上海地区某三甲医院艰难梭菌感染临床分析及微生物学特征研究

背景：近年来,艰难梭菌作为医院感染的重要病原菌逐渐受到国内外研究者的重视,然而国内相关报道较少。本研究拟对上海地区某三甲医院艰难梭菌感染情况进行临床分析和微生物学特征研究。 方法：本研究收集2010年12月至2013年3月艰难梭菌感染的住院病人,对临床数据进行回顾性分析;同时分离病原体艰难梭菌,采用微生物学和分子生物学方法对其进行药物敏感试验、毒素检测、芽孢及生物膜形成、动力试验和多位点序列分型等研究。 结果：本研究共入选94例艰难梭菌感染患者,其中12例为严重感染。对临床信息进行分析表明,所有患者均接收过质子泵抑制剂和（或）抗生素治疗,且分布在不同的科室,其中消化科较多,占29.79%（28/94）。通过比较感染严重病例组和感染轻微病例组,感染的病原体之间在微生物学特征上未发现有统计学意义的差异。94株艰难梭菌中,31株为A毒素阴性B毒素阳性（A-B ）且为序列型ST37,为流行克隆株。与其他克隆来源的菌株相比,流行克隆株产较少的毒素和芽孢,生物膜形成和动力也相似,但都对头孢菌素类、喹诺酮类、大环内酯类-林可酰胺类链霉素类和四环素类具有较高的耐药性。 结论：在艰难梭菌感染严重病例中,没有发现特异的临床症状和微生物学特征。高耐药性可能是艰难梭菌感染流行和传播的主要潜在原因之一。     

艰难梭菌的耐药性及耐药机制研究进展

艰难梭菌是抗生素相关性腹泻最常见的病原菌。近年来,艰难梭菌感染已对全球公共卫生健康造成威胁,艰难梭菌感染极有可能在住院患者,特别是在医院感染高风险科室中流行甚至暴发。绝大多数临床分离株对甲硝唑及万古霉素仍呈高度敏感,但已有最低抑菌浓度及异质性耐药的报道,艰难梭菌对甲硝唑及万古霉素的耐药机制尚不明确,但对氟喹诺酮类、红霉素及克林霉素的耐药机制主要是因为靶点发生了改变。本文阐述了国内外艰难梭菌耐药情况及机制方面的研究。     

非产毒艰难梭菌对艰难梭菌感染BALB/c小鼠的防治作用

目的观察非产毒艰难梭菌对艰难梭菌感染的防治效果。方法用艰难梭菌产毒株人工感染BALB/c小鼠,感染前后分别用非产毒艰难梭菌进行预防与治疗,以小鼠的死亡数、盲肠内容物上清液的细胞毒性和盲肠黏膜的病理变化为观察指标,判断非产毒艰难梭菌对艰难梭菌感染的防治效果。结果非产毒艰难梭菌不能预防艰难梭菌的感染,但在艰难梭菌感染后能明显降低盲肠黏膜的病理损伤。结论非产毒艰难梭菌对感染艰难梭菌的BALB/c小鼠有一定的治疗作用。     

基于线粒体功能障碍探讨补肾健脾化湿法对PCOS-IR作用的研究进展

]艰难梭菌是医院感染性腹泻的主要病原菌。艰难梭菌感染严格依赖于艰难梭菌产生的蛋白质毒素。近年来对艰难梭菌毒素的进一步研究有了新的发现,也发展和建立了一些新的艰难梭菌毒素检测方法。本文对艰难梭菌毒素的生物学和艰难梭菌毒素及其基因检测方法的研究进展做一综述,旨在为艰难梭菌感染防治提供参考。     

艰难梭菌鞭毛帽蛋白的功能研究

目的 验证艰难梭菌鞭毛帽蛋白FliD的黏附细胞活性以推测其在艰难梭菌感染中的作用,并鉴定其抗原性以测试其应用于候选艰难梭菌疫苗组分的可能性.方法 PCR获取VPI 10463全长fliD基因,构建pET-22b-fliD原核表达质粒,转化至BL21(DE3)中,诱导表达,Ni2+亲和层析纯化,进行N端测序验证.蛋白3次皮下免疫大耳白兔后间接ELISA法检测其血清特异IgG水平并鉴定抗原性.间接免疫荧光染色后流式细胞术检测黏附Vero细胞能力.结果 VPI10463的fliD基因钓取成功,与GenBank公布的其他9株艰难梭菌的fliD基因相似度在89％～100％.pET-22b-fliD表达质粒构建成功,表达蛋白大小为56 ku,N端测序序列为MSSIS,与预期一致.一步纯化得到的蛋白纯度为99％以上.ELISA检测3次免疫后效价达到105.用流式细胞术检测其可以黏附在Vero细胞表面.结论 构建的pET-22b-fliD表达质粒成功表达FliD,具有黏附细胞活性,在艰难梭菌感染过程中起黏附因子作用,其具有较高的抗原性可以作为预防艰难梭菌感染的候选抗原之一.     

艰难梭菌感染患者的临床特征分析

目的：研究艰难梭菌感染患者的临床特征,为临床对此类感染患者的诊断及治疗提供依据。方法回顾性分析感染性腹泻患者的艰难梭菌分离情况以及临床感染特点。结果从291份感染性腹泻标本中分离出33株艰难梭菌,阳性率为10.3％（18／174）,其中26株为产A／B毒素菌株（12例患者）。艰难梭菌主要分离自老年男性,均具有严重基础疾病,且使用过质子泵抑制剂和多种广谱抗菌药物;粪便常规和血液学相关指标对艰难梭菌感染及产毒与否具有一定的指示作用。结论严重的艰难梭菌感染患者病死率高,且易引起院内感染的播散,医院可以根据此类患者的临床特征进行规范干预,从而有效地控制院内感染的爆发。     

住院腹泻患儿粪便艰难梭菌毒素检测与分析

目的对住院腹泻患儿的粪便标本进行艰难梭菌毒素筛查,以了解患儿艰难梭菌的感染情况,为院内感染的防控提供基础数据。方法采用VIDAS艰难梭菌AB毒素(CDAB)检测试剂对2013年6月~11月收集的146例住院腹泻患儿粪便标本进行毒素检测,并结合其他实验室检测结果及临床资料进行综合分析。结果 146例患儿中有10例检出CDAB,阳性率6.8%。10例CDAB阳性患儿均使用过美洛西林/舒巴坦、头孢他啶、头孢克洛等抗生素,占抗生素相关性腹泻患者(56例)的17.9%。结论住院患儿艰难梭菌相关性腹泻感染率较高,抗菌药物的使用是诱使艰难梭菌感染的重要因素,年幼体弱的儿童更容易感染艰难梭菌。     

细菌培养法、ELFIA和PCR检测恶性肿瘤化疗期腹泻患者艰难梭菌的比较

目的比较细菌培养法、酶联荧光免疫分析技术（ELFIA）检测艰难梭菌毒素A/B、PCR检测肠毒素（tcd）A/B对恶性肿瘤化疗期腹泻患者的艰难梭菌检出率,并分析艰难梭菌感染患者的临床特征。方法选择212例行恶性肿瘤化疗的腹泻患者为研究对象,分别采用粪便艰难梭菌培养、ELFIA检测艰难梭菌毒素A/B、PCR检测tcdA/B等3种方法,比较其艰难梭菌阳性检出率,并分析艰难梭菌感染患者的临床特征。结果粪便艰难梭菌培养、ELFIA检测艰难梭菌毒素A/B、PCR检测tcdA/B的阳性检出率分别为12.7%、10.4%和31.6%;PCR的阳性检出率明显高于其他2种方法（均P＜0.05）。PCR检测艰难梭菌阳性的67例患者中男36例,女31例;年龄46~89（67.2±10.8）岁;合并心血管疾病或糖尿病等基础性疾病占86.6%;所有患者使用过广谱抗生素、质子泵抑制剂（PPIs）;粪便潜血试验阳性占95.5%;平均血浆白蛋白浓度为37.92g/L,C反应蛋白为30.25mg/L。结论PCR的阳性检出率最高。恶性肿瘤化疗患者若年龄较高、使用过广谱抗生素或PPIs和粪便潜血试验阳性合并腹泻时,应考虑艰难梭菌感染。     

《中国成人艰难梭菌感染诊断和治疗专家共识》解读

【摘要】艰难梭菌（Clostridium difficile,CD）为人类肠道的条件致病菌,是医院和社区感染性腹泻的重要病原菌。随着抗生素的滥用及高毒力菌株027/NAP1/BI型的流行,艰难梭菌感染（CDI）的发病率不断上升,已引起世界范围的关注。2017年发表的《中国成人艰难梭菌感染诊断和治疗专家共识》是首次针对CDI诊断和治疗的中国专家共识,在业界受到高度关注。本文就《中国成人艰难梭菌感染诊断和治疗专家共识》中艰难梭菌感染的诊断、检测及治疗进行解读。     

艰难梭菌A毒素受体结合区基因在乳链菌中的表达

目的：在乳链菌内表达艰难梭菌A毒素受体结合区并检测其活性．方法：提取艰难梭菌标准株基因组DNA,扩增编码艰难梭菌毒素A毒素受体结合区的羧基未端基因重复序列（14CDTA）,分别连接到乳链菌表达载体pNBC1000及pNBC2000,转化乳链菌,蛋白电泳及Western—blot检测蛋白定位表达情况．结果：成功构建了14CDTA乳链菌表达载体,并在乳链菌内表达了艰难梭菌受体结合区蛋白,分泌表达的艰难梭菌受体结合区蛋白大小约39．2ku,膜锚定表达的受体结合区蛋白大小约为55．1ku,所表达的蛋白均可与艰难梭菌A毒素多克隆抗体发生免疫印迹反应．结论：表达艰难梭菌受体结合区蛋白的重组乳链菌可以识别艰难梭菌A毒素多克隆抗体,为研制防治艰难梭菌疫苗的口服生态活菌亚单位疫苗奠定了一定基础．     

兴化地区住院腹泻患者艰难梭菌感染的流行病学研究

目的 了解兴化地区艰难梭菌的感染情况，为预防艰难梭菌感染的暴发流行提供参考依据。方法 收集2018年5月至2021年4月兴化市某医院住院腹泻患者(年龄≥18岁)的粪便标本229例，进行艰难梭菌毒素基因检测(Xpert实时荧光PCR法，赛沛公司)、艰难梭菌谷氨酸脱氢酶抗原(glutamate dehydrogenase antigen, GDH)和毒素检测(酶联免疫层析法，美艾利尔公司)。结果 229例腹泻患者粪便标本，Xpert法检出艰难梭菌阳性19例(tcdB阳性，未检测到cdtA和tcdC缺失)、酶联免疫层析法检出艰难梭菌阳性19例(GDH阳性15例、毒素阳性3例、2者同时阳性1例),诊断为艰难梭菌感染19例(感染率8.30%)。结论 兴化地区住院腹泻患者存在艰难梭菌感染病例，应做好相关预防控制工作。     

艰难梭菌感染的机制与防治进展

艰难梭菌是引起医源性感染的重要病原菌之一,可引起发热、腹泻、肠炎等疾病,严重者可并发肠穿孔及腹腔感染,且存在复发性感染的风险,严重威胁着患者的生命健康。随着抗生素的滥用,艰难梭菌的耐药性逐渐增强,其感染率逐年上升,治疗难度越来越大,复发及死亡人数也随之上升。探讨艰难梭菌的感染机制,从中发现阻断病情进展的有效疗法是当前临床工作的重中之重。本文综述艰难梭菌的致病机制,并探讨其防治进展,以期为临床诊疗提供新的参考和借鉴。     

艰难梭菌感染性腹泻五例分析

艰难梭菌是引起抗生素相关性腹泻的主要病原菌,同时也属于院内感染病原菌,由于感染呈增长趋势越来越受到人们的重视。艰难梭菌属厌氧性细菌,一般寄生在人的肠道内。如果过度服用某些抗生素,艰难梭菌的菌群生长速度加快,影响肠道中其他细菌而引发炎症。我院2008年1月至2011年12月,住院患者先后发生了5例艰难梭菌感染性腹泻,临床症状严重,现报告如下。     

恶性肿瘤患者艰难梭菌感染相关性腹泻的临床特征分析

目的 恶性肿瘤患者腹泻发生率较高,艰难梭菌感染为其中一个重要的原因,但临床辨别相对困难。本研究拟探讨恶性肿瘤患者艰难梭菌感染相关性腹泻的临床特征。 方法 回顾性分析472例恶性肿瘤合并腹泻患者,根据患者是否感染艰难梭菌分为艰难梭菌感染阳性组(A组,95例)和艰难梭菌感染阴性组(B组,377例)。采用进行聚合酶链式反应(PCR)检测艰难梭菌毒素A(tcdA)和艰难梭菌毒素B(tcdB);采用倾向值匹配法对研究中非研究混杂因素进行类似随机化的均衡处理。卡钳值设定为0.1,2组按照1:1的比例进行匹配。记录2组患者一般情况和恶性肿瘤治疗情况等。 结果 2组患者倾向值匹配完成后,每组共有91例患者纳入研究。A组患者与B组患者一般资料差异均无统计学意义(均P>0.05);A组患者血浆白蛋白水平明显低于B组(P<0.01),抗生素应用比例、质子泵抑制剂应用比例化疗、便潜血阳性比例和化疗后体能状态(ECOG)评分明显高于B组(均P<0.05);2组患者不良反应发生情况差异无统计学意义(P>0.05)。 结论 恶性肿瘤艰难梭菌感染相关性腹泻患者血浆白蛋白水平下降、便潜血阳性增加。抗生素、化疗和质子泵抑制剂的使用可能会增加恶性肿瘤患者艰难梭菌感染几率。      

质子泵抑制剂与艰难梭菌感染的关系

随着质子泵抑制剂(PPI)的长期应用,营养素缺乏、骨质疏松症、呼吸道和肠道感染、胃底腺息肉等不良反应频繁出现,近年来发现PPI也与艰难梭菌感染的风险增加相关,其导致艰难梭状杆菌感染率上升。正常情况下,艰难梭菌与肠道有益菌群处于平衡状态,若肠道正常菌群的平衡被打破,艰难梭菌的产毒株就会移居或增殖,导致假膜性肠炎,此外其致病作用还与脂质代谢和胆汁酸转化相关。PPI导致艰难梭菌感染的具体作用机制尚不明确,但肠道菌群失调在其中起到了重要作用。     

新型艰难梭菌感染治疗药ridinilazole进行Ⅲ期临床试验

Summit公司宣布FDA和EMA监管会议后,其新型艰难梭菌感染治疗药物ridinilazole确定进行Ⅲ期临床试验,考察与标准治疗药比较治疗艰难梭菌感染和抗复发的优点.Ⅲ期临床有2次试验,每次入选700名艰难梭菌感染患者,主终点是与标准治疗药万古霉素相比,其持续的临床有效反应及医疗经济学的比较.在美国和欧洲,大肠艰难梭菌感染每年在医院社区内约有100万患者.此菌毒素可导致炎症和严重腹泻,最重可致命.患者常由于使用广谱抗生素,损害了自然的肠道菌群,引起艰难梭菌过度生长,继而加重危害肠道菌群,使疾病更容易复发.ridinilazole是小分子抗生素,Ⅱ期临床试验证实其对从患者体内分离的艰难梭菌具强抑菌作用,优于标准治疗药万古霉素的临床有效反应,治疗结束后30 d内无复发.FDA授予此药合格传染病药品认定和快通道审批许可,另加5年上市专营权.     

炎症性肠病复发期检测粪便病原体的诊断学效益

目的:确定在炎症性肠病(IBD)可疑的复发感染期,对粪便中细菌培养物、寄生虫(卵)和艰难梭菌毒素进行分析检测的诊断学效益。背景:美国近几年来没有针对这种粪便检测诊断学效益的研究。方法:筛选出2000年7月1日至2001年11月25日在本院就诊的在复发期做过粪便化验的IBD患者病历,对其人口统计学、粪便化验结果、感染前期使用的抗生素及住院治疗等方面进行研究。结果:有54例IBD患者共复发感染62次,采集粪便样本共99份。12例患者粪便化验为阳性,其中艰难梭菌感染的10例。艰难梭菌感染阳性组中9例(90%)及艰难梭菌感染阴性组中10例(22%)复发感染…     

艰难梭菌感染的流行状况及耐药机制研究进展

近年来艰难梭菌感染（CDI）的流行状况发生了巨大变化,随着其感染率的增加及病情的加剧,CDI已成为一个全球性的健康问题。CDI曾在北美和欧洲数次暴发流行,同样艰难梭菌也已成为亚洲地区重要的院内感染病原体,但目前国内对CDI的认识和临床感染监控还不够。了解CDI的流行状况和艰难梭菌耐药情况,可以为临床预防及治疗CDI提供依据。本文将就CDI的流行状况及耐药机制的研究进展进行综述。     

ICU病房的非艰难梭菌相关性医院感染腹泻

目的 了解三甲医院ICU病房非艰难梭菌医院感染腹泻患者产酸克雷伯菌和产气荚膜梭菌的感染率及临床特点,以期对ICU病房细菌性医院感染腹泻患者的诊治思路提供基础数据.方法 收集四川大学华西医院综合ICU病房2012年4～11月非艰难梭菌医院感染腹泻102例患者的粪便,PCR检测产酸克雷伯菌毒素基因pehX,产气荚膜梭菌菌种鉴定16S rRNA基因和毒素基因cpa、cpe,空肠弯曲菌菌种鉴定16S rRNA基因、mapA基因及毒素基因hi pO.PCR阳性产物双向测序并用工具BLAST算法进行比对.总结产毒菌株检测阳性的医院感染腹泻患者的临床特点.结果 102例非艰难梭菌医院感染腹泻患者的粪便中检出产毒的产酸克雷伯菌和产毒的产气荚膜梭菌各4例,各占非艰难梭菌相关性医院感染腹泻的3.9％.没有检出产毒的空肠弯曲菌.大多数检测阳性的患者都有严重的基础疾病,都在使用强有力干扰肠道正常菌群的抗菌药物,预后都很差.结论 尽管我院ICU病房非艰难梭菌相关医院感染腹泻的患者粪便中产毒产酸克雷伯菌和产气荚膜梭菌的检出率较低,但这两种菌感染的患者都有严重的基础疾病且预后不良.     

艰难梭菌感染C57BL/6小鼠模型的建立方法研究

目的 建立C57BL/6小鼠抗菌药物诱导艰难梭菌感染模型,为更有效地认识人类艰难梭菌感染性疾病的发病机制及治疗措施提供依据。方法 C57BL/6小鼠经抗菌药物混合液预处理3天后,进行克林霉素腹腔注射。之后给予高、中、低浓度艰难梭菌ATCC43255悬液灌胃,建立艰难梭菌感染诱导肠损伤和结肠炎的CDI模型。观察小鼠的病死率,平均相对体重、结肠组织病理学评分和粪便艰难梭菌A&B毒素变化。结果 小鼠经抗菌药物处理和艰难梭菌灌胃后,出现腹泻,体重下降,粪便艰难AB毒素检测阳性。结肠病理切片可见炎性细胞浸润和组织坏死等结肠炎表现。随着灌胃菌液浓度的增加,小鼠症状越重,粪便毒素值越高。造模后存活下来的小鼠即使再次给予艰难梭菌灌胃也不再出现症状。结论 C57BL/6小鼠艰难梭菌感染模型与人类CDI病程变化相似,可进一步用于CDI防治措施的研究。