达肝清对小鼠免疫功能影响的实验研究

目的 探讨达肝清对正常小鼠和免疫抑制小鼠免疫功能的影响.方法 用达肝清给正常小鼠和环磷酰胺免疫抑制小鼠灌胃,然后用称重法检测小鼠肝脾重量、溶血试验检测血清溶血素含量、QHS法检测抗体形成细胞数、RIA法检测IL-2含量、MTT法检测NK细胞活性和T淋巴细胞增殖功能.结果 达肝清对正常小鼠免疫功能无显著影响,对CXT免疫抑制小鼠有显著的抵抗作用,能增加免疫抑制小鼠肝脾的重量、促进抗体生成和IL-2分泌,增加NK细胞活性和T淋巴细胞增殖功能.结论 达肝清对正常小鼠的免疫功能无显著影响,但能抵抗CTX对小鼠免疫功能的抑制作用.     

望江南葸醌苷对小鼠免疫功能的影响

目的 探讨望江南蒽醌苷(AG)对环磷酰胺(CTX)造成的免疫低下小鼠的保护作用.方法 体外,将小鼠胸腺和脾淋巴细胞与不同浓度的AG共培养,用MTT法检测AG对胸腺和脾淋巴细胞增殖的影响;体内,腹腔注射CTX形成免疫抑制模型.结果 体内试验中,与模型对照组小鼠相比,能显著升高外周血的白细胞数.增强腹腔巨噬细胞的吞噬功能,能促进胸腺/脾淋巴细胞增殖,增加胸腺指数和脾指数.结论 AG具有免疫增强作用.     

望江南蒽醌苷对小鼠免疫功能的影响

目的探讨望江南蒽醌苷(AG)对环磷酰胺(CTX)造成的免疫低下小鼠的保护作用。方法体外,将小鼠胸腺和脾淋巴细胞与不同浓度的AG共培养,用MTT法检测AG对胸腺和脾淋巴细胞增殖的影响;体内,腹腔注射CTX形成免疫抑制模型。结果体内试验中,与模型对照组小鼠相比,能显著升高外周血的白细胞数,增强腹腔巨噬细胞的吞噬功能,能促进胸腺/脾淋巴细胞增殖,增加胸腺指数和脾指数。结论AG具有免疫增强作用。     

葛仙米多糖对白色念珠菌诱导的免疫低下小鼠免疫功能的影响

[摘要] 目的 考察葛仙米多糖对免疫低下小鼠免疫功能的影响。方法 BALB/c小鼠分成对照组、模型组、葛仙米多糖低、中、高剂量组（0.1,0.2,0.4g/kg）组、阳性药玉屏风颗粒组（2.5 g/kg）,动物分组后持续灌胃给药28d,第29d除对照组外,其余组小鼠尾静脉注射白色念珠菌5×104 CFU/只,造成免疫低下模型。注射白色念珠菌后第14d,解剖,检测小鼠体重、脏器指数、血常规、脾组织形态、脾淋巴细胞增殖能力、腹腔巨噬细胞吞噬能力和凋亡以及Bcl-2和Bax 蛋白的表达。结果 与对照组比较,模型组体质量下降,白细胞下降,中性粒细胞增加,胸腺、脾脏指数降低,脾损伤,脾淋巴细胞增殖能力降低,腹腔巨噬细胞吞噬能力降低,腹腔巨噬细胞凋亡增加,Bax表达增加,Bcl-2表达减少;与模型组比较,葛仙米多糖各剂量组可显著增大脏器指数（P<0.01或P<0.001）;葛仙米多糖各剂量组可增加白细胞,减少中性粒细胞（P<0.001）;葛仙米多糖各剂量组可修复脾组织形态;葛仙米多糖各剂量组可明显增加ConA诱导的小鼠脾淋巴细胞增殖能力（P<0.01或P<0.001）;葛仙米多糖各剂量组可显著改善小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬能力（P<0.01）;葛仙米多糖各剂量组可降低小鼠腹腔巨噬细胞的凋亡;葛仙米多糖各剂量组可显著降低Bax表达和升高Bcl-2表达。结论 葛仙米多糖能显著增强免疫低下小鼠的免疫功能。     

八味方对小鼠免疫功能的影响

目的 观察八味方对小鼠免疫器官和吞噬功能的影响.方法 腹腔注射环磷酰胺(CTX)造成免疫功能低下模型;连续灌药7d后检测正常和免疫功能低下组小鼠的脾指数、胸腺指数和巨噬细胞吞噬功能.结果 与结论 八味方能显著提高免疫功能低下组小鼠脾指数、胸腺指数和巨噬细胞吞噬功能(P＜0.01),而正常组小鼠,虽能提高但不显著.     

白芍水提物及芍药苷改善环磷酰胺致白细胞减少的对比研究

目的对比观察白芍水提物及芍药苷对环磷酰胺(CTX)致小鼠白细胞减少症的影响。方法给小鼠连续灌胃10d,第6和第7天腹腔注射高剂量CTX造成外周血白细胞减少。比较各给药组和模型组小鼠体质量、外周血白细胞数量、股骨中骨髓有核细胞数及肝、脾、胸腺造血免疫器官脏器系数。结果连续2d腹腔注射CTX 100mg.kg-1,可见小鼠外周血白细胞数、骨髓有核细胞数均显著减少(P<0.01),肝脏、脾脏和胸腺系数均明显降低(P<0.01)。白芍水提物及芍药苷均使小鼠外周血白细胞数、骨髓有核细胞数显著增多,脾脏系数明显升高。用药期间各组小鼠体质量无明显差异。结论白芍水提物及芍药苷对CTX所致小鼠白细胞减少和骨髓细胞减少均有升高作用,可提高CTX减少的小鼠脾脏系数。     

环磷酰胺对肿瘤微环境调节作用的研究

目的：观察环磷酰胺（ CTX）对黑色素瘤小鼠动物模型肿瘤微环境的干预及抗瘤作用。方法应用黑色素瘤细胞B16细胞株皮下接种制备荷黑色素瘤的小鼠动物模型。将不同剂量的CTX分别对不同组的小鼠模型进行腹腔注射,流式细胞术检测小鼠脾淋巴悬液中中Treg 的含量,筛选CTX最佳剂量。应用流式细胞术检测最佳剂量CTX腹腔注射后Treg水平的动态变化。应用ELISA 法检测小鼠血清中IL-10、TGF-β水平的动态变化。定期测量肿瘤大小绘制出肿瘤的生长曲线。结果 CTX腹腔注射的最佳剂量为100 mg/kg,腹腔注射 CTX后Treg水平及IL-10、TGF-β水平均出现下降后再缓慢升高的波动趋势,低剂量CTX腹腔注射后不影响肿瘤的生长。结论低剂量CTX腹腔注射可以有效的调节肿瘤微环境,同时不影响荷瘤小鼠肿瘤的生长。     

固本养血口服液药效学研究

目的:研究固本养血口服液对环磷酰胺(CTX)致小鼠免疫和造血系统抑制的影响。方法:采用CTX腹腔注射(50mg·kg-1)复制免疫抑制小鼠模型,同时给予不同剂量的固本养血口服液,以贞芪扶正胶囊作对照,分别进行外周血细胞、免疫器官质量、血清溶血素的测定。结果:87.3g·kg-1剂量的固本养血口服液能够提高CTX致免疫抑制小鼠的白细胞(WBC)、淋巴细胞(L)、中性粒细胞(N)、血红蛋白(Hb)、红细胞(RBC)、血小板(PLT)、脾脏指数、胸腺指数、血清溶血素水平;26.3g·kg-1剂量的固本养血口服液能提高CTX模型小鼠的WBC、N、Hb、RBC、PLT、脾脏指数、血清溶血素水平;7.96g·kg-1剂量的固本养血口服液能提高CTX模型小鼠的WBC、N、血清溶血素水平。结论:固本养血口服液能够增强CTX所致免疫抑制小鼠的非特异性免疫和体液免疫功能,对CTX所致造血功能低下有显著促进恢复作用。     

槐白皮水提物对免疫抑制小鼠的免疫作用

目的 探讨槐白皮水提物对免疫抑制小鼠免疫功能的影响。方法 昆明小鼠随机分为正常组,模型组,香菇多糖组和槐白皮水提物低、中、高剂量组,除正常组外,其余各组连续3 d腹腔注射环磷酰胺复制免疫抑制模型。造模后连续灌胃给药14 d,血细胞计数仪测定小鼠外周血白细胞数目、称量并计算免疫器官系数、MTT法测定脾淋巴细胞增殖和NK细胞活性,ELISA检测血清IL-2、IFN-γ和TNF-α水平。结果 槐白皮水提物中、高剂量组明显提高免疫抑制小鼠的外周血白细胞水平和免疫器官系数,显著增加LPS诱导的脾淋巴细胞增殖,显著增强脾NK细胞活性,提高免疫抑制小鼠血清IL-2、IFN-γ水平;槐白皮水提物高剂量组明显提高ConA诱导的脾淋巴细胞增殖,显著提高免疫抑制小鼠血清TNF-α水平。结论 槐白皮水提物可以提高免疫抑制小鼠的免疫功能。     

板栗中蛋白质的分离鉴定及活性研究

目的探讨板栗中蛋白质的分离纯化及其促肾细胞生长作用和抗肿瘤作用及机制。方法从板栗中提取出的水溶性蛋白质,经鉴定是欧栗球蛋白(CAS)。利用MTT法检测该蛋白对正常肾细胞和肝癌细胞HepS,小鼠肉瘤S180腹水型肿瘤细胞增殖的影响;检验其对小鼠T细胞和B细胞增殖作用的影响;用DNA电泳方法检测该蛋白诱导HepS细胞凋亡的作用。结果 CAS在体外对正常肾细胞的增殖有促进作用,对试验的肿瘤细胞的增殖均有抑制作用,对T细胞和B细胞的增殖有促进作用,对HepS细胞具有诱导凋亡的作用。结论 CAS具有促肾细胞生长和抗肿瘤作用,其抗肿瘤作用机制可能通过提高机体免疫力和诱导细胞凋亡来实现。     

金黄扶正散对免疫抑制小鼠脾细胞凋亡的影响

目的研究金黄扶正散对免疫抑制小鼠脾细胞凋亡的影响。方法建立免疫抑制小鼠模型,金黄扶正散低、中、高剂量组分别连续给小鼠灌胃10d,小鼠处死后,取脾,比色法测定乳酸脱氢酶和酸性磷酸酶活性;采用TUNEL染色法观察脾细胞凋亡情况。结果与环磷酰胺组比较,金黄扶正散低、中、高剂量组可明显提高免疫抑制小鼠的乳酸脱氢酶和酸性磷酸酶活性(P<0.01,P<0.05);与正常对照组比较,环磷酰胺组凋亡指数显著性提高(P<0.05);金黄扶正散中、高剂量组凋亡指数与环磷酰胺组比较显著性下降(P<0.01,P<0.05)。结论金黄扶正散可抑制免疫抑制小鼠脾细胞凋亡,降低凋亡指数。     

蛞蝓提取物对环磷酰胺治疗肝癌的增效减毒作用

目的:探讨蛞蝓提取物(LE)对环磷酰胺(CTX)治疗肝癌的增效减毒作用。方法:将小鼠随机分为正常组,模型组,CTX组(0.02 g/kg),LE低、中、高剂量组(即LEL、LEM、LEH组,0.6、1.2、2.4 g/kg),CTX+LE低、中、高剂量联用组(即CTX+LEL、CTX+LEM、CTX+LEH组,剂量同各单药组),每组10只。除正常组外,其余各组小鼠均于左腋下接种小鼠肝癌细胞H22以复制荷瘤模型。接种24 h后,正常组和模型组小鼠灌胃生理盐水,各给药组小鼠分别灌胃相应药物,每日1次,连续10 d。末次给药后第2天,观察各组小鼠一般情况,测定体质量和胸腺指数(LI)、脾指数(SI),检测抑瘤率,并采用金氏公式评估联合用药的效果(q);检测模型组、CTX组和各联用组小鼠的白细胞(WBC)、红细胞(RBC)、血小板(PLT)计数以及血清中丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(ALT)、血肌酐(Scr)、尿素氮(BUN)含量,并采用比色法和酶联免疫吸附测定(ELISA)法分别检测上述各组小鼠肿瘤组织中丙二醛(MDA)含量和超氧化物歧化酶(SOD)、还原型谷胱甘肽(GSH)活性以及血管内皮生长因子(VEGF)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素6(IL-6)水平;采用免疫组化法检测模型组、CTX组和CTX+LEM组小鼠肿瘤组织中癌基因蛋白(p53、Bcl-2、Bax)的表达水平。结果:模型组小鼠精神不佳,且出现多饮、多食症状;其体质量、TI、SI虽较正常组无明显异常(P>0.05),但其WBC计数、AST含量均显著升高,ALT、BUN含量均显著降低(P<0.05或P<0.01)。与模型组比较,各给药组小鼠上述症状有所改善;各给药组的瘤体质量,CTX组的TI、SI以及各联用组的TI均显著降低,但LEL组、LEH组的瘤体质量,LE单用组及各联用组的TI、SI均显著高于CTX组,各联用组的瘤体质量均显著低于CTX组(P<0.05或P<0.01);各给药组的抑瘤率为29.58%~72.08%,CTX+LEL组、CTX+LEM组、CTX+LEH组的q值分别为1.03、0.97、0.86。与模型组比较,CTX组小鼠的WBC计数和AST、BUN含量,各联用组的MDA含量,各给药组的VEGF、TNF-α、IL-6水平以及CTX组和CTX+LEM组的Bcl-2表达水平均显著降低,各给药组的SOD、GSH活性以及CTX+LEM组的p53表达水平,CTX组和CTX+LEM组的Bax表达水平均显著升高(P<0.05或P<0.01);但各联用药组的WBC计数和AST含量以及CTX+LEM组的ALT含量,CTX+LEH组的SOD活性和CTX+LEM组的GSH活性均显著高于CTX组,CTX+LEH组的MDA含量,CTX+LEM组、CTX+LEH组的VEGF、TNF-α水平和各联用组的IL-6水平均显著低于CTX组(P<0.05或P<0.01)。结论:LE和CTX联用具有相加的抑瘤作用,且LE可减少CTX致小鼠免疫功能减退、骨髓抑制等毒性反应,具增效减毒的作用。这种作用可能与抗氧化应激、抑制血管生成和炎症因子分泌以及调控凋亡蛋白的表达有关。     

瓜蒌皮对环磷酰胺致免疫功能低下小鼠免疫功能的影响

目的:研究瓜蒌皮对环磷酰胺致免疫功能低下模型小鼠免疫功能的影响。方法:以ip环磷酰胺建立小鼠免疫低下模型,ig给予瓜蒌皮浓缩液后采用含药血清体外培养小鼠腹腔巨噬细胞,MTT法考察巨噬细胞的活性及其吞噬鸡红细胞的吞噬百分率和吞噬指数;测定小鼠体内巨噬细胞的吞噬指数和吞噬系数、血清溶血素含量、淋巴细胞的转化率。结果:瓜蒌皮能提高免疫抑制小鼠吞噬系数、血清溶血素含量,促进T淋巴细胞转化;能提高巨噬细胞的活性及其吞噬鸡红细胞的能力。结论:瓜蒌皮有提高免疫抑制小鼠免疫功能的作用。     

尖尾芋醇提物保护黑色素瘤小鼠脾的作用机制

目的研究尖尾芋醇提物对荷瘤小鼠脾保护的作用机制。方法C57BL/6小鼠背部右侧皮下接种黑色素瘤B16-F10细胞后,将未造模的6只小鼠作为正常组(normal),造模的30只小鼠随机分为模型组(model)、环磷酰胺组(CTX)和低、中、高剂量的尖尾芋醇提物组(lEAC、mEAC、hEAC),每组各6只。连续给药10 d,末次给药24 h后,小鼠眼球采血后颈椎脱臼处死,剥离脾组织并称重计算脏器指数,以苏木精-伊红(HE)染色观察脾组织的病理变化,以TUNEL荧光染色检测不同组小鼠脾组织中细胞凋亡的情况,以免疫组化检测脾组织中B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)和胱天蛋白酶-3(caspase-3)蛋白表达水平,以细胞计数法-8(CCK-8)法检测尖尾芋醇提物对正常小鼠脾细胞的生长活性的影响。结果模型组和高剂量尖尾芋醇提物组脾指数分别为5.26±0.94和7.78±1.63,差异有统计学意义(P<0.01)。免疫组化中,正常组、模型组和高剂量尖尾芋醇提物组小鼠脾组织中Bcl-2阳性细胞IOD值分别为8171.34±1210.74,712.79±203.90和7437.72±1342.33;Bax阳性细胞IOD值分别为1235.50±302.81,1.14×10⁴±882.91和5241.06±991.12;caspase-3阳性细胞IOD值分别为2197.56±388.14,1.08×10⁴±700.90和3267.04±531.23。模型组与正常组相比,高剂量尖尾芋醇提物组与模型组相比,差异均有统计学意义(均P<0.01)。结论尖尾芋醇提物能够抑制荷瘤小鼠的脾组织在肿瘤微环境下发生异常凋亡,对荷瘤小鼠脾组织具有一定的保护作用,其作用机制与上调Bcl-2抗凋亡的蛋白的活性,降低Bax促凋亡的蛋白的活性,减低caspase-3蛋白表达相关。     

防芪汤及其组方对免疫抑制小鼠免疫功能的影响

目的:探讨防芪汤及其组方对免疫抑制小鼠免疫功能的影响。方法:建立受氢化可的松(HC)免疫抑制动物模型,应用防芪汤及其组方对免疫抑制小鼠进行治疗,观察其对免疫抑制小鼠免疫功能的影响。结果:防芪汤可明显增强免疫抑制小鼠腹腔巨噬细胞(MΦ)的活性和红细胞C_3b受体(RBC—C_3bR)花环形成率、脾细胞产生抗体的能力及白介素-2(IL—2)的活性,增强红细胞免疫复合物(RBC-IC)花环形成率和脾细胞增埴反应。黄芪配伍水煎液能促进免疫抑制小鼠的腹腔MΦ的活性和IL—2的活性,增强脾细胞产生抗体的能力,但作用不及防芪汤;防已配伍水煎液能促进免疫抑制小鼠脾细胞产生抗体,作用与黄芪配伍水煎液相近。结论:防芪汤能增强受HC免疫抑制小鼠的各项免疫功能。     

人甲胎蛋白启动子控制HIV-1 Vpr表达的重组腺病毒体内抑瘤效果研究

目的：研究人甲胎蛋白启动子控制表达HIV Vpr基因的重组腺病毒对裸鼠肝癌模型的肿瘤组织生长抑制作用，探讨其应用于肝癌基因治疗的可行性。方法：将人甲胎蛋白启动子控制表达HIV Vpr基因的重组腺病毒（rvAdAFP-Vpr）直接注射到利用BEL-7402细胞建立的肝癌裸鼠模型瘤体内，同时往裸鼠腹腔内注射环磷酰胺（CTX），经过1个月的治疗，利用肿瘤生长曲线、增殖指数、凋亡指数等指标，观察rvAdAFP-Vpr对肝癌组织生长抑制的效果。结果：人甲胎蛋白启动子控制表达HIV Vpr基因的重组腺病毒在肝癌组织中表达了Vpr蛋白，rvAdAFP-Vpr注射明显诱导肿瘤细胞凋亡，抑制了体内肝癌组织的生长，rvAdAFP-Vpr治疗组和rvAdAFP-Vpr＋CTX治疗组抑瘤率分别达到41％和66．7％，与空白对照组和rvAd-null组相比，具有统计学意义，差异显著（P〈0．05，P〈0．01），两组的Ki-67指数和凋亡指数相比，对照组和空腺病毒载体（rvAd-null）组同样具有统计学意义，差异显著（P〈0．05，P〈0．01）。结论：人甲胎蛋白启动子控制表达HIV Vpr基因的重组腺病毒rvAdAFP-Vpr通过引起肝癌细胞凋亡，有效抑制了体内肝癌组织的生长。本研究结果为HIV-1 Vpr应用于肝癌治疗提供了依据。     

山楂中谷甾醇抑制肿瘤细胞的研究

目的从山楂中提取及鉴定谷甾醇,并研究其对3种肿瘤细胞和人体正常肝脏细胞的作用。方法取对数生长期的细胞进行MTT法细胞增殖实验及DNA凝胶电泳实验,观察谷甾醇对不同细胞的作用。结果MTT法细胞增殖实验显示一定剂量的谷甾醇对体外培养的HepS、S180、EAC细胞有显著的抑制作用(P<0.01),抑制率总体上与时间和浓度呈正相关;对L02细胞无明显的抑制作用(P>0.05);电泳结果显示经谷甾醇作用的HepS细胞DNA出现梯带。结论谷甾醇可能是通过促进肿瘤细胞凋亡来抑制其增殖。