精子激活剂应用于梗阻性无精症患者ICSI的比较分析

目的 睾丸或附睾穿刺获得的精子经过含有PF的精子激活剂处理后，挑选出活动精子行ICSI，最后比较分析相关指标。方法 研究分为观察组91例患者，男方行睾丸/附睾穿刺抽吸取精术或者解冻此前手术获得精子，经过激活处理后，选活动的精子行ICSI操作;对照组选择未行激活的此类患者77例，显微镜下机械接触法选活动精子行ICSI。对2组的受精率、卵裂率、可用胚胎率、囊胚形成率、临床妊娠率等指标比较分析。结果 2组间的受精率(81.3%VS79.5%)、卵裂率(97.1%VS 98.1%)差异无统计学意义(P> 0.05)。可利用胚胎率(55.5%VS 46.1%,P=0.008)、囊胚形成率(57.8%VS 46.0%,P=0.007)均有提高。2组均没有分娩畸形胎儿。另在冷冻睾丸/附睾精子亚组中，观察组的受精率、正常受精率均有高于对照组的趋势，但样本量较小，尚无统计学意义。结论 对睾丸(附睾)精子，尤其是对冷冻复苏后的精子行激活处理，可帮助实验室操作人员镜检并挑选出活动精子行ICSI，获得较为理想的实验室及临床结局，而且未发现危害。     

梗阻性无精子症附睾精子与睾丸精子行ICSI治疗结局比较

目的 比较梗阻性无精子症应用附睾精子与睾丸精子行卵胞浆内单精子注射技术（ICSI）的临床结局.方法 回顾分析2011年及2012年梗阻性无精子症患者于我中心ICSI助孕110周期,根据精子来源,分为附睾精子组（PESA组）及睾丸精子组（TESA组）,比较两组间的2PN受精率、卵裂率、可移植胚胎率、临床妊娠率、流产率等.结果 2PN受精率TESA组（77.8％）明显低于PESA组（84.5％）（P＜0.05）.TESA组与PESA组的卵裂率（97.1％、97.6％）、可移植胚胎率（74.4％、70.7％）、临床妊娠率（78.6％、67.1％）、流产率（4.6％、7.3％）,两组比较差异均无统计学意义（P＞0.05）.结论 TESA精子用于ICSI治疗2PN受精率比PESA精子低,TESA精子与PESA精子妊娠结局无显著差异.     

卵子玻璃化冷冻复苏后行卵母细胞胞浆内单精子显微注射27例临床结局

目的：探讨卵子玻璃化冷冻技术在辅助生殖中的临床应用价值。方法回顾性分析2013年1月－2015年12月在解放军174医院生殖医学中心行体外受精,取卵日因男方因素未取到精子而行卵子玻璃化冷冻保存的27对不孕夫妇的资料。卵子解冻后均行夫精卵母细胞胞浆内单精子显微注射,记录卵子受精情况及临床结局。结果27例患者共冷冻卵子245枚,并全部解冻,解冻后存活214枚,存活率84．79％;其中第二次减数分裂中期（ metaphase Ⅱ,MⅡ）卵198枚,并全部行ICSI,受精138枚,受精率74．49％;卵裂99枚,卵裂率71．74％;形成87枚2PN（原核,pronucleus）胚胎,优质胚胎34枚,优质胚胎率39?08％。20个移植周期移植胚胎41枚,临床妊娠6例,临床妊娠率34．82％。结论玻璃化冷冻技术应用于卵子冷冻保存,并对复苏卵子进行卵母细胞胞浆内单精子显微注射可以取得一定的临床妊娠率,在辅助生殖技术临床上具有很强的实用价值。     

卵子玻璃化冷冻技术在IVF-ET中的应用(附7例报告)

目的探讨卵子玻璃化冷冻的临床应用价值。方法回顾性分析2011年1月-2012年12月体外受精周期取卵日因男方睾丸取精失败等原因行卵子冷冻的16对不孕夫妇的资料。其中,7例患者接受卵子解冻,并行夫精卵细胞胞质内单精子注射(ICSI),记录其受精、胚胎及临床结局。结果16例患者共冷冻卵子167枚,7例接受卵子解冻,共解冻卵子86枚,存活66枚,并行ICSI,正常受精率68.2%,优质胚胎率14.6%;1例患者取消移植,3例生化妊娠(50%),2例临床妊娠(33.3%),其中1例患者足月分娩1女婴。结论卵子玻璃化冷冻可作为取卵日取精困难及睾丸取精失败患者的临床补救措施。     

卵丘颗粒细胞SIRT1表达对卵胞浆内单精子显微注射助孕结局的影响

目的 探讨卵丘颗粒细胞SIRT1表达对ICSI助孕结局的影响.方法 收集120例因男方因素在我院辅助生殖技术研究室行ICSI助孕的女性患者卵丘颗粒细胞,采用免疫组化法检测SIRT1蛋白.比较分析ICSI妊娠与非妊娠组SIRT1表达率,并分析其与ICSI实验室各项指标如穿卵泡数、获卵数、获卵率,受精数、受精率,卵裂数、卵裂率,优质胚胎数、囊胚形成数及囊胚冷冻数之间关系.结果 妊娠与未妊娠组SIRT1表达率差异有统计学意义(P＜0.05).SIRT1表达率与穿卵泡数、Ⅲ级OCCs数、ICSI卵子数、受精数、卵裂数、平均优质胚胎数、平均囊胚数、优质囊胚数、平均冷冻胚胎数间均有显著相关性(P＜0.01).结论 SIRT1在卵丘颗粒细胞表达可能影响卵母细胞成熟及卵子发育能力,进而与ICSI助孕结局有关.     

不同来源精子卵胞浆内单精子注射治疗男性不育

目的分析用3种不同来源精子行卵细胞浆内单精子注射(ICSI)治疗不育158个周期。方法女方进行常规超排卵．用射出精子。经皮附睾精子抽吸术(PEsA)或睾丸精子抽吸术(TESE)获得的精子行ICSI治疗男性不育共158个周期。结果射出精子组110个治疗周期其受精率、卵裂率、优质胚胎率、胚胎种植率和临床妊娠率为67．3％，95．2％，50．2％，20．5％和35．5％。附睾精子组38个治疗周期其受精率、卵裂率、优质胚胎率、胚胎种植率和临床妊娠率为63．5％，95．7％，60．1％，20．2％和47．4％。睾丸精子组10个治疗周期其受精率、卵裂率、优质胚胎率、胚胎种植率和临床妊娠率为68．8％，96．1％。35．1％，17．2％和30％。3组结果比较，差异无显著性意义。结论不论通过手淫取精，PESA或TESE，只要能获得活动精子，结合ICSI，各种因素的男性不育患者均有机会获得妊娠。     

精子形态对ICSI结果的影响

目的 通过对接受ICSI治疗的不育患者进行精子形态分析和ICSI结果参数的统计分析,研究精子形态对于ICSI结果参数的影响.方法 采用改良巴氏染色法进行精子形态学分析,对精子正常形态率和ICSI的受精率、卵裂率、优质胚胎率、胚胎移植率、临床妊娠率等结果参数进行相关性分析、分组秩和检验和卡方检验.结果 ①精子正常形态率与受精率无相关性（r=0.02,P〉0.05）、与卵裂率无相关性（r=-0.17,P〉0.05）、与优质胚胎率无相关性（r=-0.10,P〉0.05）、与胚胎移植率无相关性（r=0.05,P〉0.05）.②以精子正常形态率4%为界分为两组,精子正常形态率〈4%（n=24）组,受精率（80.29%）、卵裂率（98.75%）、优质胚胎率（43.54%）、胚胎移植率（31.30%）.精子正常形态率≥4%（n=32）组,受精率（79.68%）、卵裂率（94.52%）、优质胚胎率（41.07%）、胚胎移植率（37.8%）,两组之间的秩和检验差异无显著性（P〉0.05）.两组的临床妊娠率的卡方检验差异无显著性（P〉0.05）.结论 精子形态不影响ICSI的受精率、卵裂率、优质胚胎率、胚胎移植率、临床妊娠率等结果参数.     

ICSI周期中人类MⅡ卵子形态对胚胎发育的影响

目的探讨胞浆内单精子注射技术（ICSI）中MⅡ卵子的形态及其影响因素以及卵母细胞形态学特性对其后胚胎质量的影响。方法选择江西省妇幼保健院辅助生殖中心2011年5月-2012年2月所有需行ICSI治疗的患者,共54个周期,采用常规超促排卵长方案,获得了812个MⅡ卵子,将其分成A组：正常卵子形态组;B组：卵子胞浆外异常组;C组：卵子胞浆内异常组;行ICSI操作后对D2-D3卵裂期胚胎进行评估,分别比较3组的受精率、卵裂率、胚胎质量,由此评估人类MⅡ卵子形态的异常是否对胚胎发育有显著性的影响。结果⑴A、B、C3组间的卵子受精率、卵裂率均无显著的统计学差异（P＞0.05）。 A组正常形态的卵子的优质胚胎形成率显著高于B组（84.9% vs 51.8%,P＜0.05）和C组（84.9% vs 44.9%,P＜0.05）。⑵卵母细胞受精率降低与第一极体异常、卵周间隙增大和卵胞浆内出现空泡相关联。卵子胞浆内异常与卵母细胞发育能力低下相关。⑶原核的形态受到大的卵周间隙、扩散的胞浆内粗颗粒和/或出现中心颗粒区的影响。⑷形态异常的卵子,发育为低质量的胚胎的概率更高,尤其是卵子胞浆内异常组卵子,与其它形态学异常的特征相比,其优质胚胎率有显著性降低。（OR2.26,95%CI 1.25-4.08）。⑸根据每个卵子异常形态特点获得的优势比来达到至少一种结局,计算出MⅡ卵子形态学（MOMS）评分。 MOMS与女性的年龄、基础FSH值和临床结局有显著的相关性。结论⑴ICSI的结局与获得卵子的质量密切相关。⑵行ICSI之前的卵母细胞形态学评估有助于确定卵子具有更高的发育潜能。⑶将卵子、受精卵、胚胎的形态学特性与胚胎的评分系统相结合,有助于选择优质胚胎进行移植。⑷本研究由于样本量较小,MⅡ卵子的形态学特征是否对胚胎种植率和临床妊娠率有显著性的影响仍不明确。     

海藻糖应用于人类成熟卵母细胞玻璃化冷冻研究

目的 探讨海藻糖的应用能否改善人成熟卵母细胞玻璃化冷冻效果、提高冻融后卵母细胞的发育潜能.方法 从该中心IVF/ICSI治疗的病人中经知情同意获取卵母细胞248枚,随机分成四组：显微注射海藻糖组（A组）、细胞外海藻糖组（B组）、常规蔗糖组（C组）、新鲜对照组（D组）.卵母细胞复苏后,所有存活卵母细胞均行卵胞浆内单精子显微注射（ICSI）,观察各组卵母细胞冻融后存活率、受精率、卵裂率、囊胚率、优质胚胎率、优质囊胚率.结果 A、B、C三组存活率、优质胚胎率、囊胚率差异无统计学意义（P〉0.05）,A组受精率、卵裂率、优质囊胚率高于B组和C组,差异均有统计学意义（P〈0.05）,其中与B组受精率、卵裂率差异极显著（P〈0.01）,与C组卵裂率差异极显著（P〈0.01）;B组与C组存活率、受精率、卵裂率、优质胚胎率、囊胚率、优质囊胚率差异均无统计学意义（P〉0.05）;A组与D组优质胚胎率、优质囊胚率差异有统计学意义（P〈0.05）;B组及C组与D组受精率、卵裂率、优质胚胎率、优质囊胚率差异极显著（P〈0.01）.结论 海藻糖作为细胞内冷冻保护剂似乎能够改善人卵母细胞玻璃化冷冻效果及冻融后卵母细胞发育潜能.     

精子DNA完整性对辅助生殖技术结局的影响

目的 探讨精子DNA完整性与辅助生殖技术结局的相关性.方法 采用改良SCD法对精子DNA完整性进行测定.同时运用统计学方法对测定结果进行分析.结果 在行辅助生殖治疗的患者中,精子DNA完整性正常组与异常组比较,受精率(IVF:77.4％与84.8％,P=0.366; ICSI:90.1％与92.1％,P==0.899)、卵裂率(IVF:97.1％与96.4％,p=0.958;ICSI:96.0％与99.0％,P=0.845)、优质胚胎形成率(IVF:42.8％与38.6％,P =0.485;ICSI:25.8％与46.2％,P=0.002)及临床妊娠结局(IUI:13.8％与16.6％,P=1.000;IVF:35.3％与73.7,P=0.150;ICSI:49.5％与42.8,P=0.832)等指标,除ICSI治疗的优质胚胎率之外,差异无统计学意义.结论 精子DNA完整性尚且不能作为独立的指标对辅助生殖技术结局进行预测.     

精子DFI与精液常规、精子形态学的相关性及其对IVF-ET/ICSI结局的影响#br#

摘要：目的　分析精子DNA碎片指数（DFI）与精液常规、精子形态学及体外受精-胚胎移植（IVF-ET）/卵胞浆内单精子注射（ICSI）结局的关系,探讨精子DFI预测男性生育力及IVF-ET/ICSI结局的价值。方法　回顾性分析2420例男性不育患者精液检查数据,根据DFI值分为A组（DFI≤15%）、B组（15%＜DFI＜30%）、C组（DFI≥30%）,分析精子DFI与精液常规、精子形态学相关性。检测117对IVF-ET/ICSI不孕夫妇中男性患者精子DFI,精液常规、精子形态学,根据DFI值分为IVF-1组（DFI≤15%）、IVF-2组（15%＜DFI＜30%）、IVF-3组（DFI≥30%）,ICSI-1组（DFI≤15%）、ICSI-2组（15%＜DFI＜30%）、ICSI-3组（DFI≥30%）,研究精子DFI对IVF-ET/ICSI结局的影响。结果　A、B、C组患者年龄、精子畸形率逐次升高,精子浓度、前向运动精子（PR）、精子活动率逐次降低（P＜0.01）;精子DFI与年龄、精子畸形率呈正相关,与精子浓度、PR、精子活动率呈负相关（P＜0.01）;与IVF-1组比较,IVF-3组精子浓度、PR降低;IVF-3组精子畸形率较IVF-2组升高;与ICSI-1组和ICSI-2组比较,ICSI-3组PR降低;ICSI-3组精子畸形率较ICSI-1组升高（P＜0.05）;IVF组和ICSI组中,各亚组受精率、卵裂率、优胚率及临床妊娠率差异均无统计学意义（P＞0.05）。结论　精子DFI可有效评估男性生育力。精子DFI对IVF/ICSI的临床结局没有预测价值,不建议将精子DFI检测作为选择辅助生殖技术方案检查项目。      

乙型肝炎病毒感染对精液参数及精子DNA完整性的影响

目的 探讨乙型肝炎病毒(HBV)感染对精液参数及精子DNA完整性的影响.方法 选取2013年1月至2015年12月来本院医学生殖中心就诊的41名乙肝病毒感染阳性男性不育患者(试验组)和45例健康生育男性(对照组),采用伟力WL-9000精液分析仪测定精液密度、活力、畸形精子率、前向运动活动精子等精液参数;采用精子染色质扩散实验(SCD法)进行精子DNA完整性分析.结果 试验组精液密度为(40.19±18.52)×106/ml,精子活力为(39.33±15.84)％,精子畸形率为(28.83±10.54)％,前向运动精子为(37.95±11.67)％,精子DNA碎片指数(DFI)为(23.35±12.24)％.与对照组相比,试验组精液密度下降、活力下降、精子畸形率增加、前向运动精子减少、DFI升高,差异有统计学意义(t=6.16、6.87、11.40、5.75、7.48,P＜0.05).结论 乙型肝炎病毒感染影响精液参数及精子DNA,可能是造成男性不育的原因之一.     

Evaluation of human sperm function

Our understanding of the causes of male infertility and our ability to develop an appropriate range of diagnostic tests are both dependent upon a knowledge of the cellular mechanisms responsible for the regulation of human sperm function. This review examines the intra- and extracellular factors regulating four separate components of human sperm function: sperm transport, sperm-egg recognition, the acrosome reaction and sperm-oocyte fusion. Within each of these areas the fundamental nature of the process, the control mechanisms involved, the availability of appropriate diagnostic tests and the relationship with human infertility have been considered.     

Organophosphorus pesticide exposure decreases sperm quality: association between sperm parameters and urinary pesticide levels

Several studies have suggested that human semen quality has declined over the past decades and some of them have associated it with occupational exposure to pesticides. However, most of these studies have not been associated with a reliable exposure level and have been designed mostly as cross-sectional studies. The present work evaluates, in a longitudinal follow-up study, the effect of organophosphate pesticides (OP) at three occupational exposure levels on semen quality. In addition, the study examined the association between OP urinary levels and sperm parameters in exposed and unexposed workers. A total of 139 semen samples from 52 volunteers were assessed. Urinary OP levels were measured by gas-liquid chromatography.The results revealed that the poorest semen quality was found among the subjects with the highest OP exposure and the highest urinary OP levels. Seasonal variations in sperm concentration and sperm count were registered.The results showed a significant decrease in total sperm count among subjects with the highest exposure to OP. Further studies assessing the effects of OP on male reproductive health should be controlled by the variability in human sperm parameters, sperm seasonality, spermatogenesis time and the changing OP exposure level in men highly exposed to OP.     

Anethole compromises human sperm function by affecting the sperm intracellular calcium concentration and tyrosine phosphorylation

Anethole is a natural anisole derivative that has been widely used in food and daily chemical industries, agricultural applications and the traditional medicine. It is closely related to aspects of daily life, and humans can easily be exposed to it. Although the reproductive toxicity of anethole was shown in the rat, its effect on human reproduction remains unknown. In this study, we examined the effect of anethole on human sperm in vitro. Different anethole doses (0.1, 1, 10, and 100 μM) were applied to ejaculated human sperm. Fertilization-essential functions, as well as the intracellular calcium concentration ([Ca²⁺]_i) and tyrosine phosphorylation, two vital factors for regulating sperm function, were measured. The results indicated that 10 and 100 μM anethole significantly reduced the motility, hyperactivation, and penetration ability of human sperm (P < 0.05) and inhibited the increase in human sperm functions induced by progesterone, a hormone essential for sperm function activation. Additionally, 10 and 100 μM anethole decreased both basal and progesterone-increased tyrosine phosphorylation, [Ca²⁺]_i, and the current of CATSPER, a cation channel of sperm predominant for Ca²⁺ influx. These results suggest that anethole inhibits human sperm functions by reducing sperm [Ca²⁺]_i through CATSPER and suppressing tyrosine phosphorylation in vitro, raising the fact that the caution is needed when overtaking anethole.     

经皮附睾精子抽吸术结合卵胞浆内单精子注射术治疗梗阻性无精子症的研究

目的 探讨经皮附睾精子抽吸术(percutaneous epididymal sperm aspiration,PESA)结合卵胞浆内单精子注射术(intracytoplasmic sperm injection,ICSI)治疗梗阻性无精子症患者的临床效果.方法 无精子症患者通过PESA获取精子行ICSI,评估受精率、临床妊娠率、种植率等指标;另外,取射出精子行ICSI作为对照组.结果 34例无精子症患者中有16例经PESA获得活动精子,其中7例患者采用附睾精子行7个治疗周期,对照组19个治疗周期,其受精率、临床妊娠率和种植率分别为69.39％和70.07％,42.86％和47.37％,21.43％和26.32,两组比较,差异无统计学意义(P＞0.05).结论 PESA结合ICSI方法是治疗梗阻性无精子症的有效手段.