血小板膜蛋白受体信号转导通路的研究进展

血小板在止血和动脉血栓形成中扮演重要角色。当血管内皮损伤暴露内皮下细胞外基质时,血小板与细胞外基质结合而被激活。在血小板激活过程中,血小板膜蛋白受体发挥着至关重要的作用。当配体与血小板膜蛋白受体结合后,产生各自的信号转导路径,使血小板发生形态变化,内容物释放,并最终形成一条由内向外的共同信号通路使血小板糖蛋白(GP)Ⅱb/Ⅲa受体激活;激活的GPⅡb/Ⅲa受体与其配体结合后诱导由外向内的信号转导,进一步使血小板形态发生变化、内容物释放,并使已黏附和聚集的血小板更稳定,从而形成血小板血栓。血小板有多条膜蛋白受体信号转导通路,这些信号通路是研究抗血小板药物作用的靶点。     

血小板与血栓性疾病

血小板在止血与血栓形成中具有重要的作用。血小板表面含有丰富的膜糖蛋白,它们介导血小板的粘附、活化和聚集,最终形成血栓,成为血栓性疾病的发病基础。血小板膜糖蛋白的表达和功能受其基因多态性的影响,后者可能是决定血栓性疾病发生的遗传背景之一,许多多态性位点已成为特定人群血栓性疾病发病的危险因子。通过检测血小板的活化程度有助于诊断血栓性疾病,评价疾病的严重程度和转归。应用抗血小板药物可以有效地预防和治疗血栓性疾病,尤其是近年来研制的各种针对血小板膜糖蛋白的单克隆抗体,显示了良好的治疗效果和广阔的应用前景。血小板在止血与血栓形成过程中处于核心地位。流行病学研究显示,血栓形成的危险因素,包括人群的遗传易感性、环境因素的长期影响以及一些疾病如糖尿病、高血压、脂质血症和高同型半胱氨酸血症等都直接或间接与血小板的止血功能有关,提示血小板与血栓性疾病之间的密切关系。正常人20岁开始血管壁就逐渐发生改变,吸烟、高血压和遗传因素会加快血管损害的进程,从而产生动脉粥样硬化的病变。血小板在“巡游”中与血管壁表面的内皮细胞“和平相处”。当血管损伤性病变发生时,内皮细胞缺损,暴露内皮下胶原等组织,即使血管不破,血小板亦会粘附、聚集、活化并在血管内形成止血栓,造成血管栓塞,导致急性心肌梗死、缺血性脑血管病以及肺栓塞的发生。     

抗血小板药物研究新进展

目的血小板活化在缺血性脑卒中的发病过程中发挥着重要的作用，抑制血小板的黏附、聚集和释放功能可以有效预防动脉血栓的形成，随着抗血小板药物研究的逐渐深入，目前临床出现了多种可供选择的抗血小板药物，本文对此进行如下综述，并着重介绍近年来阿司匹林的一氧化氮衍生物(NO-Aspirin)的研究新进展。     

穿心莲成分对血栓模型家兔血小板三磷酸肌醇及其受体表达的影响

目的　观察穿心莲成分 API0 1 34 (API)抗血小板活化和聚集的机制。方法　建立高脂血症家兔动脉血栓形成模型。观察穿心莲成分 API0 1 34 (API)对闭塞性血栓形成时间 (OT)、血小板聚集、血液血小板活化因子 (PAF)含量、血小板内三磷酸肌醇 (IP3)含量和 IP3受体 (IP3R)表达的影响。结果　 API能够显著延长 OT和抑制血小板聚集 ,降低血液 PAF和血小板内 IP3含量 ,抑制血小板内 IP3R蛋白的表达。API 5 0 mg/ kg的抑制作用明显强于 API 5 m g/ kg。结论　 API具有较强的抗血小板聚集和抗血栓形成作用 ,API对血小板 PAF- IP3/ IP3R信号途径的抑制作用 ,是 API抗血小板活化和聚集的机制之一     

辅酶Q10通过调控糖蛋白VI信号通路抑制血小板聚集和活化

目的 血小板过度活化在血栓以及动脉粥样硬化（AS）的发生发展中发挥重要的作用,糖蛋白VI （GPVI）是血小板表面重要的受体,在血管损伤处通过与胶原结合介导血小板活化参与血栓以及AS的形成。辅酶Q₁₀（CoQ₁₀）作为膳食补充剂通过抗炎、抗氧化等发挥预防心血管疾病的功能,尤其是抗AS作用。但是CoQ₁₀是否影响血小板功能尚未见报道, 因此本研究通过体外实验探讨CoQ₁₀对血小板活化的影响及其对GPVI信号通路调控作用。方法 用不同浓度CoQ₁₀ （0、1、10、100 μmol/L）与健康人纯化血小板在体外共同孵育50 min,采用血小板聚集仪测定胶原诱导的血小板聚集率;用流式细胞术测定血小板表面CD62P、CD63、α_IIbβ₃的活化和纤维蛋白原结合率（Fibrinogen binding）;用Western blot检测胶原诱导的血小板GPVI信号通路相关蛋白磷酸化水平。结果 CoQ₁₀可以显著降低胶原诱导的血小板聚集率,抑制血小板表面CD62P和CD63的表达,并能显著抑制α_IIbβ₃的活化以及降低Fibrinogen binding百分率。CoQ₁₀下调胶原诱导的GPVI信号通路中Syk、LAT、SLP76、PLCγ2以及PKC的磷酸化水平。结论 CoQ₁₀抑制胶原诱导的血小板活化可能是通过下调GPVI信号通路来实现。     

血小板Toll样受体在血栓形成中的研究进展

血小板是广泛参与生理和病理过程的无核血细胞,其主要作用是参与止血和形成血栓。Toll样受体(TLRs)是天然免疫受体,大量研究发现血小板表达多种TLRs且可通过识别配体诱导血小板活化聚集促进血栓形成。本文总结了血小板TLRs与血栓形成及其与血栓性疾病的关系。     

血小板活化途径的研究进展

<正> 自1842年Donhe首次描述血小板以来,许多学者的研究指出,血小板在血栓形成的初期发挥了重要作用。近20年来,对于血小板功能的研究取得了极大的进展,许多实验揭示了血小板在血栓性疾病、动脉粥样硬化和其它心血管疾病的病因学中占有重要地位。体内血小板的活化可导致纤维蛋白形成、血小板聚集及释放反应,进尔在血栓性疫病和心血管疾病的发生、发展过程中发挥重要作用。因此,许多研究者都试图通过观察药物对血小板聚集功能的影响来寻找有效的抗血小板药及心血管药物。迄今为止,已知在血小板活化过程中,至少存在着3条途径,即二磷酸腺苷(ADP)途径、花生四烯酸(AA)途径和凝血酶遗径。本文就这几条途径的研究现状     

血小板活化因子参与血小板-中性粒细胞活化的研究

血小板活化因子是一种内源性脂类介质,在血栓形成、急性炎症等病理生理过程中起重要作用,血小板活化因子作为最强的血小板聚集诱导剂,一种很强的炎性因子,在参与血小板-中性粒细胞的活化中起着重要作用。许多血小板活化因子受体拮抗剂,可以拮抗特异性受体,抑制其对血小板-中性粒细胞的活化作用。研究表明,血小板活化因子参与血小板-中性粒细胞的相互作用,是多种细胞因子、化学介质参与其中的病理生理过程,不同配体-受体系统介导血小板-中性粒细胞的相互作用。     

血小板GPⅡb/Ⅲa受体及其拮抗剂与冠状动脉疾病

血小板在动脉粥样硬化性心血管疾病的血栓并发症及急性冠状动脉综合征的发生中起重要作用。血小板的主要作用是在血管损伤部位发生粘附 ,聚集而形成血栓。血小板表面的膜糖蛋白 (GP)Ⅱb Ⅲa受体与纤维蛋白原连接 ,并在血小板之间交叉连接 ,完成血小板聚集的最后一步。由于此受体是血小板聚集、冠脉血栓形成的最后途径 ,因此抗血小板治疗最有前途的是血小板GPⅡb Ⅲa受体拮抗剂。本文就血小板GPⅡb Ⅲa受体及其拮抗剂在心血管疾病中的应用做一综述。1　血小板GPⅡb Ⅲa复合物1.1　血小板GPⅡb Ⅲa复合物的分子结构[1,2 ] 　血小板GPⅡb …     

常用血小板功能检测方法研究进展

血小板聚集形成血栓是急性冠状动脉综合征和经皮冠状动脉介入(PCI)治疗术后发生不良心血管事件的基本原因,抗血小板治疗是防治冠状动脉粥样硬化性心脏病(冠心病)的基石。然而,同一种抗血小板药物在不同个体可产生不同的抗血小板效应,抗血小板药物低反应者血栓事件可能增加,而抗血小板药物高反应者出血风险加大。因此,通过检测血小板功能以预测患者不良心血管事件的风险及评估出血风险有着重要的临床意义。     

Analysis of anti-platelet aggregation components of Rhizoma Zingiberis using chicken thrombocyte extract and high performance liquid chromatography

Background The conventional procedure for screening bioactive components from traditional Chinese medicine is time-consuming, expensive and low efficient. Therefore, some alternative strategies are needed urgently. A novel method for screening anti-platelet aggregation components from oleoresins was developed using chicken thrombocyte extract and high performance liquid chromatography.
Methods The anti-platelet aggregation components of oleoresins were combined with receptors, channels and enzymes of chicken thrombocytes under physiological environment. Unbound substances were washed away and bound compounds were eluted using specific phosphate buffered solution （PBS）. Compounds released from target sites were collected and analyzed by high performance liquid chromatography and LC-MS. The activity of three compounds which were screened from this model was confirmed using platelet aggregation pharmacology in vivo.
Results There were four typical compounds that bound to the thrombocytes： 6-gingerol, 8-gingerol, 6-shogaol and 10-gingerol, and all had shown anti-platelet aggregation activities. Eight-gingerol displayed the best anti-platelet aggregation effect.
Conclusions Chicken thromobcyte extract can be used to isolate chemicals that are ligands of the receptor or other bio-targets on the platelet. This may therefore be a simple and efficient method to screen for anti-platelet aggregation compounds from traditional Chinese medicine.     

基于血小板途径的抗血栓机制的研究

血液栓塞是心血管疾病发生的重要病理过程。血栓形成离不开血小板的参与,血小板在止血和动脉血栓形成中扮演重要角色。常见的血小板活化诱导途径有二磷酸腺苷途径、花生四烯酸途径、凝血酶途径、胶原途径和血小板活化因子途径。该文针对这5 种血小板活化机制、活化途径治疗药物以及新型靶点的抗血小板药物进行综述,为血液栓塞的研究和治疗提供一定参考。     

腺苷二磷酸在凝血酶信号传递过程中的作用

目的比较腺苷二磷酸（ADP）在两类凝血酶受体活化过程中对血小板聚集率以及血小板膜表面活化标记物表达的影响,探讨ADP在凝血酶信号传递机制中的作用。方法分别以凝血酶受体（PAR）活化肽PAR1-AP与PAR4-AP诱导血小板活化,观测腺苷三磷酸双磷酸酶（Apyrase,ADP抑制剂）ⅤⅡ作用过程中血小板聚集以及血小板膜表面糖蛋白（GP）Ib与P-选择素的改变。结果两类凝血酶受体都能诱导血小板活化,产生完全的聚集波,血小板膜GPIb则呈现先进行性减少后逐渐回升的可逆性变化,P-选择素水平持续升高。ApyraseⅤⅡ作用后,PAR1-AP诱导的血小板聚集反应受到部分抑制,而PAR4-AP诱导的血小板聚集反应未有明显改变。ApyraseVⅡ加速PAR1途径GPIb回复细胞表面,对PAR4途径中GPIb的改变则没有显著影响。两种活化途径中P-选择素的表达都不受ApyraseVⅡ的影响。结论ADP在凝血酶信号传递过程中发挥重要作用,其中PAR1途径与ADP参与密切相关．     

山豆根碱与山豆根苏林碱对血小板聚集和粘附的影响

观察山豆根碱（Ｄａｕ）及山豆根苏林碱（Ｄａｓ）对人血小板聚集和粘附功能的影响，并探讨其作用机制。结果表明，两者可抑制由二磷酸腺苷、花生四烯酸和胶原引起的血小板聚集，药物浓度与聚集抑制率表现出明显的量效关系。Ｄａｕ处理的血小板其对二磷酸腺苷、花生四烯酸和胶原诱导聚集抑制的ＩＣ５０（ｍｍｏｌ／Ｌ）分别为０．０４２（ｎ＝５），０．０２８（ｎ＝９）及０．０４６（ｎ＝１０）；Ｄａｓ则分别为０．０４２（ｎ＝５     

高脂血症患者血小板体积及有关参数的研究

本文报道242例高脂血症患者血小板(PLT)、平均血小板数(MPLT)及平均血小板体积(MPV)等参数的测定结果,其中高胆固醇并高甘油三酯患者,PLT、MPLT及巨大血小板比例(Macro-PLT)高于正常,MPV正常;而单纯高胆固醇或高甘油三酯患者,上述指标与正常人无显著性差异。提示高胆固醇并高甘油三酯患者,存在血小板生成动力学异常,其血小板的破坏增加,生成率加速、但处于一种高水平的动态平衡之中。这可能是高脂血症出现高凝状态的原因之一。同时表明此类患者使用抗血小板疗法具有一定的合理性和必要性。     

Cigarette smoking inhibits the anti-platelet activity of aspirin in patients with coronary heart disease

Objective  Tobacco smoking results in increased platelet aggregability, which suggests that low-dose aspirin used in common clinical practice may not effectively inhibit platelet activity in smokers with coronary heart disease (CHD). This review was performed to assess the effect of aspirin on platelet aggregation in patients with CHD.

Data sources  We performed an electronic literature search of MEDLINE (starting from the beginning to March 15, 2009) using the term “smoking” or “tobacco” paired with the following: “platelet”, “aspirin” or “coronary heart disease”.

Study selection  We looked for review articles regarding the effect of tobacco smoking on platelet activity and on the anti-platelet efficacy of aspirin in healthy people and patients with CHD. The search was limited in “core clinical journal”. In total, 1321 relevant articles were retrieved, and 36 articles were ultimately cited.

Results  Tobacco smoking results in increased platelet aggregability, which can be inhibited by low-dose aspirin in the healthy population. However, in patients with CHD, the increased platelet aggregability can not be effectively inhibited by the same low-dose of aspirin. A recent study indicated that clopidogrel or an increased dose of aspirin can effectively inhibit the increased platelet aggregability induced by tobacco smoking in patients with CHD.

Conclusions  It is important for patients with CHD to quit smoking. For the current smoker, it may be necessary to take larger doses of aspirin than normal or take an adenosine diphosphate receptor inhibitor along with aspirin to effectively inhibit the increased platelet activity.

     

Effect of Aqueous Extracts of Several Kinds of Herbs on Human Platelet Aggregation and Expression of P-Selectin in Vitro

Objective: To study the effect of aqueous extract of several kinds of herbs on human platelet aggregation and expression of P-selectin in vitro. Methods: Blood was collected from volunteers. Effects of the prepared water extracts of herbs on platelet aggregation were monitored on a Packs-4 aggregometer. The fluorescence intensity of water extracts of Caulis Spatholobi, Flos Carthami and Rhizoma Curcumae on the expression of P-selectin in human platelets of healthy persons was measured with flow cytometry. Results: Out of several herbs investigated, Flos Carthami and Rhizoma Curcumae potently inhibited platelet aggregation after incubation with platelet-rich plasma (PRP) for 15 min. Caulis Spatholobi, Flos Carthami and Rhizoma Curcumae inhibited adenosine-5''-diphosphate (ADP) or platelet activating factor (PAF)-induced platelet aggregation in PRP in a dose-dependent manner. In contrast to Flos Carthami and Rhizoma Curcumae, Caulis Spatholobi could not inhibit thrombin-induced platelet aggregation. Despite its inability to inhibit thrombin-induced platelet aggregation in PRP, Caulis Spatholobi had a greater anti-aggregating activity in PRP induced by ADP or PAF. Caulis Spatholobi and Flos Carthami showed significant inhibitory effects on the expression of P-selectin. Conclusions: Caulis Spatholobi, Flos Carthami and Rhizoma Curcumae have potent anti-platelet properties, and their inhibitory actions are mediated via different mechanisms. Caulis Spatholobi inhibited ADP-induced platelet aggregation but not by thrombin, indicating that its mechanism of action might be independent of the thromboxane pathway. The effect of Caulis Spatholobi and Flos Carthami were associated with suppressing the expression of P-selectin.     

出血性血小板病患者血小板超微结构的研究

未明原因多部位出血性血小板产现是一新型出性血疾病，特征为同一血小板对常规诱导阈值浓度的各种诱导剂可有正常或有缺陷的聚集反应。观察同一患者聚集的、不聚集的和静息的血小板，在电镜下的超向一结构。结果患者血小板超微结构形态学的改变，均符合正常对照者形态变化的规律。     

缺血性脑卒中患者血小板各参数的变化及其临床意义

目的 探讨缺血性脑卒中患者血小板计数（PLT）、血小板平均体积（MPV）及血小板最大聚集率（PAGm）的变化规律及其临床意义。方法 检测168例缺血性脑卒中患者（急性期及恢复期）及40名健康体检者（对照组）PLT、MPV及PAGm，并与神经功能缺损程度进行相关分析。结果 缺血性脑卒中患者急性期MPV及PAGm显著高于其恢复期（P＜0.01）及对照组（P＜0.01），恢复期MPV及PAGm仍高于对照组（P＜0.01）。缺血性脑卒中组急性期患者按牛津郡社区卒中计划（OCSP）分为4个亚型，MPV及PAGm在完全前循环梗死（TACI）组明显高于部分前循环梗死（PACI）组（P＜0.01）、后循环梗死（POCI）组（P＜0.01）及腔隙性梗死（LACI）组（P＜0.01）,PACI组及POCI组明显高于LACI组（P＜0.01），而PACI组与POCI组之间差异无显著性（P＞0.05）。MPV及PAGm与神经功能缺损程度评分呈正相关（r=0.684、0.698,均P＜0.01）。缺血性脑卒中患者PLT在急性期、恢复期与对照组之间均无显著性差异（P＞0.05），TACI组、PACI组、POCI组及LACI组之间差异亦无显著性（P＞0.05）；神经功能缺损程度评分与PLT不存在相关性（r=0.32,P＞0.05）。结论 与PLT相比,MPV及PAGm更能反映缺血性脑卒中的严重程度，可以判断预后，是外周血中较好的血小板参数指标。