不同起动剂促诱生制备IFN-α活性的研究

为了诱生出高效价的IFN-α,本文研究了用人脐血和外周血获得的白细胞,以人脾转移因子(以下简称TF)、人白细胞IFN分别做为起动剂,再协同NDV进行促诱生制备IFN-α试验。结果表明TF组有起动IFN-α作用,TF和IFN两组进行了比较,促诱生效果无显著差异。TF和IFN两组再分别与不加起动剂组比较促诱生的结果均差异显著。因此TF可代替IFN做为起动剂,同时加入NDV诱导,同样可制备出效价更为理想的IFN—α。     

重症肝炎患者对赤栀黄合剂治疗的干扰素反应

用赤栀黄合剂(赤芍60g,栀子和大黄各30g)治疗24例。结果:14例临床治愈与好转,治前全血的干扰素(IFN)-α和外周血单个核细胞PBMC的IFN-γ诱生能力在最低点,治后逐渐增高,在21～30天以后显著升高;血浆IFN治疗前后无变化。10例恶化与死亡,治后IFN-α和IFN-γ诱生能力有所增加,但无统计学意义。提示该方剂促进干扰素诱生能力提高在先,促进细胞恢复在后,在体内外均不能直接诱生干扰素。     

白细胞介素-2和干扰素诱生的相互调节作用

探讨人外周血单个核细胞(PBMC)在丝裂原刺激后产生白细胞介素-2(IL_2)和干扰素(IFN_s)的关系。PHA、SPA、ConA、PolyI:C均可诱导IL_2的产生。如联合采用PolyI:C PHA、PolyI:C ConA在IL_2的诱生中有明显诱生协同作用。IFN-α PHA、IFN-γ PHA对IL_2的诱生也能明显提高效应。IL_2还能明显增强IFN-α和IFN-γ的生成。若将IL_2 PHA联合刺激可加强IFN-γ生成作用,IL_2 NDV联合刺激可提高IFN-α的生成。     

人参多糖及其皂甙等5种中药提取物促诱生人干扰素的研究

用100mg／L人参多糖、人参皂甙、羧甲基茯苓多糖、云芝糖肽及10mg／L刺五加多糖对人淋巴细胞在NDV或PHA刺激下所产生的IFN－α或IFN-γ的效价均比常规诱生组高5～7倍，是理想的干扰素促诱生剂，为上述中药的抗感染、抗肿瘤和免疫调节药效机理从分子水平上提供了实验依据。     

小鼠脾细胞对新城鸡瘟病毒及伴刀豆球蛋白A双重诱生干扰素反应的研究

本文就C_(57)BL/6J鼠脾细胞对新城鸡瘟病毒(NDV)、伴刀豆球蛋白A(Con A)同时、重复、交替诱生干扰素进行了研究。鼠脾细胞用NDV或Con A诱生α/β或γ干扰素后12～24h,对同一诱生剂再诱导出现低反应性。但对另一种诱生剂仍能产生另一型别的干扰素。NDV和Con A同时诱生,则鼠脾细胞能同时产生两种型别干扰素,相互间无明显的抑制或促进作用。作者还提出了重复利用人白细胞生产α/β和γ干扰素的可能性。     

缺锌儿童外周血诱生α干扰素能力与自然杀伤细胞活性的研究

本文对100例缺锌患儿与健康儿童外周血诱生α干扰素(IFN-α)能力、自然杀伤细胞(NK)活性、发锌和全血锌含量以及它们之间的关系进行研究。结果显示:缺锌患儿发锌(57.4±6.2μg/g)、全血锌(5.8±0.9μg/ml),诱生IFN-α水平(1.82×10~6±5.02×10~4IU/L)和NK细胞活性(29.34+4.12％)均显著低于健康儿童(发锌: 110.5±8.1μg/g、全血锌:13.7±3.9μg/ml、NK细胞活性:38.42±2.21％,IFN-α效价:2.41×10~6±4.12×10~4 IU/L),其他元素铜、铁含量同诱生IFN-α能力、NK细胞活性之间无明显相关关系。提示锌缺乏可能是导致机体抗感染免疫功能低下而致使缺锌儿童对感染性疾病抵抗力降低的重要因素之一。     

六味地黄丸对人扁桃体细胞的干扰素诱生和协同增强NDV诱生作用实验研究

应用干扰素微量板测定法(以A549细胞-VSV为测定系统),观察了六味地黄丸(LWDHW)对人扁桃体细胞的干扰素诱生和协同增强NDV诱生作用。结果显示:用终末浓度为5.0mg/ml的LWDHW处理人扁桃体细胞可增加细胞培养上清液中的干扰素效价;用5.0和12.5mg/ml两种浓度的LWDHW预先处理扁桃体细胞后再进行NDV常规诱生,干扰素产量显著增加。通过热敏感试验和干扰素中和试验,初步证明干扰素样本的性质主要是人α干扰素。     

人脐血白细胞干扰素治疗小儿急性呼吸道病毒感染

<正> 自Isaas和Lindenmann发现干扰素以来,现国外已能大规模生产,并已应用于临床治疗病毒性疾病和肿瘤.国内有的单位用干扰素治疗单纯疱疹病毒性角膜炎、带状疱疹、风疹及腮腺炎等病毒性疾病均获得了一定的疗效. 我科自1980年开始,用人脐带全血以新城鸡瘟病毒(NDV)诱生制备人白细胞干扰素.并已于1981年2-3月份用于临床,治疗了呼吸道合胞病毒(RSV)及腺病毒引起的小儿急性呼吸道感染.现将资料比较完整的8例与对照组8例的病例总结如下.     

人扁桃体细胞和外周血白细胞的干扰素产生反应的比较

本文观察了人扁桃体细胞在体外条件下对植物血凝素(PHA)等诱生剂的γ干扰素产生反应,以及对新城鸡瘟病毒(NDV)等的α干扰素产生反应,并且将扁桃体细胞对这些诱生剂的干扰素产生反应与外周血白细胞的反应进行了比较。     

云芝糖肽的干扰素诱生和促诱生效应

云芝糖肽(Polysaccharide-Peptide，Ps-P)是与日本产品Kredtin(Ps-K)相类似的云芝糖肽，它的产生菌属担子菌纲、多孔菌目、多孔菌科革盖菌属，学名为彩绒革盖菌(Corolus Versi-color)由杨庆尧从上海的柳树倒木上分离所得，现已证明所提取的糖肽成分能提高红细胞的免疫功能，并具有抗肿瘤和免疫调节作用。我们用Ps-P在体外进行了干扰素(IFN)诱生和促诱生试验，证明Ps-P是IFN-α的诱生剂，又是IFN-α和IFN-γ的促诱生剂，现报告如下：     

新城疫病毒合用中药黄芪诱生内源性干扰素的研究

目的研究新城疫病毒（NDV）合用中药黄芪在小鼠体内诱生内源性干扰素-α及对小鼠的免疫调节作用。方法实验分3部分,实验1：分别以NDV、黄芪及二者合用予小鼠口腔喷洒给药,连续10日后以ELISA法测定小鼠唾液中干扰素-α和SIgA的含量;实验2：分别以NDV、黄芪及二者合用予小鼠腹腔注射给药（黄芪灌胃方式给药）,ELISA法测定给药10日后血清干扰素-α的含量;实验3：分为NDV、黄芪及二者合用的高、中、低三种剂量,给药方法同第二组,6天后MTT法测定脾脏NK细胞的活性。每组分别设置阴性对照。结果NDV和黄芪口腔给药能升高小鼠唾液干扰素-α（35.54±10.20IU/ml,5.69±1.35IU/ml）和SIgA含量（68.88±15.47ng/ml,44.32±9.87ng/ml）,腹腔给药能诱生血清干扰素-α（120.54±29.21IU/ml,10.69±6.35IU/ml）,并能激活NK细胞活性（50.4%,32.1%）。NDV合用黄芪组的诱生效果远高于单独使用组（98.55±16.95IU/ml,101.31±27.59ng/ml,262.55±26.91IU/ml,75.6%）,显示出较强的协同作用。结论NDV合用黄芪能诱生小鼠内源性干扰素,并能发挥对小鼠SIgA和NK细胞的免疫调节作用。     

人αD型干扰素基因组在小鼠L细胞中表达的研究

将缺失3′末端非编码区的人αD型干扰素基因组与Ⅰ型疱疹疾病tk基因分别连接到pBR325上,重组成质粒pZZ,后者转化小鼠Ltk~-细胞,所获 Ltk~+细胞经NDV 诱生后可分泌人α干扰素。结果表明,人αD型干扰素基因的3′端非编码区对其表达并非必需。     

人扁桃体淋巴细胞诱生免疫干扰素的效用

手术切除的正常儿童扁桃体,经抗生素杀菌后,制成1×10~7分散的细胞悬液,不加或加1～2种诱生剂,单独或混合培养2～3日后,用细胞病变抑制法检测上清液中的干扰素效价及干扰素类型。结果证明人扁桃体细胞单独培养不加任何诱生剂,可自发产生IFN-γ。加中国商陆皂甙(ES)或其单体及美州商陆(PWM)皆可诱生出IFN-γ,后者比前者效价高。以PWM及莨菪硷联合诱生者与单以PWM诱生者效价无差别,但以PWM加短小棒状杆菌(C。P)疫苗或以PWM加刀豆素A(Con-A)诱生者反比单独以PWM诱生者效价低。人扁桃体混合淋巴细胞培养,加或不加中国商陆皂甙或PWM均可诱生IFN-γ,但加PWM诱生的效价略高。文内讨论了上列各法诱生IFN-γ效价差异的可能原因。     

流行性出血热病人白细胞干扰素诱生能力的研究

本文报告66例EHF病人白细胞IFN诱生能力。NDV全血法诱生IFN,以WISH—VSV系统、细胞病变抑制法检测其效价。结果是,EHF病人白细胞IFN诱生能力较正常人明显增高(7.60±1.36 vs 6.35±1.02,P<0.001),不同病型、病期EHF病人白细胞IFN诱生能力无明显差别,免疫抑制剂(环磷酰胺、氢化可的松)不影响EHF病人IFN系统激活。作者认为EHF病人IFN系统处于活跃状态与病毒感染有关,但IFN不能完全阻断EHF病程及免疫病理损害。可采用IFN和免疫抑制剂联合用药治疗EHF,以期获得增强抗病毒能力及减轻由免疫复合物所致病理损害的双重作用。     

槐果碱对感染CVB3小鼠干扰素和肿瘤坏死因子水平的影响

目的研究槐果碱对感染CVB3小鼠干扰素和肿瘤坏死因子活性的影响.方法制备CVB3病毒性心肌炎小鼠模型,用MTT比色分析法检测小鼠脾细胞IFN-α与TNF的诱生量以及血清中Ⅰ型干扰素(IFN-Ⅰ)和TNF水平.结果槐果碱50 mg·(kg·d)-1皮下注射可提高正常小鼠血清TNF含量.与正常对照组比较,病毒对照组TNF活性明显升高,IFN无明显变化.槐果碱50 mg·(kg·d)-1和25 mg·(kg·d)-1两个剂量灌胃均明显升高CVB3感染小鼠血清和脾细胞诱生的IFN-α活性.槐果碱两种途径、四个剂量给药均明显降低感染小鼠血清中TNF活性,其中槐果碱25 mg·(kg·d)-1灌胃和槐果碱30 mg·(kg·d)-1皮下注射还明显降低脾细胞中的TNF诱生量.结论槐果碱升高CVB3感染小鼠的IFN活性,降低TNF的活性,可能是其体内抗CVB3免疫机制之一.     

白芍水煎剂促干扰素诱生及抗病毒作用的研究

研究了白芍水煎剂的促干扰素诱生及抗病毒作用,并在抗病毒方面,将白芍水煎剂和白芍总甙作了比较。结果表明:白芍水煎剂10g/L在试管内无直接诱生干扰素作用,可促进NDV诱生IFNα,其最适浓度为1g/L,可促进ConA诱生IFNγ,当ConA为亚适剂量时,其最适浓度为5～10g/L,当ConA为最适剂量时,其最适浓度为2.5～10g/L,皆可提高干扰素效价1～2倍。白芍水煎剂比白芍总甙具有直接抗VSV作用,所试最小剂量的白芍水煎剂(1.25g/L)能使VSV下降1.9个对数值,最适浓度(5g/L)时,能使VSV效价下降5.22个对数值。     

临床级人纤维细胞干扰素的研制

本文为制备临床级人纤维细胞干扰素(IFN-β),就 IFN-β的诱生原理、超诱导方法以及纯化技术进行了研究。结果表明:人包皮二倍体细胞较人肌皮二倍体细胞的诱生能力为高.黄芪对纤维细胞的诱生系统有明显的刺激作用。用人肌皮二倍     

槐果碱对感染CVB_3小鼠干扰素和肿瘤坏死因子水平的影响

目的 :研究槐果碱对感染 CVB3小鼠干扰素和肿瘤坏死因子活性的影响。方法 :制备 CVB3病毒性心肌炎小鼠模型 ,用 MTT比色分析法检测小鼠脾细胞 IFN-α与 TNF的诱生量以及血清中 型干扰素 (IFN- )和TNF水平。结果 :槐果碱 5 0 mg· (kg· d) - 1 皮下注射可提高正常小鼠血清 TNF含量。与正常对照组比较 ,病毒对照组 TNF活性明显升高 ,IFN无明显变化。槐果碱 5 0 m g· (kg· d) - 1 和 2 5 mg· (kg· d) - 1 两个剂量灌胃均明显升高 CVB3感染小鼠血清和脾细胞诱生的 IFN-α活性。槐果碱两种途径、四个剂量给药均明显降低感染小鼠血清中TNF活性 ,其中槐果碱 2 5 mg· (kg· d) - 1灌胃和槐果碱 30 m g· (kg· d) - 1皮下注射还明显降低脾细胞中的 TNF诱生量。结论 :槐果碱升高 CVB3感染小鼠的 IFN活性 ,降低 TNF的活性 ,可能是其体内抗 CVB3免疫机制之一     

人γ干扰索的纯化及理化性质的研究

用美洲商陆(PWM)或中国商陆在人脾脏淋巴细胞中诱生γ干扰素(IFN-γ)。PWM诱生的IFN-γ经用可控孔径玻璃(CPG)珠吸附后,以含乙二醇的PBS洗脱进行部分纯化,比活性可达10~6RU/mg蛋白。采用国产微孔玻璃(MPG)代替CPG纯化IFN-γ得到相似的纯化效果。回收的CPG和MPG均可再生重复使用。玻璃珠纯化的样品经过抗小牛血清抗体一Sepharose4B(ACS)柱层析进一步纯化至比活性10~7RU/mg蛋白,回收率为78％。PWM或中国商陆诱生的IFN抗病毒活性经pH 2.0或56℃加热处理后几乎全被破坏并可被抗HuIFN-γ的单克隆抗体中和,确证是HuIFN-γ。用Bio-Gel P-200层析法测得PWM诱生的HuIFN-γ分子量主峰在40000～45700范围,小峰在25700左右。中国商陆诱生的HuIFN-γ分子量在45700～49000范围。     

γ-干扰素

根据最近国际干扰素命名委员会的建议,白细胞干扰素(Le-IFN)命名为α-干扰素(IFN-α);成纤维细胞干扰素(F-IFN)称为β-干扰素(IFN-β);而由T细胞有丝分裂素在淋巴细胞诱生的Ⅱ型干扰素或免疫干扰素,称为γ-干扰素(IFN-γ)。γ-干扰素在理化与生物学性质上与前两者有很大的不同。(1)γ-干扰素的免疫调节和抑制细胞生长活性比α、β干扰素为强;(2)它