PAP和双桥PAP染色法在淋巴结陈旧石蜡包埋标本中的应用

本文应用未标记抗体过氧化物酶和抗过氧化物酶(PAP和双桥PAP)技术染色,保存5～20年,福尔马林固定的石蜡包埋标本,显示反应性增生和腺癌转移淋巴结中IgG产生细胞。分析比较减低背景着色的四种方法、PAP与双桥PAP法的染色效果,以及各种抗体和DAB液中H_2O_2浓度对染色效果的影响。进一步证实PAP法是适合在石蜡切片上进行回顾性研究的高敏感、高特异性方法。     

肝活检标本中检测乙型肝炎表面抗原方法的比较

应用地衣红、醛复红染色、免疫荧光和双桥PAP法,对显示石蜡切片肝活检标本中的HBsAg进行了比较。结果表明组化染色中地衣红染色简便、实用。双桥PAP染色显示HBs-Ag阳性率高达90％,且方法具有特异性、敏感性。     

PAP法和双桥PAP法检测乙型肝炎核心抗原的比较

近十余年发展起来的“非标记酶技术”,尤其是酶抗酶可溶性复合物法(简称PAP法)是比间接酶标法更敏感的免疫酶染色技术。本文介绍了兔抗辣根过氧化物酶(HRP)血清以及PAP的制备方法,讨论了PAP制备过程中使用的酶及其用量,简化了酶/抗酶克分子比值计算公式。并以制得的PAP用于检测肝组织内的乙型肝炎核心抗原(HBcAg)。 通过对20例各种肝病共71只蜡块的检查比较,认为双桥PAP法敏感性比PAP法更高,并具有节约第一抗体用量的优点。     

消化酶、固定剂对石蜡包埋肝组织DPC和FN—PAP法染色的影响

本文作者对不同固定剂和消化酶对石蜡包埋肝组织desmin阳性细胞(DPC)和纤维联接蛋白(FN)PAP法染色的影响进行了比较研究。所试固定剂中,除Carnoy液外,其它皆需酶消化。对FN染色以缓冲福尔马林或4％多聚甲醛固定、0.2％胃蛋白酶消化2 h为宜。DPC染色以缓冲福尔马林或4％多聚甲醛固定、胃蛋白酶与胰蛋白酶双重消化各45 min最为理想。结果提示石蜡包埋组织PAP法染色显示细胞内外抗原时应注意选择适宜的固定剂和消化酶。     

单克隆鼠PAP制备及其有关特性的研究

采用自制抗辣根过氧化酶单克隆抗体(抗HRP McAb)进行了鼠单克隆PAP(PAPm)研制。并对其染色特性进行观察。以抗HRP McAb AP_4制备PAPm、酶与抗体克分子比值以1:3为佳;腹水与上清制备的PAPm免疫组化染色效果相似,ELISA显色前者低于后者;用于肝组织HBsAg定位检测,本室AP_4、AP_2、AP_5三种抗HRP腹水制备PAPm的染色效价,显色强度及本底显色相当,均接近或达到Sigma公司同类制品的效果。为采用McAb进行临床免疫组化研究提供了可靠的试剂保证。     

PAP法与PAAP法结合的双重免疫染色技术

介绍在同一切片上显示两种抗原物质在同一结构内比较分布的一种双重免疫染色技术。实验用过氧化物酶－抗过氧化物酶（ＰＡＰ）法作为第一染色序列，用碱性磷酸酶标Ａ蛋白（ＰＡＡＰ）法作为第二染色序列，最终分别产生深棕褐色和紫蓝色反应产物。其特点在于利用Ａ蛋白能与ＩｇＧ抗体分子Ｆｃ段牢固结合的分子生物学特性，在进行第二序列反应显色的同时，使第一序列反应产物的染色强度得以增加。结果表明，此技术能反差鲜明地显示含有     

采用多克隆与单克隆辣根过氧化酶抗体制备多种系性PAP的初步研究

本文研制出一种新的多种系性PAP复合物。采用双扩、参比扩散及免疫沉淀试验证实辣根过氧化酶(HRP)、兔抗HRP及鼠单克隆抗HRP三者同存于一分子PAP复合物中。将其用于ELISA及免疫病理染色,效果与普通兔PAP及鼠单克隆PAP相近,但可通过两种不同桥抗体,与作为第一抗体的兔IgG及鼠(单克隆)IgG连接,代替兔PAP与鼠单克隆PAP进行染色,在不改变反应方式的情况下,能部分克服PAP复合物在应用中的种系限制。     

PAP法显示人早期胎盘绒毛促性腺激素(hCG)的定位

收集了8例正常人早期胎盘组织,采用PAP法显示人胎盘绒毛hCG的定位。观察结果表明仅合体滋养层细胞质内有免疫组织化学阳性反应,而合体滋养层细胞核、细胞滋养层细胞和绒毛轴心都是阴性反应。这结果证实了大多数学者的看法,即hCG定位在合体滋养层细胞质内。比较了三种免疫过氧化物酶方法的敏感性,肯定了PAP法优于酶标记抗体法,双PAP法又优于PAP法。由于PAP法不仅敏感性高而且特异性染色与非特异性染色之间的对比清楚,因此认为此法最可采用。 本工作还对不同固定液和孵育的不同温度和时间对PAP法染色的影响作了比较和讨论。     

免疫组织化学双PAP方法在淋巴瘤科研上的应用

免疫组织化学双PAP方法国内外已应用于淋巴瘤科研工作中。其原理是利用酶与抗体或抗原结合后,既不改变抗体或抗原的免疫学反应的特异性,也不影响酶本身的活性。在适当的酶底物中很稳定,所以染色标本可以长期保存。 PAP法是过氧化酶——抗过氧化酶免疫复合物方法的简称。PAP制备是将辣根过氧化酶(Horseradish Peroxidaes)和其特异性抗体制成可溶性复合物,再使其与直接或间接结合在抗原上的抗体连接起来,最后用酶底物显色。 Vacca(1980)在PAP法的基础上,重新使用第二抗体与PAP形成更大的抗原——抗体复合物,进一步提高了敏感性,比     

重组腺病毒介导HIP/PAP治疗小鼠实验性急性肝衰竭

目的 观察以重组腺病毒载体介导肝肿瘤-肠道-胰腺基因(HIP/PAP)腹腔注射对小鼠D-氨基半乳糖急性肝损害的保护作用,为急性肝衰竭的临床治疗探索新的方法.方法 Balb/C小鼠80只(雄性)随机分成四组,分别是正常组、Ad-HIP/PAP组、Ad-LacZ组及模型组;每组又分成a、b两组.分别予腹腔注射生理盐水、Ad-HIP/PAP、Ad-LacZ、生理盐水,2d后用D-氨基半乳糖(D-Gal)诱导急性肝衰竭模型(1.0 g/kg),后对a组小鼠进行肝功能指标、肝脏病理学、胃肠免疫组化的检测.b组观察14d,记录小鼠死亡时间及死亡数.结果 免疫组化证实Ad-HIP/PAP腹腔注射后,肠壁可测到HIP/PAP的表达,而正常组未检测到.Ad-HIP/PAP组血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)含量明显低于Ad-LacZ组、模型组(P＜0.05),差异有统计学意义.Ad-LacZ组及模型组肝组织坏死严重,Ad-HIP/PAP组肝组织病变稍轻.观察14 d后,Ad-LacZ组及模型组小鼠全部死亡,Ad-HIP/PAP组小鼠死亡较少.结论 重组腺病毒介导HIP/PAP腹腔表达具有能显著保护肝细胞,预防D-Gal所致小鼠急性肝衰竭作用.腺病毒介导HIP/PAP表达有可能成为急性肝衰竭的治疗手段之一.     

关节手术病人血浆凝血酶-抗凝血酶复合物、纤溶酶-α2抗纤溶酶复合物的研究

目的 探讨髋、膝关节手术病人血栓前状态和血液中凝血-纤溶系统的变化.方法 每组病人术前及术后1、4、7、10天检测TAT、PAP、血凝常规等指标;术前及术后第7天～10天应用彩色多普勒超声仪监测DVT.结果 ①手术组共有18例(40.9%)术后并发DVT,保守组共有9例(22.0%)并发DVT,对照组无DVT发生;②手术组术后并发DVT者术前及术后TAT均显著升高,而PAP水平较低;③术后并发DVT者与术前PAP/FB比值相关.结论 ①术前TAT检测可作为术后是否并发DVT的一项较有意义的预测指标.②术前较低的纤溶水平可能成为髋、膝关节置换术后DVT发病率高的原因之一.③术前血浆PAP/FB比值有望成为预测术后DVT的有用指标.     

肺泡蛋白沉着症的临床特点和早期诊断

目的　探讨肺泡蛋白沉着症 (PAP)的临床特点和早期诊断。方法　对 4例经纤维支气管肺泡灌洗液 (BALF)病检证实的PAP患者病史进行回顾性分析 ,仔细观察BAL治疗前后各病例的症状 ,体征、影像等的特征性变化情况。结果　反复咳嗽、咳痰 ,进行性呼吸困难 ,慢性呼吸功能衰渴以及典型的影像表现与临床症状不相称是PAP的特征。BALF病检PAS染色阳性是确认PAP的重要依据。BALF可长期改善PAP患者的大部分症状。并使影像呈良性改变。结论　详询病史结合影像 ,BPLF的PAS染色对早期诊断本病至关重要。限制性肺通气功能障碍 ,CO2 弥漫散功能降低 ,血清LDH增高对诊断PAP有一定的参考价值。     

雷公藤巴布剂对大鼠佐剂性关节炎的治疗作用

用Ｆｒｅｕｎｄ＇ｓ完全佐剂诱发大鼠产生佐剂性关节炎（ＡＡ），以继发性反应左后足跖的肿胀度、前肢、耳和尾部病变的发生率以及免疫器官胸腺、脾脏指数为指标，观察了雷公藤巴布剂对大鼠ＡＡ的治疗作用。结果表明，雷公藤巴布剂对ＡＡ有明显的治疗作用，其效果较等剂量口服的片剂及浸膏剂显著。     

宫颈刮片、阴道镜及HPV检测在宫颈癌筛查中的体会

目的:总结宫颈刮片、阴道镜及HPV检测在宫颈病变诊断中的临床经验,对宫颈癌筛查提出合理化建议。方法:对3种方法任何一项检测异常者行阴道镜下病理活检及宫颈管搔刮,以组织学诊断作为金标准。对212例病理结果阳性(CINI、CINII、CINIII、宫颈浸润癌)的患者,比较3种方法的检出敏感度,及在细胞学及阴道镜检查中漏诊的临床体会。结果:212例病理结果阳性者中,宫颈刮片阳性者151例,敏感度为71.23%,阴道镜阳性者167例,敏感度为78.77%,两者阳性检出率相比无显著性差异(P>0.05)。高危型HPV感染者182例,敏感度83.02%,与阴道镜的敏感度相比,无显著性差异(P>0.05),与宫颈刮片相比,有显著性差异(P<0.05)。结论:宫颈癌的筛查及早期诊断,应以宫颈细胞学检查、阴道镜检查及HPV检测相互结合以提高检出率。     

核素心血管造影及门电路心血池显像检测肺动脉压力的研究

应用放射性核素心血管显像原理，一次性注药，同时获得放射性核素心血管造影及门电路心血池显像，测右心射血分数，肺尖、肺底放射性核素分布峰值，来定量分析肺动脉压力。结果，肺心病患者右心射血分数明显降低；肺尖与肺底放射性核素分布峰值比和右心射血分数之间呈负相关；而上述峰值比与应用心导管法测平均肺动脉压力呈正相关；平均肺动脉压与ＲＶＥＦ之间为负相关，该法简便，安全、重复性好，是一项无创性估价肺动脉压力的方法。