胞壁酰二肽多异戊烯乙酰衍生物的免疫学活性

本文作者对6种多异戊烯乙酸和6种胞壁酰二肽(MDP)衍生物的免疫学活性进行了研究。取350～400g的雌性豚鼠,足垫免疫细菌α-淀粉酶(BαA)抗原,总剂量为300μg/0.4ml,抗原溶剂是弗氏不完全佐剂(FIA)。免疫时对照组不用佐剂,试验组使用不同种类的佐剂(100μg)。4周后从后眼窝静脉丛取血,用酶学方法测定抗BαA抗体。取血后24小时皮内注射100、50或10μg BαA,于注射后4、24和48小时观察皮肤反应。抗原为单偶氮苯胂酸盐(ABA)-N-乙酰-L-酪氨酸(50μg),免疫两周后皮内注射ABA-牛血清白蛋白(BSA)(50或10μg)并于     

脂质体作为潜在的疫苗载体的作用:在霍乱毒素和人疟子孢子抗原中的应用

本文作者分别在霍乱毒素(CT)抗原和恶性疟原虫外周子孢子(CS)蛋白的16个氨基酸残基-白蛋白合成肽抗原中加入不同佐剂,以比较研究不同佐剂对抗原的作用。这些佐剂是:(1)脂质体(L)[神经节苷脂(G_(M1))];(2)L[G_(M1)+L_(18)-胞壁酰二肽(MDP)];(3)L(G_(M1)+B_(20)-MDP);(4)L(G_(M1)+脂质A);(5)弗氏完全佐剂(FCA)。作者用家兔作试验,试验组注射佐剂+CT,对照组仅注射CT。注射后3和4周,用固相放射免疫试验(SPRIA)测定抗CTRIA单位(×10~(-3))。     

免疫佐剂脂质体的γ干扰素诱导效应

据报道脂质体作为一种有效的佐剂能辅助某些抗原诱导体液免疫。作者以卵白蛋白(OVA)为模型抗原,比较脂质体与氢氧化铝(Alum)两种佐剂的效果,并依据细胞因子的产生来评价它们佐剂性能的差异。     

合成免疫佐剂胞壁酸二肽及相似物使用的新进展

由于分枝杆菌在免疫应答中的多种作用,不少研究工作者已广泛使用。抗结核感染的特异免疫能力只局限于某些菌株,然而大量品种的分枝杆菌可引起非特异抗感染作用及增强肿瘤免疫性。当把这些微生物与抗原制成油包水佐剂注射,也能产生迟发超敏感性,并显著提高体液抗体水平。除了这些应答,注射分枝杆菌能刺激网状内皮系统并引起几种其他的生物学反应,其中很多被考虑     

明胶微球作免疫佐剂的潜能

作者以人体丙种球蛋白(HGG)为抗原,制备明胶微球进行包裹研究并与弗氏不完全佐剂(FIA)进行免疫学比较,以期评价微球作为新佐剂的可能性。 具体方法是:含HGG明胶溶液中加氯仿和甲苯,加戊二醛饱和液进行交联。混合液用超声制成油包水乳化液。制好的微球经洗涤、离心、悬于磷酸盐缓冲盐水(PBS)中。用荧光素异硫氰酸盐(FITC)标记HGG以进行体外HGG释放实验。免疫用Balb/c雌鼠,皮下注射HGG-明胶微球,用FIA作对照,35天后用HGG加强免疫,定期眼眶采血。用ELISA测定HGG特异性IgG和IgM抗体。通过鼠足垫皮下注射,估计迟发型超敏反应(DTH)。通过对注射部位的组织切片观察,进行炎症反应评估。 结果如下:(1)所有微球呈球形,其大小随戊二醛浓度升高而缩小,微球大小与球中水含量成正比。HGG释放实验揭示,微球释放速率与戊二醛浓度成反比。(2)皮下注射含     

异甘草酸镁对D-Gal/FCA诱发小鼠免疫性肝损伤的影响

目的:观察异甘草酸镁(MgIG)对D-半乳糖胺(D-Gal)和弗氏全佐剂(FCA)诱发小鼠慢性免疫性肝损害的影响.方法:C57BL/6J小鼠腹腔注射D-Gal 1500 mg·kg-1,同时肢体皮下注射FCA 5 mL·kg-1,每周一次,连续13周,诱发免疫性肝损伤.在注入D-Gal/FCA 2 h后腹腔注射MgIG 50,100和200 mg·kg-1,qd,连续13周.末次给药后处死各组小鼠,取血作生化和一氧化氮(NO)检测;取肝组织作病理观察;取脾脏测重量.结果:MgIG能明显改善D-Gal/FCA诱发免疫性慢性肝损伤小鼠的肝功能及降低血浆NO水平,使肝组织损伤减轻,提高小鼠存活率,并显示剂量依赖.结论:MgIG对D-Gal/FCA诱发小鼠慢性免疫性肝损伤具有治疗作用.     

弗氏完全佐剂对小鼠细胞免疫功能的影响

弗氏完全佐剂(CFA)是一种常用免疫佐剂,其提高体液免疫应答的作用已被公认,而对细胞免疫应答的影响鲜有报道。作者测定了一些注射佐剂后小鼠的细胞免疫应答指标,同时测定体液免疫指标对CFA剂量作一监测,报告如下。1材料和方法1.1实验材料1.1.1实验动物昆明种小鼠24只,由本校实验动物室提供。1.1.2主要试剂弗氏完全佐剂,为sigma公司生产。1.2实验方法1.2.1CFA对小鼠产生抗卵黄抗体水平的影响昆明种小鼠24只,体质量18~22g,雌雄随机分组,8只/组,以5倍稀释鸡卵黄为抗原。免疫方法及程序见表1。表1卵黄抗原免疫程序组别注射物第1天第4天第10…     

SD大鼠被动皮肤过敏实验影响因素的研究

目的探讨SD大鼠被动皮肤过敏反应（PCA）的影响因素,为选择敏感实验条件提高实验准确性提供依据。方法采用SD大鼠作为实验动物,在不同的实验条件下（加或不加佐剂、抗原种类、致敏剂量、致敏途径、致敏次数）进行PCA实验。结果采用卵白蛋白（OVA）作为抗原,SD大鼠在不加佐剂时,PCA反应为阴性;在加入佐剂时PCA反应均为阳性,蓝斑直径及阳性反应率从大到小依次为：氢氧化铝凝胶〉百白破疫苗〉弗氏完全佐剂。采用氢氧化铝凝胶作为佐Nu,-J,OVA对SD大鼠的免疫原性优于牛血清白蛋白（BSA）。增加致敏剂量能使大鼠背部蓝斑直径明显增大。腹腔致敏和背部皮下致敏均可良好的PCA反应,两者之间无明显差异性。增加致敏次数对PCA反应无明显影响。结论采用SD大鼠进行PCA实验最佳实验条件为：采用OVA作为抗原,氢氧化铝凝胶作为佐剂,两者按照l：1混合后,皮下隔日致敏,OVA浓度为10mg·mL。,致敏体积为lmL,共致敏3次,末次致敏后10天腹主动脉取血,分离抗血清,皮下被动致敏,24h后以相同量抗原静脉激发。     

弗式不完全佐剂诱导小鼠腹腔淋巴管瘤模型方法的改进

目的改进弗式不完全佐剂诱导小鼠腹腔淋巴管瘤模型的建立方法。方法 20只C57BL/6小鼠中的16只按照小鼠体重随机分为两组,分别采取d1、d15(实验Ⅰ组)和d1、d8、d15(实验Ⅱ组)模式每次腹腔注射弗氏不完全佐剂与PBS以1:1体积比配制的乳悬液0.2ml。首次注射后约3个月,脱颈处死小鼠,观察小鼠腹腔内诱导形成的白色肿瘤样组织的生长部位,用游标卡尺记录大小,随后对其进行病理组织学观察,并通过免疫组化表达淋巴管内皮细胞透明质酸受体1(LYVE-1)来进一步证实为淋巴管瘤。另外4只小鼠分别作为两组的对照组(对照Ⅰ组和对照Ⅱ组)按照与实验组对应的注射模式腹腔注射0.2 ml PBS缓冲液。结果实验Ⅰ组、实验Ⅱ组小鼠腹腔内成瘤率均为100%。实验Ⅰ组每只小鼠腹腔成瘤总体积(227.82±124.87)mm3,明显小于实验Ⅱ组的(365.38±78.74)mm3(P<0.05)。实验Ⅰ组、实验Ⅱ组的肿瘤样组织均经HE染色后光学显微镜下观察,及免疫组化均强阳性的表达LYVE-1,证实为淋巴管瘤。对照Ⅰ组、对照Ⅱ组4只小鼠腹腔均未见任何新生物生成。结论利用C57BL/6小鼠腹腔注射弗氏不完全佐剂,以d1、d8、d1...     

辐射去毒内毒素用作口蹄疫疫苗佐剂

细菌内毒素是一种极好的佐剂,但具有毒性作用.内毒素经辐射去毒后,能保持其免疫刺激性及佐剂活性.作者观察了灭活口蹄疫(FMD)病毒疫苗添加辐射去毒内毒素(RD-LPS)佐剂后,对不同动物免疫原性的增强作用.实验一:C型单价疫苗含228.8F和GFMD抗原,经1∶8稀释后,该疫苗含28.6F和GFMD抗原.这两种不同抗原量的疫苗样品按每2ml分别含200、400和800/μg RD-LPS制备,其效力用20～22g第1代BALB/c和CBA近交小鼠按E-指数法测定.结果表明,     

基因工程人类免疫缺陷症病毒疫苗的安全性和免疫原性

作者研究了env2-3(SF2)抗原与胞壁酰三肽二棕榈磷脂酰乙醇胺(MtP-PE)佐剂合用作为1型人类免疫缺陷症病毒(HIV-1)亚单位疫苗对人体的安全性和免疫原性。受试者为25名未感染过HIV的健康者。env2-3(SF2)为代表HIV-1SF2分离物env基因gp120区的未糖基化多肽,用基因工程方法制备,其分子量约56000,env2-3(SF2)抗原纯度>95%。佐剂为MTP-PE,最后疫苗是在注射前将乳化抗原与佐剂混合制得。采取两种免疫程序,单用佐剂(每次100μg)或在相同佐剂中加低剂量env2-3(SF2)(每次50μg)或加大剂量env2-3(SF2)(每次     

不同剂量弗氏完全佐剂对类风湿关节炎模型大鼠复制的影响

目的观察不同剂量的弗氏完全佐剂对类风湿关节炎(Rheumatoid arthritis,RA)模型复制的影响,探讨RA模型复制中弗氏完全佐剂的最佳注射量,以期为RA的实验研究提供较好的模型复制方法。方法采用"病证结合"复合佐剂性关节炎模型复制方法,即"风、寒、湿"环境因素+弗氏完全佐剂的模型复制方法,观察不同注射量的弗氏完全佐剂对RA模型复制的影响。结果 0.1mL模型复制组有自愈的趋势;0.15mL模型复制组大鼠体质量、跖围改变呈进行性下降趋势,X线可见骨质破坏情况较贴近临床患者骨质的改变;0.2mL模型复制组骨质呈粉碎性破坏。结论 0.15mL注射量可能是RA模型复制中的最佳注射量。     

注射用鲨鱼肝再生因子对小鼠免疫性肝损伤的影响

观察鲨鱼肝再生因子 (sHRF)对小鼠免疫性肝损伤的影响。小鼠注射BCG后再注射低剂量LPS ,造成免疫性肝损伤模型。测定血清中ALT、AST、NO的含量及对肝组织进行病理组织学检查。sHRF能显著降低BCG和LPS诱导的免疫性肝损伤小鼠血清ALT、AST和NO含量的升高 (P <0 .0 5 ) ;并减轻对肝脏细胞的病理性损伤。实验表明sHRF对小鼠免疫性肝损伤有保护作用。     

豚鼠注射合成佐剂MDP后体液和细胞免疫反应的动力学:与弗氏完全佐剂相比较

MDP(N-乙酰胞壁酰-L-丙氨酰-D-异谷氨酰胺)是细菌细胞壁一种普遍存在的成份,能替代弗氏完全佐剂中的分枝杆菌以增强机体对抗原的体液和细胞免疫反应。本文对比MDP,未酰胺化的MDP类似物(MDPA),弗氏不完全佐剂(FIA)以及含丁酸分枝杆菌的弗氏完全佐剂(FCA)引起豚鼠抗卵白蛋白的体液和细胞免疫反应的动力学。实验方法     

茯苓总多糖对H1N1流感疫苗和乙肝疫苗抗原的佐剂作用

目的研究茯苓总多糖(PCP)对人用H1N1流感疫苗抗原和乙肝疫苗抗原的佐剂作用。方法在50℃条件下,采用水提、醇沉、透析和冷冻干燥方法制备PCP。苯酚-硫酸法测定总多糖含量,凝胶渗透色谱法测定多糖相对分子质量分布,毛细管电泳法测定单糖组成。H1N1流感病毒裂解液为抗原(每鼠3μg),与PCP(每鼠0.2或1.0 mg)联用,肌内注射免疫小鼠1次,免疫后14 d采用ELISA法测定小鼠血清特异性抗体Ig G滴度。乙肝表面抗原(HBs Ag)蛋白为抗原(每鼠2μg),与PCP(每鼠1.0 mg)联用,肌内注射免疫小鼠2次,于第2次免疫后14,21,28和35 d,采用ELISA法测定小鼠血清特异性抗体Ig G滴度。结果PCP中多糖含量为40.8%,由岩藻糖、甘露糖、葡萄糖和半乳糖组成,摩尔比为1.00∶1.36∶0.48∶2.67。PCP与H1N1流感抗原联用免疫小鼠1次,能明显提高小鼠抗原特异性抗体Ig G滴度(P<0.05),效果与铝佐剂相当。与单用HBs Ag抗原组相比,PCP与HBs Ag联用初次免疫即能显著提高小鼠血清抗原特异性抗体滴度(P<0.01),且与铝佐剂组无显著性差异;二次免疫后14~21 d,PCP与HBs Ag联用组小鼠抗体水平进一步升高,且高于铝佐剂组(P<0.05),28~35 d PCP与HBs Ag联用组小鼠抗体滴度与铝佐剂组相当。结论PCP对人用H1N1流感疫苗和HBs Ag疫苗具有良好的佐剂活性,该多糖能显著提高小鼠体液免疫功能。     

三种新型聚集体结构佐剂在调节淋巴细胞增殖及Th1和Th2型细胞因子应答中的作用

对于佐剂活性 ,传统上常以其诱导体液免疫应答的能力来评价 ,而忽略了其对细胞免疫的影响。细胞因子是免疫应答期间效应淋巴细胞功能的重要介质 ,疫苗策略应考虑Th细胞 (Th1 / Th2 )诱生的细胞因子的平衡。作者对三种新型分子聚集体配方佐剂〔蕃茄苷 (RAM1 )、糖基酰胺脂 (RAM2 )和第 5代树状聚合物 (RAM3)〕的免疫增强性进行了比较 ,并评估了这些佐剂与可溶性蛋白抗原一起应用时增强 Th1或 Th2应答的能力。　　作者以卵清蛋白 (OVA)为抗原 ,以上述三种新型聚集体为实验佐剂 ,并用结核菌素、Al(OH) 3和弗化不完全佐剂 (FIA)作对照…     

应用免疫增强性重组流感病毒体及其他佐剂提高小抗原的免疫原性

近几十年来,已建立了多种增强免疫原性的方法,如铝盐、蛋白体、免疫刺激复合物(ISCOM)、脂质体、与细菌产物或衍生物连接、与表面活性剂结合及细胞因子的应用。作者设计了一种以免疫增强性重组流感病毒体(IRIV)为佐剂的甲型肝炎灭活疫苗,在这种新疫苗中作者结合了几种不同的免疫刺激作用:磷脂囊泡的免疫增强作用,免疫系统对血凝素(HA)抗原决定簇的识别,HA对含有唾液酸的巨噬细胞和免疫活性细胞受体的结合力以及HA通过激发膜融合,介导抗原进入巨噬细胞胞质。这种新疫苗在甲型肝炎病毒(HAV)抗体阴性的志愿者中具有良好的免疫原性,且局部反应轻微.因此,IRIV为今后佐剂疫苗的设计提供了一种新方法。     

抗原诱导豚鼠离体胸主动脉的变态收缩反应

目的:研究血管过敏变态反应并观察血管变态反应过程中肥大细胞释放介质的影响。方法:迅速截取卵蛋白致敏豚鼠的胸主动脉环(约3mm)悬挂于10ml氧饱和的克亨氏液浴槽中,记录不同试剂对抗原诱导的胸主动脉收缩反应影响。结果:抗原(卵蛋白)引起的胸主动脉收缩于4min达到最大,9min约恢复一半,至30min时基本恢复到基线,约为最大值的(8±2)% ;苯海拉明对抗原引起的血管收缩反应有延迟作用并显著降低其最大收缩峰值,而法莫替丁不影响抗原对血管的收缩作用,但可部分减弱苯海拉明的作用;5-HT₂受体抑制剂,酮色林、环加氧酶抑制剂,吲哚美锌和脂氧合酶抑制剂,咖啡酸对抗原诱导的血管收缩均有显著的抑制作用;当苯海拉明、法莫替丁、酮色林、吲哚美锌和咖啡酸一起孵育胸主动脉环时,抗原诱导的血管收缩作用基本被完全抑制。结论:上述结果表明,组胺、5-HT和花生四烯酸代谢物对抗原诱导的胸主动脉血管收缩反应均有调节作用。     

细菌DNA免疫增强作用的研究

探讨DNA佐剂对蛋白和多糖抗原的免疫增强作用。从大肠杆菌和黄杆菌中提取纯化DNA，采用超声波进行物理降解。制备不同分子量、不同剂量的DNA佐剂，混合抗原后对小鼠进行免疫。实验结果表明，DNA佐剂能诱导Th1型体液免疫反应；血清中IgG滴度和IgG2a／IgG1l的比率随DNA用量增加，DNA片断的增大而提高。     

Algammulin:一种新的疫苗佐剂的佐剂活性

新的疫苗佐剂Algammulin是由嵌入明矾的免疫刺激物γ菊粉(g-IN)所组成,其大小为1～2μm颗粒。g-IN是一种较强活性的佐剂,明矾具有蛋白载体作用,本文以钥孔蜮血蓝蛋白(KLH)作为抗原,在小鼠中分析Algammulin的佐剂活性。g-IN与明矾的比率为10:1(W/W)。选择5～8周龄的Balb/c小鼠,随机分成几个实验组(每组8～20只),经腹腔分别注射含不同量的佐剂Algammulin、g-IN、明矾的KLH盐水溶液(KLH剂量为0.1、1、10μg),