Salubrinal通过调节破骨细胞发育改善骨关节炎 胫骨平台不均匀沉降

摘要：目的 观察Salubrinal对早期骨关节炎（OA）小鼠胫骨平台不均匀沉降的治疗作用。方法 30只小鼠随机 分为对照（Sham）组、OA组和OA+Salubrinal（OA+Sal）组。采用手术切除小鼠膝关节内侧半月板建立OA模型,Sham 组只切开关节内侧皮肤;OA+Sal组小鼠皮下注射Salubrinal （1 mg/kg）2周,Sham组及OA组给予等量的生理盐水。采 用番红O和抗酒石酸酸性磷酸酶（TRAP）染色,观察胫骨平台内侧和外侧的组织形态学改变以及破骨细胞活性变化。 使用骨髓细胞的破骨细胞形成、迁移、黏附实验检测破骨细胞发育情况。结果 与Sham组相比,OA组破骨细胞发育 显著激活,软骨下骨的破骨细胞活性也明显增高;关节软骨OARSI评分、钙化软骨比例（CC/TAC）均显著升高（P＜ 0.05）;胫骨平台内侧软骨下骨的骨面积分数（B.Ar/T.Ar）明显增加（P＜0.05）,但外侧B.Ar/T.Ar、软骨下骨板（SBP）厚 度均显著降低（P＜0.05）。与OA组相比,OA+Sal组破骨细胞发育及软骨下骨破骨细胞活性被抑制,OARSI评分、CC/ TAC 均有所降低（P＜0.05）;而且,内外侧胫骨平台软骨下骨 B.Ar/T.Ar 和 SBP 厚度的不均匀改变均明显恢复（P＜ 0.05）。结论 Salubrinal通过调控破骨细胞发育对早期OA胫骨平台的骨重建和不均匀沉降有明显的改善作用。     

“杜仲-当归”调控NLPR3炎症小体对骨关节炎大鼠改善作用的研究

目的：探究药对“杜仲-当归”对骨关节炎（osteoarthritis,OA）大鼠膝组织的改善效果及对NLPR3炎症小体的调控。方法：24只雄性SD大鼠随机挑选18只采用前交叉韧带切断术（ACLT）进行OA造模，随后将大鼠分为正常组、OA模型组、杜仲-当归组和阳性药物组，每组6只，后两组分别给与“杜仲-当归”或西乐葆和奥泰灵混合液治疗8周。收集大鼠外周血，ELISA测定IL-1β、IL-6、IL-18、TNF-α水平；另取大鼠膝关节软骨组织，HE染色观察病理改变，番红-固绿染色观察软骨钙化情况并行OARSI评分，免疫组化和TUNEL染色分别检测膝关节软骨组织Caspase1、CollagenⅡ表达和软骨细胞凋亡情况，Western blot检测基质金属蛋白酶-13(MMP-13)、基质金属蛋白酶抑制剂-1(TIMP-1)、p53、p21、NLPR3、凋亡相关斑点样蛋白（ASC）、Pro-Caspase-1蛋白表达。结果：与正常组相比，OA模型组大鼠血清IL-1β、IL-6、IL-18、TNF-α水平均显著上升（P<0.01），膝关节损伤明显，OARSI评分显著升高（P<0.0...     

消骨痛汤对骨关节炎大鼠TGFβ1和BMP2表达观察

目的：观察中药方剂消骨痛汤对骨关节炎（OA）大鼠模型中软骨和滑膜中转化生长因子β1（TGFβ1）和骨形成蛋白2（BMP2）的表达。方法将40只Wistar大鼠随机分为4组,每组10只。正常对照组不予干预,其余3组采用膝关节腔内注射木瓜蛋白酶的方法建立骨关节炎大鼠模型,造模2周后开始给药,分别给予生理盐水（模型组）、双氯芬酸钠（西药组）和中药消骨痛汤（中药组）,灌胃8周后取软骨及滑膜标本。用免疫组化方法检测TGFβ1和BMP2在软骨和滑膜中的蛋白表达。结果模型组和西药组软骨、滑膜中TGFβ1、BMP2水平低于中药组和正常组,差异均有统计学意义（P＜0．05）。中药组和正常组TGFβ1和BMP2水平差异无统计学意义（P＞0．05）。结论消骨痛汤能上调OA大鼠软骨和滑膜中TGFβ1和BMP2的蛋白表达。     

芦荟多糖对大鼠骨关节炎治疗作用的体内和体外研究 #br#

目的 通过体外和体内实验探究芦荟多糖（APS）对大鼠骨关节炎（OA）的治疗作用。方法 体外分离SD 乳鼠的关节软骨细胞,培养至2代后,通过CCK-8法筛选实验组APS安全剂量。后续通过检测DNA含量和糖胺聚糖 （GAG）分泌量评估软骨细胞的增殖和基质降解情况,实时荧光定量PCR检测OA相关基因表达情况,酶联免疫吸附 测定（ELISA）法检测炎症因子水平;通过HE染色、番红O和免疫荧光染色等来观察其抗炎和软骨保护效果;并进一 步在SD大鼠骨关节炎模型中探究其作用效果。结果 通过CCK-8法筛选出剂量为5、10、20 g/L的APS作为低、中、 高剂量组。各剂量组的DNA含量均显著高于模型组（P＜0.05）;高剂量组GAG分泌量高于模型组（P＜0.05）。高剂 量组的蛋白聚糖（ACAN）和Ⅱ型胶原（COL2A1）基因表达水平相对模型组显著上调（P＜0.05）,而肿瘤坏死因子 （TNF）-α、白细胞介素（IL）-6、基质金属蛋白酶（MMP）-3和MMP-13基因表达显著下调（P＜0.05）。低、中、高剂量 组TNF-α和IL-6的分泌量显著低于模型组（P＜0.05）,HE和番红O染色也显示APS实验组的细胞形态较模型组好, MMP-13免疫荧光显示高剂量组的表达量显著低于模型组（P＜0.05）。体内实验软骨组织番红O染色及国际骨关节 炎研究学会（OARSI）软骨损伤评分结果显示APS干预的实验组关节软骨损伤程度明显低于模型组（P＜0.05）。结论 APS对OA具有一定的抗炎和软骨保护作用。     

电针治疗对兔膝骨关节炎软骨的影响

目的：初步探讨电针对兔膝骨关节炎（osteoarthritis,OA）模型软骨细胞修复的影响及作用机制。方法健康新西兰大白兔（雄性）60只,随机分为正常对照组,模型组和电针治疗组,每组20只,模型组和电针治疗组均采用伸直位管型石膏固定左膝关节,正常对照组和模型组于喂养6周后取内侧髁软骨观察造模后相关指标变化,治疗组在进行电针治疗15 d后以同样方法观察治疗后相关指标改变情况：软骨细胞形态、蛋白多糖和胶原等基质含量变化。结果正常对照组左膝关节无明显关节积液;模型组左膝关节大部分出现关节积液;电针治疗组大部分动物出现关节积液及滑膜增生。正常对照组软骨表面平整;模型组软骨表层出现溃烂缺失,甲苯胺蓝染色明显减退;电针治疗组软骨细胞数明显增多,甲苯胺蓝染色轻度减退。模型组软骨结构,软骨细胞和潮线完整性评分与电针治疗组比较,差异有统计学意义（ P ＜0．05）。正常对照组Mankin＇s甲苯胺蓝评分与模型组比较,差异有统计学意义（ P ＜0．05）,模型组与电针治疗组比较,差异有统计学意义（ P ＜0．05）。结论采用伸直位管型石膏固定法制作兔膝OA模型能较好地模拟OA 的发病过程。电针能有效治疗膝OA,有利于软骨细胞的修复。     

骨关节炎患者滑膜和关节软骨中金属蛋白酶组织抑制物—1的研究

目的：了解骨关节炎（OA）滑膜和关节软骨中金属蛋白酶酶抑制－1（TIMP－1）的分布及变化,探讨OA滑膜和关节软骨中TIMP－1变化与OA发病和治疗的关系。方法：应用免疫组织化学方法对26例OA及3例正常人的滑膜和关节软骨中TIMP－1的分布和阳性程度进行观察,结果：17例OA滑膜标本TIMP－1染色阳性,分布于滑膜衬里细胞、血管内皮细胞和质皮巨噬细胞等部位。阳性颗粒位于细胞浆中,程度多为弱阳性。16例OA关节软骨标本TIMP－1染色阳性。讨论：OA患者滑膜和关节软骨中TIMP－1分布减少和含量较低可能与OA的发病有一定关系。设想利用TIMP－1或其类似物可抑制关节软骨破坏和改善OA的病情。     

MicroRNA-204/-211敲除加重DMM小鼠骨关节炎滑膜增生和滑膜炎症

目的 观察microRNA-204/-211敲除对内侧半月板失稳术（destabilization of the medial meniscus,DMM）所致骨关节炎（osteoarthritis, OA）小鼠的影响。方法使用12只C57BL/6J(WT)小鼠和12只microRNA-204/-211基因敲除（miR-204/-211-dKO）小鼠，WT小鼠随机分为假手术组和DMM组，即WT-control组和WT+DMM组；miR-204/-211-dKO小鼠随机分为假手术组和DMM组，即dKO组和dKO+DMM组。WT+DMM组和dKO+DMM组行DMM。Von Frey法测定小鼠对疼痛的敏感性。3个月后取材，膝关节行微计算机断层扫描（Micro-CT）检测、组织染色以及免疫组化分析，RT-qPCR检测DRG组织中相关疼痛和炎症因子。结果与WT-control组小鼠相比，WT+DMM组小鼠出现骨赘形成、软骨下骨硬化、疼痛阈值下降等典型OA症状，软骨中Ⅱ型胶原的表达降低、MMP13的表达升高，DRG中炎症因子以及疼痛相关因子的表达明显升高。与此同时，miR-204/-211 dKO+...     

高频超声在膝骨关节疾病诊断及治疗中的应用价值

目的：探讨高频超声在膝骨关节疾病的诊断及治疗中的临床应用价值。方法选择80例膝骨关节疾病患者，随机分为观察组和对照组，每组40例。对照组行X线检查，采用解剖定位方法进行注药治疗；观察组行高频超声检查，在超声引导下行穿刺抽液注射术治疗，比较两组患者关节病变诊出情况、依从性穿刺成功率、并发症及治疗前、后两组患者的积液深度、视觉模拟评分（VAS）及WOMAC骨关节炎指数。结果观察组总检出率为95．0％，明显高于对照组的42．5％（P＜0．05），且在关节软骨回声改变、滑膜增厚、软骨变薄等方面的诊出情况明显高于对照组（P＜0．05）；观察组一次性穿刺成功率为100．0％，明显高于对照组的47．5％（ P＜0．05），观察组未出现因操作导致的并发症，并发症发生率明显低于对照组（ P＜0．05）；治疗3周后，观察组患者的积液深度、VAS评分、WOMAC骨关节炎指数均明显低于对照组（ P＜0．05）。结论高频超声能够准确、及时地将膝骨关节病变、积液、软骨情况反映出来，在超声引导下行穿刺抽取注射术治疗的一次性穿刺成功率高且无并发症。     

滑膜切除对全膝关节置换出血及临床效果的影响

目的：为了探讨单纯膝关节骨关节炎（OA）患者膝关节表面置换术（TKR）中滑膜切除对围手术期失血量及术后功能评分影响。方法：自2011年2月至2014年3月,对符合标准的187例OA患者行TKR,患者随机分两组,其中一组行滑膜切除。手术时间、住院时间、隐性失血、引流量、输血率、术后3天膝关节活动范围纳入评估指标。术后4周和12月随访VAS疼痛评分,KSS功能评分,髌骨浮沉试验。结果：滑膜切除组隐性失血量、平均引流量、平均手术时间（p<0.05）均显著高于对照组。余统计参数无明显差异。结论：TKR+滑膜切除对OA患者没有优势,且增加了失血量及手术时间。     

机械加载对大鼠薄型子宫内膜的修复作用

摘要：目的 探究脉冲式机械加载对薄型子宫内膜的疗效。方法 30只雌性SD大鼠随机分成假手术组（Sham 组）、薄型子宫内膜模型组（TE组）和机械加载治疗组（TE+L组），每组10只。在动情期采用95%乙醇宫腔注射法建 立薄型子宫内膜模型，Sham组宫腔注射生理盐水，TE+L组造模次日接受机械加载，加载力为5 N，频率为15 Hz，时间 为5 min/d，连续治疗15 d。HE染色观察子宫内膜组织形态变化，测量子宫内膜厚度、子宫内膜面积和腺体数目，免 疫组化染色法检测血管内皮生长因子（VEGF）和细胞增殖核抗原（Ki-67）的表达。结果 子宫组织学结果显示，TE 组子宫内膜厚度、子宫内膜面积和腺体数目较Sham组明显减少（P＜0.05），而TE+L组子宫内膜厚度、子宫内膜面积 和腺体数目较TE组明显增加（P＜0.05）。免疫组化染色结果显示，TE组子宫内膜中VEGF和Ki-67蛋白的阳性表达 率较Sham组显著降低（P＜0.05）。经过机械加载治疗后，TE+L组子宫内膜中VEGF和Ki-67蛋白的阳性表达率较TE 组显著升高（P＜0.05）。结论 机械加载能够有效修复大鼠薄型子宫内膜，该作用可能与机械加载促进子宫内膜的 细胞增殖和血管生成有关。     

鹿瓜多肽对膝骨关节炎保护作用的动物实验研究

目的通过观察鹿瓜多肽对动物膝骨关节炎（OA）软骨的影响,探讨鹿瓜多肽对骨关节炎的治疗作用。方法6个月龄新西兰大白兔18只,采用随机数字表法分为3组,每组各6只,正常空白对照组：非手术,正常喂养;模型对照组：行双膝关节部分软骨缺损手术;观察组：行双膝关节部分软骨缺损手术,术后第2周开始,正常空白对照组、模型对照组不予任何处理;观察组按0．6ml／kg腹腔注射鹿瓜多肽,1次／d,术后12周处死动物。切取胫骨平台关节软骨大体观察,苏木素-伊红及甲苯胺蓝染色,检测血清、关节液。结果正常空白对照组动物模型关节软骨正常;模型对照组动物模型关节软骨缺损部分修复;观察组动物模型关节软骨缺损完全修复。观察组关节软骨形态学上明显改善,血清及关节液中超氧化物歧化酶（superox—idedismutase,SOD）分别为（117．31±11．49）mol／L、（76．28±19．11）mol／L,明显高于模型对照组[（102．37±11．54）mol／L,（57．58±17．31）mol／L]（P〈0．01）。结论鹿瓜多肽能够降低兔膝关节骨关节炎软骨的退变,通过抑制关节软骨炎症,加强关节软骨下骨的吸收应力的能力来保护关节软骨。     

降钙素对膝骨关节炎保护作用的动物实验研究

目的通过观察降钙素（Calcitonin,CT）对动物膝骨关节炎（OA）软骨的影响,探讨降钙素对OA的治疗作用。方法6个月龄新西兰大白兔18只,随机分为3组,每组各6只,正常空白对照组（A组）：非手术,正常喂养;模型对照组（B组）：行双膝关节部分软骨缺损手术;CT组（C组）：行双膝关节部分软骨缺损手术,术后第2周开始,A、B组不予任何处理;C组按15U/kg皮下注射CT,1次/2天;共给药12周;术后12周处死动物。切取胫骨平台关节软骨大体观察,HE及甲苯胺蓝染色,检测血清、关节液。结果A组动物模型关节软骨正常;B组动物模型关节软骨缺损部分修复;C组动物模型关节软骨缺损完全修复。与B组比较,C组关节软骨形态学上明显改善,血清及关节液中SOD明显升高（P〈0.01）。结论降钙素能够明显降低兔膝关节骨关节炎软骨的退变,通过抑制关节软骨炎症,加强关节软骨下骨的吸收应力的能力来保护关节软骨。     

Controlled release of celecoxib inhibits inflammation,bone cysts and osteophyte formation in a preclinical model of osteoarthritis

Major hallmarks of osteoarthritis (OA) are cartilage degeneration, inflammation and osteophyte formation. COX-2 inhibitors counteract inflammation-related pain, but their prolonged oral use entails the risk for side effects. Local and prolonged administration in biocompatible and degradable drug delivery biomaterials could offer an efficient and safe treatment for the long-term management of OA symptoms. Therefore, we evaluated the disease-modifying effects and the optimal dose of polyesteramide microspheres delivering the COX-2 inhibitor celecoxib in a rat OA model. Four weeks after OA induction by anterior cruciate ligament transection and partial medial meniscectomy, 8-week-old female rats (n?=?6/group) were injected intra-articular with celecoxib-loaded microspheres at three dosages (0.03, 0.23 or 0.39?mg). Unloaded microspheres served as control. During the 16-week follow-up, static weight bearing and plasma celecoxib concentrations were monitored. Post-mortem, micro-computed tomography and knee joint histology determined progression of synovitis, osteophyte formation, subchondral bone changes, and cartilage integrity. Systemic celecoxib levels were below the detection limit 6?days upon delivery. Systemic and local adverse effects were absent. Local delivery of celecoxib reduced the formation of osteophytes, subchondral sclerosis, bone cysts and calcified loose bodies, and reduced synovial inflammation, while cartilage histology was unaffected. Even though the effects on pain could not be evualated directly in the current model, our results suggest the application of celecoxib-loaded microspheres holds promise as novel, safe and effective treatment for inflammation and pain in OA.     

钙敏感受体在人骨关节炎软骨中的表达研究

【摘要】目的 研究钙敏感受体(CaSR)在人骨性关节炎(OA)软骨中的表达强度,探讨其与OA 发病机制的关 系。方法收集5 例因膝关节OA 接受全膝关节置换术患者的股骨远端及胫骨近端标本,HE 染色后根据Collins 病 理学分级标准进行关节软骨退变分级,Collins 0 级切片8 张为软骨正常组,Collins Ⅱ级切片8 张为软骨退变组,免疫 组织化学染色后比较2 组软骨组织内CaSR 的表达强度。结果CaSR 在OA 软骨中阳性表达,CaSR 在软骨正常组 的表达强度低于退变软骨组（评分：1.63±0.95 vs 3.52±0.78,t=8.99,P＜0.05）。结论CaSR 活化与关节软骨退变 有关。     

Intra-articular Injection of Urinary Bladder Matrix Reduces Osteoarthritis Development

Micronized porcine urinary bladder matrix (UBM) is an extracellular matrix biomaterial that has immunomodulatory and pro-regenerative properties. The objective of this study was to assess the ability of UBM to alter disease progression in a mouse model of post-traumatic osteoarthritis (OA). Ten-week-old wild-type C57BL/6 male mice underwent anterior cruciate ligament transection (ACLT) to induce OA. Two weeks after ACLT, UBM (50 mg/mL) or saline was injected into the mouse joint. At 4 and 8 weeks post-ACLT, cartilage integrity was assessed using OARSI scoring of histology, pain was evaluated, and joints were harvested for quantitative RT-PCR analysis of cartilage-specific and inflammatory gene expression. UBM-treated animals showed improved cartilage integrity at 4 and 8 weeks and reduced pain at 4 weeks compared to saline-injected mice. Animals injected with UBM expressed higher levels of genes encoding structural cartilage proteins, such as collagen2α1 and aggrecan, as well as anti-inflammatory cytokines, including interleukins 10 and 4. UBM decreased cartilage degeneration in the murine ACLT model of OA, which may be due to reduced inflammation in the joint and maintenance of high expression levels of proteoglycans.     

Targeting macrophagic SHP2 for ameliorating osteoarthritis via TLR signaling

Osteoarthritis (OA), in which M1 macrophage polarization in the synovium exacerbates disease progression, is a major cause of cartilage degeneration and functional disabilities. Therapeutic strategies of OA designed to interfere with the polarization of macrophages have rarely been reported. Here, we report that SHP099, as an allosteric inhibitor of src-homology 2-containing protein tyrosine phosphatase 2 (SHP2), attenuated osteoarthritis progression by inhibiting M1 macrophage polarization. We demonstrated that M1 macrophage polarization was accompanied by the overexpression of SHP2 in the synovial tissues of OA patients and OA model mice. Compared to wild-type (WT) mice, myeloid lineage conditional Shp2 knockout (cKO) mice showed decreased M1 macrophage polarization and attenuated severity of synovitis, an elevated expression of cartilage phenotype protein collagen II (COL2), and a decreased expression of cartilage degradation markers collagen X (COL10) and matrix metalloproteinase 3 (MMP3) in OA cartilage. Further mechanistic analysis showed thatSHP099 inhibited lipopolysaccharide (LPS)-induced Toll-like receptor (TLR) signaling mediated by nuclear factor kappa B (NF-κB) and PI3K–AKT signaling. Moreover, intra-articular injection of SHP099 also significantly attenuated OA progression, including joint synovitis and cartilage damage. These results indicated that allosteric inhibition of SHP2 might be a promising therapeutic strategy for the treatment of OA.     

膝关节液透明质酸含量与滑膜炎程度的关系

目的探讨膝关节液透明质酸含量与滑膜炎程度之间的关系。方法酶联免疫吸附试验(ELISA)检测膝关节疾病(OA)患者102例共104膝的关节液透明质酸含量,并在关节镜下应用Ayral滑膜炎评分法和Outerbridge关节软骨损伤评分法评价膝滑膜炎和关节软骨损伤程度。采用t'检验、Spearman相关分析和多元线性回归分析进行统计分析。结果Ayral滑膜炎评分≥60分组的关节液透明质酸含量比Ayral滑膜炎评分<60分组高(P<0.001)。104膝关节液透明质酸含量与Ayral滑膜炎评分呈正相关(茁'A=0.497,P<0.001),与Outerbridge软骨损伤累计评分呈负相关(茁'o=-0.364,P<0.001),且Ayral滑膜炎评分的影响较大。关节液透明质酸含量与Ayral滑膜炎评分在Ayral滑膜炎评分≥60分组呈正相关(r=0.306,P<0.05),在Ayral滑膜炎评分<60分组无相关性(r=-0.144,P>0.05)。与非OA组相比,OA组的关节液透明质酸含量较低(P<0.05),而Ayral滑膜炎评分较高(P<0.01)。结论膝关节液透明质酸可作为生物标记物反映滑膜炎的程度,关节液透明质酸含量的增高提示滑膜炎较重。     

白细胞介素-1在骨性关节炎的水平及作用

目的测定正常组、早、中和晚期膝骨关节炎（KOA）患者血清和关节液中白细胞介素-1（IL-1）水平的变化,探讨IL-1在KOA发病中所起的作用及其用于临床上判断KOA早期病理变化的可能性。方法应用酶联免疫吸附技术（ELSIA）检测10例健康体检者和30例早、中、晚期KOA患者血清和关节液中IL-1水平,通过关节镜观察并切取关节滑膜组织,标本分别行甲苯胺蓝染色,光镜下观察。结果KOA患者早、中、晚期血清和关节液中IL-1含量显著高于正常对照组,且随病情的进展而含量逐渐升高,差异有统计学意义（P〈0.01）,关节液中IL-1水平与Mankin分值之间呈高度正相关,关节液IL-1水平越高,关节软骨的病变程度越重。结论IL-1与KOA患者免疫炎症有关,其水平高低可反映病情活动变化情况。