HPLC法测定玉屏风不同配伍中4种黄酮成分

目的 研究玉屏风黄芪-白术-防风1∶1∶1、2∶2∶1、3∶1∶1、4∶4∶1和防风-黄芪1∶2、黄芪-白术1∶1、防风-白术1∶2配伍剂量变化对槲皮素、芒柄花素、5-O-甲基维斯阿米醇苷和升麻苷4种黄酮成分的影响。方法 对玉屏风配伍剂量变化的4组整方和3组拆方分别先用水回流提取,药渣再用80%乙醇回流提取,并采用HPLC法对水醇提取液中4种黄酮成分的含量进行了测定。结果 在整方中,4种黄酮成分的总量为3∶1∶1＞1∶1∶1＞2∶2∶1＞4∶4∶1,在拆方中,防风-黄芪＞防风-白术＞黄芪-白术。对单一成分而言,5-O-甲基维斯阿米醇苷＞升麻苷＞槲皮素＞芒柄花素;除芒柄花素外,其余3种成分的量均为水提液大于药渣醇提液,药渣醇提可使4种黄酮成分的量增加12.24%～40.64%。槲皮素和芒柄花素是黄芪药材中的有效成分,二者的含量均为3∶1∶1＞2∶2∶1＞4∶4∶1＞1∶1∶1,白术不含4种黄酮成分。结论 随着玉屏风配伍剂量的变化,水醇提取液中4种黄酮成分的含量明显改变,但这种改变并不是药材含量的线性加减。     

黄芪赤风汤指纹图谱建立及主要成分含量测定

目的 建立10批黄芪赤风汤供试品溶液的指纹图谱，以及对方中芍药内酯苷、芍药苷、毛蕊异黄酮葡萄糖苷、芒柄花苷、毛蕊异黄酮、芒柄花素、黄芪甲苷7种主要成分进行测定。方法 采用Diamonsil C18(2)色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm)；使用0.05%甲酸水(B)-5%四氢呋喃95%乙腈(D)为流动相进行梯度洗脱；流量：1 mL/min；柱温：23℃，进样量：10μL。基于HPLC-ELSD法，漂移管温度：60℃，柱温：30℃，进样量：20μL。结果 10批黄芪赤风汤供试品共标出16个共有峰，其相似度均在0.9以上，并对毛蕊异黄酮葡萄糖苷、芒柄花素、芍药苷、升麻素、5-O-甲基维斯阿米醇苷、毛蕊异黄酮、芍药内酯苷分别进行指认；基于HPLC-ELSD法：10批黄芪赤风汤其相似度均在0.903以上。且7种主要成分在各自的加样范围中线性关系良好，各自加样回收率RSD≤3%，含量为：芍药内酯苷(9.58±1.70)mg/g、芍药苷(8.36±0.78)mg/g、毛蕊异黄酮葡萄糖苷(0.77±0.11)mg/g、芒柄花苷(0.16±0.06)mg/g、毛蕊异黄酮(0.50±0.06)m...     

高效液相色谱法同时测定玉屏风汤剂中6种成分

目的 建立以高效液相色谱法同时测定玉屏风散中2类化合物(黄酮类和色原酮类)6种有效成分升麻苷、升麻素、5-O-甲基维斯阿米醇苷、槲皮素、亥茅酚苷、芒柄花素含量的分析方法.方法 采用AgilentExtend-C18色谱柱(4.6mm×250mm,5 μm),柱温25℃;流动相为甲醇-1%乙酸水溶液,梯度洗脱,流速0.8ml/min;检测波长254 nm.结果 升麻苷、升麻素、5-O-甲基维斯阿米醇苷、槲皮素、亥茅酚苷、芒柄花素分别在90～1810 ng、97～1940 ng、190～1906 ng、105～3144 ng、88～2625 ng、109～3279 ng范围内标准曲线呈良好的线性关系,相关系数均在0.9999以上;平均加样回收率分别为98.2%,99.1%,97.3%,97.8%,98.8%,99.2%.结论 方法简便快速,结果准确,重复性好,线性范围宽,灵敏度高,可用于玉屏风制剂中升麻苷、升麻素、5-O-甲基维斯阿米醇苷、槲皮素、亥茅酚苷和芒柄花素含量的同时测定,为玉屏风散质量监控及新剂型研究提供了更加合理、可靠的检测方法.     

山西浑源仿野生栽培蒙古黄芪的质量研究

目的 通过对山西浑源县仿野生栽培和野生蒙古黄芪中皂苷类和黄酮类成分的比较,评价仿野生栽培蒙古黄芪的质量。方法 采集12批野生和19批仿野生栽培蒙古黄芪样品,采用HPLC-DAD法测定毛蕊异黄酮苷、芒柄花苷、毛蕊异黄酮、芒柄花素4种黄酮成分,UPLC-ELSD法测定黄芪皂苷I、II、III、IV 4种皂苷成分。结果 5～6年生的仿野生栽培的蒙古黄芪中的高质量分数成分毛蕊异黄酮苷、芒柄花苷、黄芪皂苷I、II、III的量高于野生黄芪,相应的黄酮总量、皂苷总量高于野生黄芪,而2种低质量分数成分芒柄花素、黄芪皂苷IV的量低于野生黄芪;通过比较仿野生栽培1～6年生黄芪中8种成分的量发现,黄酮类成分随生长年限的增长不断升高,而皂苷类成分则逐渐降低。结论 仿野生栽培的方法可有效地解决优质野生浑源蒙古黄芪资源不足的问题。     

高效液相色谱-质谱法同时测定玉屏风汤中的3种主要成分

目的 建立同时测定玉屏风汤中黄芪甲苷、白术内酯-Ⅰ和升麻苷含量的高效液相色谱-质谱法(HPLC-MS).方法 采用Hedera ODS-2(2.0 mm×150 mm,5 μm)色谱柱,流动相为甲醇∶水(68:32),流速为0.2 ml/min;电喷雾电离(ESI+),选择性离子监测(SIM)质荷比为807.50、28...     

玉屏风药材汤剂HPLC指纹图谱的建立

目的 建立玉屏风药材汤剂的指纹图谱.方法 采用高效液相色谱法(HPLC)分析,色谱柱为Hypersil ODS柱(250 mm×4.6 mm,5 μm),流动相为乙腈-水梯度洗脱,检测波长为220 nm,流速为1.0 ml/min,进样量为10 μl,柱温为30℃.采用中药色谱指纹图谱相似度评价系统软件(2004 A版)进行指纹图谱分析.结果 玉屏风药材汤剂主要有8个特征峰.结论 该指纹图谱可以作为玉屏风药材汤剂中升麻苷、5-O-甲基维斯阿米醇苷、芒柄花素稳定性的参考.     

影响山西恒山野生蒙古黄芪质量的环境因素研究

目的 通过相关性分析和逐步回归分析方法分析海拔、经度、纬度、坡向、坡度生态环境因素对恒山产野生蒙古黄芪黄酮类和皂苷类成分的影响,筛选出影响黄芪质量的主要环境因素。方法 采用HPLC-DAD法测定了毛蕊异黄酮苷、芒柄花苷、毛蕊异黄酮、芒柄花素4种黄酮成分;UPLC-ELSD法测定了黄芪皂苷I、黄芪皂苷II、黄芪皂苷III、黄芪甲苷4种皂苷成分。采用SPSS17.0软件对黄芪各成分进行相关性分析,并以逐步回归分析法分析各生态因素对各成分量的影响。结果 建立逐步回归方程,毛蕊异黄酮苷的量与黄酮总量相关系数为0.958,黄芪皂苷I的量与皂苷总量相关系数为0.969,毛蕊异黄酮的量与芒柄花素的量相关系数为0.896,呈极显著的正相关;皂苷总量与黄酮总量相关系数为?0.505,呈显著的负相关。随着海拔和纬度的升高,黄芪中毛蕊异黄酮和黄酮总量升高;芒柄花素的量随经度的增加而增加;种植在阴坡的黄芪中黄芪皂苷I和皂苷总量的量高,且随坡度增大而升高;黄芪皂苷II的量主要受坡度的影响。结论 影响恒山野生蒙古黄芪药材黄酮成分量的主要因素是海拔和纬度,经度也有一定的影响;坡向和坡度对黄芪的皂苷成分的量有显著的影响,纬度、海拔也有一定的影响。     

人参、黄芪药对血中移行成分质谱分析

目的:探讨人参、黄芪药对在正常大鼠血中移行成分。方法:利用UPLC-MS/MS联用方法对人参、黄芪药对体外样品及灌胃后正常大鼠血清样品进行分析,比较各样品分析结果,确认人参、黄芪药对的血中移行成分及其药材饮片来源。结果:推断出给药后大鼠血清中原型成分11个,其中来源于人参的化学成分8个,分别是人参皂苷Ra1、人参皂苷Ra3、人参皂苷Rb1、人参皂苷Rc、人参皂苷Re、人参皂苷Rg2、人参皂苷Rg5、三七皂苷Fe;来源于黄芪的化学成分3个,分别是毛蕊异黄酮葡萄糖苷、芒柄花素、山柰酚苷。结论:初步确立了人参、黄芪的血中移行成分,为阐明该药对血清药物化学成分及药效物质基础研究提供了参考。     

蒙古黄芪的化学成分研究

目的 研究蒙古黄芪乙醇提取物石油醚、二氯甲烷、醋酸乙酯萃取部位的化学成分。方法 利用硅胶柱色谱、凝胶柱色谱、制备液相色谱等方法进行分离、纯化,根据化合物的理化性质和波谱数据鉴定其结构。结果 分离得到14个化合物,分别鉴定为红车轴草素（1）、芒柄花素（2）、芒柄花素-7-O-β-D-葡萄糖苷（3）、毛蕊异黄酮（4）、毛蕊异黄酮-7-O-β-D-葡萄糖苷（5）、(6aR,11aR)-3-羟基-9,10-二甲氧基紫檀烷（6）、(6aR,11aR)9,10-二甲氧基紫檀烷-3-O-β-D-葡萄糖苷（7）、黄芪皂苷Ι（8）、乙酰黄芪皂苷Ι（9）、黄芪皂苷ΙΙ（10）、异黄芪皂苷ΙΙ（11）、腺嘌呤（12）、β-谷甾醇（13）、胡萝卜苷（14）。结论 此次从蒙古黄芪中主要分离得到黄酮类和皂苷类化合物。     

高效液相色谱法测定黄芪中毛蕊异黄酮苷和芒柄花素的含量

目的:采用高效液相色谱法测定膜荚黄芪Astragalus membranaceus(Fisch.) Bge.中毛蕊异黄酮苷和芒柄花素的含量.方法:依利特Hypersil ODS 2色谱柱(4.6 mm×250 mm,5 μm);流动相:A相为乙腈-甲醇(体积分数 9∶1),B相为水,梯度洗脱;流速:1.0 ml/min;检测波长:260 nm;柱温:室温;进样量:20 μl.黄芪药材以甲醇超声提取2次,每次20 min.结果:毛蕊异黄酮苷和芒柄花素色谱峰的理论塔板数分别为50 134和25 258.回归方程分别为Y=58 924 X-12 352,r=0.999 9和Y=9 237 X-124 447,r=0.999 9,线性范围分别为2.022～101.1 μg/ml和38.04～1 522 μg/ml.方法学考察结果表明,毛蕊异黄酮苷和芒柄花素的日内和日间RSD均<2.0%,最低检测限分别为0.202 2 μg/ml和1.522 μg/ml,加样回收率结果分别为98.34%,RSD＝1.33%(n=3)和98.84%,RSD＝0.12%(n=3).测定了10批次黄芪药材的毛蕊异黄酮苷和芒柄花素的含量.结论:该方法稳定简便,结果可靠,能够用于黄芪药材中毛蕊异黄酮苷和芒柄花素含量测定的研究.     

溃结灵片的制备工艺及质量标准研究

目的:研究溃结灵片的制备工艺及质量标准.方法:单因素试验考察溃结灵片的制备工艺;通过薄层色谱法对处方中五味药材进行定性鉴别;高效液相色谱法对白术内酯Ⅰ和Ⅲ进行定量测定.结果:确定溃结灵片的处方:崩解剂为L-HPC和PVPP各8%,黏合剂为95%的乙醇溶液,润滑剂为0.25%硬脂酸镁.薄层鉴别图谱斑点清晰,分离度好.白术内酯Ⅰ和Ⅲ分别在0.0125~0.1125μg/mL和0.0245~0.2205μg/mL内线性关系良好.溃结灵片成品各项检查均符合药典要求.结论:该处方工艺科学、合理,建立的质量标准方法可行.     

回药扎里奴思方UPLC指纹图谱结合多成分含量测定的质控方法研究

目的   建立扎里奴思方的UPLC-PDA指纹图谱及多成分含量测定方法。方法   采用Waters ACQUITY UHPLC T₃(2.1 mm×100 mm,1.7 μm)色谱柱,流动相为乙腈(A)-0.1%甲酸水溶液(B),梯度洗脱,流速0.4 mL/min,柱温30 ℃,检测波长317 nm;采用UPLC-PDA对其中9种物质进行含量测定。结果   共确定扎里奴思方指纹图谱13个共有色谱峰,通过对照品比对出其中9个共有峰。10批样品指纹图谱相似度为0.923~0.983。9种物质在一定浓度范围内呈良好线性关系,r值均大于0.999 0;含量测定结果表明肉桂酸、没食子酸含量较高。各物质回收率在98.82%~102.91%之间,RSD均小于2.52%;样品在24 h内稳定,重复性良好。结论   建立了扎里奴思方指纹图谱分析方法及含量测定方法,该方法简便、重复性良好,可为进一步完善扎里奴思方质量控制方法提供参考。      

RP-HPLC法测定党参内酯和党参炔苷的含量及相关性研究

目的：分析潞党参、素花党参、川党参中党参内酯和党参炔苷的含量,对实验结果进行比较,找出其相关性,以更好地控制党参的品质。方法：采用反相高效液相色谱法分析,色谱柱：Diamonsil C18柱（250mm×4.6mm,5μm）。流动相为以乙腈∶水（70∶30）,测定党参内酯的含量,检测波长为220nm;以乙腈∶0.1%HAC（26∶74）为流动相,测定党参炔苷的含量,检测波长为267.3nm。结果：党参内酯的线型范围为0.014～0.280μg（r=0.9997）,平均回收率为100.4%,RSD为1.90%（n=6）党参炔苷的线型范围为0.065～1.040μg（r=0.9999）;平均回收率为100.8%,RSD为1.60%（n=6）。在选定的色谱条件下,这两种活性成分的分离度良好。结论：党参内酯和党参炔苷含量之间有一定的相关性。     

白术内酯Ⅰ通过调低CyclinD1/CDK4抑制胃癌细胞SGC-7901的增殖及机制

目的 探讨白术内酯I抑制胃癌细胞SGC-7901的增殖及可能机制。 方法 MTT法检测白术内酯Ⅰ对胃癌细胞SGC-7901增殖的抑制作用;流式细胞仪检测白术内酯Ⅰ作用后胃癌细胞SGC-7901的凋亡率及细胞周期的改变;Western blotting检测度白术内酯Ⅰ作用后胃癌细胞SGC-7901中Cyclin D1、CDK4蛋白的变化。 结果 MTT试验结果显示与对照组相比,白术内酯Ⅰ可抑制胃癌细胞SGC-7901的增殖,并且呈时间及剂量的依赖性（P < 0.05~P < 0.01）;流式细胞仪结果显示与对照组相比白术内酯Ⅰ能够明显促进胃癌细胞SGC-7901后的细胞凋亡,并且呈剂量的依赖性（P < 0.01）,同时会增加细胞中G₁期细胞的比例（P < 0.01）,减少G₂期细胞的比例（P < 0.01）,并且呈剂量的依懒性（P < 0.05）;Western blotting结果显示同对照组相比白术内酯Ⅰ能够调低胃癌细胞SGC-7901中Cyclin D1、CDK4蛋白的表达（P < 0.01）,并且呈剂量的依赖性（P < 0.05）。 结论 白术内酯Ⅰ能通过调低Cyclin D1、CDK4蛋白进而改变细胞周期来抑制胃癌细胞SGC-7901的增殖同时促进其凋亡。     

HPLC-ELSD法测定黄芪及金芪降糖片中黄芪甲苷的含量

目的：建立黄芪及金芪降糖片中黄芪甲苷的测定方法。方法：采用高效液相色谱-蒸发光散射法（HPLC—ELSD）测定黄芪甲苷的含量。色谱柱为DiamonsilC。。（4．6mm×250mm,5μm）,以乙腈-水（34：66）为流动相,流速为1．0ml／min,柱温为35℃,漂移管温度为105℃,载气流量为2．5L／min。结果：黄芪甲苷进样量在2．056-8．224μg范围内具有良好的线性关系（r=0．9995）,黄芪药材中黄芪甲苷的平均回收率为98．67％（RSD=1．72％）,金芪降糖片中黄芪甲苷的平均回收率为98．13％（RSD=1．34％）。结论：该方法操作简便、灵敏度高、专属性强、重现性好,可用于黄芪药材及金芪降糖片的质量控制。     

HPLC-ELSD测定三两半药酒中黄芪甲苷的含量

目的:采用HPLC-ELSD测定三两半药酒中黄芪甲苷的含量。方法:采用Diamonsil C18色谱柱,以乙腈-水（28:72）为流动相,流速1.0ml·min^-1,柱温30℃,漂移管温度45℃,载气为N₂,流速3.5 ml·min^-1。采用外标两点法计算含量。结果:黄芪甲苷在（0.56-11.20）mg·L^-1浓度范围内有良好线性关系（r=0.9999）,平均加样回收率为98.4%,RSD为0.95%。结论:本方法快速简便,结果准确,可用于该制剂中黄芪甲苷的定量分析。     

一测多评法测定牡丹皮中多种指标成分的含量

目的：建立一测多评法同步测定丹参中迷迭香酸、紫草酸、丹酚酸 B、隐丹参酮、丹参酮Ⅰ及丹参酮ⅡA 的含量,为控制丹参药材的质量提供依据。方法用超高效液相色谱法对丹参药材进行分析,计算其中1个脂溶性成分“丹参酮 IIA”,通过建立该成分与其他成分的校正因子,同时计算3个脂溶性与3个水溶性成分的含量。结果建立的对丹参药材的含量测定方法快速有效,且使用一测多评方法仅需要1个成分的标准品,即可进行定量分析。结论本研究建立了牡丹皮药材的 UHPLC 含量测定方法,从含量测定方面控制牡丹皮药材的质量。本研究建立的牡丹皮含量测定方法简单、快速、稳定且成本低廉。     

高效液相色谱法测定保元清血颗粒中黄芪甲苷含量方法的建立及评价

目的：探讨影响保元清血颗粒中黄芪甲苷含量测定的各种因素,分析黄芪甲苷含量测定的提取方法及色谱条件,建立黄芪甲苷含量测定的有效方法。方法：保元清血颗粒中黄芪甲苷含量测定前处理采用甲醇超声提取法,检测采用高效液相色谱（HPLC）法,色谱柱为SB-C18柱（Agilent公司生产,ZORBAX,4.6 mm×150 mm,5 μm）,流动相为乙腈-水（36∶64）,流速为1.00 mL?min-1,柱温为30℃,进样量为20 μL,UV检测器检测波长为203 nm。
结果：在本色谱条件下,黄芪甲苷与其他峰分离良好,在0.010 03～0.200　60　g.L^-1 范围内呈良好的线性关系（r=0.999　9);平均加样加收率为98.4%,RSD为0.8%（n=6）。结论：采用高效液相色谱法-紫外检测器（HPLC-UV）测定保元清血颗粒中黄芪甲苷含量,方法便捷、准确,可作为黄芪甲苷含量测定的质量控制方法。     

黄芪-丹参药对活性成分网络药理学研究

目的:采用网络药理学方法对黄芪-丹参药对的主要活性成分的作用机制进行分析,探讨其多成分、多靶点、多通路的相关关系。方法:首先将黄芪-丹参药对中14个主要活性成分(黄芪甲苷、芒柄花苷、芒柄花素、毛蕊异黄酮、异鼠李素、丹酚酸B、紫草酸、迷迭香酸、丹参素、原儿茶醛、丹参酮IIA、二氢丹参酮I、丹参酮I、隐丹参酮)依据Pharm Mapper数据库构建多成分-蛋白网络;然后采用MAS和KEGG数据库获得靶蛋白的作用通路;最后,采用Cytoscape软件建立黄芪-丹参药对成分-靶点-通路网络模型。结果:黄芪-丹参药对中的14个效应成分涉及63个靶点蛋白和69条作用通路。预测结果得到文献印证。网络模型中每个靶点蛋白、每条作用通路出现的平均频次分别为8.31次、7.62次,每个效应成分的平均靶点蛋白数、平均作用通路数分别为4.57、4.93。结论:为深入研究黄芪-丹参药对的药效作用及其机制提供参考。