生真菌Penicillium sp. GH-9发酵产物4-甲基-3-甲氧基-2,4-戊二烯酸（GH-9-1）进行抗肺癌活性研究。方法 利用微生物培养和发酵技术对红树林内生真菌进行分离纯化及液体发酵,通过16S rRNA基因序列构建系统发育树分析红树林内生真菌多样性,利用高效液相色谱（HPLC）检测技术对其次级代谢产物进行特征峰追踪分离,根据核磁共振数据鉴定化合物结构,采用CCK-8法、流式细胞术、Western blot技术评价单体化合物的体外抗肺癌活性。结果 从湛江市观海长廊采集6种红树林植物组织标本及红树林根部土壤标本,共分离得到130株内生真菌,从真菌Penicillium sp. GH-9的发酵产物中获得其主要特征性代谢产物4-甲基-3-甲氧基-2,4-戊二烯酸（GH-9-1）。化合物GH-9-1可抑制非小细胞肺癌细胞A549和H460细胞生长增殖,并可诱导A549和H460细胞发生凋亡和细胞周期阻滞。结论 湛江市观海长廊红树林内生真菌具有丰富的多样性,从其中1株内生真菌Penicillium sp. GH-9的次级代谢产物分离得到的GH-9-1具有显著的抗肺癌活性。     

植物内生真菌HCCB00189代谢产物研究

目的：研究植物内生真菌HCCB00189的代谢产物。方法：采用溶剂萃取、硅胶柱层析及制备HPLC等方法，对活性菌株的发酵物进行分离，并根据理化性质和光谱分析对化学结构进行鉴定。结果：从其代谢产物中分离到5个化合物，鉴定为4-甲基苯甲酸羧甲基酯（1）；4-甲氧甲酰基苯甲酸（2）；4-羟甲基苯甲酸（3）；4’，7-二羟基异黄酮（4）和4’，5，7-三羟基异黄酮（5）。抗肿瘤活性测试表明化合物4，5对肿瘤细胞有较明显的抑制作用。结论：从植物内生真菌HCCB00189代谢产物中分离到抗肿瘤活性成分。     

红海榄内生真菌BGD22抑菌活性成分的初步研究

 目的：鉴定一株来自于海南文昌红海榄茎的内生真菌菌株BGD22,分离其抑菌活性代谢产物。方法：根据形态学特征和ITS序列分析结果对菌株BGD22进行鉴定;采用各种色谱方法分离乙酸乙酯提取物中的化学成分,并根据化合物的波谱数据确定结构。结果：菌株BGD22被鉴定为黑曲霉的一种,从该菌株中分离到3个化合物：草酸二甲酯（1）、枸橼酸二甲酯（2）和麦角甾醇（3）,其中枸橼酸二甲酯具有较弱的抑制藤黄八叠球菌和枯草芽孢杆菌生长的活性,最低抑菌浓度（MIC）分别为0.5和0.9 mg?mL-1。结论：从红海榄茎中分离到的内生真菌黑曲霉可分泌抑菌活性代谢产物枸橼酸二甲酯。     

丹参内生真菌的分离鉴定及抗血小板凝集活性菌株的筛选

目的:分离鉴定丹参内生真菌,考察其代谢产物粗提物的体外抗二磷酸腺苷(ADP)诱导的血小板凝集活性。方法:对丹参的叶、茎和根中的内生真菌进行分离,采用ADP诱导血小板凝集实验测试丹参内生真菌粗提物的抗血小板凝集活性,并用分子生物学方法对筛选出的活性内生真菌进行鉴定。结果:共分离得到80株内生真菌,发现5株内生真菌的粗提物具有良好的抗血小板凝集的作用。结论:丹参中分离的多种活性内生真菌具有潜在的抗血小板凝集活性,值得进一步研究和开发。     

红树植物卤蕨内生真菌Penicillium sp.0935030中的抗菌活性成分研究

为研究红树林植物卤蕨（Acrostichum aureurm）内生真菌Penicillium sp．0935030发酵物中的抗菌活性成分，采用活性追踪的方法，用多种色谱技术对化合物进行分离纯化．通过理化性质和光谱数据鉴定出7个化合物，分别为：环（脯氨酸-苏氨酸）（1）．环（脯氨酸-酪氨酸）（2），1-呋喃基-1，2-乙二醇（3），（3p．4B，22B）-12-烯-3，22，23-三羟基-齐墩果烷（4），甘露醇（5），尿苷（6）和甘草素（7）。以上化合物均为首次从该真菌中分离得到。用滤纸片琼脂扩散法测定上述化合物的抗菌活性，其中化合物1、2和7具有明显抗金葡菌和耐甲氧西林金葡菌活性。     

一株红树植物秋茄内生真菌次级代谢产物的研究

目的 对红树植物秋茄内生真菌KCM2-1的次级代谢产物进行研究。方法 利用硅胶柱层析,Sephadex LH-20凝胶柱层析,半制备高效液相色谱仪等分离手段对秋茄内生真菌KCM2-1的提取物进行分离纯化,并利用各种波谱方法,结合文献对照,确定化合物结构。结果 从提取物中分离得到10个化合物,经鉴定为Palmarumycin C2（1）,Isosclerone（2）,Indole-3-carboxaldehyde（3）,Cyclo-（L-Pro-L-Val）（4）,Cyclo-（L-Pro-L-Leu）（5）,Cyclo-（L-Pro-L-Ile）（6）,4-Hydroxyphenylacetic acid（7）,2-（4-Hydroxyphenyl）ethanol（8）,Thymidine（9）,1,2-benzenedicarboxylic-dibutyl ester（10）。结论 10个化合物均为首次从红树植物秋茄内生真菌中分离得到,其中化合物1对人类Hela癌细胞株显示了显著的细胞毒活性。     

具有抗氧化活性的绞股蓝内生真菌的分离及研究

从药用植物绞股蓝根部分离内生真菌,筛选出抗氧化活性菌株并对其成分进行初步检测,鉴定目的菌株。采用常规方法分离绞股蓝根部内生真菌;DPPH法和Fe3+还原力测定抗氧化能力;TLC和HPLC检测内生真菌代谢产物中绞股蓝皂苷;分子生物学方法进行种属鉴定。分离得到的10株内生真菌中G4菌株具有一定的抗氧化活性,经检测发现G4的胞内产物中含有绞股蓝皂苷,鉴定其为柔膜菌目(Helotiales)。     

1株红树内生真菌Phomopsis sp. MGGP14112活性次级代谢产物研究

摘 要：目的 研究1株红树植物木果楝（Xylocarpus granatum Koenig）来源内生真菌Phomopsis sp. MGGP14112的次级代谢产物及其生物活性。方法 综合运用硅胶柱层析、Sephadex LH-20凝胶柱层析、半制备高效液相色谱（HPLC）等色谱分离技术对菌株的发酵产物进行分离纯化,通过核磁共振波谱（NMR）、质谱（MS）等多种现代波谱技术以及与文献数据对照,确定化合物的结构,对化合物进行抗氧化活性和抗虫活性测试。结果 从内生真菌Phomopsis sp.中分离鉴定出7个化合物1~7,结构分别为phomoxydiene B (1)、deacetylmycoepoxydiene (2)、mycoepoxydiene (3)、5,6-dihydroxy-2,3,6-trimethylcyclohex-2-enone (4)、4-methoxy-3,6-dimethylpyran-2-one (5)、petasol (6)和lithocarin A (7)。其中化合物3表现出一定的抗氧化活性,其IC50为3.83 mg/mL;化合物1~3和7对棉铃虫幼虫（Helicoverpa armigera Hubner）具有一定的生长抑制活性,其IC50值为200 μg/mL。结论 从红树内生真菌Phomopsis sp. MGGP14112中分离获得7个单体化合物,活性筛选发现1个具有抗氧化活性和4个具有棉铃虫幼虫生长抑制活性的化合物,具有重要的研究和应用价值。     

两株牛肝菌内生真菌的分离鉴定及活性初步研究

目的 从牛肝菌中分离内生真菌,并对其活性进行初步研究.方法 采用组织培养法从秦巴山区牛肝菌子实体中分离内生真菌,基于形态特征及ITS系统发育分析对内生真菌进行鉴定,以金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌、枯草芽孢杆菌为指示菌,检测内生真菌发酵产物的抑菌活性,并对其绿豆芽的抑制活性进行了研究.结果 分离获得2株内生真菌L3和L5,L3和黄瘤孢菌(Hypompces chrysosperums)序列同源性为99％;L5和毛霉属序列同源性为100％;两株菌的形态学特征分别与黄瘤孢菌和毛霉属形态特征一致.结论 内生真菌L3和L5,分别鉴定为黄孢瘤菌和毛霉属;这两株菌发酵液对枯草芽孢杆菌和金黄色葡萄球菌具有较强的抑制作用,对绿豆芽生长均具有抑制作用.     

闽浙马尾杉内生真菌分离纯化及产石杉碱甲菌株LC-MS／MS筛选

目的通过组织块分离法从闽浙马尾杉中分离内生真菌,利用LC-MS／MS筛选产石杉碱甲的内生真菌。方法将采集到的新鲜植物闽浙马尾杉进行表面灭菌消毒及将植物的根际土壤稀释,接种于含有3％的链霉素的PDA平板培养基上,挑取尖端菌丝进行分离、纯化和保藏;通过石杉碱甲菌株LC-MS／MS法对分离到的内生真菌进行快速的筛选,筛选出产石杉碱甲的内生真菌。结论通过组织块及稀释平板法从闽浙马尾杉植物中分离到306株内生真菌,其中根（G）8株,茎（J）65株,叶（Y）173株,茎尖（M）60株。通过LC-MS／MS筛选法共筛选到产石杉碱甲菌株15株,其中根（c）o株,茎（J）2株,叶（Y）11株,茎尖（M）2株。     

A new 2H-benzindazole compound from Alternaria alternata Shm-1, an endophytic fungus isolated from the fresh wild fruit of Phellinus igniarius

Journal of Natural Medicines - Endophytic fungi have been shown in recent years to produce a series of bioactive secondary metabolites. Several endophytic fungi were isolated from the fresh wild...     

The plant origins of herbal medicines and their quality evaluation

The caulis (stem and leaf) of Trachelospermum jasminoides (Lindl.) Lem. (Apocynaceae) is listed as the plant origin of Luoshiteng in the Chinese Pharmacopeia. However, preparations from the caulis of Ficus pumila L. (Moraceae) or Psychotria serpens L. (Rubiaceae) are distributed on the Chinese market. The fruit of Forsythia suspensa Vahl (Oleaceae) is listed as the plant origin of Forsythia Fruit in the Chinese Pharmacopeia, although the fruits of two Forsythia species, F. suspensa and F. viridissima Lindley, are listed as the plant origins in the Japanese Pharmacopeia, and fruits of three Forsythia species, F. viridissima, F. koreana Nakai, and F. suspensa, are listed in the Korean Pharmacopeia. The whole plant of Plantago asiatica L. (Plantaginaceae) is listed as the plant origin of Plantago Herb in the Japanese Phamacopeia, but the whole plants of two Plantago species, P. asiatica and P. depressa Wild, are listed as the plant origins in the Chinese Pharmacopeia. The leaves of two Plantago species, P. lanceolata L. and P. major L., are distributed as Plantain on the European market. Each of these herbal medicines is reviewed based on the differences in plant origins and their quality evaluation from the viewpoints of the morphological properties, chemical components, and biological activities, respectively.     

半红树植物海芒果内生与根际细菌多样性及抗农用真菌活性研究

摘要：勘探半红树植物海芒果内生和根际细菌多样性,挖掘具有高效广谱抗农用真菌活性菌株。以7种植物病原真菌为指示菌,采用平板对峙法对海芒果组织和根际中分离到的细菌进行抑菌活性筛选,并对活性菌株的基因组DNA进行聚酮合酶(PKS)基因与非核糖体肽合成酶(NRPSs)基因的扩增及检测。从海芒果组织和根际中共分离到454株细菌,隶属于35属71种,从中筛选出15株细菌在至少1个抗菌活性检测中显示阳性,总阳性率为21.13%,其中6株细菌对多种指示菌均有抑制活性;且15株活性菌株的基因组DNA均扩增出至少1种次级代谢产物合成基因。综上所述,广西山口红树林自然保护区内半红树植物海芒果内生和根际细菌具有丰富物种多样性、抗农用真菌活性及合成聚酮类和非核糖体肽类化合物的潜能。     

忽地笑鳞茎中产加兰他敏内生真菌的分离与鉴定

目的筛选产加兰他敏的内生真菌,为生产加兰他敏寻找新的途径。方法以忽地笑鳞茎为实验材料,分离内生真菌,利用HPLC对其发酵代谢产物进行检测,筛选能产生加兰他敏的菌株。结果从忽地笑鳞茎中分离出5株内生真菌,经HPLC分析,真菌GF-1能产生加兰他敏。经初步鉴定,GF-1为半知菌亚门(Deuteromycotina)青霉属(Penicillium LK.ex Fries)。结论忽地笑内生真菌有希望成为生产加兰他敏的新资源。     

Analgesic and Anti-inflammatory Activities of the Aqueous Extract of Plantago major L.

This study aimed to validate the pharmacological effects of Plantago major L., a medicinal plant used to decrease pain and inflammation. The aqueous extract (AE) was prepared from the dried ground leaves. Pretreatment with AE (1 g/kg, p.o.) decreased writhing induced by acetic acid in mice, but it did not change the tail flick responses to heat nociceptive stimuli. In rats, AE (1 g/kg, p.o.) reduced the paw edema and pleurisy induced by carrageenin, but it did not alter the paw edema induced by dextran. The effect of AE on the carrageenin inflammatory responses was more intense than that obtained on the ear edema induced by croton oil in mice. In addition, daily treatment with AE (1 g/kg/day during 8 days, p.o.) inhibited the exudative process induced by croton oil injected into the air pouch of rats. The results indicate that the aqueous extract of Plantago major is endowed with effective antiinflammatory and analgesic activities.     

浙江天目山和建德地区产银杏中内生真菌多样性的比较研究

目的比较银杏内生真菌在浙江天目山地区和建德地区以及在同一地区雄株与雌株银杏中的种群结构。方法利用PDA培养基对采集自天目山地区和建德地区以及天目山地区雄株和雌株的银杏内生真菌分别进行分离、纯化,根据菌株群落的培养特征及5.8S和ITS区片段序列相似性比较和系统发育分析,进行菌株鉴定。结果从天目山地区和建德地区分别分离得到440、382株内生真菌。天目山地区内生真菌归属到9目、14科、19属、28种;建德地区内生真菌归属到8目、10科、11属、26种。银杏各组织部位内生真菌的数量和种类按由多到少排序:枝条>树皮>叶。天目山地区雄株银杏内生真菌在定殖率和菌株个数上均高于雌株银杏。结论银杏内生真菌具有极其丰富的物种多样性,天目山地区银杏内生真菌在种类和数量上均多于建德地区。天目山地区雌雄株银杏在菌种种类和数量上存在差异,雄株银杏内生真菌在菌种数量上具有一定的优势。     

The toxicology mechanism of endophytic fungus and swainsonine in locoweed

Locoweed is a perennial herbaceous plant included in Astragalus spp. and Oxytropis spp. that contains the toxic indolizidine alkaloid swainsonine. The livestock that consume locoweed can suffer from a type of toxicity called locoism. There are aliphaticnitro compounds, selenium, selenium compounds, and alkaloids in locoweed. The toxic component in locoweed has been identified as swainsonine, an indolizidine alkaloid. Swainsonine inhibits lysosomal a-mannosidase and mannosidase II, resulting in altered oligosaccharide degradation and incomplete glycoprotein processing. Corresponding studies on endophytic fungi producing swainsonine have been isolated from a variety of locoweed, and these endophytic fungi and locoweed have a close relationship. Endophytic fungi can promote the growth of locoweed and increase swainsonine production. As a result, livestock that consume locoweed exhibit several symptoms, including dispirited behavior, staggering gait, chromatopsia, trembling, ataxia, and cellular vacuolar degeneration of most tissues by pathological observation. Locoism results in significant annual economic losses. Therefore, in this paper, we review the current research on locoweed, including that on locoweed species distribution in China, endophyte fungus in locoweed, the toxicology mechanism of locoweed, and the swainsonine effect on reproduction.     

Natural products with antitumor activity from endophytic fungi

Endophytic fungi are a seemingly inexhaustible source of novel bioactive natural products. Currently, more than 140 fungal metabolites have shown confirmed activity in tumor cell line bioassays. We present the chemical structures of these antitumor metabolites, their corresponding fungal endophytes and host plants, and the activities they exhibited, and briefly discuss some of their action mechanisms. This review emphasizes the role of endophytic fungi as an important source of leads for drug discoveries.     

三角叶黄连内生真菌的多样性及其抑菌活性的筛选

目的分离和鉴定三角叶黄连Coptis deltoidea根状茎、叶柄及叶中的内生真菌,并检测其抑菌活性。方法用平板法分离菌株,对照真菌鉴定手册,根据菌株的菌落形态、大小、颜色、生长速率、质地、生长培养基的颜色变化以及菌丝体和孢子的形态特征进行分类鉴定;选择大肠杆菌、金黄色葡萄球菌作为指示菌,采用杯碟法对内生真菌的发酵上清液进行体外抑菌试验。结果从三角叶黄连中分离获得的297株内生真菌,分属2目、3科、32属;抑菌实验表明:22株内生真菌的发酵液对指示菌均有不同程度的抑制作用,其中6号内生真菌同时对两种致病菌的抑菌效果明显。结论三角叶黄连内生真菌在种类、不同部位呈多样性分布,且部分内生真菌的代谢产物具有较强的抑菌作用,可作为筛选抑菌活性物质的新资源。