应用灰色数列预测模型预测去卵巢大鼠体重的变化

目的:探讨去卵巢大鼠的体重变化规律。方法:运用灰色GM(1,1)模型,对去卵巢大鼠的体重变化进行分析和预测。结果:灰色GM(1,1)模型对各组大鼠体重变化的预测精度高,结果可靠。结论:去卵巢大鼠的体重变化可用灰色GM(1,1)模型进行预测。     

狗皮膏中铅体外吸收数据的灰色GM(1,1)拟合研究

目的:对传统制剂狗皮膏中铅透皮吸收数据进行灰色GM(1,1)模型拟合并与相关模型进行比较。方法:采用Franz扩散池进行体外透皮实验,通过累加生成建立透皮吸收数据的灰色GM(1,1)模型。结果:以平均相对误差和灰色绝对关联度为评价标准进行拟合精度的比较,以预测值与实测值的相对误差作预测精度的比较。结论:灰色GM(1,1)模型的拟合精度较高,可进行短期预测。     

SD大鼠骨髓基质细胞体外培养及分化研究

目的 研究SD大鼠骨髓基质细胞(marrow stromal cells,MSCs)的生物学特性及其成骨和成脂分化能力.方法 处死16只6月龄SD大鼠动物,非连续密度梯度离心分离大鼠MSCs,传代后分别在成骨及成脂培养基中诱导培养14天,观察细胞形态,绘制细胞生长曲线,通过组织特染对MSCs的成骨,成脂表型进行鉴定,计数阳性染色细胞百分比.结果 SD大鼠MSCs在体外具有成骨细胞分化潜力,油红0染色显示成脂诱导培养基可定向诱导其分化.结论 本实验成功分离SD大鼠MSCs且保持分化能力.     

TNF-α抑制多发性骨髓瘤患者骨髓间充质干细胞成骨潜能

目的 探讨多发性骨髓瘤(MM)患者骨髓间充质干细胞(MSCs)成骨潜能变化,以及肿瘤坏死因子α(TNF-α)对MSCs成骨潜能的影响.方法 分离培养MM患者和正常人的MSCs,鉴定其生物学特性.体外成骨诱导后,实时RT-PCR检测其成骨指标的变化,Von Kossa染色测定其钙质沉积,ELISA法检测MM患者和正常人骨髓血清中TNF-α的浓度.MSCs成骨体系中加入TNF-α,2周后检测MSCs成骨指标mRNA表达量及其钙质沉积程度.结果 MM患者的MSCs成骨潜能较正常人降低,其骨髓血清中的TNF-α浓度较正常人高.TNF-α可以抑制MSCs成骨潜能.结论 TNF-α抑制MSCs成骨潜能可能参与骨髓瘤骨病发病机制.     

灰色系统GM(1,1)模型在隐性梅毒发病预测中的应用

目的:探讨应用灰色系统一阶一个变量的微分方程型模型(GM(1,1)模型)预测隐性梅毒发病率的可行性。方法:应用灰色GM(1,1)模型对广西南宁市2004～2010年隐性梅毒年发病率数据进行建模拟合,并进行外推预测。结果:建立的广西南宁市隐性梅毒年发病率GM(1,1)预测模型,拟合精度高(C≈0.311,P=1),可用于外推预测。结论:灰色系统一阶模型可以很好地模拟和预测隐性梅毒发病率在时间序列上的变化趋势,将其应用于隐性梅毒发病预测是可行的。     

胰高血糖素样肽-1及其类似物EX-4促进大鼠骨髓间充质干细胞的增殖与成骨分化

目的:观察胰高血糖素样肽-1(GLP-1)及其受体激动剂exendin-4(EX-4)对体外培养大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)增殖与成骨分化的影响。方法:取大鼠股骨和胫骨全骨髓,采用贴壁法分离BMSCs并传代至第三代,培养2d后分成4组:BMSC组、诱导成骨组(osteoblast induced medium,OIM组)和诱导加药组,诱导加药组细分为GLP-1(10-9~10-7 mol/L)或EX-4(10-9~10-7 mol/L)的不同浓度组,MTT法检测细胞增殖能力;测定碱性磷酸酶(ALP)活性;通过ALP染色及茜素红染色观察药物诱导BMSCs向成骨细胞分化、矿化的效果;采用RT-PCR方法检测ALP和Runx2成骨相关基因的表达情况。结果:与诱导对照组相比,GLP-1及EX-4各浓度处理组呈剂量依赖性显著促进细胞增殖(P<0.05);ALP染色与茜素红染色结果显示,对照组无显色或显色不明显,而GLP-1及EX-4组均有阳性显色。GLP-1及EX-4可以显著提高ALP活性,并提高Runx2、ALP的表达水平。结论:GLP-1及EX-4不仅能够直接促进BMSCs增殖,并促进其向成骨细胞分化,GLP-1及EX-4可能在骨重建中发挥重要的作用。     

应用灰色GM(1,1)模型预测乙肝发病率

目的:探讨灰色GM(1,1)模型在乙肝发病率预测中的应用,对比常规GM(1,1)模型与动态GM(1,1)模型的预测效果。方法:利用2000～2009年全国乙肝年发病率数据,建立GM(1,1)模型以及动态GM(1,1)模型,检验各模型的拟合效果。结果:全国乙肝年发病率GM(1,1)模型预测方程为^x(1)(t+1)=-876.554+941.464e(0.686981e-t),模型拟合效果好,平均相对误差为0.0577;5维动态GM(1,1)模型为^x(1)(t+1)=-7982.71+8074.13e(0.128060e-t),模型拟合效果更佳,平均相对误差仅为0.0114。结论:5维动态GM(1,1)模型预测乙肝的发病率比传统GM(1,1)模型更为准确。     

体外长期培养的家猪骨髓间充质干细胞生物学特性变化

目的 观察体外长期培养的家猪骨髓间充质干细胞(marrow mesenchymal stem cells,MSCs)生物学特性的变化.方法 将第1代MSCs(早期)和第35代MSCs(晚期)分别进行细胞形态学观察和染色体核型分析;钙沉积和细胞增殖测定,以及采用实时定量PCR定量分析成骨分化及成脂分化相关基因表达.结果 早期培养的MSCs细胞形态为较大的纺锤形,晚期为小的梭形.第35代MSCs细胞Ki-67染色强阳性,染色体数目增加.成骨诱导条件下早期MSCs茜素红S染色呈强阳性,晚期MSCs未见明显染色且OC基因表达明显下调(P＜0.01);成脂诱导条件下早期MSCs油红O染色阳性,晚期MSCs未见明显染色且PPARγ2基因表达明显下调(P＜0.01).结论 体外长期培养的家猪晚期MSCs不适合作为组织工程种子细胞.     

香港HIV/AIDS新陈代谢GM(1,1)模型与预测分析

目的:研究香港HIV/AIDS的流行情况及其发展趋势。方法:构造预测模型Y(t)=(x1-b/a)e-a t+b/a,对比新陈代谢GM(1,1)模型和一般GM(1,1)模型以及不同维数GM(1,1)模型,以研究香港HIV/AIDS人数的预测结果。结果:新陈代谢GM(1,1)的误差小于对应的常规GM(1,1),短序列预测的误差通常小于长序列,香港HIV人数5维GM(1,1)模型精度检验4项指标均为一级。用5维新陈代谢GM(1,1)模型预测香港2010年HIV累计4920例,AIDS累计1158例。结论:新陈代谢GM(1,1)模型是处理这类数据理想的模型,5维M(1,1)模型用于香港HIV/AIDS预测具有一定优势。     

运用灰色系统GM(1,1)模型预测安徽省肺结核发病趋势

目的建立肺结核灰色预测模型GM(1,1),应用于安徽省肺结核发病趋势的预测。方法根据公共卫生科学数据中心中2005~2012年安徽省肺结核发病报告资料建立肺结核发病率灰色预测模型GM(1,1),同时采用该模型对安徽省2013~2015年的肺结核发病率进行预测分析。结果通过灰色预测模型GM(1,1)而建立一个Y(t)=-1433.7369e-0.0654(t-1)+1531.5997预测模型,利用建立的模型预测安徽省2013~2015年安徽省肺结核发病率分别为57.4372/10万、53.7996/10万和50.3923/10万。结论通过实践应用证实,GM(1,1)模型预测安徽省肺结核发病率符合目前发展趋势,结果具有较高的参考应用价值。     

应用灰色系统GM(1,1)模型预测甲型病毒性肝炎发病率

目的:探讨预测江苏省甲肝发病率的数学模型,为甲肝防制工作提供科学的参考依据。方法:利用1999～2007年江苏省甲肝的发病率资料建立GM(1,1)预测模型,并进行模型评价。结果:甲肝发病率的GM(1,1)模型为,拟合效果较好,同时利用模型外推预测了2008年的甲肝发病率,预测准确。结论:如无较大规模的甲肝爆发,运用此预测方法较为方便适用。     

8-异戊烯基柑橘素促进体外骨髓基质干细胞成骨性分化的研究

目的研究8-异戊烯基柑橘素对体外培养大鼠骨髓基质干细胞(bone marrow stromal cells,BMSCs)的增殖与成骨性分化的影响。方法取大鼠股骨及胫骨全骨髓,利用全骨髓培养法培养于含体积分数为10%FBS的DMEM-F12培养液中。以碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)为指标,96孔板梯度筛选作用最佳浓度。增殖分析采用MTT法。以1×10-6 mol.L-1的最佳浓度作用并成骨性诱导(1×10-7mmol.L-1地塞米松、10 mmol.L-1β-甘油磷酸钠和50 mg.L-1抗坏血酸)培养的d 4、8、12、16测ALP活性、钙盐沉积量,d 16进行ALP和钙化结节组织化学染色及计数。成骨性诱导后不同时间点提取Total RNA,RT Real-Time PCR法检测bFGF、IGF-1、Osterix、Runx-2、BMP-2及COL-Ⅰ的基因表达情况。结果 8-异戊烯基柑橘素不能促进BMSCs增殖,但8-异戊烯基柑橘素在1×10-6 mol.L-1时能促进其向成骨性分化,表现为提高BMSCs的ALP活性、促进钙盐沉积、增加钙化结节数量、提高bFGF、IGF-1、Osterix、Runx-2、BMP-2及COL-Ⅰ的mRNA表达水平。结论 8-异戊烯基柑橘素可诱导骨髓间充质干细胞向成骨细胞分化,作为促进骨修复和抗骨质疏松的有效成分具有较大的药用价值。     

淫羊藿苷对体外在无地塞米松培养基中诱导培养大鼠骨髓基质细胞成骨性分化的影响

目的：探讨在无地塞米松（dexamethasone）时淫羊藿苷（icariin,ICA）对体外培养大鼠骨髓基质细胞成骨性分化的影响,并试图寻找一种新的或更强的促体外培养骨髓基质细胞成骨性分化的诱导剂。方法用1×10－5 mol·L －1淫羊藿苷或1×10－8 mol·L －1的地塞米松对大鼠骨髓基质细胞分别进行药物干预,细胞计数试剂盒（Cell Counting Kit-8,CCK-8）检测细胞增殖,碱性磷酸酶检测试剂盒检测碱性磷酸酶（alkaline phosphatase,ALP）活性,茜素红染色检测钙化结节数量,实时定量聚合酶链反应（RT-PCR）检测骨保护素（osteoprotegerin,OPG）、核因子-κB 受体活化因子配体（receptor activator of NF-κB ligand, RANKL）、骨形态发生蛋白（bone morphogenetic protein,BMP）的信使 RNA（mRNA）表达情况。结果1×10－5 mol·L －1淫羊藿苷在无地塞米松的培养基中能显著提高大鼠骨髓基质细胞 ALP 活性;明显增加大鼠骨髓基质细胞钙化结节数目;显著上调BMP、OPG mRNA 水平以及 OPG／RANKL mRNA 比值。结论淫羊藿苷可能是一种潜在的促体外培养大鼠骨髓基质细胞成骨性分化的新诱导剂。     

Osteogenic effects of D(+)β-3,4-dihydroxyphenyl lactic acid (salvianic acid A,SAA) on osteoblasts and bone marrow stromal cells of intact and prednisone-treated rats

Aim:

Previous studies have shown that D(+)β-3,4-dihydroxyphenyl lactic acid (salvianic acid A, SAA) has anabolic effects on prednisone (GC)-induced osteoporosis in rats. The current study aims to investigate the molecular mechanism of SAA''s impact on osteogenesis and adipogenesis in bone marrow stromal cells in intact and GC-treated rats.

Methods:

For in vitro study, newborn rat calvaria osteoblasts (rOBs) and rat bone marrow stromal cells (rMSCs) were isolated, identified and cultured with SAA at different concentrations to evaluate SAA''s influence on osteogenesis and adipogenesis. In addition, 3-month-old Sprague-Dawley (SD) male rats were treated with distilled water, prednisone alone (3.0 mg·kg⁻¹·d⁻¹) or prednisone (3.0 mg·kg⁻¹·d⁻¹) and SAA (25 mg·kg⁻¹·d⁻¹) for 45 d. At the end point, the different groups of rMSCs were isolated by density-gradient centrifugation and cultured.

Results:

(1) At 0.1–10.0 mg/L, SAA increased ALP activity, type I collagen (Coll-I) mRNA and OPG mRNA expression and stimulated nodule mineralization of rOBs. SAA (0.5 mg/L) also significantly increased the ALP activity of rMSCs without a need for osteogenesis-inducing medium. At 5.0 mg/L, SAA decreased the number of adipocytes with less lipid droplet formation from the rMSCs, which typically undergo adipocyte induction. (2) Coll-I expression was markedly decreased, whereas lipoprotein lipase (LPL) mRNA expression increased by 98% when compared with the first generation of rMSCs in GC-treated rats. The SAA-treated rats demonstrated an over 2-fold increase in Coll-I expression when compared with intact rats and further showed a significant decrease in LPL expression when compared with GC-treated rats. When rMSCs were co-cultured with SAA (0.5 mg/L) in vitro, SAA did not affect Coll-I and LPL gene expression in intact rats but significantly increased Coll-I and decreased LPL gene expression in GC-treated rats.

Conclusion:

SAA protected bone from GC-induced bone marrow impairment by stimulating osteogenesis and depressing adipogenesis in bone marrow stromal cells both in vivo and in vitro. The data indicated that aqueous extract of Salvia miltiorrhiza, which include SAA, may serve as an active anabolic agent and a useful therapeutic strategy for the treatment of GC-associated osteoporosis.     

灰色系统GM(1,1)模型预测流行性出血热发病趋势

目的:预测佳木斯市2006～2007年流行性出血热(EHF)流行趋势,为该市EHF防治工作提供科学的参考依据.方法:根据佳木斯市1996～2005年EHF发病率资料,运用灰色系统GM(1,1)模型,预测该市2006～2007年EHF的流行趋势.结果显示,佳木斯市此间EHF的发病率呈缓慢增加趋势.     

骨髓来源成骨细胞体外成骨表达的研究

目的探索在体外诱导兔骨髓基质干细胞(bone marrow stem cells,BMSCs)向成骨细胞分化及成骨表达的特性。方法抽取兔骨髓,通过离心法获取单个核细胞,在体外经条件培养基培养21d,通过倒置显微镜及激光共聚焦显微镜观察成骨细胞的形态学特点;应用MTT法测定成骨细胞活性;并检测成骨细胞分泌碱性磷酸酶活性及形成矿化结节情况。结果体外BMSCs可在成骨条件培养液下诱导培养后可向成骨细胞分化,经倒置显微镜和激光共聚焦显微镜观察证实,诱导后BMSCs由长梭形转变为短胖形的成骨细胞,MTT检测成骨细胞活性良好,分泌碱性磷酸酶并形成矿化结节。结论骨髓基质干细胞在体外可定向诱导为成骨细胞,并具有成骨细胞功能,有希望成为理想的种子细胞应用于临床。     

蛇床子素对体外培养骨髓基质干细胞增殖与成骨性分化的影响

目的研究蛇床子素对体外培养大鼠骨髓基质干细胞(bone marrow stromal stem cells,BMSCs)增殖与成骨性分化的影响。方法取大鼠股骨及胫骨全骨髓,利用全骨髓培养法培养单核层细胞,培养于含10%FBS的DMEM-F12培养液中,3d后首次换液,9d后传代培养。培养基中蛇床子素终浓度分别为1×10-4、1×10-5、1×10-6、1×10-7mol·L-1。增殖分析采用MTT法,于成骨性诱导培养d4、8、12、16测碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)活性、钙盐沉积量、骨钙素分泌量,d15进行钙化结节组织化学染色及计数。成骨性诱导后不同时间点提取Total RNA,RTReal-Time PCR法检测bFGF、IGF-1、Osterix与Runx-2的基因表达情况。结果蛇床子素剂量依赖性抑制BMSCs增殖,但能明显促进其向成骨性分化,表现为提高BMSCs的ALP活性、促进骨钙素分泌、钙盐沉积量、增加钙化结节数量、提高bFGF、IGF-1、Osterix和Runx-2的mRNA表达水平。结论终浓度为1×10-5mol·L-1蛇床子素能明显促进BMSCs的成骨性分化,证明蛇床子素是中药蛇床子抗骨质疏松的有效成分。     

Arctigenin promotes bone formation involving PI3K/Akt/PPARγ signaling pathway

This study investigated the mechanisms through which arctigenin promotes osteogenesis. Bone marrow mesenchymal stem cells (BMSCs) from ovariectomized (OVX) rats were differentiated into osteoblasts, and osteogenesis was evaluated via Alizarin Red S (ARS) staining and alkaline phosphatase (ALP) measurements in cultured BMSCs. The levels of phosphorylated AKT serine/threonine kinase 1 (p‐Akt), and peroxisome proliferator‐activated receptor gamma (PPARγ) expression were quantified by Western blot analysis. The levels of urine calcium (U‐Ca), urine phosphorus (U‐P), serum ALP, and bone mineral density (BMD) of OVX rats were assessed in vivo. The results showed that treatment with arctigenin in rat BMSCs enhanced mineralization, increased ALP activity, increased the expression of Akt and p‐Akt, and decreased PPARγ expression, consistent with its ability to promote osteoblast differentiation. Furthermore, arctigenin prevented OVX‐induced osteoporosis in rats by increasing BMD and ALP activity and inhibiting the loss of Ca and P. In contrast, treatment with LY294002, a selective inhibitor of the phosphatidylinositol 3‐kinase (PI3K), produced the opposite phenotype. These data suggest that the protective effects of arctigenin on BMSCs and OVX rat models result from the induction of osteogenesis involving the PI3K/Akt/PPARγ axis.     

灰色预测模型GM(1,1)在猩红热发病率预测中的应用

目的:探讨预测长治市猩红热发病率预测模型,为猩红热防治工作提供科学依据。方法:利用长治市2001～2009年猩红热发病率资料建立GM(1,1)预测模型,并进行模型评价,对今后两年2010、2011长治市猩红热发病率进行预测。结果:猩红热发病率的预测模型为^Y(t)=6.170.231(t-1)-5.53,拟合精度好(C=0.34,P=1),同时利用模型外推预测了2010、2011年的猩红热发病率。结论:GM(1,1)可用于长治市猩红热发病率的预测,长治市猩红热发病率呈上升趋势。     

bFGF对骨髓基质细胞的增殖作用及其临床意义

目的探讨成纤维细胞生长因子(bFGF)对骨髓前体细胞的增殖作用及其临床意义。方法分离骨髓前体细胞体外培养,用碱性磷酸酶化学染色及图像分析测定细胞克隆数;采用免疫组化(ABC法)检测ALP、骨钙素及钙,研究bFGF对NASP的促增殖作用。结果骨髓细胞中许多基质前体细胞以非贴壁细胞形式存在,bFGF不仅能促进NASP细胞增殖,而且能诱导NASP细胞向成骨细胞分化。结论bFGF主要作用于非贴壁生长的基质前体细胞,bFGF能增加骨细胞的数量,促进骨样组织形成,为临床用bFGF治疗骨折、骨不连提供理论依据。