荧光标记A蛋白检测IgG抗体的研究

葡萄球菌A蛋白(SPA)对多种哺乳动物免疫球蛋白G(IgG)有很强的亲和性。SPA可同荧光色素、放射性同位素或酶等结合成各种IgG试剂。在检出IgG抗体中使用标记SPA和标记抗IgG(抗体)这两类IgG指示性试剂,各有优点和缺点。一般认为前者敏感性略差,但是,非特异性反应较轻。     

葡萄球菌A蛋白用于免疫学研究的进展

葡萄球菌A蛋白(Staphylococcal proteinA,SPA)是某些金黄色葡萄球菌细胞壁上的一种蛋白质成分。早在1940年Verwey已有描述。60年代许多学者相继对SPA的理化特性和生物学活性进行了研究,发现SPA具有能与人和多种哺乳类动物的IgG分子Fc段呈非特异性结合而不影响抗体活性的特性。此后,众多学者利用SPA这一特性以特异性抗血清标记的SPA直接鉴定抗原,或以荧光素、同位素和酶标记的SPA代替第二抗体来测定抗体、抗原抗体复合物或研究淋巴细胞表面的抗原和受体等。70年     

HRP-SPA用于丙型肝炎检测

葡萄球菌A蛋白(SPA),能与人和多种哺乳动物的IgG FC段呈非特异性结合,标记上酶等结合物,可作为广谱的第二抗体,而广泛地应用于各种疾病的IgG型抗体的检测。利用SPA以上特征,我们以南京铁道医学院自制的HRP-SPA试用于丙型肝炎的检测,取得了满意的效果。1 材料和方法     

用SPA协同凝集快速诊断志贺氏菌属的实验研究

金黄色葡萄球菌A蛋白(SPA)是大多数金黄色葡萄球菌细胞壁上的一个主要成份,能与人和某些哺乳动物血清IgG的Fe段发生非特异性结合。利用这一特点,我们将含有SPA的葡萄球菌制成稳定液,然后将志贺氏菌属抗血清中经DEAE离子交换纯化的IgG,标记在SPA稳定液上,制成SPA痢疾分型试剂用于快速诊断志贺氏菌属。此法简便,节省人力、物力和时间,且具有良好的敏感性和特异性。     

应用酶联A蛋白测定肝吸虫病抗体

A蛋白(Staphylococcal protein A,简称SPA)是某些金黄色葡萄球菌细胞壁的一种成分,属天然蛋白质,能与人及多种哺乳动物血清中IgG的Fc段结合。1979年国外开始用辣根过氧化物酶(Horseradish peroxidase HRP)标记SPA用于酶联免疫吸附试验(E     

用间接SPA法检测人外周血T细胞亚群

葡萄球菌A蛋白(SPA)是葡萄球菌菌体蛋白成分之一。它能与哺乳类动物的IgG的Fc段非特异结合,而不影响单克隆抗体(McAb)的活性,因此,将人T细胞的McAb与外周血中的T细胞结合,再加上IgG致敏的SPA菌体,由于IgG的介导,葡萄球菌围绕在T细胞的周围,形成光学显微镜下可见的花环。用该法检测外周血中T细胞亚群,操作简单,不需     

新型抗体靶向性核酸转移系统关键组分SPA-PEI交联物的生物学功能研究

目的 考察新型抗体靶向性核酸转移系统的关键组分葡萄球菌A蛋白-聚乙烯亚胺交联物(SPA-PEI)的生物学功能,即结合IgG与压缩、复合DNA的能力.方法 采用酶联免疫吸附试验和中和抑制实验测定SPA-PEI交联物与多种来源IgG的结合能力;采用DNA凝胶阻滞实验测定SPA-PEI交联物与DNA片段的结合;采用溴化乙啶拒掺实验测定SPA-PEI交联物压缩DNA的能力.结果 SPA-PEI交联物可与多种种属来源的IgG良好结合;SPA-PEI交联过程对SPA的结合特性无明显影响,SPA活性保持较好;SPA-PEI交联物能较好地中和质粒DNA或脱氧核酶(DzTi)的负电荷,压缩DNA片段能力接近游离PEI.结论 制备的SPA-PEI交联物保持了SPA和PEI的生物学活性;SPA-PEI交联物可用于抗体靶向性核酸转移系统的构建.     

我国用协同凝集试验快速诊断副霍乱菌的实验研究进展

葡萄球菌A蛋白(SPA)是某些金黄色葡萄球菌细胞壁上的一种蛋白成分,具有与人及多种哺乳动物血清IgG分子Fc段结合的特性,因此可用其进行多种免疫学试验。由于用SPA所建立的各种实验方法,具有敏感、特异、简便、经济和应用广泛等优点,现已成为医学和生物学领域中许多学科研究中常用的新技术。     

SPA吸附法在测定乙脑患者特异性IgM中的应用

由于葡萄球菌A蛋白(SPA)具有与人和多种哺乳动物IgG的FC段呈非特异结合的特性,并且许多传染病在急性期产生特异性IgM,,因此应用SPA吸附法测定其特异性IgM,可以判断疾病的活动性或近期感染。本文报告以SPA吸附法测定乙脑患者血清中的特异性IgM的结果。     

HRP-SPA免疫组织细胞化学法检测抗核抗体

用辣根过氧化物酶(Horseradish peroxidase,HRP)标记葡萄球菌A蛋白(SPA),在酶标记免疫组织细胞化学法中,代替酶标记第二抗体(马抗人IgG)。以鼠肝印片作为抗原基质,检测32例病人血清中的抗核抗体,并与免疫荧光间接法、酶标记抗体(HRP—IgG)免疫组织细胞化学法,检测抗核抗体比较,三者在敏感性和特异性方面基本相符。HRP—SPA免疫组织细胞化学法,HRP—IgG免疫组织细胞化学法,都可在光学显微镜下观察,标本可长期保存。但是HRP—SPA试剂较HRP—lgG试剂稳定,为检测抗核抗体提供了更便于推广的一种新方法。     

葡萄球菌蛋白A在病毒学诊断中的应用

<正> 葡萄球菌蛋白A(SPA)是金黄色葡萄球菌细胞壁的一种蛋白成份,具有与人及多种哺乳动物血清中IgG类抗体Fc段结合的特性。国外自七十年代起对SPA广泛开展了研究;国内自1979年由张颖悟引进标准株以来也进行了大量研究。近年国内外学者应用SPA作为一种新的免疫学试剂,建立了许多敏感、特异、快速而简便的检测方法,本文仅就SPA在病毒学诊断中的应用综述如下。一、SPA主要性质 SPA分子是高度稳定的单一多肽链,分子量为42000。从N端开始有4个高度同源性片段,每个片段都具有与IgG Fc段结合的特性。SPA具有多结合片段的特性使SPA碘化     

酶标记葡萄球菌A蛋白“ELISA”法检测人群白喉毒素抗体的初步应用

<正> 白喉毒素抗体的体外测定,近年来,虽有人建立了单向免疫扩散、反向火箭电泳和间接血球凝集试验(IHA)等方法。但由于存在需要大量动物,敏感性较低或缺乏重复性等缺点,以致使用价值受到限制。自从Forsgren证明葡萄球菌A 蛋白(以下简称SPA)能与人及多种哺乳动物IgG 分子的Fc 段结合之后,SPA 已被广泛的应用于微生物学、免疫学和细胞学等许多领域中,是一种非常有用的实验工具。酶联A 蛋白的“ELISA”法也被证明是一种比较理想的检测方法。本文试用酶联A 蛋白“ELISA”法检测380份青少年血清中白喉毒素抗体水平,并与IHA 法进行了比较,获得了满意的结果,现将结果报告如下。     

金黄色葡萄球菌蛋白A的原核表达及生物亲和特性研究

目的构建金黄色葡萄球菌蛋白A (SPA)基因片段的表达载体,并在大肠杆菌表达系统中进行表达,探讨该重组蛋白与不同来源IgG结合的生物学特性。方法利用PCR法扩增SPA基因片段,将该段基因克隆到pET30a(+)表达载体,转化感受态BL21大肠杆菌细胞,IPTG诱导表达,利用SDS PAGE及Westen blot鉴定目的蛋白。His亲和层析纯化后分别与人、小鼠、兔、猪及山羊血清反应,分析其与不同来源IgG的亲和关系。结果构建的pET30a(+) SPA表达载体在大肠杆菌BL21中可表达SPA蛋白,且发现其与人及小鼠源IgG具有较高亲和性,与兔及猪源IgG亲和性较低。结论该重组蛋白SPA与人及小鼠源免疫球蛋白IgG具有较高亲和性,为下一步应用于SPA ELISA打下基础。     

介绍一种更为敏感的免疫金银染色方法

免疫金银染色(Immunogold—silver staining,IGSS)法敏感、简便、省时、安全可靠,葡萄球菌A蛋白(SPA)金标记四步法是在此基础上发展起来的更为敏感的一种新方法。SPA和许多哺乳类动物IgG具有亲和性,且它们之间的连接不干扰抗原抗体的结合。简单的SPA金标两步后,第三步     

链球菌G蛋白——一种新型、广谱的免疫检测剂

某些链球菌菌株的细胞壁中含有一种能与免疫球蛋白G(immunoglobulin,IgG)结合的蛋白质成分,称为IgG Fc段受体或链球菌G蛋白(streptococcal protein G)。近年来,此种蛋白质已被成功分离、纯化,并应用于免疫学研究。与经典的葡萄球菌A蛋白(staphylococcal protein A,SPA)相比,链球菌G蛋白(以下简称SPG)更易与IgG发生反应,亲和力强,结合谱广,已受到密切的关注。目前,国内尚未见有关SPG研究的综述文章及实验报道。现将国外SPG研究的新进展介绍如下。     

SPA痢疾杆菌分型试剂在实际应用上的价值

金黄色葡萄球菌细胞壁的主要成分 A 蛋白(Staphylococcal Protein A,简称 SPA)能与正常人及多种哺乳动物血清中 IgG 分子 Fc 段非特异结合,而 IgG 的 Fab 段则暴露于外,并保持其正常抗体的活性,当与特异性抗原相遇时,则抗原与 IgG 的 Fab 段相结合。如将含 A 蛋白葡萄球菌本身作为载体,用特异抗体致敏,如遇特异抗原,则能引起协同凝集反应。协同凝集反应已在细菌学上应用于细菌的分型,但大多属于实验室方面的研究,正式作为诊断试剂应用于临床的报告不多。     

辣根过氧化物酶标葡萄球A蛋白组化法快速诊断流行性出血热

本文报告辣报过氧化物酶标葡萄球菌A蛋白(HRP-SPA) 间接组化法检测EHF特异性IgG抗体,并与IFA法进行了比较。结果表明HRP—SPA组化法和IFA一样,具有相同的特异性而且敏感性更高,其血清抗体滴度为IFA法2～4倍。     

应用协同凝集反应快速诊断流行性脑脊髓膜炎的研究

<正> 金黄色葡萄球菌A蛋白(简称SPA)具有与许多哺乳动物IgG分子的Fc段结合的特性,结合后Fab段暴露于外并保持其抗体活性,当与特异性抗原相遇时,使已标记抗体的SPA菌相互连结引起协同凝集反应(简称COAG)。国内外已应用COAG进行脑膜炎球菌的鉴定和分群,检测脑脊液中的可溶性抗原,并利用此法与细菌培养法、对流免疫电泳法做     

A蛋白在免疫细胞化学中的应用——检查病人血清自身抗体IgG(ANA、PCA)的免疫细胞化学方法

A蛋白(Protein A简称SPA)产生于金黄色葡萄球菌细胞壁,它能和数种哺乳类IgG的Fc段高度特异性亲和,是藉助于两个结合点与IgG相结合。由于A蛋白能     

SPA协同凝集反应快速检定痢疾杆菌的实验研究

1940年Verwey首先发现葡萄球菌A蛋白(Staphlococcal Protein A、简称SPA),以后经许多学者相继研究,证明它能与免疫球蛋白Ig~G FC段结合,结合后的IgG的Fab段仍能与特异性抗原结合,形成凝集,即协同凝集反应(Coaggulutination reaction,简称COA)目前已广泛用于很多微生物的鉴定和诊断。但作为快速