哈蟆油真伪鉴别研究的回顾和展望

本文综述了哈蟆油原动物来源的研究,真伪哈蟆油的性状、显微结构、理化特性方面的鉴别研究现状及展望.     

哈蟆油发酵乳中蛋白质及氨基酸含量分析

目的：建立哈蟆油发酵乳中蛋白质及氨基酸含量分析方法。方法运用考马斯亮蓝法测定哈蟆油发酵乳中蛋白质含量,运用氨基酸自动分析仪测定哈蟆油发酵乳中氨基酸的含量。结果3批哈蟆油发酵乳蛋白含量分别为8.0501、8.0930、7.7582 mg/mL。平均总氨基酸的含量为15.3205 mg/mL。结论哈蟆油发酵乳中含有合成人体所需蛋白质及丰富的氨基酸。     

哈蟆油水提物祛痰及免疫作用初步研究

本实验研究了哈蟆油水提物在祛痰及免疫功能方面的药理作用^[1],祛痰作用实验采取小鼠酚红法^[2],免疫作用实验采用碳粒廓清法^[3]来研究哈蟆油对单核细胞吞噬功能的影响。结果表明哈蟆油无祛痰作用;但对小白鼠血中炭粒清除速度有加快的作用。免疫实验的研究结果表明哈蟆油对小白鼠的单核细胞的吞噬功能有促进作用。这一结果为哈蟆油的进一步开发利用提供了药理依据。     

大鼠卵巢颗粒细胞体外培养及哈蟆油对其增殖功能的影响

目的 采用CCK-8法研究哈蟆油对体外培养大鼠卵巢颗粒细胞增殖的影响,对比分析哈蟆油含药血清对颗粒细胞的最佳作用浓度和时间,为进一步体外试验奠定基础.方法 选用25日龄未成年雌性SD大鼠,腹腔注射孕马血清,48 h后脱颈处死,收集卵巢颗粒细胞,在DMEM-F12培养液中培养,并通过HE染色和免疫荧光技术对颗粒细胞进行鉴定.25只SD大鼠分为正常对照组、阳性药对照组、哈蟆油低、中、高剂量组,灌胃给药7d后采血并分离血清.将体积分数为10％,20％,40％,80％各组不同浓度的含药血清加入体外培养的大鼠卵巢颗粒细胞体系中,采用CCK-8法检测各组24、48 h和72 h细胞增殖情况.结果 哈蟆油显著提高了颗粒细胞的增殖能力,有一定的量效和时效关系,随着哈蟆油浓度的增加,其促增殖能力逐渐增强,在作用48 h后,20％浓度体积分数的哈蟆油含药血清组最为显著(P＜0.05).结论 体外建立大鼠卵巢颗粒细胞的培养方法,有助于深入研究哈蟆油等中药对卵巢的作用和机制.     

不同贮藏年限哈蟆油的电泳比较

哈蟆油是一种名贵的动物药,为东北地区特产的一种营养价值极高的滋补性中药。哈蟆油在贮藏过程中,常常颜色变深变暗,出现类似“走油”的现象,这些现象不仅使哈蟆油的品质降低,还直接影响其经济效益。哈蟆油中含有大量蛋白质、氨基酸等,这些成分的变化是否会引起其品质发生变化,故本实验采用SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳法考察了不同贮藏年限哈蟆油的蛋白质情况。     

名贵药材哈蟆油化学成分的现代研究进展

哈蟆油为蛙科动物中国林蛙Rana temporaria chensinensis David雌蛙的输卵管,经采制干燥而得,又名田鸡油、哈士蟆油等.哈蟆油是一种传统中药,主产地是黑龙江、吉林、辽宁省,尤以吉林省为多.据报道[1],哈蟆油具有健脾养胃、滋阴补肾、润肺生津之功效,是一种扶正固本的药物,对体弱气虚、气血亏损、精力耗损、记忆力不佳、神经性头痛、神经衰弱等均有很好疗效[2].近半个世纪以来,国内外学者对其进行了一些研究,目前已知的哈蟆油的化学成分多数为一般性成分,对其指标性、专属性或特征性成分的深入研究尚不够.现在所做的研究主要有以下几个方面的成分研究:     

基于配方配伍药效学及正交试验优选复方哈蟆油片配方组成及工艺参数

目的优选复方哈蟆油片配方及提取工艺。方法设黄芪-红景天(A)、黄芪-哈蟆油(B)、黄芪-红景天-哈蟆油(C)3个药物配伍组,每组分别设3个亚组和空白对照组,给不同剂量及配方的提取物30 d后,观察各组小鼠体质量和负重游泳时间。优选出复方哈蟆油片的最佳配方:采用L9(34)正交试验设计,以黄芪甲苷及红景天苷为考察指标,优选出最佳提取工艺条件。结果黄芪+红景天+哈蟆油中剂量组小鼠的游泳时间明显长于对照组(P0.05)。复方哈蟆油片最佳水提工艺为加入8倍量水,煎煮3次,每次1.5 h。结论黄芪+红景天+哈蟆油配方具有显著缓解小鼠体力疲劳的作用。优选的提取工艺对各功效成分提取率均较高,可以为制剂大生产提供依据。     

哈蟆油的原动物分类阶元探讨

目的:根据近代国内外学者关于林蛙属的研究报道及笔者所研究的内容,进一步探讨哈蟆油的原动物分类阶元.方法:综合分析文献资料报道,从形态学、染色体组型、银带及同工酶电泳、基因水平等方面,探讨哈蟆油原动物的分类地位.结果:哈蟆油的原动物基源为东北林蛙.结论:其分类阶元为我国蛙类的一有效物种.     

哈蟆油活性部位的研究

哈蟆油活性部位的研究刘素琴，邓英杰，刘淑珍沈阳药科大学药物研究所１１０Ｏ１５蒋亚君，李淑范沈阳市延风制药厂苗林哈尔滨医科大学哈蟆油（ＯｖｉｄｕｃｔｕｓＲａｎａｅ）亦称哈土蟆油，田鸡油，为蛙科动物中国林蛙（Ｒａｎａｔｅｍｐｏｒａｒｉａｃｈｅｎｓｉｎｅｎ...     

哈什蟆原动物研究

哈什蟆主要分布于长白山区域,是我国一种重要的野生药用动物,其干燥输卵管即为中外驰名的珍贵中药材:哈蟆油.对于哈什蟆的原动物问题存有不同观点,对记载哈什蟆的历史文献以及有关中国林蛙的分类研究文献进行整理,确认我国东北地区的林蛙有黑龙江林蛙(Rana amurensis Boulenger)、桓仁林蛙(Rana huanrenensisLiu,Zhang and Lliu)和东北林蛙(Rana dybowskii Güenther),哈什蟆的原动物暨哈蟆油的动物基源为东北林蛙.     

哈蟆油的营养保健成分及药理作用

哈蟆油为蛙科动物中国林蛙(Rana temporaria chensinensis David)雌蛙的干燥输卵管,具有健脾益胃、滋阴补肾、润肺生津等功效,是一种营养保健价值极高的滋补品,本文就其哈蟆油的营养保健成分及药理作用归纳如下.     

哈蟆油对D-半乳糖所致雄性衰老大鼠肝组织CyclinD1、CDK6和P15蛋白表达的影响

目的 探讨哈蟆油对D-半乳糖所致雄性衰老大鼠肝组织细胞周期素D1(CyclinD1)、周期性依赖性激酶6(CDK6)和细胞周期蛋白D/CDK激酶的抑制因子P15蛋白表达调控的影响.方法 SPF级SD雄性大鼠18只,随机分为模型、维生素E(VE)和哈蟆油组,每组6只,D-半乳糖颈背部皮下连续注射6周,另取雄性大鼠6只,同样部位每日注射生理盐水,作为空白组.第3周开始灌胃给药,给药时间30 d.给药结束后收集标本采用Western blotting法检测肝组织CyclinD1、CDK6和P15蛋白的表达.结果 与空白组比较,模型组大鼠肝脏CyclinD1蛋白、CDK6蛋白、P15蛋白表达明显下调.雄性衰老大鼠口服哈蟆油后,CyclinD1、CDK6和P15蛋白表达量(与内参比较)分别为41.73±0.54、23.29±0.30和21.49±0.30.与模型组相比,哈蟆油组能明显上调肝脏Cyelin D1、CDK6、P15蛋白的表达(P＜0.01).结论 哈蟆油能不同程度上调CyclinD1和CDK6蛋白表达,促进衰老雄性大鼠肝细胞增殖.同时反馈性上调细胞增殖负性调控蛋白P15表达,防止不必要的过度增殖.哈蟆油延缓雄性衰老作用可能通过调控肝脏有关增殖蛋白表达发挥抗衰老作用,与VE作用有所不同.     

中药蛤蟆油的鉴定研究

对哈蟆油(Rana temporaria chensinesis)和中华大蟾蜍(Bufo bufo gargarizans)干燥输卵管进行了性状与理化鉴定,结果表明在灼热变化,水泡膨胀系数,化学定性反应,酸水解氨基酸,碱水解色氨酸,游离氨基酸的定性定量等方面,二者均有明显差异,提供了鉴定哈蟆油真伪的依据与方法,证实中华大蟾蜍干燥输卵管不能充哈蟆油药用。     

0.5%哈蟆油匀浆对NK细胞活性和细胞免疫功能影响实验研究

目的:观察0.5%(g/mL)哈蟆油匀浆对NK细胞活性和增强细胞免疫作用的影响。方法:用乳酸脱氢酶LDH测定法研究对NK细胞活性的影响;用小鼠迟发型变态反应(DTH)研究对细胞免疫功能的影响。结果:经口给予小鼠不同剂量的0.5%哈蟆油匀浆30 d,对小鼠NK细胞活性无影响;能增强小鼠迟发型变态反应,即能增强细胞免疫功能。结论:0.5%哈蟆油匀浆对NK细胞活性无影响,根据动物实验结果,成人每日服用20 mL具有增强细胞免疫的作用。     

哈蟆油的免疫调节作用及其微球的制备工艺

目的：研究哈蟆油对免疫系统的影响,并探讨其制备成微球的工艺。方法：50只ICR小鼠随机分为空白对照组、模型组、哈蟆油低剂量组（0.1 g·kg^-1）、哈蟆油中剂量组（0.4 g·kg^-1）和哈蟆油高剂量组（1.0 g·kg^-1）,每组10只。采用流式细胞术检测小鼠脾T淋巴细胞亚群含量,ELISA法测定脾T淋巴细胞中白细胞介素2（IL-2）含量。以喷雾干燥法制备哈蟆油微球,采用正交试验法考察进风温度、出风温度、物料比、进料速度,以平均粒径、粒径分布、载药量、包封率为考察指标,确定哈蟆油微球最佳制备工艺。结果：与空白对照组比较,模型组小鼠的脾T淋巴细胞亚群CD3+、CD4+水平和CD4+/CD8+比值明显增加,差异均有统计学意义（P<0.001）;与模型组比较,哈蟆油低剂量组小鼠的脾T淋巴细胞亚群CD3+和CD4+水平明显降低（P<0.001）,CD4+/CD8+比值明显降低（P<0.05）;与空白对照组比较,模型组小鼠的脾T淋巴细胞中IL-2含量明显降低（P<0.001）;与模型组比较,哈蟆油低、中、高剂量组小鼠的脾T淋巴细胞中IL-2含量均显著增高（P<0.001）。采用喷雾干燥法制备微球,最佳工艺为A3B1C1D1,即物料比1∶3、进风温度130℃、出风温度100℃、进料速度     

哈蟆油对哮喘豚鼠炎性因子及肺组织病理变化的影响

目的探讨哈蟆油对哮喘豚鼠模型的影响和作用机制。方法健康雄性豚鼠60只,分为空白对照组,模型组,阳性对照组(地塞米松,1 mg/kg),哈蟆油高、中、低(400、200、100 mg/kg)剂量组,卵清蛋白激发造模,腹主动脉取血,酶联免疫法检测豚鼠血清中IL-4、IL-5、免疫球蛋白Ig E含量;HE染色观察肺组织病理学改变。结果与正常组相比,模型组IL-4、IL-5、IgE数量均显著增加差异具有统计学意义(P0.01);与模型组相比,阳性对照组,哈蟆油高、中剂量给药组IL-4、IL-5、IgE数量均极具显著性差异有统计学意义(P0.01)。哈蟆油低剂量组差异具有统计学意义(P0.05)。病理结果模型组平滑肌增厚,炎性浸润较为显著,各给药组均不同程度得到改善。结论哈蟆油可缓解哮喘豚鼠模型的症状,其作用途径可能与降低机体炎性因子的分泌、改善免疫平衡有关。     

不同提取方法对哈蟆油中雌二醇含量的影响

目的 利用3种不同方法提取哈蟆油中雌二醇并测定其相应雌二醇含量,优选出提取哈蟆油中雌二醇最佳方法.方法 采用ODS-C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为磷酸水-乙腈-甲醇(63:32:5);检测波长:280 nm;柱温:30℃;流速:1.0 mL/min.结果 90%乙醇提取法中雌二醇含量为7.5μg/g,超临界提取法中(无夹带剂)雌二醇含量为1.25μg/g,超临界提取法中(有夹带剂)雌二醇为0.83μg/g.结论 利用90%乙醇提取哈蟆油中雌二醇方法最佳.     

蛤蟆油与明太鱼精巢的经验鉴别

蛤蟆油与明太鱼精巢的经验鉴别万立杰，王如九营口市药品检验所１１５０００彭文才营口市中医院１１５０００哈蟆油：为蛙科动物中国林蛙（ＲａｎａｔｅｍｐｏｒａｒｉａＣｈｅｎｓｉｎｅｎｓｉｓＤａｖｉｄ）雌体干燥输卵管．干品哈蟆油的性状鉴别同中国药典１９９０年版...     

莪术、哈蟆油对去势后大鼠雌激素水平及受体表达的影响

目的 检测莪术、哈蟆油对去势后大鼠血清雌激素水平、脾脏雌激素受体表达,探讨其对生殖内分泌-免疫网络的影响及作用机制.方法 将成年SD雌性大鼠去势后制成更年期综合征模型,给药12周后,采用放射免疫法测定大鼠血清性激素(E2、FSH、LH、T、P)和白介素-2含量.取脾脏用免疫荧光法检测雌激素受体表达.结果 与模型对照组比较大剂量莪术、哈蟆油能升高去势大鼠血清E2、T、P水平(P<0.01),明显提高IL-2含量(P<0.01),有降低FSH、LH含量趋势(P0.05),并能显著升高脾脏ER表达水平(P<0.01).结论 莪术、哈蟆油可提高去势大鼠血清性激素水平,增强脾脏ER表达.为临床治疗更年期综合征提供实验依据.     

采用等离子体发射光谱法对不同产地哈蟆油无机元素的含量分析

哈蟆油为中国林蛙(Rana temporaria chensinensisDavid)雌蛙的输卵管干制品。具有补肾益精、养阴润肺的功能,是货源紧缺的贵重药材。近年来,许多俄罗斯产贵重动物药材进入国内医药市场,为对比俄罗斯产哈蟆油与国产的内在质量,确定临床用药,本次实验采用等离子体发射光谱法对两样品进行无机元素研究。