氧化苦参碱和拉米夫定体外抗乙肝病毒的比较

目的比较氧化苦参碱(OM)和拉米夫定体外抗乙肝病毒的效果。方法采用四甲基偶氮唑盐(MTT)法考察OM和拉米夫定对HepG2.2.15生长的抑制作用,ELISA法检测对HepG2.2.15分泌HBsAg和HBeAg的抑制作用。结果 OM和拉米夫定对HepG2.2.15的半数中毒剂量分别为1 489.1和15.5μg/L。对HBsAg和HBeAg的表达均有剂量和时间依赖的抑制作用。结论 OM治疗乙肝病毒的安全性高于拉米夫定。     

硫酸化魔芋葡甘低聚糖的抗乙肝病毒作用

目的体外观察硫酸化魔芋葡甘低聚糖(HOGS)抗乙肝病毒(HBV)的作用。方法采用四甲基偶氮唑盐(MTT)法和ELISA法,研究HOGS对HepG2-2.2.15细胞细胞毒性作用及其分泌HBsAg、HBeAg的影响。采用荧光探针定量PCR检测HOGS对HepG2-2.2.15细胞HBV-DNA复制的影响。结果HOGS在0.125~1mg/mL浓度范围对HepG2-2.2.15细胞没有明显的细胞毒性作用,细胞的半数中毒浓度(TC50)为1.4753mg/mL;并且可明显抑制HepG2-2.2.15细胞HBsAg的分泌,其半数有效浓度(IC50)为0.0268mg/mL,治疗指数达5.52;对HBV-DNA也有一定的抑制作用。结论HOGS具有一定的体外抗HBV作用。     

拉米夫定和干扰素α2b体外细胞毒性与抗乙型肝炎病毒作用比较

目的 体外比较拉米夫定和α-干扰素的细胞毒性和抗乙型肝炎病毒作用. 方法体外培养L-02和 HepG2.2.15细胞,给予不同浓度的拉米夫定和干扰素α2b,作用72 h后,噻唑蓝(MTT) 法检测L-02和 HepG2.2.15细胞的生存率;收集不同浓度的拉米夫定和干扰素α2b处理的HepG2.2.15细胞上清液,酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测HBsAg、HBeAg的分泌.结果拉米夫定对L-02和 HepG2.2.15有一定的毒性作用,而干扰素α2b对细胞无毒性作用,甚至能促进正常细胞的增殖;拉米夫定对HBsAg和HBeAg的抑制作用大于干扰素α2b,拉米夫定对HBsAg的抑制率较高,而干扰素α2b对HBeAg的抑制率较高.结论拉米夫定和α干扰素联合使用可提高抗HBV的作用和质量.     

转阴灵抗乙型肝炎病毒的体外实验研究

目的通过体外实验,探讨转阴灵抗乙肝病毒(HBV)的作用。方法将转阴灵作用于体外培养的2.2.15细胞,以MTT比色法观察转阴灵的细胞毒性,以ELISA法检测细胞培养液中HBsAg和HBeAg的变化,观察药物对2.2.15细胞分泌HBsAg和HBeAg的影响。结果转阴灵作用于2.2.15细胞8d后,对细胞的半数毒性质量浓度(TC50)为4.5g·L-1,对HBsAg和HBeAg抑制的半数有效质量浓度IC50分别为0.42和0.15g·L-1,转阴灵对HBsAg和HBeAg的治疗指数(TI)分别为10.71和30.00。结论转阴灵在体外细胞培养中对HBsAg和HBeAg的分泌有较好的抑制作用,有显著的抗HBV作用。     

山芝麻水提液对HepG2.2.15细胞HBsAg和HBeAg的抑制作用

目的观察山芝麻水提液（water extracts from Helicteres angustifolia,WHA）的体外抗乙型肝炎病毒的作用。方法采用HepG2．2．15细胞模型进行体外培养,给予不同浓度山芝麻,以拉米夫定作阳性对照,作用72h后检测上清液中HBsAg、HBeAg的分泌,观察药物对HepG2．2．15细胞分泌HBV病毒抗原的影响,同时以MTT法检测药物在体外对HepG2．2．15细胞的生长抑制作用,从而评价药物的抗HBV作用。结果山芝麻水提液对HepG2．2．15细胞的半数细胞毒浓度（TC50）为482．1mg·L-1;对HepG2．2．15细胞分泌HBsAg的半数抑制浓度（IC50）为7．3mg。L-1,其治疗指数（TI）为66;对HBeAg,其Ic,n为14．6mg·L-1,TI为33。结论山芝麻水提液在体外有显著的抗HBV的作用,且毒性较低。Tel：（0771）5358342E—mail：gxLx60@163．COll]     

JNK 信号转导通路在黄芩苷诱导肝癌细胞凋亡中的作用

目的：探讨黄芩苷对人肝癌 HepG2细胞生长的抑制作用及其对 c-Jun 氨基末端激酶(JNK)信号通路的影响。方法50、100、150μg/ ml 的黄芩苷分别与人肝癌 HepG2细胞共同培养24、48和72 h,MTT 测定细胞生长抑制率;采用 Western blotting 方法检测黄芩苷处理72 h 后 HepG2细胞 JNK 和 p-JNK 的表达变化并观察 JNK 抑制剂对细胞凋亡的影响。结果黄芩苷对人肝癌 HepG2细胞增殖抑制作用呈时间依赖性,黄芩苷浓度低于100μg/ ml 其对细胞的抑制作用随浓度升高而增强,超过100μg/ ml 其对细胞的抑制作用不再增强。在黄芩苷处理后 HepG2细胞 p-JNK 蛋白表达上调,使用 JNK 抑制剂后,能阻断 JNK 蛋白的磷酸化,并且降低黄芩苷诱导细胞凋亡的能力。结论黄芩苷通过激活 JNK 信号通路诱导人肝癌 HepG2细胞凋亡。     

不同海鞘醇提物体外抗乙肝HBsAg和HBeAg作用的比较

目的研究皱瘤海鞘、冠瘤海鞘和大洋纵列海鞘乙醇提取物的体外抗乙肝病毒作用,对其进行比较,并推测其作用机制。方法用血清进行抗HBsAg、HBeAg、AntiHBs和AntiHBe的试验研究。结果当海鞘醇提物的浓度大于2g·L-1时,3种海鞘对HBsAg均有一定程度的抑制作用,当海鞘醇提物的浓度大于0.5g·L-1时,3种海鞘对HBeAg均有良好的抑制作用,它们在抑制两种抗原的作用上差异均无显著性。结论海鞘醇提物对乙肝患者血清中的HBsAg抗原和HBeAg抗原均具有一定程度的抑制作用,其抑制程度的大小与浓度有关。通过海鞘醇提物对AntiHBs、AntiHBe的作用结果推测,海鞘中用于抗乙型肝炎病毒的成分大致可以分为两类,一类具有类似抗体样的结构,可以通过与抗原结合形成无感染力的复合物来清除病毒;另一类则在对抗原具有明显抑制作用的同时对抗体亦有一定的抑制作用。     

皱瘤海鞘乙醇提取物抗乙肝HBsAg和HBeAg的初步研究

目的：研究皱瘤海鞘乙醇提取物的体外抗乙肝病毒作用。方法：用2．2．15细胞株进行杭HBsAg、HBeAg的试验研究。结果：海鞘乙醇提取物对HBsAg、HBeAg的分泌均有较明显的抑制作用，对细胞的毒性低，其治疗指数均在10以上。结论：海鞘乙醇提取物体外具有明显的抗乙肝病毒作用。     

空心莲子草总皂苷对HepG2.2.15细胞系HBsAg和HBeAg表达及HBV-DNA含量的影响

目的：研究空心莲子草总皂苷对乙肝病毒的抑制作用。方法：应用光密度测定法和细胞培养技术,研究空心莲子草总皂苷对HepG2.2.15细胞系HBsAg与HBeAg表达的影响。结果：96孔板试验：实验第3、6日,空心莲子草总皂苷对HBsAg和HBeAg表达均有明显的抑制作用（与对照组比较P<0.01）;同时采用定量PCR方法检测,空心莲子草总皂苷（200 mg·L-1）可使培养基中HBV-DNA转阴。结论：空心莲子草总皂苷有较强的体外抗乙肝病毒作用。     

苦参碱与氧化苦参碱抑制HepG2细胞增殖的对比研究

目的比较研究苦参碱与氧化苦参碱体外抑制肝癌HepG2细胞增殖的效果并初步探讨其机制。方法不同剂量苦参碱与氧化苦参碱注射液处理细胞 ,细胞计数及溴化四唑蓝实验观察细胞增殖抑制 ;光镜观察细胞形态改变 ;流式细胞仪和Tunnel实验观察细胞凋亡并检测细胞周期 ;免疫组化观察凋亡相关基因Bax与Bcl 2的表达。结果 0 .8g/L苦参碱处理细胞 3d即可明显抑制HepG2细胞增殖 ,细胞存活率为 5 1% ;1.5g/L苦参碱可明显诱导细胞凋亡 ,用药后大量细胞被阻滞于S期 ;1.5g/L的苦参碱使HepG2细胞凋亡相关基因Bax表达增强 ,Bcl 2的表达减弱。与苦参碱同浓度的氧化苦参碱不能抑制细胞增殖 ,1.5g/L氧化苦参碱处理细胞 3d ,细胞存活率仍为84 .2 % ;氧化苦参碱的浓度增至 8.0g/L时才出现明显凋亡峰。结论体外苦参碱诱导HepG2细胞凋亡能力强于氧化苦参碱 ,并调控了凋亡相关基因的表达 ,而氧化苦参碱浓度 6倍于苦参碱时细胞才出现凋亡。     

氧化苦参碱磷脂复合物的制备及其体外抗乙肝病毒活性的研究

目的制备苦参素磷脂复合物并对其体外抗乙肝病毒活性进行评价。方法利用四氢呋喃作为反应溶剂,苦参素及磷脂溶于溶媒中,真空除去有机溶剂得苦参素磷脂复合物。并以2.2.15 cell line为细胞模型,分别对苦参素磷脂复合物的细胞毒性值和乙型肝炎表面抗原,乙型肝炎e抗原,乙型肝炎病毒DNA的抑制率进行了研究。结果制得的苦参素磷脂复合物中苦参素的含量为24.86%。苦参素磷脂复合物的细胞毒性值为250μg·mL^-1与苦参素相比,苦参素磷脂复合物对2.2.15细胞的HBsAg,HBeAg,HBV-DNA值明显降低。结论苦参素磷脂复合物能够产生更有效的抗乙肝病毒活性。因此乙肝治疗中苦参素磷脂复合物有很强的抗病毒活性潜力。     

复方大青叶注射液体外抑菌作用及抗内毒素作用的研究

目的研究复方大青叶注射液体外抑菌作用及抗内毒素作用。方法体外抑菌作用采用液体培养基连续稀释法测定复方大青叶的最小抑菌浓度(MIC);抗内毒素作用采用细菌内毒素检查法。结果体外抑菌实验结果表明复方大青叶注射液对被测微生物的最小抑菌浓度为:金黄色葡萄球菌,MIC62 g.L-1;藤黄微球菌,MIC62 g.L-1;枯草芽孢杆菌,MIC62 g.L-1;大肠埃希菌,MIC125 g.L-1;变形杆菌,MIC125 g.L-1;新型隐球菌,MIC62 g.L-1;白假丝酵母菌,MIC125 g.L-1;啤酒酵母菌,MIC125 g.L-1。抗内毒素结果:复方大青叶注射液62 g.L-1即具有抗内毒素作用。结论复方大青叶注射液体外具有广谱抗菌作用,不仅对革兰阳性细菌有较强的抑菌作用,而且对某些真菌也有较强的抑菌作用;复方大青叶注射液有较强的抗内毒素活性。     

HepG2.2.15细胞中siRNA与拉米夫定抗乙型肝炎病毒复制作用的比较

目的：对HepG2.2.15细胞中siRNA与拉米夫定的抗乙型肝炎病毒（HBV）作用进行比较。方法：构建HBV siRNA的表达载体并转染入HepG2.2.15细胞。分别于48、72、96h收获细胞,与拉米夫定治疗组比较抗HBV作用。用ELISA方法检测HBsAg浓度;HBV DNA水平用实时定量PCR测定;用逆转录PCR检测HBV mRNA水平。结果：拉米夫定能明显降低HBV DNA水平,对HBsAg和mRNA抑制率较低;siRNA能全面降低HBsAg、HBV DNA和mRNA水平（P〈0.05）。结论：HepG2.2.15细胞中,siRNA与拉米夫定的抗病毒作用完全不同,siRNA抗HBV作用明显优于拉米夫定。     

脱氧野尻霉素衍生物抗乙型肝炎病毒的体外试验研究

目的:观察脱氧野尻霉素(DNJ)衍生物N—苄基—1—脱氧野尻霉素(P-DNJ)与N—壬基—1—脱氧野尻霉素(NN-DNJ)的体外抗乙型肝炎病毒(HBV)作用。方法:以HBVDNA转染的人肝癌细胞株HepG22,2,15细胞为靶细胞,以不同浓度的试验药物培养细胞,在第6天、第10天时应用时间分辨免疫荧光分析法和荧光实时定量聚合酶链反应法检测培养基上清液中HBsAg、HBeAg和HBVDNA,同时应用MTT法检测药物对细胞的毒性。结果:P-DNJ、NN-DNJ在试验浓度(5~125μg.mL-1)内未见细胞毒性作用,在浓度为125μg.mL-1时能显著减少细胞培养基上清液中HBsAg、HBeAg、HBVDNA的分泌。结论:P-DNJ、NN-DNJ在体外细胞培养试验中发现有抗HBV作用。     

亚硒酸钠对乙型肝炎病毒的体外抑制作用

目的探讨亚硒酸钠在体外对乙型肝炎病毒(HBV)蛋白合成、DNA复制的影响及机制。方法将不同浓度的亚硒酸钠作用于HepG2.2.15细胞系,通过检测细胞培养上清液中乙型肝炎表面抗原(HBsAg)、乙型肝炎e抗原(HBeAg)水平、乙型肝炎核心抗原(HBcAg)和HBV DNA水平来评价HBV复制情况;免疫组织化学检测HepG2.2.15细胞p53蛋白的表达情况。结果亚硒酸钠对HBV复制具有抑制作用,随着亚硒酸钠浓度的升高,对HBsAg和HBeAg的抑制率逐渐上升,但对HBsAg的抑制作用要小于HBeAg。细胞内HBV DNA复制水平也逐渐下降(P<0.01)。p53蛋白的分布也发生了改变。结论亚硒酸钠对HepG2.2.15细胞HBsAg、HBeAg和HBcAg表达、HBV DNA复制均有抑制作用,作用机制与其干扰p53蛋白的表达有关。     

苦参素胶囊联合胸腺肽α-1治疗慢性乙型肝炎疗效观察

目的:研究苦参素胶囊联合胸腺肽α-1治疗慢性乙型肝炎(CHB)的疗效和安全性。方法:60例CHB患者随机分为治疗组和对照组。治疗组(28例)口服苦参素胶囊,0.3g.次-1,3次.d-1,2mo后改为0.2g.次-1,3次.d-1;对照组(32例)肌肉注射干扰素α-2b500MU,1次.d-1,1mo后改为隔日1次。2组疗程均为24wk,治疗结束后随访48wk。比较2组的ALT复常率、HBV-DNA阴转率、HBeAg阴转率、HBeAg血清转换率。结果:治疗第12、24周时,治疗组的ALT复常率、HBV-DNA阴转率、HBeAg阴转率、HBeAg血清转换率与对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05);治疗结束后第24、48周随访时,治疗组ALT复常率分别为64.3%和71.4%,对照组分别为34.4%和43.8%,2组比较差异有统计学意义(P<0.05);治疗组血清转换率分别为42.8%和46.4%,对照组分别为25.0%和21.9%,2组比较差异有统计学意义(P<0.05);治疗结束后第48周随访时,治疗组HBeAg阴转率为50.0%,对照组为25.0%,2组比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论:苦参素胶囊联合胸腺肽α-1治疗CHB用药方便,能够明显抑制乙型肝炎病毒复制,且能持续应答,治疗期间安全性好。     

热毒宁对流感病毒FM_1的抑制作用

目的:研究中草药热毒宁注射液对流感病毒FM_1的抑制作用。方法:以利巴韦林为阳性对照药,采用细胞培养技术及四氮唑蓝(MTT)比色法,观察在热毒宁干预下,受FM_1感染的犬肾传代细胞(MDCK细胞)的病变效应(CPE)及光密度值(D),计算各组细胞的病毒抑制率。比较不同药物剂量及3种不同给药方式(预防给药、直接灭活及治疗给药)下热毒宁对流感病毒FM_1的抑制作用。结果:热毒宁注射液半数中毒浓度(TC_(50))为10.11g·L~(-1)。预防给药、直接灭活及治疗给药方式下,CPE法测得其抗流感病毒FM_1的半数有效浓度(EC_(50))分别为0.625、0.725、0.629 g·L~(-1),治疗指数(TI)分别为16.17、13.94、16.07;MTT比色法测得其抗流感病毒FM_1的EC_(50)分别为1.135、0.770、0.661 g·L~(-1),TI分别为8.91、13.12和15.29。3种方式给药,MTT法测定时,热毒宁对流感病毒FM_1的抑制作用无差异;CPE法测定时,热毒宁浓度在0.812 51 g·L~(-1)及以上对流感病毒FM_1的抑制作用无差异。结论:热毒宁对流感病毒FM_1有直接灭活及抑制增殖作用,对其感染靶细胞有阻断作用,且呈明显量效关系。